橢圓葉米仔蘭化學(xué)成分及其生物活性

韓晶晶， 陳夢(mèng)瑩， 岑 娟， 李 欽， 張 峰*

(1.河南大學(xué)藥學(xué)院，河南 開封 475004；2.河南大學(xué)天然藥物與免疫重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 開封 475004)

橢圓葉米仔蘭Aglaiarimosa(Blanco) Merrill是一種楝科、米仔蘭屬、蕓香目的常綠灌木或小喬木,其小枝有銹色鱗片，圓錐花序腋生[1]。楝科米仔蘭屬植物由于喜溫暖而濕潤(rùn)的氣候和對(duì)低溫敏感的生長(zhǎng)習(xí)性，主要分布在東南亞熱帶雨林地區(qū)[2]，該屬中的米仔蘭在民間可以作為藥用，其葉味辛，微溫，入肺、胃、肝經(jīng)，有活血散疲、消腫止痛的功效，用于治療跌打、骨折、風(fēng)濕、癰疫；其花味甘，性辛，有行氣解郁的功效，用于治療氣郁胸悶、食滯腹脹[3-4]。米仔蘭屬植物化合物結(jié)構(gòu)種類繁多，除了常見的萜類、甾體類外還有木脂素類，具有抗腫瘤、抗病毒、抗炎、抗菌活性[5-6]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)橢圓葉米仔蘭的莖皮化學(xué)成分進(jìn)行深入的研究，從中分離出17個(gè)化合物，均為首次從該植物中分離得到，其中化合物10～11、15～16均表現(xiàn)出抗菌和抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。

1 材料

搖擺式高速萬能粉碎機(jī)(林大機(jī)械有限公司)；JHBE-100A型閃式提取器(智晶生物科技科技股份有限公司)；Buchi旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；LC-20AT型高效液相色譜儀、LC-6A型高效液相色譜儀(制備型)(日本島津公司)；基質(zhì)輔助激光解析離子飛行質(zhì)譜檢測(cè)儀、AVANCE AV-400核磁共振波譜儀(德國(guó)Bruker公司)；Agilent 1100 Series LC/MSD Trap 質(zhì)譜儀(美國(guó)安捷倫公司)。乙醇、甲醇、石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮均為分析純，購(gòu)自天津市富宇精細(xì)化工有限公司；色譜純甲醇、乙腈購(gòu)自天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司；氘代甲醇、氘代氯仿購(gòu)自寧波旋光醫(yī)藥科技有限公司。硅膠 GF254薄層板和柱層析硅膠(200～300、300～400目)均購(gòu)自青島海洋化工有限公司；ODS反相柱層析填料購(gòu)自上海博勢(shì)生物科技有限公司。

藥材來源于云南西雙版納，由河南大學(xué)藥學(xué)院袁王俊教授鑒定為橢圓葉米仔蘭Aglaiarimosa(Blanco) Merrill。

2 提取與分離

橢圓葉米仔蘭莖枝(10 kg)經(jīng)粉碎后按料液比1∶10加95%乙醇，用閃式提取器提取，提取時(shí)間分別是1檔2 min、2檔1 min、三檔1 min，重復(fù)提取3次。提取液經(jīng)減壓回收至無醇味，濃縮液用水混懸，分別用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到相應(yīng)部位浸膏。

