肖國勝 , 許豐孟 , 劉興旺 , 黃文慶 , 王國霞
(1.湖南農業(yè)大學動物科學技術學院,湖南長沙 410128;2.廣州飛禧特生物科技有限公司,廣東廣州 510640;3.廣東省農業(yè)科學院動物科學研究所,農業(yè)農村部華南動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室,廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點實驗室,廣東廣州510640)
大口黑鱸隸屬輻鰭魚綱、鱸形目、太陽魚科,俗稱加州鱸(Tsunoda 等,2018)。 其具有經濟價值高、抗逆性強、易于飼養(yǎng)等特點,是我國重要的淡水經濟養(yǎng)殖魚類之一(Yves 等,2019)。 大口黑鱸是一種典型的肉食性魚類, 對飼料中蛋白質的營養(yǎng)需求較高(Huang 等,2017;梁勤朗,2012;陳乃松等,2012)。 其商品配合飼料中魚粉的添加量較高,一般為50% ~55%,少數產品甚至達到60%。
魚粉因其具有蛋白質含量高, 必需氨基酸均衡,適口性好,易被水產動物消化吸收等優(yōu)點被廣泛應用于水產飼料中。 但不同魚粉間品質各不相同,影響魚粉質量的因素很多,如原料魚的種類、原料魚的新鮮度、 魚粉的加工工藝和儲存條件等(吳代武等,2020)。近年來由于加工設備的改進和工藝的優(yōu)化,國產魚粉的質量有了大幅度的提升。與進口魚粉相比,國產魚粉的性價比更為突出,尤其是在飼料中魚粉添加量較高的肉食性魚類上。因此, 本試驗嘗試利用國產魚粉部分替代進口魚粉,觀察其對大口黑鱸生長性能、血清生化指標及抗氧化能力的影響, 為大口黑鱸商品配合飼料中魚粉的選用和配方成本的降低提供參考。
1.1 試驗飼料 本試驗所選進口魚粉為秘魯超級蒸汽魚粉,國產魚粉為山東日照魚粉。兩種魚粉營養(yǎng)指標見表1。 以魚粉、酶解雞肉粉、雞肉粉、豆粕、大豆?jié)饪s蛋白為主要蛋白源,豆油和魚油為主要脂肪源, 并補充肉食性預混料等配制2 種蛋白水平約為50%,脂肪水平約為8%的等氮等脂飼料(表2)。使用實驗室雙螺桿擠壓機(SLX-80,華南理工大學機械廠,廣州)在85.5 ℃和1.83 MPa 下擠出試驗飼料,切成小條(3 mm),55 ℃烘干,自然冷卻后放入密封袋中,置于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>
表1 2 種魚粉營養(yǎng)成分及新鮮度指標
表2 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平 %
1.2 養(yǎng)殖管理 飼養(yǎng)試驗在廣東省農業(yè)科學院動物科學研究所白云區(qū)實驗基地魚塘網箱養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行,網箱規(guī)格為長×寬×高(3 m×3 m×2 m)。選取體格健康,初始體均重為(5.02±0.01)g 的大口黑鱸幼魚 400 尾, 隨機分為 2 組, 每組 4 個重復,每個重復50 尾魚。 試驗期間每天飽食投喂兩次(9:00 和 17:00),試驗周期為 90 d。 每天記錄各個網箱的飼料投喂量, 并在喂食1 h 后將網箱中剩余的飼料用撈網撈出, 分析干物質并從投喂的飼料中扣除,以計算實際飼料攝入量。每天記錄死亡情況,對死魚進行稱重并統(tǒng)計死亡率。 在90 d的試驗過程中, 水溫為 20.8 ~ 37.8 ℃,pH 7.6 ~8.0, 溶解氧 > 5 mg/L, 氨氮<0.1 mg/L 和亞硝酸鹽<0.05 mg/L,光照為自然光源。
