凡納濱對(duì)蝦氣泡病的組織病理學(xué)觀察

戚瑞榮，唐紹林*，張吉鵬，崔龍波，馬家好

(1.廣州利洋水產(chǎn)科技股份有限公司，廣東 廣州 510515；2.廣州金水動(dòng)物保健品有限公司，廣東 廣州 510515；3.煙臺(tái)大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264005)

水產(chǎn)動(dòng)物的氣泡病在自然或養(yǎng)殖水體中均較常見[1-2]，但由于國(guó)內(nèi)對(duì)該病的研究不多，同時(shí)在養(yǎng)殖過程中對(duì)該病也無明確診斷方法，導(dǎo)致業(yè)界對(duì)氣泡病認(rèn)識(shí)不足。水產(chǎn)動(dòng)物的氣泡病與人類潛水后發(fā)生的減壓病類似，它是由于水體中氣體過飽和或壓力、水溫變化而引起水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)形成氣栓，并對(duì)機(jī)體造成損傷的一種非傳染性疾病[3-4]。水體中氣體過飽和的原因較多，自然及人為因素均可引起，因此，水產(chǎn)動(dòng)物的氣泡病時(shí)有發(fā)生。目前，國(guó)外關(guān)于氣泡病方面的研究較多，在魚類、蝦、蟹、貝類及兩棲類中均有報(bào)道[5-14]。

氣泡病對(duì)于魚類的影響首先主要集中在眼睛部位，Grahn等[15]、Smiley等[16]、Speare[17-18]均進(jìn)行了該病對(duì)魚類眼睛造成的損傷研究，這些研究表明，患?xì)馀莶◆~眼常一側(cè)嚴(yán)重突出，眼盲，且眼球組織嚴(yán)重病變，眼角膜和眼窩發(fā)生氣腫或出現(xiàn)氣泡，氣泡首先在眼組織脈絡(luò)膜出現(xiàn)。在亞急性和慢性氣泡病中，氣泡顯著位于眼周及眼球后，眼病變嚴(yán)重程度會(huì)隨著總氣體壓力的增加而增加，并伴隨視網(wǎng)膜下、視神經(jīng)及虹膜出血，其次在魚體表、鰭、鰓等部位可以觀察到氣泡。Machova等[6]、Pauley等[19]、Espmark等[20]、彭天輝等[21]對(duì)此均有報(bào)道，他們?cè)隰~體表、鰭、口周、鰓絲表面、鰓小片內(nèi)、眼等部位均觀察到了氣泡的存在。

甲殼類動(dòng)物的氣泡病癥狀以觀察到動(dòng)物體內(nèi)的氣泡為主，Johnson[12]研究了藍(lán)蟹Callinectessapidus氣泡病及其組織病變情況，在藍(lán)蟹的鰓、心、血管、眼中均發(fā)現(xiàn)了氣泡，組織病變以缺血、變性為主。Lightner等[8]報(bào)道，在褐對(duì)蝦Penaeusaztecus幼體及稚蝦蝦體的甲殼下、腸腔及附近血腔內(nèi)、鰓、眼柄等處均可見氣泡。Pillai等[22]研究了羅氏沼蝦Macrobrachiumrosenbergii以鰓部腫脹為主要特征的疾病，養(yǎng)殖戶俗稱氣球病。

