• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    自然發(fā)酵泡菜中乳酸菌的分離鑒定及其在金刺梨汁發(fā)酵中的應(yīng)用

    2022-02-07 13:09:48施渺筱湯鑫鑫姚蔣龐陳云坤
    中國釀造 2022年1期
    關(guān)鍵詞:梨汁刺梨果汁

    施渺筱,洪 蘊(yùn),湯鑫鑫,肖 洋,姚蔣龐,陳云坤*

    (1.安順學(xué)院 貴州省高校鄉(xiāng)村振興研究中心,貴州 安順 561000;2.西南民族大學(xué),四川 成都 610000;3.貴州省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測院,貴州 貴陽 550003)

    乳酸菌在許多泡菜、果汁、發(fā)酵乳等食品中的分布與功能已有大量文獻(xiàn)報道[1-3],是公認(rèn)的食品級益生菌,具有維持腸道菌群平衡、降低膽固醇等保健作用,已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于食品發(fā)酵工業(yè)中[4]。乳酸菌在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的醋酸、丙酸等有機(jī)酸,不僅可以賦予金刺梨汁酸味,還可以與發(fā)酵過程中產(chǎn)生的醇、酮、醛等物質(zhì)相互作用,形成多種新的呈味物質(zhì)。

    金刺梨(Rosa sterilis)又名無籽刺梨、搭鉤刺梨,屬于薔薇科薔薇屬植物[5],主要分布于貴州安順、興仁等地[6]。金刺梨營養(yǎng)價值豐富,鮮食加工均宜。成熟的金刺梨果肉肥厚、味酸甜、富含超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、維生素、黃酮等營養(yǎng)元素[7]。近年來,隨著金刺梨產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,由于大量金刺梨鮮果集中上市,導(dǎo)致價格急劇下降,加之鮮果采后易纖維化、失水等引起食用品質(zhì)和商業(yè)價值下降,嚴(yán)重制約該產(chǎn)業(yè)發(fā)展[8]。普通刺梨已廣泛應(yīng)用于食品產(chǎn)業(yè),但對于營養(yǎng)價值更豐富的金刺梨,開發(fā)尚處于起步階段[9]。目前,雖然已經(jīng)開發(fā)了果酒、飲料、果醬、酸奶含片等金刺梨產(chǎn)品[10-13],但還未有發(fā)酵型金刺梨汁的研制。與普通刺梨相比,金刺梨藥理活性基本相同,但其單寧和粗纖維含量較低,含糖量、可溶性固形物、維生素C(vitamin C,VC)和超氧化物歧化酶含量均較高,且肉質(zhì)細(xì)膩,酸甜適度,香氣濃郁,是加工發(fā)酵型果汁飲料的良好原料[14-16]。

    本研究通過透明圈法從傳統(tǒng)自然發(fā)酵泡菜樣品中分離產(chǎn)酸、降解亞硝酸鹽和抑制病原菌能力強(qiáng)的優(yōu)良乳酸菌,通過形態(tài)觀察、生理生化試驗(yàn)及分子生物學(xué)技術(shù)對其進(jìn)行菌種鑒定,并將其應(yīng)用于金刺梨汁的發(fā)酵中,分析對比自然發(fā)酵果汁和人工接種乳酸菌發(fā)酵果汁的VC含量和SOD活性,以期為發(fā)酵金刺梨果汁工藝提供參考,為篩選具有優(yōu)良性狀的食品發(fā)酵工業(yè)用菌奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    自然發(fā)酵泡菜:畢節(jié)市家鄉(xiāng)美農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)有限公司;金刺梨原汁:貴州天賜貴寶食品有限公司。

    1.1.2 菌株

    金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli):貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室。

    1.1.3 試劑

    牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、葡萄糖、蔗糖、乳糖、革蘭氏染色液試劑盒、細(xì)菌基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)提取試劑盒:北京索萊寶科技有限公司;磷酸氫二鉀、檸檬酸二銨、無水乙酸鈉、硫酸鎂、硫酸錳、吐溫-80、碳酸鈣:天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司;鹽酸乙二銨:天津市永大化學(xué)試劑有限公司;對氨基苯磺酸、亞硝酸鈉、丙三醇、四硼酸鈉(硼砂)、亞鐵氰化鉀、乙酸鋅:成都金山化學(xué)試劑有限公司。所用試劑均為分析純或生化試劑。

    1.1.4 培養(yǎng)基[2]

    MRS液體培養(yǎng)基:蛋白胨10 g,牛肉膏10 g,酵母膏10 g,葡萄糖20 g,檸檬酸鈉2 g,乙酸鈉2 g,硫酸鎂0.58 g,硫酸錳0.25 g,磷酸氫二鉀2 g,吐溫-80 1 mL,蒸餾水1 000 mL,pH 6.28±0.06,121 ℃滅菌30 min。固體培養(yǎng)基中加入瓊脂粉20 g。

