不同鐵源對新西蘭肉兔生長性能、血清指標(biāo)及組織器官鐵沉積的影響

晏家友 ， 刁 慧 ， 李書偉 ， 湯文杰 ， 鄺聲耀

（1.四川省畜牧科學(xué)研究院，四川成都 610066；2.動物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川成都 610066；3.四川省畜科飼料有限公司，四川成都 610066；4.畜禽生物制品四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川雙流 616200）

鐵是動物機(jī)體必需的重要微量元素，是功能蛋白（血紅蛋白和肌紅蛋白）和含鐵酶（細(xì)胞色素氧化酶、過氧化氫酶和黃嘌呤氧化酶等）的組成成分或活化因子， 主要通過血紅蛋白運(yùn)輸氧氣和二氧化碳，以及肌紅蛋白固定和儲存氧，參與機(jī)體組織呼吸過程（Dong 等，2020；楊維仁等，2014）。 以植物性原料為主的肉兔飼糧中鐵的含量普遍不足，必須額外補(bǔ)充才能滿足肉兔對鐵的營養(yǎng)需要。厲磊（2016）研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加100 mg/kg 硫酸亞鐵，不但可以提高新西蘭肉兔的平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率，而且可以提高成活率。 與無機(jī)鐵相比，有機(jī)鐵具有化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、生物學(xué)利用率高、環(huán)境污染小和安全性能好等優(yōu)勢，在促進(jìn)吸收利用、減少糞污排放、改善生產(chǎn)性能和提升肉品質(zhì)量方面體現(xiàn)出理想效果（丁浩軒等，2021；劉明美等，2015）。 目前，在豬、雞等主要養(yǎng)殖動物飼糧中廣泛應(yīng)用的有機(jī)鐵包括：富馬酸亞鐵、 甘氨酸鐵絡(luò)合物和氨基酸鐵絡(luò)合物等，它們?yōu)樘岣邉游锷L效率和增加養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益發(fā)揮了積極作用。 但是，關(guān)于這些鐵源在肉兔飼糧中的應(yīng)用效果尚鮮見研究報(bào)道。 因此，本試驗(yàn)通過研究硫酸亞鐵、富馬酸亞鐵、甘氨酸鐵絡(luò)合物和氨基酸鐵絡(luò)合物對新西蘭肉兔生長性能、血液免疫和抗氧化指標(biāo)及組織器官鐵沉積的影響，探討不同鐵源在肉兔飼糧中的應(yīng)用效果，為養(yǎng)兔生產(chǎn)中鐵源的科學(xué)選擇和合理利用提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)鐵源 對照組采用無機(jī)鐵 （一水硫酸亞鐵，飼料級，F(xiàn)e2+實(shí)測值為30%）；試驗(yàn)組采用有機(jī)鐵，分別為富馬酸亞鐵 （飼料級，F(xiàn)e2+實(shí)測值為30.6%）、甘氨酸鐵絡(luò)合物（飼料級，F(xiàn)e2+實(shí)測值為17%）和氨基酸鐵絡(luò)合物（飼料級，F(xiàn)e2+實(shí)測值為10%）。試驗(yàn)所需鐵源由四川省畜科飼料有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與基礎(chǔ)日糧組成 選取35 日齡斷奶、 體重相近的健康新西蘭仔兔192 只 （公母各半），按體重和性別一致原則，隨機(jī)分為4 組，每組8 個重復(fù)，每個重復(fù)6 只兔。 在同一棟封閉式兔舍內(nèi)，采用不銹鋼籠子（60 cm×60 cm×45 cm）飼養(yǎng)仔兔，每個籠子2 只兔（公母各1 只），每3 籠兔為1 個重復(fù)。 參照 De Blas 和 Wiseman（1998）《兔的營養(yǎng)需要》配制基礎(chǔ)飼糧，對照組飼糧含一水硫酸亞鐵形式的鐵100 mg/kg，試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組飼糧分別含富馬酸亞鐵、 甘氨酸鐵絡(luò)合物和氨基酸鐵絡(luò)合物形式的鐵100 mg/kg。試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在四川省畜牧科學(xué)研究院肉兔科研基地進(jìn)行。 試驗(yàn)前，對兔舍進(jìn)行全面清掃消毒。 每天 08：00 和 17：00 準(zhǔn)時飼喂試驗(yàn)兔，自由采食、飲水，人工定時清糞。 執(zhí)行兔場原有免疫程序，保持兔舍環(huán)境衛(wèi)生，控制溫濕度，確保各組兔的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件一致。 試驗(yàn)預(yù)試期7 d，正試期49 d。