二氯甲烷部位浸膏經(jīng)硅膠柱色譜石油醚-乙酸乙酯(20∶1～2∶1)梯度洗脫后TLC檢測(cè)合并，得到Fr.1～Fr.4流分,Fr.2、Fr.4經(jīng)LC-6AD高效液相色譜儀-制備型分離純化得化合物8(6.2 mg)、5(21.5 mg)、9(4.8 mg)；Fr.3經(jīng)ODS柱色譜(10%～60%甲醇)梯度洗脫，其中在20%、30%甲醇部位得化合物6(19 mg)。乙酸乙酯部位浸膏經(jīng)硅膠柱色譜二氯甲烷-甲醇(20∶1～5∶1)梯度洗脫后經(jīng)TLC檢測(cè)合并后共得到7個(gè)流分Fr.1～Fr.7，F(xiàn)r.1、Fr.2直接得化合物2(24 mg)、10(129.5 mg)；Fr.3、Fr.5、Fr.6經(jīng)LC-6AD高效液相色譜儀-制備型分離純化得化合物17(62.7 mg)、11(44.6 mg)、7(7.3 mg)、13(69.1 mg)、12(126.5 mg)、15(43.4 mg)、14(58.3 mg)、16(43.4 mg)、1(46.3 mg)；Fr.4經(jīng)ODS柱色譜(10%～60%甲醇)梯度洗脫，在20%甲醇部位直接得化合物3(21.3 mg)、4(75.1 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色無定形粉末，ESI-MSm/z：178.4[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.99(J=33.6，1.9 Hz，3H)，6.87～6.65(7H)，4.61(J=1.9 Hz，1H)，4.23～3.95(3H)，3.80(1H)，3.35(J=1.7 Hz，1H)，2.93～2.69(3H)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：158.0(C-5′，7′，9′)，156.5(C-5′，7′，9′)，154.1(C-5，7，9)，154.0(C-5，7，9)，145.4(C-5，7，9)，144.6(C-4′)，144.4(C-3′，4)，144.2(C-3)，131.0(C-1′)，130.6(C-1)，118.1(C-6′)，117.8(C-6)，114.5(C-5，5′)，114.0(C-2′)，113.8(C-2)，101.7(C-8′)，99.8(C-10，10′)，99.3(C-6′)，99.2(C-6)，99.1(C-8)，78.3(C-2′)，75.9(C-2)，71.3(C-3)，66.1(C-3′)，36.3(C-4)，28.2(C-4′)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]基本一致，故鑒定為(±)-6-linalyl-7-hydroxycoumarin。

化合物2：白色白色無定形粉末，10%香草醛濃硫酸顯紅色，放置后變棕黃色，提示該化合物為三萜皂苷類或甾體皂苷類成分[8]。ESI-MSm/z：331.2[M+H]-。1H-NMR(400 MHz，Chloroform-d)δ：4.33～4.21(1H，H-2)，3.53～3.21(2H，1H，J=11.4，3.9 Hz，H-3a，3b)，2.16(1H，J=9.0，6.4 Hz，H-2′)，0.95～0.80(3H，J=6.9 Hz，16′-CH3)；13C-NMR(100 MHz，Chloroform-d)δ：35.2(C-1)，28.0(C-2)，78.7(C-3)，35.7(C-4)，139.3(C-5)，121.1(C-6)，28.3(C-7)，28.8(C-8)，41.3(C-9)，32.9(C-10)，20.1(C-11)，36.3(C-12)，37.9(C-13)，49.1(C-14)，23.3(C-15)，27.1(C-16)，44.8(C-17)，10.7(C-18)，18.8(C-19)，33.3(C-20)，18.4(C-21)，28.8(C-22)，28.3(C-23)，38.8(C-24)，25.1(C-25)，18.0(C-26)，17.8(C-27)，22.0(C-28)，11.7(C-29)，100.2(C-1′)，72.4(C-2′)，72.8(C-3′)，55.8(C-4′)，69.3(C-5′)，55.1(C-6′)，173.4(C-1′)，30.9(C-2″)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]基本一致， 故鑒定為β-谷甾醇-3-O-6-棕櫚酰葡萄糖苷。

化合物3：無定形粉末，ESI-MSm/z：290.3[M+H]-。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.83(1H，J=1.9 Hz，H-2′)，6.80(1H，J=8.04 Hz，H-6′)，6.67(1H，J=8.12 Hz，H-5′)，5.90(1H，J=2.24 Hz，H-8)，5.67(1H，J=2.20 Hz，H-6)，4.55(1H，J=7.5 Hz，H-2)，3.97(1H，J=7.8，5.3 Hz，H-3)，2.50(1H，J=16.0，8.1 Hz，H-4a)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：27.1(C-4)，67.4(C-3)，81.5(C-2)，94.2(C-8)，94.8(C-6)，99.4(C-4a)，113.9(C-2′)，114.7(C-5′)，118.7(C-6′)，130.8(C-1′)，144.8(C-3′)，155.5(C-4′)，156.2(C-8a)，156.4(C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]基本一致，故鑒定為兒茶素。