1.3 樣品采集 飼養(yǎng)試驗結束后禁食24 h,將每個網箱魚撈出分別稱重并統(tǒng)計數目, 用于計算終末體重、飼料系數、特定生長率和存活率。 每個網箱隨機取3 尾魚,-20 ℃冰箱保存,用于全魚體組成分析。再從每個網箱中隨機取6 尾魚,用于肥滿度、臟體比和肝體比的測定。每個網箱隨機取6 尾魚, 尾靜脈取血混合后4 ℃下 4000 r/min 離心10 min 制備血清樣品,-80 ℃保存,用于血清生化指標分析。每個網箱中再取3 尾魚分離肝臟,將肝臟樣品切碎后在10 倍體積冰冷的生理鹽水中勻漿,并在4 ℃條件下6000 r/min 離心20 min,取上清液于-20 ℃保存,用于抗氧化能力的分析。
1.4 指標分析 在105 ℃下將樣品干燥至恒定重量, 以測定干物質。 粗蛋白質含量采用凱氏定氮法(2300-Autoanalyzer,FOSS,丹麥)通過測定總氮 (N×6.25) 來計算。 粗脂肪含量根據索氏方法(36680-analyzer,BUCHI,Switzerland)進行乙醚萃取后,通過重量分析法確定。 550 ℃馬弗爐中燃燒6 h 后測定灰分含量。 以上用于測定飼料的近似組分和全魚成分。 使用自動生化分析儀(Hitachi 7180,東京,日本)進行血清生化指標分析,包括:膽固醇、甘油三酯、尿素、血糖、白蛋白、球蛋白、總蛋白、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶。 肝臟中總超氧化物歧化酶、丙二醛、總抗氧化能力、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶,均使用商業(yè)試劑盒(南京建成生物工程研究所,南京)并根據說明書進行測定。
1.5 指標計算 各參數按照以下公式進行計算:
增重率/%=(終末體重+死亡體重-初始體重)/初始體重×100;
特定生長率/(%/d)=[ln 終末體重(g)-ln 初始體重(g)]/飼養(yǎng)天數×100;
存活率/%=終末尾數/初始尾數×100;
飼料系數=攝取飼料總量(g)/[終末體重(g)+死亡體重(g)-初始體重(g)];
肥滿度/(g/cm3)=體重(g)/體長(cm)3×100;
臟體比/%=內臟重(g)/體重(g)×100;
肝體比/%=肝臟重(g)/體重(g)×100。
1.6 數據處理 數據結果采用“平均值±標準誤”表示,用SPSS 17.0 軟件對數據進行統(tǒng)計學分析,先用單因素方差分析(one-way ANOVA),若組間差異顯著, 再作 Duncan’s 多重比較法檢驗,P <0.05 表示差異顯著。
2.1 不同品質魚粉對大口黑鱸生長性能和形體指標的影響 由表3 可知, 對照組和試驗組的特定生長率、存活率、飼料系數、肥滿度、臟體比、肝體比沒有顯著差異。 試驗組的終末體重和增重率略低于對照組,差異不顯著(P >0.05)。
表3 國產魚粉替代進口魚粉對大口黑鱸生長性能和形體指標的影響
2.2 不同品質魚粉對大口黑鱸體成分含量的影響 如表4 所示,兩組間全魚水分、粗蛋白質、粗脂肪、粗灰分、鈣、總磷均無顯著性差異(P > 0.05)。
表4 國產魚粉替代進口魚粉對大口黑鱸體成分的影響 %
2.3 不同品質魚粉對大口黑鱸血清生化指標的影響 由表5 可知,兩組間血清中膽固醇、甘油三脂、尿素、血糖、球蛋白、白蛋白和總蛋白含量沒有顯著差異, 試驗組血清中谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性高于對照組,差異不顯著(P >0.05)。
表5 國產魚粉替代進口魚粉對大口黑鱸血清生化指標的影響