    MRS-CaCO3培養(yǎng)基:MRS固體培養(yǎng)基中加入CaCO315 g。

    MRS-NaNO2培養(yǎng)基:MRS固體培養(yǎng)基中加入NaNO215 g。

    牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g,蒸餾水1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。固體培養(yǎng)基中添加瓊脂粉20 g。

    明膠基礎(chǔ)培養(yǎng)基:明膠120 g,蛋白胨5 g,酵母提取物3.0 g,蒸餾水1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    硫化氫培養(yǎng)基:牛肉浸膏5 g,蛋白胨10 g,氯化鈉5 g,硫代硫酸鈉0.3 g,硫酸亞鐵0.2 g,瓊脂20 g,蒸餾水1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    V-P培養(yǎng)基:蛋白胨5 g,葡萄糖5 g,磷酸氫二鉀2 g,蒸餾水1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    淀粉水解培養(yǎng)基:可溶性淀粉10 g,蛋白胨10 g,氯化鈉5 g,牛肉膏5 g,瓊脂20 g,蒸餾水1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    檸檬酸鹽培養(yǎng)基:檸檬酸鈉3 g,葡萄糖2 g,酵母浸粉5 g,磷酸二氫鉀1 g,氯化鈉5 g,0.2%酚紅溶液6 mL,瓊脂20 g,蒸餾水1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基:蛋白胨5 g,牛肉膏5 g,酵母膏5 g,吐溫-80 1 mL,1.6%溴甲酚紫溶液1.4 mL,1%糖類,蒸餾水1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    1.2 儀器與設(shè)備

    SW-CJ-IFD型單人單面凈化工作臺:蘇州凈化科技有限公司;SHP-250型立式壓力蒸汽滅菌鍋:上海申安儀器有限公司;HPX-9082MBE電熱恒溫培養(yǎng)箱:江蘇省科學(xué)器材有限公司;FA2204N型精密電子天平:上海菁??萍加邢薰荆籔HS-3C精密酸度計(jì):上海大普儀器有限公司;SKY-2112B恒溫振蕩培養(yǎng)箱:上海達(dá)平儀器有限公司;DK-98-II型電熱恒溫水浴鍋:天津市泰斯特儀器有限公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 乳酸菌的分離

    參照黃承敏等[17]的方法,稱取自然發(fā)酵泡菜20 g,加至裝有180 mL無菌生理鹽水的錐形瓶中,充分振蕩,吸取1 mL稀釋液轉(zhuǎn)接至盛有9 mL無菌生理鹽水的試管中按10倍系列梯度稀釋至10-7,取0.1 mL稀釋液分別涂布于MRSCaCO3培養(yǎng)基,在37 ℃條件下厭氧培養(yǎng)24~48 h。若出現(xiàn)溶鈣圈、圓形稍扁平或凸起、白色或黃色,可初步定為乳酸菌。再分別挑取菌落形態(tài)大小各不相同的單菌落進(jìn)行平板劃線、培養(yǎng),反復(fù)純化多次。將純化的單菌落分別進(jìn)行4 ℃斜面保藏和-80 ℃甘油管凍藏備用。

    1.3.2 形態(tài)觀察及生理生化鑒定

    形態(tài)觀察:根據(jù)《伯杰細(xì)菌鑒定手冊》對乳酸菌進(jìn)行觀察。

    生理生化試驗(yàn):參考《乳酸細(xì)菌分類鑒定及實(shí)驗(yàn)方法》和《伯杰細(xì)菌鑒定手冊》,對初篩的優(yōu)良菌株進(jìn)行明膠液化、淀粉水解、硫化氫(H2S)、糖發(fā)酵試驗(yàn)等生理生化特性試驗(yàn)[18-19]。

    1.3.3 優(yōu)良乳酸菌的篩選

    (1)種子液的制備

    在無菌條件下,挑取活化后的分離菌株轉(zhuǎn)接至MRS液體培養(yǎng)基中,37 ℃條件下培養(yǎng)24 h,活化2代,當(dāng)培養(yǎng)菌液的OD600nm值達(dá)到0.8作為種子液,備用。

    (2)產(chǎn)酸能力的測定

    按1%(V/V)的接種量將種子液接種至MRS液體培養(yǎng)基中,37 ℃培養(yǎng)24 h。將菌液混勻,在波長600 nm處測定菌液的吸光度值,使用pH計(jì)測定發(fā)酵液的pH值,比較各菌株的產(chǎn)酸能力。

    (3)亞硝酸鹽降解能力的測定

    按1%(V/V)的接種量將種子液接種至MRS-NaNO2液體培養(yǎng)基中,37 ℃培養(yǎng)24 h。將菌液混勻,在波長600 nm處測定吸光度值。比較各菌株在含有150 mg/L NaNO2的MRS液體培養(yǎng)基中的生長能力,并測定發(fā)酵前后亞硝酸鹽的含量,計(jì)算亞硝酸鹽降解率,比較不同菌株降解亞硝酸鹽的能力,亞硝酸鹽降解率計(jì)算公式如下:

