復(fù)合益生菌對(duì)大口黑鱸延后繁殖性能、生理指標(biāo)及仔魚(yú)成活率的影響

王賽賽，朱莉飛，李榮妮，史東杰，孫硯勝，張欣

(北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所 國(guó)家淡水漁業(yè)工程技術(shù)研究中心，北京 100068)

大口黑鱸Micropterussalmoides又稱(chēng)加州鱸，原產(chǎn)于美國(guó)加利福尼亞州密西西比河水系，中國(guó)臺(tái)灣于20世紀(jì)70年代引進(jìn)，并于1983年人工繁殖獲得成功，經(jīng)過(guò)30多年的發(fā)展，目前大口黑鱸已成為國(guó)內(nèi)特色淡水魚(yú)品種之一，具有廣闊的市場(chǎng)前景。大口黑鱸性成熟年齡為1齡以上，性腺1年成熟一次，且多次產(chǎn)卵，產(chǎn)卵季節(jié)為2—7月[1]。2019年，華南和華東地區(qū)春天天氣較為異常，雨水較多，受天氣、蟲(chóng)害、疾病等因素的影響，大口黑鱸苗期損耗較往年嚴(yán)重，后期苗種補(bǔ)給需求量較大[2]，因此，開(kāi)展大口黑鱸延后繁育技術(shù)研究、提高仔魚(yú)成活率迫在眉睫。

研究發(fā)現(xiàn)，溫度[3-4]、光周期[5-6]、養(yǎng)殖密度、鹽度[4]均能顯著影響水產(chǎn)動(dòng)物的性腺發(fā)育，如低溫可延緩水產(chǎn)動(dòng)物的性腺發(fā)育，在飼料中添加維生素A、C、E[7]、中草藥[8]、益生菌[9]等添加劑均可提高水產(chǎn)動(dòng)物的繁殖性能。然而，目前益生菌在水產(chǎn)動(dòng)物繁殖中的應(yīng)用主要集中在斑馬魚(yú)Daniorerio[10-11]、南美白對(duì)蝦Litopenaeusvannamei[12]、觀賞魚(yú)[9,13]等，有關(guān)復(fù)合益生菌在可食用魚(yú)類(lèi)繁養(yǎng)殖方面的研究較少。為此，本試驗(yàn)中通過(guò)降低水溫延緩卵巢發(fā)育，開(kāi)展了不同水平復(fù)合益生菌對(duì)大口黑鱸延后繁殖性能、生理指標(biāo)及仔魚(yú)成活率影響的研究，以期為大口黑鱸親魚(yú)保卵(即延后繁育)提供一定的技術(shù)指導(dǎo)，同時(shí)也為常年進(jìn)行大口黑鱸繁育提供可能，以利于維持大口黑鱸市場(chǎng)價(jià)格穩(wěn)定。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用魚(yú)取自天津藍(lán)科水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司自行培育的1冬齡大口黑鱸親魚(yú)，挑選體格健壯、無(wú)傷病的親魚(yú)300尾(雌雄各150尾)，其中雌魚(yú)體質(zhì)量為550～665 g，雄魚(yú)體質(zhì)量為500～573 g，雌魚(yú)性腺分期在Ⅳ期初。

復(fù)合益生菌制劑由酵母菌Saccharomyces、乳酸菌Lactobacillus、芽孢桿菌Bacillussubtilissubsp等多種益生菌及其代謝物復(fù)配而成，活菌總數(shù)≥2×1010CFU/g，購(gòu)自洛陽(yáng)歐科拜克生物技術(shù)股份有限公司。注射用促黃體素釋放激素A2(LHR-A2)、多潘立酮(DOM)、絨促性腺素(Ⅰ)(HCG)購(gòu)自寧波三生生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 2020年7月初，將經(jīng)過(guò)暫養(yǎng)的150組親魚(yú)隨機(jī)平均分配到15個(gè)養(yǎng)殖池(5.0 m×2.7 m×1.0 m)中，雌雄魚(yú)分別用隔網(wǎng)隔開(kāi)。試驗(yàn)共分5組，每組設(shè)3個(gè)平行。試驗(yàn)用飼料以大口黑鱸專(zhuān)用配合飼料為基礎(chǔ)飼料，其營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。在基礎(chǔ)飼料中分別添加0、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%(均為質(zhì)量分?jǐn)?shù)，下同)的復(fù)合益生菌制劑，制得5組試驗(yàn)飼料。