本研究團(tuán)隊(duì)在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中發(fā)現(xiàn)，凡納濱對(duì)蝦Litopenaeusvannamei氣泡病發(fā)生時(shí)，輕者引發(fā)蝦體行為異常，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致死亡。甲殼動(dòng)物為開放式循環(huán)系統(tǒng)，發(fā)生氣泡病后能存活較長(zhǎng)一段時(shí)間，但是氣泡位于發(fā)病組織經(jīng)久不消，且急性氣泡病亦可轉(zhuǎn)變?yōu)槁詺馀莶。斐蓪?duì)蝦應(yīng)激反應(yīng)，抗病力下降，并容易繼發(fā)感染其他疾病，從而影響對(duì)蝦生長(zhǎng)甚至造成發(fā)病對(duì)蝦死亡。生產(chǎn)過程中，發(fā)病池塘蝦均出現(xiàn)每天幾尾、幾十尾至幾百尾的死亡，嚴(yán)重的甚至排塘。養(yǎng)殖對(duì)蝦氣泡病的高發(fā)病率及嚴(yán)重危害程度應(yīng)引起足夠的重視。目前，凡納濱對(duì)蝦氣泡病的相關(guān)報(bào)道較少，特別是對(duì)養(yǎng)殖池塘自然發(fā)病氣泡病的報(bào)道，對(duì)該病組織病理方面也未見相關(guān)報(bào)道。本研究中，主要分析了室外土池塘養(yǎng)殖環(huán)境下凡納濱對(duì)蝦自然發(fā)生氣泡病的組織病變情況，從組織病變上直接觀察氣泡病，了解其致病機(jī)理，以期為診斷和防控對(duì)蝦氣泡病提供科學(xué)參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用凡納濱對(duì)蝦取自廣東省珠海市凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖土池塘，體長(zhǎng)(6.3±1.5)cm，蝦組織內(nèi)可見氣泡或氣柱，或蝦體未見氣泡但根據(jù)臨床診斷已發(fā)生氣泡病，記錄蝦塘各水體上下層溶解氧，并取健康凡納濱對(duì)蝦(體長(zhǎng)6.1 cm±1.6 cm)作為對(duì)照。

1.2 方法

1.2.1 取樣及鏡檢 取樣池塘水深1.8 m，每日分別在水深0.2、1.6 m處實(shí)時(shí)監(jiān)控養(yǎng)殖池塘水體溶解氧，每日8:00、15:00定點(diǎn)取樣一次。解剖觀察、記錄蝦體表及各組織是否有肉眼或顯微鏡鏡檢可見的氣泡，以及鏡檢有無寄生蟲等。無菌條件下，從凡納濱對(duì)蝦肝胰腺處接種細(xì)菌。取對(duì)蝦肝胰腺、鰓、肌肉組織樣品固定于體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇中，用于蝦肝腸胞蟲及各項(xiàng)病毒項(xiàng)目的檢測(cè)。取凡納濱對(duì)蝦的兩側(cè)眼、肝胰腺、鰓、肌肉(分成前中后三段)、腸、心、觸角等組織，固定于波恩氏液中用于組織觀察，同樣方法在健康凡納濱對(duì)蝦中取對(duì)應(yīng)各組織樣品進(jìn)行固定，用于對(duì)照觀察。

1.2.2 細(xì)菌分離、培養(yǎng)及PCR檢測(cè) 將試驗(yàn)對(duì)蝦進(jìn)行細(xì)菌分離和病毒檢測(cè)，以排除病原生物的影響。無菌條件下，從對(duì)蝦肝胰腺處接種細(xì)菌，劃線接種于TSA培養(yǎng)基和TCBS培養(yǎng)基中，37 ℃條件下倒置培養(yǎng)24 h，觀察記錄結(jié)果。同時(shí)，分別取健康和患病對(duì)蝦的肝胰腺、鰓、肌肉組織，固定于體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇中。采用酚-氯仿法抽提組織病毒DNA、RNA，進(jìn)行白斑綜合征病毒、傳染性皮下及造血組織壞死病毒、對(duì)蝦桿狀病毒、蝦血細(xì)胞虹彩病毒、桃拉病毒及蝦肝腸胞蟲的檢測(cè)。

1.2.3 組織切片的制備與觀察 樣品用波恩氏液固定12～24 h后，用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇將波恩氏液換出，之后每隔4 h換液一次，直至溶液無黃色。常規(guī)脫水、透明、浸蠟后，將組織包埋成蠟塊，待蠟塊凝固后，將組織蠟塊用石蠟切片機(jī)切成5 μm蠟帶，展片、黏片、烘干后進(jìn)行H·E染色，中性樹膠封片后，于Motic光學(xué)顯微鏡下觀察。