    (4)抑菌能力的測定

    菌懸液的制備:按1%(V/V)的接種量將種子液接種于MRS液體培養(yǎng)基中,37 ℃培養(yǎng)24 h;取發(fā)酵液在4 ℃、8 000 r/min條件下離心15 min,取上清液,過0.22 μm無菌濾膜后,備用。

    指示菌的制備:取斜面保藏的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中,于30 ℃、150 r/min的條件下培養(yǎng)8~10 h。分別吸取菌液200 μL添加到牛肉膏蛋白胨瓊脂平板上。

    抑菌試驗(yàn):用滅菌鑷子將牛津杯垂直放置于培養(yǎng)皿中,將1.0%的指示菌菌懸液與牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基混勻后注入培養(yǎng)皿,待其完全凝固后,取出牛津杯。取100 μL菌株上清液注入孔中,37 ℃培養(yǎng)24~48 h,每組重復(fù)3次。使用游標(biāo)卡尺,采用十字交叉法測量抑菌圈直徑,根據(jù)抑菌圈直徑大小判斷分離菌株抑菌性能,抑菌圈直徑>9.0 mm時具有抑菌性能[20]。

    1.3.4 優(yōu)良乳酸菌的分子生物學(xué)鑒定

    采用細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒提取優(yōu)良乳酸菌的DNA,以其為模板,采用16S rDNA的通用引物27F(5'-AACTGAGTTTGATCCTGGCTC-3')、1492R(5'-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3')進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴(kuò)增[21]。將PCR擴(kuò)增得到的產(chǎn)物送至生工生物工程(上海)股份有限公司進(jìn)行測序。將測序后得到的16S rDNA基因序列提交至美國國立生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information,NCBI)的GenBank數(shù)據(jù)庫中,采用基本局部比對搜索工具(basic local alignment search tool,BLAST)進(jìn)行同源搜索比對,選取同源性較高的模式菌株的16S rDNA基因序列,采用MEGA 7.0軟件中的鄰接(neighbor joining,NJ)法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

    1.3.5 發(fā)酵金刺梨汁的制備

    按1%(V/V)的接種量將優(yōu)良乳桿菌種子液分別接種于MRS液體培養(yǎng)基中,37 ℃條件下培養(yǎng)14 h后,在4 ℃條件下8 000 r/min分別離心10 min,棄掉上清液,用生理鹽水反復(fù)洗滌2~3次,調(diào)節(jié)菌懸液菌體濃度至106CFU/mL。按金刺梨汁質(zhì)量的2%將菌懸液接種于經(jīng)過巴氏滅菌(71 ℃,10 min)的金刺梨汁中[21],37 ℃條件下發(fā)酵5 d。以未接種的自然發(fā)酵金刺梨汁為對照,每隔24 h測定樣品的pH值,以觀察發(fā)酵效果。當(dāng)pH穩(wěn)定后經(jīng)過瞬時高壓滅菌,終止發(fā)酵[22]。

    1.3.6 感官評價

    由18人分別對自然發(fā)酵金刺梨果汁和人工接種乳酸菌發(fā)酵金刺梨果汁的色澤、香氣、口感、組織狀態(tài)進(jìn)行評分,滿分為9分,去除最高分和最低分后,取平均分為自然發(fā)酵與人工接種乳酸菌發(fā)酵金刺梨果汁最后的得分。具體評分標(biāo)準(zhǔn)見表1[23]。

    表1 發(fā)酵金刺梨果汁的感官評分標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Sensory evaluation criteria of fermented Rosa sterilis juice

    1.3.7 分析檢測

    維生素C含量的測定:采用2,6-二氯氰靛酚法[24]。SOD活力測定:按照SOD試劑盒說明測定。

    1.3.8 統(tǒng)計(jì)分析

    所得試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用SPSS 26.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用Origin 2021對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行繪圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 乳酸菌的形態(tài)學(xué)及生理生化鑒定

    按照傳統(tǒng)培養(yǎng)分離技術(shù)從自然發(fā)酵泡菜中共分離得到47株菌株,編號為BJ-1~BJ-47,通過接觸酶試驗(yàn)、革蘭氏染色試驗(yàn)及生理生化試驗(yàn)初步鑒定篩選得到17株乳酸菌。部分菌株的菌落及細(xì)胞形態(tài)見圖1,17株乳酸菌的生理生化試驗(yàn)結(jié)果見表2。

    表2 17株分離菌株的生理生化試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Physiological and biochemical tests results of 17 isolated strains

    圖1 部分分離菌株菌落(a)及細(xì)胞(b)形態(tài)Fig.1 Colony (a) and cell (b) morphology of some isolated strains

    由圖1及表2可初步鑒定分離菌株BJ-1、BJ-4、BJ-14、BJ-25、BJ-30、BJ-35和BJ-36與植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)的特征接近;菌株BJ-9、BJ-10、BJ-15、BJ-16、BJ-22和BJ-31與短乳桿菌(Lactobacillus brevis)的特征接近;菌株BJ-26、BJ-32、BJ-42和BJ-45暫時無法確定種名。