表1 基礎(chǔ)飼料營(yíng)養(yǎng)成分含量Tab.1 Nutrient composition content of basic diet

親魚(yú)培育期間，水溫控制在17.5 ℃以下，溶解氧(DO)≥5 mg/L，在車(chē)間內(nèi)自然光照下養(yǎng)殖(頂部面積遮光5/6)；每日于9:00～10:00、14:00～15:00各投喂一次，日投喂量為魚(yú)體質(zhì)量的0.5%，具體投喂量根據(jù)天氣及親魚(yú)攝食情況做調(diào)整；每日換水1/3，具體根據(jù)水溫、水質(zhì)情況做調(diào)整；試驗(yàn)周期為30 d。

親魚(yú)在17.5 ℃以下培育30 d后，通過(guò)增減頂部光照面積調(diào)節(jié)水溫，3 d內(nèi)水溫升至21.5～22.5 ℃。采用一針注射法對(duì)親魚(yú)胸鰭基部進(jìn)行激素注射，雌魚(yú)注射劑量DOM為5 mg/kg，LRH-A2為5 μg/kg，HCG為1 500 IU/kg，雄魚(yú)注射劑量減半。催產(chǎn)完成后，將水位由原來(lái)的70 cm調(diào)至45～50 cm，將各養(yǎng)殖池中隔網(wǎng)撤出，池底每平方米放置1個(gè)產(chǎn)卵框(經(jīng)過(guò)處理的棕櫚片用鐵絲固定在框上)，池內(nèi)雌雄魚(yú)隨機(jī)交配，自然產(chǎn)卵。催產(chǎn)完成后，隔天開(kāi)始產(chǎn)卵，于每日9:00、16:00查看產(chǎn)卵情況，及時(shí)將產(chǎn)卵棕片放入孵化池中孵化。孵化用水為曝氣24 h的地下井水，孵化水溫控制在23～24 ℃，DO為7.0～8.5 mg/L。記錄產(chǎn)卵開(kāi)始后5 d內(nèi)的產(chǎn)卵量(每個(gè)棕片上的卵粒數(shù))、受精率,以及對(duì)應(yīng)的孵化率、仔魚(yú)成活率。

1.2.2 樣品采集與分析 親魚(yú)在17.5 ℃以下培育30 d后，停喂24 h，從每個(gè)養(yǎng)殖池隨機(jī)選取4尾親魚(yú)(雌雄各2尾)，麻醉后稱(chēng)量其體質(zhì)量，用1 mL無(wú)菌注射器(注射器用1%的肝素鈉溶液潤(rùn)洗)從尾靜脈采血，轉(zhuǎn)移至2 mL離心管中，在4 ℃下以3 000g離心5 min，取上清液放入干凈離心管中，置于冰水混合物中保存?zhèn)溆?。解剖并取出雌魚(yú)肝臟置于保鮮自封袋內(nèi)，于冰水混合物中保存?zhèn)溆?。取出性腺，稱(chēng)重，并統(tǒng)計(jì)卵巢中卵粒數(shù)。棕櫚片掛卵后，標(biāo)記并記錄卵?？倲?shù)及未受精卵粒數(shù)(白色死卵計(jì)為未受精卵)。待孵化破膜后，移出棕櫚片，統(tǒng)計(jì)初孵仔魚(yú)數(shù)量，并計(jì)算孵化率。仔魚(yú)平游后統(tǒng)計(jì)仔魚(yú)數(shù)量，計(jì)算平游后仔魚(yú)成活率。待產(chǎn)卵結(jié)束后，即連續(xù)一周未產(chǎn)卵后，每個(gè)養(yǎng)殖池隨機(jī)選取2尾雌魚(yú)，按照上述方法取肝臟組織，于冰水混合物中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 指標(biāo)測(cè)定與計(jì)算 相關(guān)指標(biāo)計(jì)算公式為