2 結(jié)果與分析

2.1 氣泡病凡納濱對(duì)蝦臨床特征

發(fā)生氣泡病的凡納濱對(duì)蝦體色泛紅、腹部肌肉體節(jié)間發(fā)白，發(fā)病嚴(yán)重的蝦腹部第6節(jié)肌肉發(fā)白或全身肌肉發(fā)白，鏡檢附肢、鰓絲、觸角、頭胸甲肌肉等部位可見氣柱、氣泡(圖1)。鏡檢未發(fā)現(xiàn)寄生蟲。

患病凡納濱對(duì)蝦體節(jié)間白濁(A)，體色發(fā)紅(B,C)，鏡檢步足(D)、第一觸角(E)、游泳足(F)可見氣柱(泡)(箭頭示)。Whitish between segments(A) and red body (B,C), gas columns(bubbles) in the periopods(D),first antennae(E) and pleopods (F)(arrow) in the diseased Litopenaeus vannamei.圖1 患?xì)馀莶》布{濱對(duì)蝦外觀及鏡檢Fig.1 Appearance and microscopic examination of Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei with gas bubble disease

2.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)及電泳結(jié)果

37 ℃條件下倒置培養(yǎng)細(xì)菌24 h，TSA培養(yǎng)基和TCBS培養(yǎng)基上均未見細(xì)菌菌落長(zhǎng)出。白斑綜合征病毒、傳染性皮下及造血組織壞死病毒、對(duì)蝦桿狀病毒、蝦血細(xì)胞虹彩病毒、桃拉病毒及蝦肝腸胞蟲電泳結(jié)果均呈陰性。

2.3 氣泡病凡納濱對(duì)蝦組織病變

2.3.1 肌肉組織病理變化 健康凡納濱對(duì)蝦肌肉組織及肌纖維紋路清晰、排列致密(圖2A)，而發(fā)病蝦肌束萎縮，相鄰肌束間距較大，局部肌肉組織壞死，肌纖維排列雜亂，有水腫或淤血現(xiàn)象，氣泡印跡明顯(圖2B～E)，并在背腹血管內(nèi)散布大小不等、形態(tài)不一的氣泡(圖2F)；健康凡納濱對(duì)蝦外殼角質(zhì)層、幾丁質(zhì)鈣層、內(nèi)皮緊密連接(圖2G)，而發(fā)病凡納濱對(duì)蝦外殼由于氣泡存在導(dǎo)致三者間發(fā)生分離(圖2H)，并在觸角內(nèi)也可觀察到氣泡的存在(圖2I)。

A—健康凡納濱對(duì)蝦肌肉組織，肌束排列致密，肌纖維紋路清晰；B—發(fā)病對(duì)蝦肌肉組織輕微淤血，有小氣泡，肌束間距大；C—發(fā)病對(duì)蝦中明顯的氣柱將肌肉組織分隔開，肌束間距大；D—發(fā)病對(duì)蝦肌束萎縮，組織壞死，比較雜亂，淤血處有小氣泡；E—發(fā)病對(duì)蝦中較大的氣泡占據(jù)肌肉組織；F—發(fā)病對(duì)蝦背腹血管內(nèi)散布大小不等的氣泡；G—發(fā)病對(duì)蝦肌束輕微萎縮，外殼角質(zhì)層、幾丁質(zhì)鈣層、內(nèi)皮緊密相連；H—發(fā)病對(duì)蝦角質(zhì)層、幾丁質(zhì)鈣層、內(nèi)皮被氣泡分離開；I—發(fā)病對(duì)蝦觸角內(nèi)有一橢圓形氣泡；g—?dú)馀莼驓庵?。A—muscle bundles arranged densely, muscle fiber with clear lines in healthy Litopenaeus vannamei; B—slight congestion in muscle, there are small gas bubbles, with large space between muscle bundles of diseased L.vannamei; C—with large obvious gas column separates muscle, with large muscle bundle spacing of diseased L.vannamei; D—muscle bundle atrophy, tissue necrosis, more disordered, and small gas bubbles in blood of diseased L.vannamei; E—larger gas bubbles occupy in muscle of diseased L.vannamei; F—different sizes of bubbles are scattered in dorsal and abdominal blood of diseased L.vannamei; G—muscle bundles atrophy slightly, keratinous layer, chitin calcium layer, and endothelium of shell are closely linked of diseased L.vannamei; H—keratinous layer, chitin calcium layer, and endothelium separated by gas bubbles in the diseased L.vannamei; I—an elliptical gas bubble in the antenna of diseased L.vannamei; g—gas bubble or gas column.圖2 凡納濱對(duì)蝦肌肉和觸角組織病理變化Fig.2 Histopathological changes in muscle and antennae of Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei

