高脂飲食對牙周炎小鼠牙槽骨吸收影響的實(shí)驗(yàn)研究

王 敏，李麗麗，閆福華

(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院 牙周病科，江蘇 南京 210008)

牙周炎是由菌斑微生物感染所引起的牙周支持組織的慢性炎癥性疾病，表現(xiàn)為牙齦炎癥和牙槽骨吸收，可導(dǎo)致牙齒松動脫落?？谇恢械木呶⑸锸茄乐苎椎氖及l(fā)因素，導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，宿主的免疫反應(yīng)與牙周致病菌的相互作用影響著牙周炎的發(fā)生和發(fā)展[1]。巨噬細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)重要的效應(yīng)細(xì)胞，主要有兩種表型：經(jīng)典活化的M1型巨噬細(xì)胞和替代活化的M2型巨噬細(xì)胞[2]，M1型是促炎表型，通過增加白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)等的產(chǎn)生而發(fā)揮殺菌、促炎作用；M2型是抗炎表型，通過上調(diào)IL-4、IL-10和下調(diào)IL-6等的表達(dá)發(fā)揮抗炎作用和促進(jìn)組織修復(fù)的功能[3]。研究表明，慢性牙周炎患者牙齦組織中M1/M2比值顯著升高，并伴有TNF-α、IL-6和IL-12等促炎細(xì)胞因子的表達(dá)增加[4]，巨噬細(xì)胞在維持牙周組織免疫穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著重要作用。

隨著物質(zhì)生活水平的提高，人們飲食中高脂高糖食物的比例越來越高，高脂飲食與糖尿病、動脈粥樣硬化、肥胖、非酒精性脂肪肝等慢性病密切相關(guān)，已成為威脅人類健康的重要危險(xiǎn)因素之一。高脂飲食可能干擾宿主的免疫調(diào)控反應(yīng)[5-6]，從而影響牙周炎的發(fā)生、發(fā)展。臨床研究顯示[7]，在肥胖男性中，高脂飲食者發(fā)生牙周炎的風(fēng)險(xiǎn)顯著高于健康飲食者。動物實(shí)驗(yàn)研究也表明[8]，高脂飲食能夠加重牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)誘導(dǎo)的牙槽骨吸收，其機(jī)制可能是肥胖導(dǎo)致免疫失調(diào)，干擾了免疫系統(tǒng)清除Pg感染的能力，然而具體的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制尚不明確。

本研究通過絲線結(jié)扎小鼠右側(cè)上頜第二磨牙誘導(dǎo)牙周炎，在高脂飲食和普通飲食背景下，觀察小鼠牙周組織的變化情況和巨噬細(xì)胞的表達(dá)，研究高脂飲食對牙周炎小鼠牙槽骨吸收的影響，并探究巨噬細(xì)胞在高脂飲食牙周炎小鼠牙槽骨吸收中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物 30只SPF(Specific pathogen free)級6周齡雄性C57BL/6J小鼠，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)技術(shù)有限公司，體重(21±2)g，飼養(yǎng)于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心SPF級動物房，環(huán)境溫度(24±1)℃，濕度(50±5)%，12 h光照晝夜交替循環(huán)，小鼠自由進(jìn)食和飲水。

1.1.2 飼料 高脂飼料(D12492,江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司)成分配比：60%脂肪、20%碳水化合物、20%蛋白質(zhì)。普通飼料(D12450J，江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司)成分配比：10%脂肪、70%碳水化合物、20%蛋白質(zhì)。

1.1.3 主要儀器與試劑 Micro-CT(SkyScan 1176，Bruker，德國)；數(shù)字化切片掃描儀(3DHI STECH，匈牙利)；5-0號醫(yī)用真絲編織線(上海浦東金環(huán)醫(yī)療用品股份有限公司，中國)；水合氯醛(Sigma，美國)；HE染液(Servicebio，中國)；TRAP染液套裝(Servicebio，中國)；免疫組織化學(xué)試劑盒DAB顯色劑(Servicebio，中國)；F4/80抗體(Servicebio，中國)；iNOS抗體(Servicebio，中國)；CD206抗體(Servicebio，中國)；IL-6抗體(Servicebio，中國)；TNF-α抗體(Servicebio，中國)；IL-4抗體(Servicebio，中國)；IL-10抗體(Servicebio，中國)。