    2.2 乳酸菌的性能測定

    2.2.1 生長及產(chǎn)酸能力的測定

    17株乳酸菌的生長能力及產(chǎn)酸能力見圖2。

    圖2 不同菌株的OD600nm值和pH值Fig.2 OD600nm value and pH of different strains

    由圖2可知,通過24 h培養(yǎng)后,各菌株發(fā)酵液的OD600nm值為1.513~1.713,pH值為3.73~4.31。其中,菌株BJ-1、BJ-4、BJ-9、BJ-10、BJ-14、BJ-15、BJ-16、BJ-22、BJ-26、BJ-30、BJ-31、BJ-32和BJ-36生長旺盛(OD600nm值>1.50)、產(chǎn)酸能力強(qiáng)(最終pH值<4.2)。

    2.2.2 亞硝酸鹽降解能力的測定

    17株乳酸菌菌株對亞硝酸鹽的降解率見圖3。

    圖3 不同菌株對亞硝酸鹽的降解率Fig.3 Nitrite degradation rate with different strains

    由圖3可知,17株乳酸菌培養(yǎng)24 h后,對亞硝酸鹽的降解率在76.33%~94.05%之間,其中菌株BJ-1、BJ-4、BJ-9、BJ-14、BJ-16、BJ-22、BJ-26、BJ-30、BJ-31、BJ-32、BJ-35、BJ-36和BJ-45對亞硝酸鹽的降解效果較好,降解率均>80%。

    2.2.3 抑菌能力的測定

    17株乳酸菌菌株對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑制效果見表3。

    表3 不同菌株對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑制效果Table 3 Inhibition effect of different strains on Staphylococcus aureus and Escherichia coli

    由表3可知,菌株BJ-1、BJ-4、BJ-9、BJ-10、BJ-14、BJ-26、BJ-30、BJ-31、BJ-32、BJ-35和BJ-36對于2種指示菌的抑菌效果較好,抑菌圈直徑均>13.0 mm。菌株BJ-1、BJ-4、BJ-30對大腸桿菌的抑制效果更好,菌株BJ-1、BJ-10、BJ-30、BJ-31、BJ-35對金黃色葡萄球菌的抑制效更好,分析原因可能是不同菌株在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)的數(shù)量和種類都有所不同。此外,同一菌株對不同指示菌的抑制效果也不同。

    綜上,通過生長能力、產(chǎn)酸性能、降解亞硝酸鹽性能、抑菌性能綜合篩選得到4株產(chǎn)酸高、降解亞硝酸鹽能力強(qiáng)、抑菌效果好的優(yōu)良乳酸菌菌株,分別為菌株BJ-1、BJ-26、BJ-31和BJ-32。

    2.3 優(yōu)良乳酸菌菌株的分子生物學(xué)鑒定

    基于16S rDNA基因序列,4株優(yōu)良乳酸菌菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹見圖4。由圖4可知,菌株BJ-1、BJ-26與植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)聚于一支,親緣關(guān)系最近,菌株BJ-31、BJ-32與短乳桿菌(Lactobacillus brevis)聚于一支,親緣關(guān)系最近。結(jié)合形態(tài)特征及生理生化試驗(yàn)結(jié)果,將菌株BJ-1、BJ-26鑒定為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum),菌株BJ-31、BJ-32鑒定為短乳桿菌(Lactobacillus brevis)。

    圖4 基于16S rDNA基因序列4株菌的系統(tǒng)進(jìn)化樹Fig.4 Phylogenetic tree of 4 strains based on 16S rDNA gene sequence

    2.4 乳酸菌發(fā)酵金刺梨果汁分析

    乳酸菌發(fā)酵果汁過程中產(chǎn)生大量的酸能快速降低果汁pH值,抑制腐敗菌生長,防止果汁腐敗變質(zhì),延長果汁保質(zhì)期,并能促進(jìn)果汁色澤的形成,加快果汁發(fā)酵,縮短果汁發(fā)酵周期[25-26]。選擇植物乳桿菌BJ-1(Lactobacillus plantarumBJ-1)和短乳桿菌(Lactobacillus brevisBJ-31)發(fā)酵金刺梨果汁,考察乳酸菌對發(fā)酵金刺梨果汁pH值、VC含量、SOD活力及感官評分的影響,結(jié)果分別見圖5和表4。

    表4 發(fā)酵金刺梨果汁感官評分的結(jié)果Table 4 Sensory score of fermented Rosa sterilis juice

    由圖5a可知,人工接種乳酸菌發(fā)酵金刺梨汁0~3 d,發(fā)酵體系的pH值下降較為明顯,而自然發(fā)酵金刺梨汁7~42 d,發(fā)酵體系的pH值才下降明顯,pH下降的速度為短乳桿菌BJ-31>植物乳桿菌BJ-1>自然發(fā)酵;人工接種乳酸菌發(fā)酵金刺梨汁3~4 d,發(fā)酵體系的pH值下降速度趨于平緩,金刺梨汁發(fā)酵成熟,發(fā)酵成熟時間短乳桿菌BJ-31最短,植物乳桿菌BJ-1次之,自然發(fā)酵需要兩個月才能完成,說明人工接種乳酸菌明顯縮短了發(fā)酵金刺梨汁的發(fā)酵時間,提高了發(fā)酵果汁的生產(chǎn)效率。