性腺指數(shù)=性腺質(zhì)量(g)/魚(yú)體質(zhì)量(g)×100%，

懷卵量=單位質(zhì)量卵巢內(nèi)的卵粒數(shù)(eggs/g)×

卵巢質(zhì)量(g)，

受精率=(1-未受精卵粒數(shù)/卵粒總數(shù))×100%，

孵化率=(初孵仔魚(yú)數(shù)/受精卵數(shù))×100%，

仔魚(yú)成活率=平游仔魚(yú)數(shù)/初孵仔魚(yú)數(shù)×100%。

產(chǎn)卵前后雌魚(yú)肝臟組織酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)活力測(cè)定試劑盒均由北京索萊寶科技有限公司提供，產(chǎn)卵前雌魚(yú)肝臟組織和血漿中總超氧化物歧化酶(T-SOD)活力測(cè)定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)平行。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±S.D.)表示，采用 SPSS Statistics 20軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)，采用Duncan法進(jìn)行組間多重比較，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同水平復(fù)合益生菌下大口黑鱸的繁殖性能

從表2可見(jiàn)：在進(jìn)行大口黑鱸延后繁育即親魚(yú)強(qiáng)化培育期間，親魚(yú)未出現(xiàn)死亡；雌魚(yú)的性腺指數(shù)、懷卵量、相對(duì)懷卵量隨著飼料中復(fù)合益生菌添加水平的增加逐漸增大，并于0.5%水平時(shí)達(dá)到峰值；親魚(yú)的性腺指數(shù)、懷卵量、相對(duì)懷卵量在各試驗(yàn)組間均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表2 不同水平復(fù)合益生菌對(duì)大口黑鱸繁殖性能的影響Tab.2 Effects of different levels of compound probiotics on reproductive performance of largemouth bass Micropterus salmoides

2.2 產(chǎn)卵前后雌魚(yú)肝臟中AKP、ACP活力的變化

從圖1可見(jiàn)：產(chǎn)卵前，雌魚(yú)肝臟中AKP活力隨飼料中復(fù)合益生菌添加量的增加逐漸增強(qiáng)，添加量為0.5%時(shí)AKP活力達(dá)到峰值，0.3%、0.5%添加組雌魚(yú)肝臟中AKP活力顯著高于其他組(P<0.05)；產(chǎn)卵后，不同試驗(yàn)組雌魚(yú)肝臟中AKP活力均顯著低于產(chǎn)卵前(P<0.05)，其中0.3%添加組雌魚(yú)肝臟中AKP活力顯著高于其他組(P<0.05)。

注：標(biāo)有不同字母者表示同一發(fā)育階段或組織不同益生菌添加量組間有顯著性差異(P<0.05)，標(biāo)有相同字母者表示組間無(wú)顯著性差異(P>0.05),下同。Note:The means with different letters in the same development stage or tissue are significantly different in between compound probiotics groups at the 0.05 probability level, and the means with the same letter are not significant differences, et sequentia.圖1 產(chǎn)卵前后不同試驗(yàn)組雌魚(yú)肝臟中AKP活力的變化Fig.1 Changes in AKP activity in liver of female in different experimental groups before and after spawning

從圖2可見(jiàn)：產(chǎn)卵前，雌魚(yú)肝臟中ACP活力隨飼料中復(fù)合益生菌添加量的增加而逐漸增強(qiáng)，添加量為0.5%時(shí)達(dá)到峰值；產(chǎn)卵后，不同試驗(yàn)組雌魚(yú)肝臟中ACP活力均顯著低于產(chǎn)前(P<0.05)。0.5%、0.7%添加組雌魚(yú)肝臟ACP活力隨著飼料中復(fù)合益生菌添加量的增多而顯著降低(P<0.05)。

圖2 產(chǎn)卵前后不同試驗(yàn)組雌魚(yú)肝臟中ACP活力的變化Fig.2 Changes in ACP activity in liver of female in different experimental groups before and after spawning

2.3 產(chǎn)卵前雌魚(yú)肝臟和血漿中T-SOD活力的變化

從圖3可見(jiàn)：產(chǎn)卵前，不同試驗(yàn)組雌魚(yú)肝臟中T-SOD活力無(wú)顯著性差異(P>0.05)，其中，0.7%添加組內(nèi)差異較大；血漿中T-SOD活力隨復(fù)合益生菌添加量的增加而逐漸增強(qiáng)，添加量為0.5%時(shí)達(dá)到峰值，0.3%、0.5%添加組T-SOD活力顯著高于其他組(P<0.05)。