1.2 方法

1.2.1 動物分組 適應(yīng)性飼喂1周后，30只C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為正常飲食組(ND，n=7只)、高脂飲食組(HFD，n=7只)、正常飲食+牙周炎組(L_ND，n=8只)和高脂飲食+牙周炎組(L_HFD，n=8只)，ND、L_ND組小鼠飼喂普通飼料(D12450J),HFD、L_HFD組飼喂高脂飼料(D12492)11周。飼料每2天更換1次，保證飼料的新鮮度，防止高脂飼料氧化影響小鼠食欲，牙周炎模型于第8周開始建立，持續(xù)3周。

1.2.2 牙周炎模型構(gòu)建 采用腹腔注射7%水合氯醛溶液(6 mL/kg)行小鼠全身麻醉，待麻醉完全后，用開口器打開小鼠口腔，用持針器夾持5-0號滅菌絲線滑入小鼠右側(cè)上頜第二磨牙的近遠(yuǎn)中間隙，用探針將絲線壓入齦溝內(nèi)，并在腭側(cè)打外科結(jié)。結(jié)扎完成后，每2天需檢查結(jié)扎線是否在位，若發(fā)現(xiàn)結(jié)扎絲線脫落，及時(shí)重新結(jié)扎。

1.2.3 牙槽骨吸收情況檢測 取小鼠右側(cè)上頜骨，4%多聚甲醛固定48 h后，使用SkyScan 1176 Micro-CT掃描，掃描參數(shù)：管電壓50 kV、管電流400 μA、分辨率9 μm，并用DataViewer軟件調(diào)整頜骨方向，使右側(cè)上頜第二磨牙咬合面近遠(yuǎn)中長軸與x軸平行，咬合面與y軸平行，牙體長軸與z軸平行，在上頜第二磨牙近遠(yuǎn)中向截面上測量釉牙骨質(zhì)界(Cemento-enamel junction,CEJ)至牙槽嵴頂(Alveolar bone crest,ABC)間的線性距離，分別測量近中、中央和遠(yuǎn)中3個(gè)位點(diǎn)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；用CTvox軟件進(jìn)行圖像三維重建，獲得上頜骨三維數(shù)字化圖像；在CTAn 軟件中設(shè)置上頜第二磨牙根分叉區(qū)平面至根尖區(qū)平面為感興趣區(qū)域(Region of interest,ROI)，計(jì)算 ROI 內(nèi)骨體積分?jǐn)?shù)(Bone volume/tissue volume,BV/TV)、骨小梁厚度(Trabecular thickness)、骨小梁數(shù)量(Trabecular number)和骨小梁分離度(Trabecular separation)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.2.4 牙周組織病理學(xué)檢測 小鼠右側(cè)上頜骨完成掃描后，置于10% EDTA溶液中進(jìn)行脫鈣，每3天更換一次新鮮脫鈣液，用針刺骨組織無顯著阻力時(shí)，表明脫鈣完成，然后進(jìn)行石蠟包埋，將包埋好的蠟塊按照第二磨牙近遠(yuǎn)中方向在切片機(jī)上連續(xù)切成4 μm厚的切片，按照試劑盒說明書進(jìn)行HE染色、TRAP染色，用數(shù)字化切片掃描儀(3DHISTECH，匈牙利)進(jìn)行切片掃描觀察，獲取切片的數(shù)字化圖像，統(tǒng)計(jì)各組的TRAP染色陽性細(xì)胞數(shù)目，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.2.5 巨噬細(xì)胞分布及相關(guān)細(xì)胞因子檢測 根據(jù)F4/80抗體、iNOS抗體和CD206抗體說明書進(jìn)行小鼠右側(cè)上頜骨組織切片的免疫組化染色，用數(shù)字化切片掃描儀(3DHISTECH，匈牙利)進(jìn)行切片掃描轉(zhuǎn)化為數(shù)字化圖像保存，棕褐色染色細(xì)胞視為陽性表達(dá)，人工計(jì)數(shù)每張切片的棕褐色染色細(xì)胞，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；根據(jù)IL-6抗體、TNF-α抗體、IL-4抗體和IL-10抗體說明書進(jìn)行小鼠右側(cè)上頜骨組織切片的細(xì)胞因子免疫組化染色，用數(shù)字化切片掃描儀(3DHISTECH，匈牙利)進(jìn)行切片掃描轉(zhuǎn)化為數(shù)字化圖像保存并分析。