    圖5 菌株對發(fā)酵金刺梨果汁pH值(a)、VC含量(b)及超氧化歧化酶活力(c)的影響Fig.5 Effect of strains on pH (a),VC content (b) and superoxide dismutase activity (c) of fermented Rosa sterilis juice

    由圖5b和5c可知,隨著發(fā)酵的進(jìn)行,接種植物乳桿菌BJ-1發(fā)酵的金刺梨汁VC含量從(2 133.95±52.18)mg/100 g降低至(1 571.35±49.21)mg/100 g,保留率為(73.62±0.94)%;SOD活力從(6459.11±132.38)U/g降至(3 546.79±138.31)U/g,保留率為(54.91±0.64)%。接種短乳桿菌BJ-31發(fā)酵的金刺梨汁VC含量從(2 133.95±52.18)mg/100 g降低至(1 526.41±49.36)mg/100 g,保留率為(71.53±0.95)%;SOD活性從(6 459.37±110.45)U/g降至(3 402.42±141.71)U/g,保留率為(50.67±0.87)%。自然發(fā)酵金刺梨汁VC含量從(2 488.26±49.38)mg/100 g降低至(803.15±52.30)mg/100 g,保留率為(32.28±0.94)%;SOD活性從(6 798.26±110.39)U/g降至(2 323.98±139.65)U/g,保留率為(34.18±0.91)%。由此可見,人工接種發(fā)酵的金刺梨汁中VC和SOD活性的損耗要遠(yuǎn)小于自然發(fā)酵的損耗。

    由表4可知,綜合色澤、香氣、口感、組織狀態(tài)評分,得分高低依次是短乳桿菌BJ-31發(fā)酵的金刺梨果汁>植物乳桿菌BJ-1發(fā)酵的金刺梨果汁>自然發(fā)酵的金刺梨果汁>未發(fā)酵金刺梨果汁。證明了人工接種乳酸菌發(fā)酵金刺梨果汁可以提高金刺梨果汁的品質(zhì)和風(fēng)味,顯著地降低了發(fā)酵過程中主要營養(yǎng)成分的損耗,有效的縮短金刺梨汁的發(fā)酵周期,說明植物乳桿菌BJ-1和短乳桿菌BJ-31具有作為金刺梨汁發(fā)酵劑的潛能。

    3 結(jié)論

    本研究從自然發(fā)酵泡菜中共分離得到47株菌株,經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察和生理生化試驗(yàn)初步鑒定出17株乳酸菌,經(jīng)過產(chǎn)酸、降解亞硝酸鹽和抑菌能力的測定從中篩選得到4株優(yōu)良乳酸菌株,經(jīng)分子生物學(xué)鑒定2株為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、2株為短乳桿菌(Lactobacillus brevis)。挑選植物乳桿菌BJ-1和短乳桿菌BJ-31應(yīng)用于金刺梨果汁發(fā)酵,接種乳酸菌BJ-1和BJ-31的金刺梨果汁發(fā)酵3 d就能達(dá)到所需的pH值,發(fā)酵結(jié)束后,金刺梨果汁中的VC含量分別為(1 571.35±49.21)mg/100 g和(1 526.41±49.36)mg/100 g,分別為自然發(fā)酵組的1.96倍和1.90倍,SOD活力分別為(3 546.79±138.31)U/g和(3 402.42±141.71)U/g,分別為自然發(fā)酵組的1.53倍和1.46倍,且感官評分分別為(7.20±0.75)分和(7.29±1.00)分,均高于自然發(fā)酵組[(6.37±1.59)分]。接種從自然發(fā)酵泡菜中分離的乳酸菌BJ-1和BJ-31發(fā)酵金刺梨果汁,不僅顯著縮短了金刺梨果汁的發(fā)酵周期,且提高了金刺梨果汁的品質(zhì)、延長了金刺梨果汁的保質(zhì)期,為金刺梨果汁的發(fā)酵工藝提供了參考。