2.3.2 鰓組織病理變化 健康凡納濱對(duì)蝦鰓組織為枝狀鰓，鰓絲有多級(jí)分支(圖3A)；發(fā)病凡納濱對(duì)蝦鰓組織多發(fā)生水腫、淤血、出血現(xiàn)象，大量的液體成分充塞鰓組織，H·E染色呈紅色(圖3B-E)；發(fā)病鰓組織外圍及中間均可觀察到較大的氣泡擠壓周圍組織細(xì)胞(圖3B、C)，鰓小片上皮內(nèi)也觀察到氣泡，一個(gè)鰓小片內(nèi)可見1～2個(gè)圓形氣泡(圖3D、E)，鰓軸血管內(nèi)散布多個(gè)大小不等的氣泡，較大氣泡的直徑與鰓軸直徑平齊，充塞于血管(圖3F)。

A—健康凡納濱對(duì)蝦鰓組織，枝狀鰓、多級(jí)分支；B—發(fā)病對(duì)蝦鰓組織淤血、出血、水腫，外圍集中分布大小不等的圓形或橢圓形氣泡，擠壓周圍組織細(xì)胞；C—發(fā)病對(duì)蝦鰓組織淤血、出血、水腫，有一較大圓形氣泡占據(jù)鰓片中間；D—發(fā)病對(duì)蝦鰓組織水腫、淤血、出血，鰓小片上皮內(nèi)多量球樣氣泡；E—發(fā)病對(duì)蝦鰓上皮內(nèi)氣泡；F—發(fā)病對(duì)蝦鰓軸血管內(nèi)散布多個(gè)氣泡；g—?dú)馀荨—dendritic branchia and multi-level branches gill tissue of healthy Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei; B—gill congestion, hemorrhage and edema, peripheral distribution of circular or oval bubble, and squeezing surrounding tissue cells in diseased L.vannamei; C—gill congestion, hemorrhage and edema, and a large round bubble occupies the middle gill in diseased L.vannamei; D—gill edema, congestion and hemorrhage, and a lot of bulbous bubbles in the branchial epithelium in diseased L.vannamei; E—intraepithelial bubbles gill in diseased L.vannamei; F—multiple bubbles scattered in the branchial axis vessels of diseased L.vannamei; g—gas bubbles.圖3 凡納濱對(duì)蝦鰓組織病理變化Fig.3 Histopathological changes in gills of Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei

2.3.3 肝胰腺組織病理變化 健康凡納濱對(duì)蝦肝胰腺為一個(gè)個(gè)腺管構(gòu)成的復(fù)管狀腺，各腺管緊密相鄰，管腔為四角形或五角形，管壁由4種類型的細(xì)胞構(gòu)成，根據(jù)形態(tài)可分為分泌細(xì)胞、吸收細(xì)胞、纖維細(xì)胞和胚細(xì)胞(圖4A，胚細(xì)胞主要位于組織邊緣的腺管內(nèi)，分化形成其他類型的細(xì)胞，圖中未顯示)；發(fā)病凡納濱對(duì)蝦肝胰腺組織腺管間偶爾可觀察到氣泡，腺管萎縮較重，腺管間距變大，不再逐個(gè)緊密相鄰，腺管上皮脫離基底膜，上皮細(xì)胞類型不可分辨，腺管間有少量細(xì)胞增生(圖4B)。