2 結(jié)果

2.1 高脂飲食牙周炎小鼠牙槽骨吸收增加 絲線結(jié)扎誘導(dǎo)牙周炎3周后，L_ND、L_HFD組小鼠右側(cè)上頜第二磨牙牙齦紅腫，齦緣處食物殘?jiān)逊e，牙齒松動，探診出血顯著，可探及深牙周袋；ND、HFD組小鼠牙齦顏色正常，牙齒無松動，探診無出血。Micro-CT掃描三維重建結(jié)果顯示(見圖1A)，L_ND、L_HFD組分別與ND、HFD組相比，頰腭側(cè)牙槽骨均可見顯著吸收，根分叉暴露，說明牙周炎模型構(gòu)建成功，同時(shí)L_HFD組與L_ND組相比，牙槽骨高度更低，根分叉暴露更加顯著。在右側(cè)上頜第二磨牙近遠(yuǎn)中向截面測量CEJ-ABC線性距離作為牙槽骨吸收值(見圖1B、C)，結(jié)果顯示L_HFD組第二磨牙近中、中央和遠(yuǎn)中位點(diǎn)CEJ-ABC距離分別為(723.90±53.12、564.38±82.90、704.80±55.90)μm，L_ND組此距離分別為(642.28±59.44、391.17±74.94、689.47±100.85)μm，L_HFD組第二磨牙近中及中央處牙槽骨吸收值顯著大于L_ND組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見圖1D)，兩組遠(yuǎn)中牙槽骨吸收無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05，見圖1D)。分析右側(cè)上頜第二磨牙根分叉區(qū)平面至根尖區(qū)平面的牙槽骨形態(tài)學(xué)參數(shù)，結(jié)果顯示L_HFD組骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)為(14.57±6.76)%顯著小于L_ND組(29.71±8.89)%(P<0.05，見圖1E)；L_HFD組骨小梁厚度(44.53±13.14)μm顯著小于L_ND組(80.54±14.48)μm(P<0.05，見圖1F)；L_HFD組骨小梁數(shù)量為(2.56±0.79)1/mm，L_ND組為(3.08±0.83)1/mm，二者相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05，見圖1G)；L_HFD組骨小梁分離度為(198.98±27.19)μm顯著大于L_ND組(155.09±37.88)μm(P<0.05，見圖1H)。

A：Micro-CT三維重建的右側(cè)上頜骨頰腭側(cè)圖像；B：右側(cè)上頜第二磨牙近遠(yuǎn)中向截面；C：右側(cè)上頜第二磨牙CEJ-ABC線性距離測量示意圖；D：各組右側(cè)上頜第二磨牙CEJ-ABC線性距離統(tǒng)計(jì)結(jié)果；E-H：各組右側(cè)上頜第二磨牙根分叉區(qū)骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量、骨小梁分離度統(tǒng)計(jì)結(jié)果；CEJ-ABC：釉牙骨質(zhì)界到牙槽嵴頂?shù)木嚯x；*：P<0.05；**：P<0.01。