1.4 樣品采集與處理

1.4.1 血樣的采集與處理 試驗(yàn)第49 天，從每個處理組隨機(jī)選取8 只兔空腹采血， 經(jīng)耳緣動脈采血 5 mL，靜置 10 min，3000 r/mim 離心 20 min，制備血清，-20 ℃保存，待測。

1.4.2 組織器官的采集與處理 試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，從每個處理組隨機(jī)選取8 只健康兔，經(jīng)屠宰后，分離出肝臟和腎臟，于65 ℃烘干至恒重，經(jīng)室溫回潮24 h 后碾碎，測定鐵含量。

1.5 測定指標(biāo)與方法

1.5.1 生長性能指標(biāo) 根據(jù)試驗(yàn)兔始重、 末重與試驗(yàn)天數(shù)，計(jì)算平均日增重（ADG）；通過試驗(yàn)期總喂料量和余料量，計(jì)算平均日采食量（ADFI）；根據(jù)每個重復(fù)兔的平均日采食量和平均日增重，計(jì)算料重比。

平均日增重/（g/d）=（末重-始重）/試驗(yàn)天數(shù)；

平均日采食量/（g/d）=（總喂料量-剩料量）/試驗(yàn)天數(shù)；

料重比=平均日采食量/平均日增重。

1.5.2 血清免疫和抗氧化指標(biāo) 采用比濁法測定血清溶菌酶（LZM）含量，羥胺法測定血清超氧化物歧化酶（SOD）含量，硫代巴比妥酸法測定血清丙二醛（MDA）含量。 試劑盒由南京建成生物工程研究所有限公司生產(chǎn)制造，嚴(yán)格遵守操作規(guī)范。

1.5.3 組織器官中鐵含量的測定 鐵含量按照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鐵的測定》（GB 5009.90-2016）中第一法進(jìn)行測定，使用的儀器設(shè)備主要有原子吸收光譜儀、分析天平和微波消解儀等。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)過Excel 2010 處理后， 利用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，差異顯著時，采用Duncan’s 方法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以P <0.05 為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同鐵源對肉兔生長性能的影響 由表2可知，與對照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組肉兔ADG 和ADFI顯著提高 14.90%和 4.69%（P < 0.05），F(xiàn)/G 顯著降低 8.78%（P < 0.05）； 試驗(yàn)Ⅲ組肉兔 ADG 顯著提高11.07%（P < 0.05）。試驗(yàn)Ⅰ組肉兔ADG 顯著高于試驗(yàn)Ⅱ組11.21%（P < 0.05）。

表2 不同鐵源對肉兔生長性能的影響

2.2 不同鐵源對肉兔血清免疫和抗氧化指標(biāo)的影響 由表3 可知，與對照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組肉兔血清LZM 和SOD 含量顯著提高85.25%和8.84%（P< 0.05），但 MDA 無顯著差異（P > 0.05）；試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組肉兔血清LZM、SOD 和MDA 含量均無顯著差異（P > 0.05）。

表3 不同鐵源對肉兔血清免疫和抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 不同鐵源對肉兔組織器官鐵沉積的影響由表4 可知，與對照組比，試驗(yàn)Ⅰ組肉兔肝臟鐵含量顯著提高18.42%（P < 0.05）， 但腎臟鐵含量無顯著差異（P > 0.05）；試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組肉兔肝臟鐵和腎臟鐵含量均無顯著差異（P > 0.05）。

表4 不同鐵源對肉兔組織器官鐵沉積的影響 mg/kg

3 討論

3.1 不同鐵源對肉兔生長性能的影響 鐵作為動物機(jī)體必需的一種微量元素，對維持動物生長和調(diào)節(jié)新陳代謝具有重要的營養(yǎng)生理作用。動物缺鐵會使血紅蛋白的合成發(fā)生障礙，導(dǎo)致血液運(yùn)輸氧氣的能力下降，引起機(jī)體貧血；而鐵過量容易誘導(dǎo)產(chǎn)生活性氧自由基， 使體內(nèi)氧化和抗氧化系統(tǒng)失衡，造成機(jī)體損傷（Qi 等，2020；Bhattarai 等，2015）。 劉公言和張偉（2017）研究發(fā)現(xiàn)，在新西蘭肉兔飼糧中添加100 mg/kg 硫酸亞鐵可以顯著提高肉兔的平均日增重，同時可顯著降低料重比。 本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，在飼糧中添加100 mg/kg 富馬酸亞鐵與硫酸亞鐵相比， 可以顯著提高新西蘭肉兔的平均日增重、平均日采食量和飼料轉(zhuǎn)化率，并且作用效果比甘氨酸鐵絡(luò)合物和氨基酸鐵絡(luò)合物更好。蔣亮和張偉（2009）研究也證實(shí)，與硫酸亞鐵相比，富馬酸亞鐵更能有效改善仔豬血液鐵的營養(yǎng)狀況，進(jìn)而提高仔豬生長性能。 這就提示，在新西蘭肉兔飼糧中添加富馬酸亞鐵，更有利于提高生長性能。