A—健康凡納濱對(duì)蝦肝胰腺，由多級(jí)分支的腺管組成，管腔呈五角形或四角形，Bc—分泌細(xì)胞，Rc—吸收細(xì)胞，F(xiàn)c—纖維細(xì)胞;B—發(fā)病凡納濱對(duì)蝦腺管萎縮嚴(yán)重，腺管間少量細(xì)胞增生，管壁上皮細(xì)胞類型無法區(qū)分，腺管間可觀察到氣泡；g—?dú)馀荨—hepatopancreas of healthy Litopenaeus vannamei consists of glandular ducts with multiple branches, and the lumen is pentagonal or quadrangular in shape, Bc—secretory cells，Rc—absorbent cells，F(xiàn)c—fibroblast; B—the glandular ducts atrophy severely, a small number of cells proliferate between the glandular ducts, the types of epithelial cells are not distinguished, and gas bubbles are observed between the glandular ducts in the diseased L.vannamei; g—gas bubbles.圖4 凡納濱對(duì)蝦肝胰腺組織病理變化Fig.4 Histopathological changes in hepatopancreas of Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei

2.3.4 心組織病理變化 健康凡納濱對(duì)蝦心組織由肌纖維及血淋巴組成(圖5A)；發(fā)病凡納濱對(duì)蝦心部分肌纖維被氣泡和氣柱占據(jù)，組織中形成較大的空白區(qū)域(圖5B)，有部分樣品心組織還可見淤血比較嚴(yán)重的現(xiàn)象。

A—健康凡納濱對(duì)蝦心組織；B—發(fā)病凡納濱對(duì)蝦心組織，大的氣泡和氣柱占據(jù)心肌;g—?dú)馀莺蜌庵—heart of healthy Litopenaeus vannamei; B—heart, and large gas bubbles and gas columns occupied the myocardium in diseased L.vannamei; g—gas bubbles and gas columns.圖5 凡納濱對(duì)蝦心組織病理變化Fig.5 Histopathological changes in heart of Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei

2.3.5 眼組織病理變化 健康凡納濱對(duì)蝦的眼為復(fù)眼，由許多小眼組成，小眼又由角膜、晶狀體、小網(wǎng)膜細(xì)胞等構(gòu)成(圖6A)；發(fā)病蝦兩側(cè)眼組織出現(xiàn)不同程度的空泡化，常一側(cè)眼組織空泡化較重(圖6B、C)，有時(shí)也可觀察到較大的氣泡擠壓眼組織(圖6B)。但發(fā)病對(duì)蝦腸組織未見明顯異常。

A—健康凡納濱對(duì)蝦眼組織；B～D—發(fā)病凡納濱對(duì)蝦眼組織,眼組織內(nèi)有一較大氣泡(B)，一側(cè)眼組織空泡化嚴(yán)重(D)，一側(cè)眼組織輕微空泡化(C)，比較正常；g—?dú)馀荨—eye of healthy Litopenaeus vannamei; B-D—eyes of diseased L.vannamei: one big gas bubble in the eye(B), vacuolization of one eye is serious (D), and the other one is slightly vacuolated(C), relatively normal; g—gas bubble.圖6 凡納濱對(duì)蝦眼組織病理變化Fig.6 Histopathological changes in eyes of Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei

2.4 不同溶解氧值下患?xì)馀莶》布{濱對(duì)蝦組織病變比較

從蝦池塘取樣測(cè)得上下層水體溶解氧范圍為4.15～15.06 mg/L，溶解氧飽和度為56%～293%(上層水體溶解氧為4.56～15.06 mg/L，下層水體溶解氧為4.15～12.06 mg/L)，不同溶解氧值下患?xì)馀莶》布{濱對(duì)蝦組織病變差異較明顯的是眼和鰓組織。

當(dāng)上、下層水體溶解氧分別為5.85、4.15 mg/L時(shí)，患病對(duì)蝦眼組織輕度空泡化且僅在眼球外圍發(fā)生空泡化，空泡范圍約占據(jù)晶狀體束的1/2(圖7A)；當(dāng)上、下層溶解氧分別為15.06、4.86 mg/L時(shí)，眼組織嚴(yán)重空泡化，小網(wǎng)膜細(xì)胞外及整個(gè)晶狀體束均空泡化(圖7B)。當(dāng)上、下層水體溶解氧分別為4.56、4.46 mg/L時(shí)，患病對(duì)蝦鰓組織僅在鰓絲血管內(nèi)可見個(gè)別氣泡印跡(圖7C)；當(dāng)上、下層水體溶解氧分別為14.27、5.86 mg/L時(shí)，鰓組織不僅在血管內(nèi)可見氣泡印跡，在鰓絲上皮亦可見多個(gè)氣泡印跡(圖7D)。這表明，水體溶解氧越高，對(duì)蝦的眼組織和鰓組織損傷就越大。