圖3 產(chǎn)卵前不同試驗(yàn)組雌魚(yú)肝臟和血漿中T-SOD活力變化Fig.3 Changes in T-SOD activity in liver and plasma of female in different experimental groups before spawning

2.4 不同水平復(fù)合益生菌對(duì)受精率、孵化率、仔魚(yú)成活率的影響

從表3可見(jiàn)：0.3%、0.5%添加組第一批產(chǎn)卵量、受精率、孵化率、仔魚(yú)成活率均高于其他組，不同組間產(chǎn)卵量、受精率、孵化率無(wú)顯著性差異(P>0.05)，僅0.5%添加組仔魚(yú)成活率顯著高于對(duì)照組和0.1%添加組(P<0.05)。

表3 不同水平復(fù)合益生菌對(duì)大口黑鱸受精率、孵化率、仔魚(yú)成活率的影響Tab.3 Effects of different levels of compound probiotics on fertilization rate, hatching rate and larval survival rate of largemouth bass Micropterus salmoides

3 討論

3.1 復(fù)合益生菌對(duì)大口黑鱸延后繁殖性能的影響

研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加適量益生菌可顯著提高水產(chǎn)動(dòng)物的性腺指數(shù)、懷卵量[9-13]。本研究中，雌魚(yú)的性腺指數(shù)、懷卵量、相對(duì)懷卵量隨飼料中復(fù)合益生菌添加量的增加逐漸增大，并于0.5%水平時(shí)達(dá)到峰值，這與Ghosh等[13]的研究結(jié)果一致，該研究在鯉Cyprinuscarpio的腸道中分離出枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis，配制出4種不同濃度的配合飼料進(jìn)行投喂，養(yǎng)殖周期1年，結(jié)果表明，該益生菌具有較好的抗菌活性，添加適量的枯草芽孢桿菌可顯著改善孔雀魚(yú)Poeciliareticulate、墨西哥莫利魚(yú)Poeciliasphenops、綠色劍尾魚(yú)Xiphophorushelleri和南方鴨嘴魚(yú)Xiphophorusmaculates的性腺指數(shù)及雌魚(yú)繁殖力，然而親魚(yú)的繁殖性能對(duì)枯草芽孢桿菌不存在高濃度依賴(lài)性。另外，本研究中試驗(yàn)組間各項(xiàng)繁殖性能指標(biāo)無(wú)顯著性差異，分析原因可能有3點(diǎn)：其一，試驗(yàn)開(kāi)始前已進(jìn)行親魚(yú)的挑選工作，親魚(yú)性腺發(fā)育良好，投喂復(fù)合益生菌配合飼料意在保卵；其二，復(fù)合益生菌配合飼料飼喂周期為30 d，時(shí)間較短；其三，物種間存在差異。在生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，大口黑鱸延后繁殖試驗(yàn)中雌魚(yú)的性腺指數(shù)均低于自然繁育期間的性腺指數(shù)，而在飼料中添加適量的復(fù)合益生菌可有效提高雌魚(yú)的性腺指數(shù)、懷卵量、相對(duì)懷卵量，這對(duì)大口黑鱸車(chē)間內(nèi)延后繁育工作具有一定的參考價(jià)值。