2.4 不同品質魚粉對大口黑鱸肝臟中抗氧化能力的影響 由表6 可知, 試驗組肝臟中超氧化物歧化酶、丙二醛、總抗氧化能力、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶與對照組相比, 顯示均無顯著性差異(P > 0.05)。
表6 國產魚粉替代進口魚粉對大口黑鱸肝臟中抗氧化能力的影響
近年來, 我國進口魚粉的量一直保持相對穩(wěn)定。 究其原因,除了運用植物性蛋白、昆蟲蛋白和其他動物性蛋白部分替代魚粉 (張鑫等,2020;Wang 等,2019;黃文慶等,2019)以及添加誘食劑減少魚粉使用量外, 國產魚粉的崛起也是重要的原因之一。在過去,人們普遍認為國產魚粉較進口魚粉的應用效果差。 一方面是因為當時加工工藝落后,魚粉質量較低劣,另一方面是因為部分魚粉廠家摻假使國產魚粉聲譽一直不高。 隨著魚粉加工工藝及設備、儲存條件等的改善,國產魚粉在品質上得到了較大的提升, 贏得了不少飼料企業(yè)的青睞(曹愛青,2014)。 目前,我國魚粉加工的工藝水平并不低,而國外的優(yōu)勢可能在于資源豐富。如行業(yè)內公認較好的秘魯魚粉, 主要因為秘魯漁業(yè)資源豐富,魚體較大,蛋白質含量高。另外,在環(huán)保措施方面, 國內魚粉生產廠家也普遍領先于東南亞、非洲、南美的魚粉加工廠。目前,國產魚粉根據其加工工藝主要分為全脫脂魚粉、 半脫脂魚粉和全脂魚粉三大類。其中,全脫脂魚粉的蛋白質含量為 62% ~ 70%,VBN≤120,酸價為 2 ~ 7,胃蛋白酶消化率為90% ~97%, 鹽分為1% ~3%(孔令民等,2020)。 這表明優(yōu)質國產魚粉的質量與進口魚粉相當,甚至更優(yōu)。 在本試驗中,對照組和試驗組的特定生長率、存活率、餌料系數、臟體比、肥滿度和肝體比沒有顯著差別, 說明國產魚粉部分替代進口魚粉對大口黑鱸的生長性能和形體指標沒有不良影響, 這與國產魚粉在甲魚和斑點叉尾鮰中替代進口魚粉對其生長性能和形體指標影響不顯著的結果一致 (林建斌等,2012; 朱慶國等,2005)。 兩組血清中膽固醇、甘油三酯和白蛋白等生化指標差異不顯著, 說明國產魚粉替代進口魚粉不會影響大口黑鱸的健康生長。 超氧化物歧化酶和過氧化氫酶是生物體抗氧化酶系的重要組成酶類, 對生物體內活性氧自由基的清除起著關鍵的作用(謝繼青等,2009;劉靈芝等,2009);丙二醛是脂質過氧化反應中的代謝產物, 其含量可間接反映機體細胞的損傷程度(翟曉虎等,2018);谷胱甘肽過氧化物酶是機體廣泛存在的一種重要的過氧化物分解酶, 可以消除機體產生的過氧化氫和有機氫過氧化物, 降低活性氧對機體的破壞作用(馬森,2008);總抗氧化能力是用于衡量機體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標, 其含量與細胞抗氧化能力呈正相關, 與機體脂質過氧化呈負相關(沈云輝等,2019)。 本試驗中,對照組與試驗組肝臟中超氧化物歧化酶、 過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性以及丙二醛含量均沒有顯著性差異,表明國產魚粉替代進口魚粉的可行性很高。黃文文等(2015)評估了不同品質魚粉對黃顙魚幼魚的影響發(fā)現, 飼料中添加國產魚粉有利于提高黃顙魚幼魚肝臟的抗氧化能力。 顯而易見, 優(yōu)質的國產魚粉也有較好的養(yǎng)殖效果, 在替代進口魚粉時能夠降低飼料配方成本,提高養(yǎng)殖效益。在大口黑鱸商品配合飼料中, 預計國產魚粉對進口魚粉的替代量還能進一步提高, 需要更多生產試驗驗證。 當前,要提高國產魚粉的聲譽,就必須杜絕摻假摻雜現象,才能改變業(yè)界對國產魚粉的偏見,從而提升其在魚粉市場的競爭優(yōu)勢。
本試驗結果表明, 飼料中使用國產魚粉替代23%的進口魚粉,對大口黑鱸的生長性能、血清生化指標和肝臟抗氧化能力指標均沒有不良影響。