2.2 高脂飲食增加了牙周炎小鼠牙周組織局部炎癥反應(yīng) HE染色結(jié)果顯示(見圖2)，ND組 、HFD組可見牙齦附著在釉牙骨質(zhì)界水平，牙骨質(zhì)、牙槽骨未見破壞；L_ND組牙齦上皮釘突增生，結(jié)合上皮向根方退縮，牙槽骨高度降低；L_HFD組與L_ND組相比，牙齦上皮結(jié)構(gòu)破壞更加嚴(yán)重，上皮釘突伸長，膠原纖維排列紊亂，局部出現(xiàn)溶解斷裂，結(jié)合上皮附著水平遠(yuǎn)離釉牙骨質(zhì)界接近根中1/3，牙槽骨高度進(jìn)一步降低，根分叉區(qū)大量炎癥細(xì)胞浸潤。

A：×20，標(biāo)尺=500 μm，黑色箭頭指示CEJ；B：黑色方框的放大圖，×200，標(biāo)尺=50 μm。

2.3 高脂飲食增加了牙周炎小鼠牙周組織中TRAP表達(dá) TRAP染色結(jié)果顯示(見圖3A)，L_ND組和L_HFD組均可見TRAP染色陽性的酒紅色細(xì)胞(破骨細(xì)胞)及骨吸收陷窩，且L_HFD組的TRAP陽性細(xì)胞數(shù)目顯著多于L_ND組(P<0.01,見圖3B)，證實(shí)牙周炎啟動了牙槽骨破骨細(xì)胞的骨吸收活動，高脂飲食使牙周炎小鼠牙槽骨的破骨活動進(jìn)一步增強(qiáng)。

A：右側(cè)上頜骨TRAP染色，×100，標(biāo)尺=100 μm，黑色箭頭指示TRAP染色陽性細(xì)胞；B：各組TRAP染色陽性細(xì)胞數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果；*：P<0.05；**：P<0.01。

2.4 高脂飲食增加了牙周炎小鼠牙周組織中M1型巨噬細(xì)胞的表達(dá) 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示(見圖4A)，ND組 、HFD組F4/80染色陽性的棕褐色細(xì)胞(巨噬細(xì)胞)較少，L_ND組、L_HFD組F4/80染色陽性細(xì)胞顯著增多，并且L_HFD組F4/80染色陽性細(xì)胞數(shù)量為(36.60±2.61)顯著高于L_ND組(21.80±2.86)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，見圖4B)。進(jìn)一步比較4組iNOS染色陽性細(xì)胞(M1型巨噬細(xì)胞)數(shù)量發(fā)現(xiàn)，L_HFD組(16.40±4.51)顯著高于L_ND組(9.20±1.48)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，見圖4C)。ND組 、HFD組和L_ND組中CD206染色陽性的棕褐色細(xì)胞(M2型巨噬細(xì)胞)數(shù)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但與L_ND組相比，L_HFD組CD206陽性細(xì)胞數(shù)量顯著減少(P<0.05，見圖4D)。統(tǒng)計(jì)四組M1型、M2型巨噬細(xì)胞數(shù)量的比值發(fā)現(xiàn)，L_HFD組M1/M2值顯著大于L_ND組(P<0.01，見圖4E)。通過巨噬細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子免疫組化染色發(fā)現(xiàn)(見圖5)，與ND組和HFD組相比，L_ND組和L_HFD組牙周組織中M1型巨噬細(xì)胞相關(guān)的促炎細(xì)胞因子IL-6、TNF-α表達(dá)顯著增加，且TNF-α在L_HFD組中呈強(qiáng)陽性表達(dá)；M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的抑炎細(xì)胞因子IL-10在四組牙周組織中的表達(dá)無顯著差異，IL-4在ND組、L_ND組和HFD組的表達(dá)無顯著差異，在L_HFD組表達(dá)顯著減少，呈弱陽性表達(dá)。以上結(jié)果說明L_HFD組牙周組織中巨噬細(xì)胞浸潤增多，且向M1型極化。