A、B—眼組織，A—上、下層水體溶氧分別為5.85、4.15 mg/L，B—上、下層水體溶氧分別為15.06、4.86 mg/L；C、D—鰓組織，C—上、下層水體溶氧分別為4.56、4.46 mg/L，D—上、下層水體溶氧分別為14.27、5.86 mg/L；箭頭示氣泡印跡。A,B—eyes; A—the dissolved oxygen levels of upper and lower water bodies are 5.85 and 4.15 mg/L respectively, B—the dissolved oxygen levels of upper and lower water bodies are 15.06 and 4.86 mg/L respectively;C,D—gills;C—the dissolved oxygen levels of upper and lower water bodies are 4.56 and 4.46 mg/L respectively, and D—the dissolved oxygen levels of upper and lower water bodies are 14.27 and 5.86 mg/L respectively.圖7 不同溶解氧值下患病凡納濱對(duì)蝦組織病理變化(氣泡變化趨勢(shì))Fig.7 Histopathological changes in diseased Pacific white leg shrimp Litopenaeus vannamei at different dissolved oxygen values(the trend of bubble change)

3 討論

3.1 氣泡對(duì)患病凡納濱對(duì)蝦組織的影響及危害

本研究中觀察發(fā)現(xiàn)，在患?xì)馀莶》布{濱對(duì)蝦的肌肉、鰓、觸角、心、肝胰腺、鰓血管、背腹動(dòng)脈中均有不同數(shù)量的氣泡。同時(shí)，多組織可見氣泡印跡取代原有組織，尤其是肌肉組織，氣泡印跡多集中于腹部中后段，體積較大，可占據(jù)約2/3肌束面積(橫切面)。同時(shí)，患病蝦肌肉組織局部有壞死，表現(xiàn)為肌纖維紋路消失、核固縮等。肌肉組織的這些病變，會(huì)導(dǎo)致眼觀肌肉發(fā)白，這也就解釋了發(fā)生氣泡病的凡納濱對(duì)蝦經(jīng)常出現(xiàn)腹部肌肉發(fā)白，尤其是腹部第6節(jié)肌肉白濁的現(xiàn)象。

本研究中，發(fā)病對(duì)蝦心臟組織也常觀察到被大氣泡占據(jù)心肌纖維導(dǎo)致心臟組織出現(xiàn)大面積空白區(qū)域的情況，且有些病蝦心組織淤血嚴(yán)重，這些病變會(huì)影響凡納濱對(duì)蝦正常的血液循環(huán)。氣泡病凡納濱對(duì)蝦鰓組織水腫、淤血、出血，導(dǎo)致鰓浸潤(rùn)于液體中，所以眼觀發(fā)病蝦鰓組織常見顏色發(fā)白、腫脹。同時(shí)，在鰓軸血管內(nèi)可觀察到多量的氣泡，有些氣泡直徑較大且與鰓軸直徑平齊，直接堵塞鰓血管，嚴(yán)重影響對(duì)蝦血液循環(huán)及呼吸功能，從而造成對(duì)蝦呼吸困難而上浮水面。Johnson[12]將藍(lán)蟹暴露于空氣過飽和的水中，在藍(lán)蟹的鰓、心、血管、眼中均發(fā)現(xiàn)氣泡，組織病變以缺血、變性為主，且發(fā)現(xiàn)存活藍(lán)蟹受損最嚴(yán)重的是心和鰓組織，組織中可見氣泡栓塞，尤其鰓組織中的氣泡栓塞在暴露之后35 d仍然存在。