    猜你喜歡
    梨汁刺梨果汁
    自制潤肺止咳的秋梨膏
    科教新報(2022年5期)2022-02-28 09:06:45
    貴州刺梨專題書法作品
    貴州刺梨專題纂刻作品
    不健康的果汁
    軍事文摘(2020年22期)2021-01-04 02:16:50
    可以吃的果汁杯
    不同施肥水平對金刺梨生長的影響
    刺梨汁對乙酸性胃潰瘍大鼠血清TFF-2、EGF及NO的影響
    中成藥(2017年5期)2017-06-13 13:01:12
    失憶果汁
    奶奶不愛喝梨汁
    喝果汁
    啟蒙(3-7歲)(2016年9期)2016-02-28 12:26:53
    麻豆成人av在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲精品成人av观看孕妇| 精品国产乱子伦一区二区三区| 色婷婷av一区二区三区视频| 性色av乱码一区二区三区2| 午夜福利,免费看| 精品一区二区三卡| av免费在线观看网站| 午夜免费鲁丝| 两人在一起打扑克的视频| 久久亚洲真实| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 欧美日本中文国产一区发布| avwww免费| 亚洲美女黄片视频| 午夜精品国产一区二区电影| 在线观看66精品国产| 在线观看66精品国产| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲专区字幕在线| av天堂久久9| 久久久国产一区二区| 国产97色在线日韩免费| 69精品国产乱码久久久| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲五月婷婷丁香| 国产成人影院久久av| 69av精品久久久久久| 精品免费久久久久久久清纯 | 成人三级做爰电影| 三级毛片av免费| 久久午夜亚洲精品久久| 国产精华一区二区三区| 欧美在线一区亚洲| 精品免费久久久久久久清纯 | 脱女人内裤的视频| 久久ye,这里只有精品| 国产成人欧美在线观看 | 亚洲中文字幕日韩| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久久久国产精品人妻aⅴ院 | 成人免费观看视频高清| 国产成人精品在线电影| 精品乱码久久久久久99久播| 日韩免费av在线播放| 久久精品国产a三级三级三级| 一边摸一边做爽爽视频免费| 水蜜桃什么品种好| 国产高清videossex| 精品免费久久久久久久清纯 | 精品福利永久在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日本wwww免费看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 一a级毛片在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| av一本久久久久| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 淫妇啪啪啪对白视频| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 最近最新中文字幕大全电影3 | 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产伦人伦偷精品视频| 99国产综合亚洲精品| 黄频高清免费视频| 交换朋友夫妻互换小说| 久久99一区二区三区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 大型av网站在线播放| 性色av乱码一区二区三区2| 天堂中文最新版在线下载| 男女免费视频国产| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲国产欧美一区二区综合| 久久亚洲真实| 日韩大码丰满熟妇| 91国产中文字幕| 在线观看免费午夜福利视频| 免费在线观看亚洲国产| 女人精品久久久久毛片| 免费不卡黄色视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 午夜成年电影在线免费观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日日夜夜操网爽| 一本大道久久a久久精品| 下体分泌物呈黄色| 国产亚洲精品久久久久久毛片 | 这个男人来自地球电影免费观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 在线观看一区二区三区激情| 久热这里只有精品99| 欧美黑人精品巨大| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 大香蕉久久网| 性色av乱码一区二区三区2| 午夜亚洲福利在线播放| 国产成人精品无人区| 视频在线观看一区二区三区| 黄片大片在线免费观看| 国产成人影院久久av| 99久久国产精品久久久| 国产97色在线日韩免费| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 9色porny在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 看免费av毛片| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 久热爱精品视频在线9| 老司机靠b影院| 国产日韩欧美亚洲二区| 免费少妇av软件| 人妻 亚洲 视频| 亚洲精品美女久久av网站| 老司机影院毛片| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产极品粉嫩免费观看在线| 久久草成人影院| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久久国产一区二区| 精品乱码久久久久久99久播| 久久香蕉国产精品| 91av网站免费观看| 男人的好看免费观看在线视频 | 99国产极品粉嫩在线观看| 午夜福利视频在线观看免费| 国产精品国产av在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲av熟女| 亚洲人成电影观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产精品 欧美亚洲| 久久国产亚洲av麻豆专区| 在线观看舔阴道视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 久久香蕉激情| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日本五十路高清| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 在线看a的网站| 久久久国产成人免费| 亚洲综合色网址| 我的亚洲天堂| 国产精品国产高清国产av | 在线观看午夜福利视频| aaaaa片日本免费| 亚洲在线自拍视频| 一本综合久久免费| 国产精品一区二区精品视频观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 天天影视国产精品| 国产精品av久久久久免费| 亚洲国产欧美一区二区综合| 热99re8久久精品国产| 欧美一级毛片孕妇| 91精品国产国语对白视频| 欧美日韩精品网址| 亚洲全国av大片| 国产不卡一卡二| 久久久水蜜桃国产精品网| 亚洲av日韩在线播放| 在线观看日韩欧美| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 757午夜福利合集在线观看| 国产成人欧美| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 国产在线精品亚洲第一网站| 久久精品国产综合久久久| 又紧又爽又黄一区二区| 丝瓜视频免费看黄片| 两个人免费观看高清视频| av有码第一页| 国产黄色免费在线视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 高清在线国产一区| 国产成人精品久久二区二区免费| 成年版毛片免费区| 久久久久久久国产电影| 久热这里只有精品99| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 性少妇av在线| 久久国产精品人妻蜜桃| 免费日韩欧美在线观看| 日本黄色视频三级网站网址 | 亚洲人成电影免费在线| 高清在线国产一区| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 