A：各組右側(cè)上頜骨免疫組化染色，×200，標(biāo)尺=50 μm，紅色箭頭指示各組F4/80、iNOS、CD206染色陽性細(xì)胞；B：各組F4/80染色陽性細(xì)胞數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果；C：各組iNOS染色陽性細(xì)胞數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果；D：各組CD206染色陽性細(xì)胞數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果；E：各組M1型巨噬細(xì)胞與M2型巨噬細(xì)胞數(shù)量比值統(tǒng)計(jì)結(jié)果；*：P<0.05；**P<0.01。

圖5 右側(cè)上頜骨細(xì)胞因子免疫組化染色

3 討論

近年來，隨著牙周醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，越來越強(qiáng)調(diào)全身健康在細(xì)菌感染和宿主免疫反應(yīng)動態(tài)平衡中所發(fā)揮的作用，高脂飲食作為代謝紊亂、心血管疾病等慢性病的共同危險(xiǎn)因素，可能干擾宿主對細(xì)菌感染的反應(yīng)[9]，從而促進(jìn)牙周炎的發(fā)生、發(fā)展[10-11]。有研究報(bào)道，高脂飲食誘導(dǎo)肥胖的早期，小鼠下頜骨骨小梁體積和厚度顯著減少，骨膜形成趨于延遲，隨后表現(xiàn)為皮質(zhì)骨孔隙率的增加[12]。高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠胰島素抵抗損害了成骨細(xì)胞胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞增殖，從而導(dǎo)致下頜骨骨質(zhì)疏松[13]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，單純高脂飲食組與單純普通飲食組相比，未發(fā)現(xiàn)顯著的頜骨骨質(zhì)的變化，骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量和骨小梁分離度無顯著差異，這可能與高脂飼料的成分和喂養(yǎng)時(shí)間的長短有關(guān)，后期我們將延長高脂喂養(yǎng)的時(shí)間進(jìn)行深入研究。

有研究發(fā)現(xiàn)，高脂飲食促進(jìn)了實(shí)驗(yàn)兔牙齦注射Pg脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)引起的牙槽骨吸收[14]，高脂飲食誘導(dǎo)的代謝綜合征小鼠牙齦注射伴放線聚集桿菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,Aa) 脂多糖也有同樣的現(xiàn)象發(fā)生[15]。我們的研究結(jié)果顯示，高脂飲食背景下，結(jié)扎誘導(dǎo)的牙周炎小鼠牙槽骨吸收程度較普通飲食牙周炎組顯著增加，尤其上頜第二磨牙根分叉區(qū)的骨質(zhì)破壞更為嚴(yán)重，骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度顯著減小，骨小梁分離度顯著增大，表明上頜第二磨牙根分叉區(qū)骨量減少、骨質(zhì)疏松。HE染色結(jié)果也表明高脂飲食牙周炎組小鼠牙齦上皮結(jié)構(gòu)破壞更加嚴(yán)重，上頜第二磨牙根分叉區(qū)大量炎癥細(xì)胞浸潤。以上結(jié)果提示，高脂飲食加重了牙周炎小鼠牙槽骨的破壞。

在慢性牙周炎期間，菌斑微生物中的細(xì)菌及其代謝產(chǎn)物引發(fā)牙周組織免疫反應(yīng)，免疫細(xì)胞在病變的牙周組織中聚集，產(chǎn)生促進(jìn)破骨生成和活動的細(xì)胞因子，如IL-6、IL-1、IL-17、TNF-α等[16]，使細(xì)胞核因子受體激活劑κB配體(Receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)/骨保護(hù)素(Osteoprotegerin,OPG)比值增加，破骨活動較成骨活動相對增強(qiáng)，最終導(dǎo)致牙槽骨吸收[17-18]。脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞都來源于相同的骨髓間充質(zhì)細(xì)胞前體，高脂飲食增加脂肪細(xì)胞分化會降低成骨細(xì)胞分化[19]，此外，體外實(shí)驗(yàn)研究表明，隨著飽和脂肪酸棕櫚酸(Palmitic acid,PA)濃度的升高，破骨細(xì)胞的形成和炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生上調(diào)，同時(shí)在動物體內(nèi)PA飲食增強(qiáng)了破骨細(xì)胞對Pg的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)牙槽骨的吸收[20]。本實(shí)驗(yàn)TRAP染色結(jié)果顯示，高脂飲食牙周炎組的破骨細(xì)胞數(shù)目顯著增多，表明高脂飲食使牙周炎小鼠牙槽骨的破骨活動增強(qiáng)。