化合物4：無定形粉末，ESI-MSm/z：290.3[M+H]-。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.99(1H，H-2′)，6.76(2H，H5′，6′)，5.94(1H，J=2.0 Hz，H-8)，5.91(1H，J=2.0 Hz，H-6)，4.19(1H，J=7.5 Hz，H-2)，3.34(2H，J=16.5 Hz，H-4)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：156.6(C-5)，156.3(C-7)，156.0(C-9)，144.5(C-3′)，144.4(C-4′)，130.9(C-1′)，118.0(C-6′)，114.5(C-2′)，113.9(C-5′)，98.7(C-10)，95.0(C-6)，94.5(C-8)，78.5(C-2)，66.19(C-3)，27.9(C-4)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]基本一致，故鑒定為表兒茶素。

化合物5：無定形粉末，ESI-MSm/z：224.4[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，Chloroform-d)δ：5.86(1H，H-4)，3.37(1H，H-9)，2.21(1H，J=18, 1 Hz， H-2)，2.16(3H，J=1 Hz，H-13)，1.36(3H，J=6 Hz，H-10)，1.26(3H，H-12)，1.15(3H，H-11)；13C-NMR(100 MHz，Chloroform-d)δ：209.6(C-9)，198.6(C-7)，118.7(C-6)，100.8(C-8)，72.4(C-5)，63.8(C-3)，48.8(C-2)，48.7(C-4)，36.1(C-1)，31.7(C-12)，30.9(C-13)，29.2(C-11)，26.4(C-10)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]基本一致，故鑒定為lyratol F。

化合物6：無定形粉末，ESI-MSm/z：226.3[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，Chloroform-d)δ：7.18(2H，H-2，6)，3.94(2H，J=6.1 Hz，H-9)，3.88(6H，3，5-OCH3)，3.13(2H，J=6.1 Hz，H-8)；13C-NMR(100 MHz，Chloroform-d)δ：198.9(C-7)，146.9(C-2，6)，140.1(C-4)，128.3(C-1)，105.6(C-3，5)，58.3(C-9)，56.4(C-2，6-OCH3)，39.9(C-8)， 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]基本一致，故鑒定為3-羥基-1-(4-羥基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮。

化合物7：無定形粉末，ESI-MSm/z：332.1[M+H]-。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.98(J=1.9 Hz，1H)，6.84～6.74(2H)，5.97～5.91(2H)，4.21(J=4.6，3.0，1.4 Hz，1H)，3.43～3.29(9H)，2.93～2.79(1H)，2.74(J=16.8，3.1 Hz，1H)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：156.6(C-7)，156.3(C-5)，156.0(C-9)，144.5(C-4′)，144.4(C-3′)，130.9(C-1′)，118.0(C-6′)，114.5(C-5′)，113.9(C-2′)，98.6(C-10)，95.0(C-8)，94.5(C-6)，78.4(C-2)，66.1(C-3)，56.1(-OCH3)，55.9(-OCH3)，55.6(-OCH3)，27.9(C-4)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]基本一致，故鑒定為(2R,3S)-5,7,3′-tri-omethyl-(-)-epicatechin。

化合物8：無定形粉末，ESI-MSm/z:354.4[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，Chloroform-d)δ：8.04～7.93(3H，H-9)，7.46(1H，J=7.3 Hz，H-10)，6.84～6.83(1H，H-11)，6.80～6.69(1H，H-12)，4.42(1H，J=2.0 Hz，H-17)，3.28～3.81(6H，H-3)，3.11(2H，J=5.3 Hz，H-5，6)，1.42(4H，H-15～16，18～19)；13C-NMR(100 MHz，Chloroform-d)δ：128.7(C-2)，57.4(C-3)，55.1(C-5)，21.7(C-6)，108.6(C-7)，121.2(C-8)，112.9(C-9)，113.3(C-10)，113.5(C-11)，110.8(C-12)，122.7(C-13)，28.7(C-14)，30.8(C-15)，54.9(C-16)，62.1(C-17)，28.3(C-18)，24.4(C-19)，38.7(C-20)，57.3(C-21)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]基本一致，故鑒定為育亨賓。