999精品在线视频| 精品人妻在线不人妻| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 成年版毛片免费区| 男人舔女人的私密视频| 国产精品国产av在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 天天操日日干夜夜撸| 久9热在线精品视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 在线观看舔阴道视频| ponron亚洲| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 欧美激情高清一区二区三区| 大型av网站在线播放| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 老司机福利观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产成+人综合+亚洲专区| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 天天影视国产精品| 日韩三级视频一区二区三区| 男女免费视频国产| 成人黄色视频免费在线看| 老司机午夜福利在线观看视频| av国产精品久久久久影院| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲精品在线美女| 国产亚洲精品第一综合不卡| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美成狂野欧美在线观看| 99久久国产精品久久久| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 香蕉久久夜色| 成人av一区二区三区在线看| 国产主播在线观看一区二区| 捣出白浆h1v1| 大型av网站在线播放| 无人区码免费观看不卡| 国产激情久久老熟女| 精品一区二区三区av网在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| av中文乱码字幕在线| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产91精品成人一区二区三区| 黄片小视频在线播放| 国产成人精品久久二区二区91| 午夜精品久久久久久毛片777| 免费看十八禁软件| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 免费在线观看黄色视频的| 丁香六月欧美| 极品少妇高潮喷水抽搐| av有码第一页| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 中文字幕av电影在线播放| 免费在线观看影片大全网站| 欧美日本中文国产一区发布| av福利片在线| 热re99久久国产66热| 91成人精品电影| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 老司机福利观看| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲精品美女久久av网站| 色婷婷av一区二区三区视频| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲人成电影观看| 黄色成人免费大全| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 日韩欧美在线二视频 | 午夜久久久在线观看| 国产在线一区二区三区精| 久久性视频一级片| 欧美不卡视频在线免费观看 | 国产区一区二久久| 男人舔女人的私密视频| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲av日韩在线播放| 午夜日韩欧美国产| 黄色视频不卡| 亚洲在线自拍视频| 国产av一区二区精品久久| 亚洲成国产人片在线观看| 久久久久久人人人人人| 久久香蕉激情| 丝袜在线中文字幕| 麻豆av在线久日| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 女同久久另类99精品国产91| 啪啪无遮挡十八禁网站| 757午夜福利合集在线观看| 午夜福利在线免费观看网站| 一级毛片精品| 欧美激情极品国产一区二区三区| 欧美最黄视频在线播放免费 | 久久精品人人爽人人爽视色| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 1024香蕉在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲国产精品sss在线观看 | 国产人伦9x9x在线观看| 制服诱惑二区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 激情在线观看视频在线高清 | 亚洲专区国产一区二区| 天天操日日干夜夜撸| 一本大道久久a久久精品| 露出奶头的视频| 免费观看精品视频网站| 99国产精品免费福利视频| 夫妻午夜视频| 黄色女人牲交| 亚洲精品国产色婷婷电影| 精品视频人人做人人爽| 国产单亲对白刺激| 亚洲国产精品sss在线观看 | 精品第一国产精品| 亚洲精品一二三| 国产精品免费大片| 一a级毛片在线观看| 少妇的丰满在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 免费不卡黄色视频| 91成人精品电影| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 日韩欧美国产一区二区入口| 很黄的视频免费| 大型黄色视频在线免费观看| 国产麻豆69| 日韩免费av在线播放| 欧美日韩视频精品一区| 少妇粗大呻吟视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 老汉色∧v一级毛片| 高清毛片免费观看视频网站 | 男人舔女人的私密视频| 99久久国产精品久久久| 老熟妇仑乱视频hdxx| 麻豆国产av国片精品| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 一级a爱视频在线免费观看| 久久久久久久精品吃奶| 国产精品一区二区精品视频观看| 午夜福利在线观看吧| 水蜜桃什么品种好| 在线观看午夜福利视频| 一区二区三区激情视频| 午夜精品在线福利| 黄色 视频免费看| tocl精华| 三上悠亚av全集在线观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 午夜视频精品福利| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲 国产 在线| 99香蕉大伊视频| 成人av一区二区三区在线看| 99久久国产精品久久久| 新久久久久国产一级毛片| 无人区码免费观看不卡| 国产日韩欧美亚洲二区| 午夜老司机福利片| 欧美成人午夜精品| 18禁美女被吸乳视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 精品一区二区三卡| 在线观看日韩欧美| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 老司机深夜福利视频在线观看| 免费在线观看完整版高清| 国产精品亚洲av一区麻豆| 精品国产亚洲在线| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 国产人伦9x9x在线观看| 色在线成人网| 欧美日韩视频精品一区| 国产乱人伦免费视频| 老司机影院毛片| 久久人妻av系列| 十八禁高潮呻吟视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 欧美人与性动交α欧美软件| 捣出白浆h1v1| 国产成人啪精品午夜网站| 国产在线一区二区三区精| 最新的欧美精品一区二区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产成人精品无人区| 亚洲国产精品合色在线| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲第一青青草原| 欧美最黄视频在线播放免费 | 国产精品免费一区二区三区在线 | av视频免费观看在线观看| 正在播放国产对白刺激| 亚洲av成人av| 亚洲午夜理论影院| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 宅男免费午夜| 人妻久久中文字幕网| av中文乱码字幕在线| 