3.2 不同鐵源對肉兔血清免疫和抗氧化指標(biāo)的影響 血清免疫和抗氧化指標(biāo)是判斷動物機(jī)體健康狀況的重要參考。 LZM 又稱胞壁質(zhì)酶或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶，是一種對細(xì)菌細(xì)胞壁具有水解作用的蛋白酶，在抗菌方面尤其是抑殺革蘭氏陽性菌中發(fā)揮著重要作用 （Nyachoti 等，2012；Masschalck等，2003）。 本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，在新西蘭肉兔飼糧中添加100 mg/kg 富馬酸亞鐵與硫酸亞鐵相比，可以顯著提高血清中LZM 的含量， 但是甘氨酸鐵絡(luò)合物組和氨基酸鐵絡(luò)合物組卻沒有顯著差異。因此，在新西蘭肉兔飼糧中添加富馬酸亞鐵，更有利于增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。 SOD 能清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，對機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用（Wang 等，2017）。 MDA是一種高活性脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，其含量高低可以衡量脂質(zhì)過氧化程度，間接反映機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度 （Wu 等，2009）。 因而血清 SOD 和MDA 的含量可作為評價機(jī)體防御功能的指標(biāo)。 本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，在新西蘭肉兔飼糧中添加100 mg/kg 富馬酸亞鐵與硫酸亞鐵相比，可以顯著提高血清中LZM 和SOD 的含量，但是甘氨酸鐵絡(luò)合物組和氨基酸鐵絡(luò)合物組同樣沒有表現(xiàn)出顯著差異。因此，在新西蘭肉兔飼糧中添加富馬酸亞鐵，更有利于增強(qiáng)機(jī)體抗氧化功能。

3.3 不同鐵源對肉兔組織器官鐵沉積的影響 鐵在動物體內(nèi)主要儲存于肝臟、脾臟和骨髓等，張兆琴和吳占福（2006）報(bào)道，鐵在動物組織器官中的沉積能力依次為：脾臟＞肝臟＞肺臟＞心臟。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明， 在飼糧中添加100 mg/kg 硫酸亞鐵、富馬酸亞鐵、 甘氨酸鐵絡(luò)合物或氨基酸鐵絡(luò)合物，新西蘭肉兔肝臟中鐵的沉積量高于腎臟。 這就提示，肝臟是體內(nèi)鐵代謝的重要器官，也是體內(nèi)主要的貯鐵器官（Cappellini 等，2006）。本試驗(yàn)研究結(jié)果還顯示，在飼糧中添加100 mg/kg 硫酸亞鐵、富馬酸亞鐵、甘氨酸鐵絡(luò)合物或氨基酸鐵絡(luò)合物，新西蘭肉兔肝臟和腎臟鐵沉積量從高到低依次為：富馬酸亞鐵＞氨基酸鐵絡(luò)合物＞甘氨酸鐵絡(luò)合物＞硫酸亞鐵。由此可見，有機(jī)鐵在肉兔組織器官中的鐵沉積量高于無機(jī)鐵，而有機(jī)鐵中富馬酸亞鐵在肉兔肝臟和腎臟中的鐵沉積量最高。這可能與不同鐵源的相對生物學(xué)利用率有關(guān)，但具體原因還需進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，在飼糧中添加100 mg/kg 富馬酸亞鐵形式的鐵，新西蘭肉兔生長性能最好，血清LZM 和 SOD 含量最高、MDA 含量最低， 肝臟鐵和腎臟鐵沉積量最高。 綜合本試驗(yàn)測定指標(biāo)可見，富馬酸亞鐵在新西蘭肉兔飼糧中的應(yīng)用效果優(yōu)于硫酸亞鐵、甘氨酸鐵絡(luò)合物和氨基酸鐵絡(luò)合物。