3.2 復(fù)合益生菌對(duì)大口黑鱸產(chǎn)卵、孵化、仔魚(yú)成活率的影響

大口黑鱸性腺1年成熟一次，且多次產(chǎn)卵，卵質(zhì)隨著批次的后延而變差。為此，本研究中僅采用第一批產(chǎn)出的受精卵統(tǒng)計(jì)產(chǎn)卵量、孵化率及仔魚(yú)成活率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，復(fù)合益生菌添加量為0.3%、0.5%時(shí)，產(chǎn)卵量、受精率、孵化率和仔魚(yú)成活率均高于其他試驗(yàn)組，其中，仔魚(yú)成活率顯著高于空白組與0.1%添加組，這與Abasali等[14]的研究結(jié)果一致，該研究表明，適量乳酸菌可顯著提高子代的成活率，然而對(duì)仔魚(yú)的體質(zhì)量及畸形率無(wú)顯著性影響。韓麗等[15]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加枯草芽孢桿菌制劑雖不影響母豬繁殖性能，但可增強(qiáng)機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的利用和免疫力，降低仔豬腹瀉率。分析其原因，復(fù)合益生菌的攝入可改善親魚(yú)的腸道菌群，并使其發(fā)揮積極作用，如降解食物組分，產(chǎn)生適量的維生素B，刺激免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生消化酶和保護(hù)性酶，從而增強(qiáng)了親魚(yú)的免疫力[16]，同時(shí)，維生素B的增加還能降低子代的死亡率[17]，這也就解釋了適量復(fù)合益生菌可提高仔魚(yú)成活率的原因，然而這一觀點(diǎn)仍需要進(jìn)一步驗(yàn)證。此外，本研究中還發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)卵量、受精率、孵化率、仔魚(yú)成活率的提升對(duì)復(fù)合益生菌的高含量不存在依賴(lài)性，這與Ghosh等[13]的研究結(jié)果一致。生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加適量的復(fù)合益生菌可顯著提高子代的成活率，這為提升大口黑鱸車(chē)間內(nèi)延后繁育苗種質(zhì)量提供了一種可能。

3.3 復(fù)合益生菌對(duì)雌魚(yú)生理指標(biāo)的影響

磷酸酶在生物體內(nèi)普遍存在，參與體內(nèi)多種生理活動(dòng)。其中，AKP酶參與物質(zhì)交換、吸收轉(zhuǎn)運(yùn)，其活性增強(qiáng)標(biāo)志著動(dòng)物機(jī)體代謝旺盛；ACP是細(xì)胞溶解酶體內(nèi)的水解酶之一，其活性增強(qiáng)往往表明細(xì)胞的解體[18]。目前，關(guān)于復(fù)合益生菌對(duì)動(dòng)物免疫指標(biāo)AKP、ACP活性的影響研究，主要集中在生長(zhǎng)性能方面[19-21]，而有關(guān)繁殖性能方面的研究較少。

本研究中聚焦于注射激素前親魚(yú)免疫指標(biāo)受不同水平復(fù)合益生菌的影響程度，研究表明，產(chǎn)卵前不同試驗(yàn)組雌魚(yú)肝臟中AKP、ACP活力均隨飼料中復(fù)合益生菌添加量的增加(0.1%～0.5%)逐漸增強(qiáng)，當(dāng)添加量為0.5%時(shí)AKP活力達(dá)到峰值。這與張崇英等[21]的研究結(jié)果一致，該研究表明，添加一定量的復(fù)合益生菌可有效提高南美白對(duì)蝦的ACP和AKP活力。然而同藍(lán)海恩等[19]、劉淑蘭等[20]的研究結(jié)果不一致。劉淑蘭等[20]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加芽孢桿菌、酵母菌等復(fù)合益生菌對(duì)大西洋鮭Salmosalar肝臟與血清中的AKP活力均無(wú)顯著性影響；藍(lán)海恩等[19]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加枯草芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌(三者的比例1∶2∶1)制得的復(fù)合益生菌，試驗(yàn)組斷奶仔豬血液免疫指標(biāo)AKP顯著低于對(duì)照組。綜合分析以上結(jié)論，推測(cè)研究結(jié)果不一致的原因可能與動(dòng)物生長(zhǎng)階段、組織功能及復(fù)合益生菌菌含量高低有關(guān)。