Lightner等[8]研究發(fā)現(xiàn)，升溫及降壓均可引發(fā)褐對(duì)蝦幼體及稚蝦氣泡病，患病蝦行為異常、游泳無方向，蝦昏迷、漂浮于水面，在蝦體的甲殼下、腸腔及附近血腔內(nèi)、鰓、眼柄等處均可見氣泡。本研究中發(fā)現(xiàn)，在凡納濱對(duì)蝦眼組織神經(jīng)區(qū)域及眼柄內(nèi)也常有氣泡，且凡納濱對(duì)蝦眼睛常一側(cè)組織空泡化嚴(yán)重，分析認(rèn)為是氣泡擠壓眼部神經(jīng)進(jìn)而引起對(duì)蝦游泳異常。

患病凡納濱對(duì)蝦背腹動(dòng)脈血管內(nèi)血液中存在大量大小不一、形態(tài)不同的氣泡，導(dǎo)致發(fā)病蝦血液如同泡沫一樣，影響對(duì)蝦血液循環(huán)。這與其他學(xué)者在魚類氣泡病中的研究結(jié)果相一致[7,23]。

3.2 凡納濱對(duì)蝦急性、慢性氣泡病的診斷

急性氣泡病發(fā)生時(shí)，凡納濱對(duì)蝦有較明顯的臨床癥狀，如游塘、跳躍、上浮，肌節(jié)間發(fā)白或肌肉發(fā)白等，肉眼觀察或鏡檢對(duì)蝦，在其體表、殼下、附肢、鰓、觸角等處可見氣泡，蝦持續(xù)性死亡，每天死亡幾尾、幾十尾至幾百尾，嚴(yán)重時(shí)甚至出現(xiàn)排塘，再結(jié)合天氣及水質(zhì)情況可以判斷對(duì)蝦是否發(fā)生了氣泡病[2,24]。而慢性氣泡病較難發(fā)現(xiàn)和診斷，慢性氣泡病發(fā)病時(shí)，一般較難在現(xiàn)場(chǎng)用肉眼和顯微鏡觀察到蝦體內(nèi)的氣泡，但通過組織切片觀察，可在鰓、肌肉、眼、肝胰腺等組織觀察到氣泡印跡，再根據(jù)天氣和水質(zhì)情況進(jìn)行確診，如陰雨后晴天、連續(xù)晴好高溫天氣、早晚溫差較大時(shí)，或者水體溶解氧和pH值較高、藻類突然大量繁殖等情況。

發(fā)生慢性氣泡病的凡納濱對(duì)蝦水體溶解氧飽和度不高，鏡檢活體未發(fā)現(xiàn)明顯氣泡，但其組織切片觀察顯示，肌肉、鰓等組織中有氣泡印跡，只是比鏡檢可見明顯氣泡的蝦組織中的氣泡印跡少。隨著溶解氧飽和度升高，鰓組織氣泡有增多、變大的趨勢(shì)；溶解氧飽和度較低時(shí)，眼組織常一側(cè)病變稍重，隨著溶解氧值的升高，空泡化趨向嚴(yán)重；溶解氧飽和度較高時(shí)，兩側(cè)眼組織空泡化均較為嚴(yán)重。

4 結(jié)論

1)患?xì)馀莶》布{濱對(duì)蝦體表微紅，肌節(jié)間及肌肉發(fā)白，附肢、鰓絲、觸角、肌肉等部位鏡檢其內(nèi)部可見氣泡或氣柱。對(duì)蝦養(yǎng)殖期間若觀察到上述外觀癥狀，則表明氣泡病已經(jīng)發(fā)生并影響蝦體。

2)患?xì)馀莶》布{濱對(duì)蝦組織病變特征以組織中出現(xiàn)氣泡印跡為主，肌肉、眼、鰓、肝胰腺、觸角、心等組織、器官均可見氣泡印跡，相比較而言，鰓、肌肉組織中氣泡印跡更明顯，鰓血管內(nèi)氣泡亦比較明顯，有些占據(jù)整個(gè)血道。根據(jù)上述組織病變特征可以確診對(duì)蝦是否患有氣泡病。

3)水體溶解氧越高，患?xì)馀莶〉膶?duì)蝦鰓、眼組織病變程度越嚴(yán)重，養(yǎng)殖過程中應(yīng)注意隨時(shí)監(jiān)測(cè)水體溶解氧的變化。