化合物9：無定型粉末，ESI-MSm/z：852.3[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，Chloroform-d)δ：4.16(1H，J=11.7，5.4 Hz，H-2′)，3.92(1H，3′-OH)，3.72～3.55(1H，J=8.60 Hz，2′-OH)，2.34(2H，H-2)，1.62(2H，H-3)，1.29(6H，H-4，14，15)，0.87(3H，H-16)；13C-NMR(100 MHz，Chloroform-d)δ：70.3(C-1′)，65.2(C-2′)，63.3(C-3′)，34.2(C-2)，31.9(C-14)，29.3～29.7(C-4-13)，24.9(C-3)，22.7(C-15)，14.1(C-16)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]基本一致，故鑒定為α-棕櫚精。

化合物10：無定形粉末，ESI-MSm/z：306.1[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.45(2H，H-2′，6′)，5.96(1H，J=2.5 Hz，H-8)，5.87(1H，J=2.5 Hz，H-6)，4.75(1H，J=7.5 Hz，H-2)，4.14(1H，H-3)，3.31(1H，J=16.0，5.5 Hz，H-4a)，2.56(1H，J=16.2，8.1 Hz，H-4b)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：27.8(C-4)，66.1(C-3)，78.5(C-2)，94.4(C-8)，95.0(C-6)，98.7(C-4a)，105.6(C-2″，C-6″)，130.1(C-1″)，132.2(C-4″)，145.3(C-3″，C-5″)，155.9(C-5，C-7，C-8a)，156.3(C-5，C-7，C-8a)，156.6(C-5，C-7，C-8a)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]基本一致，故鑒定為表沒食子兒茶素。

化合物11：無定形粉末，ESI-MSm/z：594.4[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.43(3H)，5.92(J=22.8 Hz，5H)，4.56(J=7.1 Hz，1H)，4.00(J=6.5 Hz，1H)，3.34(J=15.5 Hz，2H)，2.82(J=16.0，5.3 Hz，2H)，2.54(J=16.2，7.7 Hz，1H)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：147.6(C-3′，5′)，147.2(C-5)，146.1(C-7)，138.1(C-1′)，137.4(C-6)，133.1(C-4′)，128.8(C-9)，124.8(C-10)，106.4(C-8)，105.7(C-2′，6′)，102.7(C-1″)，76.8(C-5″)，76.5(C-3″)，73.6(C-2″)，70.5(C-3a)，70.1(C-4″)，64.8(C-2a)，61.3(C-6″)，58.8(5-OCH3)，55.6(3′，5′-OCH3)，55.3(7-OCH3)，45.2(C-3)，42.0(C-4)，39.8(C-2)，32.5(C-1)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]基本一致，故鑒定為gallocatechin-(4′-O-7)-epigallocatechin。

化合物12：無定形粉末，ESI-MSm/z：605.2[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.58(1H，H-8)，6.43(1H，H-2′，6′)，4.42(1H，J=6.2 Hz，H-4)，4.27(1H，J=7.8 Hz，H-1″)，3.83(1H，J=10.0，5.5 Hz，H-3αa)，3.76(3H，7-OCH3)，3.36(6H，H-2″～6″)，3.33(3H，5-OCH3)，2.68(1H，J=15.2，4.7 Hz，H-1a)，2.21(1H，J=15.2，11.4 Hz，H-1b)，2.16(1H，H-3)，1.66(1H，H-2)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：147.6(C-3′，5′)，147.2(C-5)，146.1(C-7)， 138.1(C-1′)，137.4(C-6)，133.2(C-4′)，128.8(C-9)，124.8(C-10)，106.4(C-8)，105.7(C-2′，6′)，102.8(C-1″)，76.8(C-5″)，76.5(C-3″)，73.6(C-2″)，70.5(C-3a)，70.1(C-4″)，64.8(C-2a)，61.3(C-6″)，58.8(5-OCH3)，55.6(3′，5′-OCH3)，55.3(7-OCH3)，45.2(C-3)，42.0(C-4)，39.8(C-2)，32.5(C-1) 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]基本一致，故鑒定為(-)-南燭木樹脂酚-3α-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物13：無定形粉末，ESI-MSm/z：514.7[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.81(1H，J=8.0 Hz，H-5′)，6.72(1H，J=2.0 Hz，H-2′)，6.67(1H，H-8)，6.11(1H，H-5)，4.15(1H，J=7.5 Hz，H-1″)，3.96(1H，H-3)，3.72(3H，3′-OCH3)，3.34(6H，H-2″～6″)，2.85(1H，H-1)，1.88(1H，H-4)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：147.5(C-3′)，145.7(C-5)，144.4(C-4′)，143.7(C-7)，137.3(C-1′)，133.0(C-2)， 127.8(C-1)，121.8(C-6′)，116.0(C-3)，114.8(C-5′)，112.9(C-2′)，111.0(C-6)，103.8(Glc C-1)，76.7(Glc C-3)，76.4(Glc C-5)，73.8(Glc C-2)，70.2(Glc C-4)，68.2(C-9′)，63.8(C-9)，61.3(Glc C-6)，55.1(6-OCH3)，55.1(3′-OCH3)，46.6(C-7′)，44.5(C-8′)，38.2(C-8)，32.5(C-7)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]基本一致，故鑒定為(+)-異落葉松脂素-9′-O-β-吡喃葡萄糖苷。