久99久视频精品免费| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲黑人精品在线| 一本综合久久免费| 国产精品免费一区二区三区在线 | 成年版毛片免费区| 日韩欧美免费精品| 亚洲精品久久午夜乱码| 久热这里只有精品99| 欧美黄色淫秽网站| 欧美 日韩 精品 国产| 一级,二级,三级黄色视频| 一本综合久久免费| 国产一区二区激情短视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 美女午夜性视频免费| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲精华国产精华精| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久精品人人爽人人爽视色| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 久久婷婷成人综合色麻豆| 女警被强在线播放| 丁香欧美五月| 色尼玛亚洲综合影院| 高清视频免费观看一区二区| 成人精品一区二区免费| 天堂中文最新版在线下载| 国产精品99久久99久久久不卡| 桃红色精品国产亚洲av| 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲一区高清亚洲精品| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 看免费av毛片| 欧美激情高清一区二区三区| 欧美精品亚洲一区二区| 十八禁人妻一区二区| 少妇粗大呻吟视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产免费av片在线观看野外av| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 大陆偷拍与自拍| 激情在线观看视频在线高清 | 亚洲伊人色综图| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 精品人妻在线不人妻| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲av电影在线进入| www日本在线高清视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产精品综合久久久久久久免费 | 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲人成电影免费在线| 日本欧美视频一区| av一本久久久久| 成年人免费黄色播放视频| 精品久久久精品久久久| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲全国av大片| 精品欧美一区二区三区在线| 久久中文看片网| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲五月色婷婷综合| 欧美日韩福利视频一区二区| 免费少妇av软件| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲中文av在线| 中文字幕精品免费在线观看视频| 中国美女看黄片| 午夜视频精品福利| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 热re99久久精品国产66热6| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产主播在线观看一区二区| 日日夜夜操网爽| 精品免费久久久久久久清纯 | 99久久精品国产亚洲精品| 免费少妇av软件| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产精品99久久99久久久不卡| 69精品国产乱码久久久| 天天影视国产精品| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 日韩欧美免费精品| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 一进一出抽搐动态| 国产不卡一卡二| 黄色怎么调成土黄色| 日韩欧美免费精品| 天堂俺去俺来也www色官网| 很黄的视频免费| 久久久精品免费免费高清| 亚洲精品av麻豆狂野| 91av网站免费观看| 动漫黄色视频在线观看| 女人被狂操c到高潮| 黄片小视频在线播放| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲专区中文字幕在线| 少妇的丰满在线观看| 午夜福利,免费看| 9191精品国产免费久久| 18在线观看网站| 亚洲伊人色综图| 高清在线国产一区| 精品久久久久久久毛片微露脸| 黄色成人免费大全| 久久这里只有精品19| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美最黄视频在线播放免费 | 男人操女人黄网站| 亚洲少妇的诱惑av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 美女高潮到喷水免费观看| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 精品欧美一区二区三区在线| 国产在线观看jvid| 老司机午夜福利在线观看视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美黑人精品巨大| av一本久久久久| 日韩欧美三级三区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 在线天堂中文资源库| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 手机成人av网站| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲三区欧美一区| 夜夜爽天天搞| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 两性夫妻黄色片| 999久久久国产精品视频| 日本vs欧美在线观看视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产激情久久老熟女| 国产精品九九99| 黄色成人免费大全| 亚洲成a人片在线一区二区| 午夜福利,免费看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 69精品国产乱码久久久| 一区二区日韩欧美中文字幕| 看黄色毛片网站| 久久精品91无色码中文字幕| 国产日韩欧美亚洲二区| 我的亚洲天堂| 免费人成视频x8x8入口观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 成人影院久久| 天堂中文最新版在线下载| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲精品国产一区二区精华液| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 久久久久国产一级毛片高清牌| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产精品99久久99久久久不卡| 日本vs欧美在线观看视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 色老头精品视频在线观看| bbb黄色大片| 国产91精品成人一区二区三区| 又黄又粗又硬又大视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲av成人av| 国产精品免费视频内射| 成人国语在线视频| 亚洲精品美女久久av网站| 午夜激情av网站| 色婷婷av一区二区三区视频| 天堂动漫精品| 曰老女人黄片| aaaaa片日本免费| 99re6热这里在线精品视频| 色老头精品视频在线观看| 极品人妻少妇av视频| 99国产精品免费福利视频| 欧美精品亚洲一区二区| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 九色亚洲精品在线播放| 亚洲免费av在线视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产精品98久久久久久宅男小说| 最新在线观看一区二区三区| 国产午夜精品久久久久久| 国产亚洲精品久久久久久毛片 | 亚洲久久久国产精品| 国产精品一区二区精品视频观看| 成人国语在线视频| 亚洲男人天堂网一区|