破骨細(xì)胞起源于單核/巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，有研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)扎誘導(dǎo)的牙周炎小鼠牙周組織中M1型巨噬細(xì)胞和破骨細(xì)胞顯著增加，且呈顯著正相關(guān)關(guān)系，二者在牙周組織中的分布表現(xiàn)為相鄰的定位關(guān)系[21]，小鼠牙齦注射M2型巨噬細(xì)胞可緩解Pg注射引起的牙槽骨吸收[22]。我們檢測了不同分組牙周組織中巨噬細(xì)胞的分布，免疫組化染色結(jié)果顯示，牙周炎組小鼠牙周組織M1型巨噬細(xì)胞顯著增多，提示M1型巨噬細(xì)胞可能參與介導(dǎo)牙周炎癥及牙槽骨破壞的過程[23]。然而高脂飲食對牙周組織中巨噬細(xì)胞表型及分布的影響尚無定論，Huang等[24]研究表明高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖牙周炎小鼠牙周組織中巨噬細(xì)胞浸潤減少，肥胖抑制了牙周組織的局部免疫反應(yīng)，減弱了機(jī)體清除牙周致病菌的能力，從而加重牙周炎的嚴(yán)重程度。Li等[15]的實(shí)驗(yàn)研究表明，PA和AaLPS對骨髓巨噬細(xì)胞炎性細(xì)胞因子的表達(dá)具有協(xié)同作用，PA可能通過增強(qiáng)巨噬細(xì)胞中炎癥因子的表達(dá)，從而在代謝綜合征牙周炎小鼠牙槽骨吸收中發(fā)揮重要作用。本研究結(jié)果表明，高脂飲食伴牙周炎組與普通飲食伴牙周炎組相比，牙周組織中M1型細(xì)胞顯著增多，提示高脂飲食背景下，牙周炎小鼠牙周組織中M1型巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答反應(yīng)增強(qiáng)。這與Huang等[24]的研究結(jié)果不一致，可能是因?yàn)闄z測時(shí)間點(diǎn)的差異所造成的，高脂飲食以及牙周炎的不同病變時(shí)期，機(jī)體的免疫反應(yīng)處于動態(tài)變化中，不同階段檢測到的巨噬細(xì)胞含量和種類有所不同。劉艷霞等[25]檢測了C57BL/6J小鼠高脂飲食不同階段外周血中單核細(xì)胞的分布，發(fā)現(xiàn)在高脂飲食的早期，外周血循環(huán)單核細(xì)胞及亞群數(shù)量呈減少趨勢，后期結(jié)果相反，表明免疫細(xì)胞的浸潤因疾病發(fā)展的不同階段而有所差異。

綜上所述，高脂飲食促進(jìn)了牙周炎小鼠牙槽骨吸收，提示我們可為牙周炎患者提供合理的飲食指導(dǎo)，提高牙周治療效果；同時(shí)牙周組織中M1型巨噬細(xì)胞表達(dá)增多，可能介導(dǎo)了高脂飲食對牙周炎小鼠牙槽骨吸收的促進(jìn)作用，后期將深入研究巨噬細(xì)胞調(diào)控牙槽骨吸收的具體機(jī)制，為牙周炎治療提供新的靶點(diǎn)。