化合物14：無定形粉末，ESI-MSm/z：605.1[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.82(1H，H-4)，6.64(2H，H-1′，6′)，4.37(1H)，4.34(1H)，4.24(1H)，3.89(1H，H-7a)，3.82(3H，3-OCH3)，3.73(6H，3′，5′-OCH3)，3.54(1H，J=4.8 Hz，H-6a)，3.44(1H，H-7a)，3.21(3H，1-OCH3)，2.08(1H，H-7)，1.64(1H，H-6)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：147.6(C-3′)，147.5(C-3)，145.8(C-2)，144.5(C-4′)，143.8(C-10)，137.4(C-2′)，132.3(C-1′)，127.9(C-9)，122.1(C-6′)，116.0(C-7)，114.6(C-5′)，112.6(C-4)，111.0(C-1″)，102.3(C-3″)，76.8(C-5″)，76.4(C-2″)，73.6(C-4″)，70.0(C-7a)，69.4(C-6a)，64.1(C-6″)，61.1(CH3O-3)，55.2(CH3O-3′)， 55.0(C-8)，43.9(C-7)，39.8(C-6)，32.3(C-5)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[21]基本一致，故故鑒定為(6S,7S,8R)-7α-[(β-D-glucopyranosyl)oxy]isolariciresinol。

化合物15：無定形粉末，ESI-MSm/z：577.9[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.94(1H，J=2.0 Hz，H-10)，6.83(1H，J=2.0 Hz，H-10′)，6.73(3H，H-13，13′～14′)，6.21(2H，H-6，8)，5.96(1H，H-6′)，4.62(H2)，4.55(1H，J=13.0 Hz，H-2′)，4.58(1H，J=6.0 Hz，H-4)，4.09(1H，H-3)，3.93(1H，J=13.0，8.0 Hz，H-3′)，2.48(1H，J=14.0，7.5 Hz，H-4′b)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：158.0(C-7)，156.6(C-5′)，153.5(C-7′)，153.50(C-5)，144.8(C-11′)，144.5(C-11)，144.3(C-12)，130.9(C-9)，130.9(C-9′)，118.7(C-14)，117.9(C-14′)，114.7(C-13′)，114.6(C-13)，113.9(C-10′)，113.9(C-8′)，100.0(C-4α)，99.2(C-4α′)，81.2(C-2′)，75.9(C-2)，71.3(C-3)，67.4(C-3′)，36.3(C-4)，27.2(C-4′)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[22]基本一致，故鑒定原花青素B1。