大口黑鱸在同一繁殖周期內(nèi)分批產(chǎn)卵，其卵母細(xì)胞發(fā)育不同步。葉澤雄等[22]研究發(fā)現(xiàn)，越冬期高背鯽Carassiusauratus肝臟處于營(yíng)養(yǎng)積累階段，當(dāng)肝臟營(yíng)養(yǎng)足夠時(shí)，性腺進(jìn)入迅速發(fā)育期，此時(shí)肝臟因供給性腺發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)而快速收縮到最小。在整個(gè)產(chǎn)卵期內(nèi)，雌魚(yú)親魚(yú)在肝臟中合成大量的卵黃原蛋白等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)通過(guò)血液循環(huán)運(yùn)輸?shù)铰殉玻龠M(jìn)卵巢的發(fā)育成熟[23]。卵巢中的AKP和ACP酶主要位于濾泡細(xì)胞內(nèi)，其活性增強(qiáng)同卵母細(xì)胞成熟、排放直接相關(guān)。隨著卵球的成熟，直到臨產(chǎn)前，其活性持續(xù)增強(qiáng)。劉夢(mèng)迪等[24]研究發(fā)現(xiàn)，隨著銀鯧Pampusargenteus卵巢的發(fā)育，肝臟中AKP活力呈下降趨勢(shì)，肝臟中的ACP 活力呈先上升后顯著下降的單峰型，銀鯧卵巢、肝臟、肌肉中AKP和ACP活力變化表現(xiàn)出協(xié)同性，產(chǎn)卵后活力均一直下降。本研究中產(chǎn)卵前不同試驗(yàn)組大口黑鱸雌魚(yú)肝臟中AKP、ACP活力均顯著高于產(chǎn)卵后，同樣也證實(shí)了這一點(diǎn)。

SOD是抗氧化防御系統(tǒng)所必需的酶之一，可作為活性氧清除劑參與清除體內(nèi)自由基氧離子和過(guò)氧化氫分子，從而消除其中間產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞的傷害，并能夠增強(qiáng)機(jī)體的防御能力和免疫功能[25]。本研究中發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.3%、0.5%的復(fù)合益生菌制劑時(shí)，產(chǎn)卵前雌魚(yú)血漿中T-SOD活力顯著高于其他試驗(yàn)組，且不存在高含量依賴(lài)性，這與桂琳等[26]、彭濤等[27]的研究結(jié)果一致。桂琳等[26]研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)合益生菌(由枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌Bacillusnatto、干酪乳桿菌Cactobacilluscasei和產(chǎn)朊假絲酵母菌Candidautilis組成)添加量為1 000、2 000 mg/kg時(shí)可顯著提高草魚(yú)血清中SOD酶活力，但添加量為3 000 mg/kg時(shí)，會(huì)降低其酶活力。彭濤等[27]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.4%的復(fù)合益生菌制劑(由植物乳桿菌、酵母菌組成，兩者活菌數(shù)分別為2.0×106、1.0×106CFU/mL)可顯著提高舍飼山羊血清T-SOD活力。以上研究結(jié)果均說(shuō)明，在飼料中添加適量的復(fù)合益生菌可提高機(jī)體抗氧化功能，增強(qiáng)機(jī)體的防御能力和免疫功能，減少養(yǎng)殖過(guò)程中病害的發(fā)生，從而間接提高子代的成活率。

4 結(jié)論

1)飼料中添加適量的復(fù)合益生菌后，雌魚(yú)的性腺指數(shù)、懷卵量和相對(duì)懷卵量可隨之增大，但無(wú)顯著性差異，這表明飼料中添加復(fù)合益生菌對(duì)大口黑鱸親魚(yú)延后繁殖性能無(wú)顯著性影響。

2)飼料中添加適量的復(fù)合益生菌可顯著提高仔魚(yú)的成活率，有效提高第一批產(chǎn)卵量、受精率和孵化率。

3)產(chǎn)卵前雌魚(yú)肝臟中AKP、ACP活力均顯著大于產(chǎn)卵后。飼料中添加適量的復(fù)合益生菌，可顯著增強(qiáng)產(chǎn)卵前雌魚(yú)肝臟中AKP、ACP活力及血漿中T-SOD活力，這表明復(fù)合酶益生菌可通過(guò)改善親魚(yú)的腸道菌群，增強(qiáng)親魚(yú)肝臟中AKP、ACP活力及血漿中T-SOD活力，以提高子代的成活率，這將為復(fù)合益生菌在親魚(yú)延后繁育工作中的使用提供一定的科學(xué)參考和數(shù)據(jù)支撐。

4)綜合各項(xiàng)指標(biāo)，復(fù)合益生菌適宜添加量為0.5%。然而，復(fù)合益生菌在水產(chǎn)動(dòng)物繁育工作中的作用機(jī)制目前仍是空白，今后需從其他組織生化指標(biāo)、免疫指標(biāo)等互作機(jī)理方面進(jìn)行深入探討。