化合物16：無定形粉末，ESI-MSm/z：577.9[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：4.16(1H，HA3)，2.33(1H，J=14.5 Hz，HA4α)，6.98(1H，J=2.0 Hz，HA2′)，6.62(1H，J=8.0 Hz，HA5′)，4.88(1H，HB2)，5.77(1H，HB6)，5.71(1H，HB8)，6.68(1H，J=8.0 Hz，HB5′)，6.77(1H，J=8.0，2.0 Hz，HB6′)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：158.0(C-5′，7′，9′)，156.6(C-5′，7′，9′)，154.1(C-5，7，9)，154.0(C-5，7，9)，145.4(C-5，7，9)，144.5(C-4′)，144.4(C-3′，4)，144.3(C-3)，130.9(C-1′)，130.6(C-1)，118.1(C-6′)，117.8(C-6)，114.6(C-5，5′)，114.0(C-2′)，113.8(C-2)，101.7(C-8′)，99.7(C-10，10′)，99.3(C-6′)，99.2(C-6)，99.1(C-8)，78.3(C-2′)，75.9(C-2)，71.3(C-3)，66.1(C-3′)，36.3(C-4)，28.2(C-4′)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[22]基本一致，故鑒定為原花青素B2。

化合物17：無定形粉末，ESI-MSm/z：577.9[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ：6.98(2H，H-10，10′)，6.79(2H，J=8.0，3.0 Hz，H-14)，6.74(2H，H-13，13′)，6.63(2H，J=8.0，2.0 Hz，H-14′)，6.52(1H，H-6′)，6.28(1H，J=2.0 Hz，H-6)，6.13(1H，J=2.0 Hz，H-8)，4.62(1H，J=7.5 Hz，H2)，4.57(1H，H-2′)，4.49(1H，J=8.5 Hz，H4)，4.35(1H，H-3′)，4.31(1H，J=8.5 Hz，H3)，2.91(1H，J=16.0，5.5 Hz，H-4′ a)，2.53(1H，J=16.0，8.0 Hz，H-4′ b)；13C-NMR(100 MHz，Methanol-d4)δ：157.18(C-9)，155.6(C-7)，154.4(C-5, 5′, 7′)，154.2(C-9′)，153.4(C-12)，144.7(C-11,12′)，144.4(C-1′)，131.2(C-9′)，130.5(C-9′)，119.3(C-14)，118.5(C-14′)，115.1(C-13)，114.9(C-10′)，114.8(C-13′)，114.2(C-10)，106.9(C-8′)，105.9(C-8)，100.9(C-6′)，82.6(C-6′)，81.0(C-2)，72.4(C-2′)，67.5(C-3)，67.2(C-3′)，37.1(C-4)，27.4(C-4′)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]基本一致，故鑒定為原花青素B3。

4 活性測(cè)試

4.1 抗菌活性測(cè)試 以不加化合物瓊脂板為對(duì)照組，采用稀釋涂布平板法將稀釋至1×104CFU/mL金黃色葡萄球菌液涂布于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，分別加入質(zhì)量濃度為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL的化合物1～17溶液各1 mL，在37 ℃下培育24 h后用倒置熒光顯微鏡和肉眼觀察是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。以完全沒有菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度作為該藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)菌的最低抑菌濃度(MIC)，重復(fù)3次,取平均值。結(jié)果，化合物4、10～11、15～17對(duì)金黃色葡萄球菌有抗菌效果，其MIC分別是1.0、1.0、1.0、1.0、0.8、1.0 mg/mL，而且抑菌率與其質(zhì)量濃度呈正相關(guān)。

4.2 細(xì)胞毒活性測(cè)試 以紫杉醇為對(duì)照組，采用MTT法測(cè)定各化合物對(duì)6種人腫瘤細(xì)胞株(急髓白血病HL-60、結(jié)腸癌HT-29、直腸癌HCT-116、乳腺癌MDA-MB-231、肺癌A549、慢性髓系白血病K562)和1種人正常肝細(xì)胞株(HL-7702)的細(xì)胞毒活性。結(jié)果，化合物1、6、10～11、15～16對(duì)7種細(xì)胞株表現(xiàn)出不同的細(xì)胞毒活性，見表1。

表1 細(xì)胞毒活性實(shí)驗(yàn)中各化合物IC50 值

綜上所述，從橢圓葉米仔蘭莖枝中提取的化合物10～11、15～16在抗菌活性、細(xì)胞毒活性測(cè)試中均有較好的效果，而且均為黃酮類成分，推測(cè)它們對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖可能有一定的抑制作用。