• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測定肌肉組織中4 種獸藥殘留

    2017-11-16 12:03耿寧盧劍
    肉類研究 2017年8期
    關(guān)鍵詞:固相萃取串聯(lián)質(zhì)譜法肌肉組織

    耿寧+盧劍

    摘 要:建立同時測定肌肉組織中新霉素、灰黃霉素、多黏菌素B、喹乙醇及其代謝物3-甲基喹啉-2-羧酸(3-methyl-quinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)分析方法。肌肉組織勻漿均質(zhì)后使用乙腈-5%甲酸水溶液提取,HLB固相色譜柱凈化,HPLC分離,電噴霧離子源正離子模式及多反應(yīng)監(jiān)測模式檢測,外標(biāo)法定量。結(jié)果表明:4 種獸藥在質(zhì)量濃度1.0~200.0 ?g/L范圍內(nèi)均表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系,R2均大于0.998 0;新霉素、灰黃霉素和多黏菌素B的方法檢出限為5.0 μg/kg,喹乙醇及MQCA為0.5 μg/kg;陰性樣品中4 種獸藥的加標(biāo)回收率為82.1%~98.4%,日內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)(n=6)為2.2%~6.7%。該方法前處理過程簡單、干擾較少,檢測結(jié)果準(zhǔn)確,適用于肌肉組織中4 種獸藥的定性與定量檢測。

    關(guān)鍵詞:高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法;固相萃?。患∪饨M織;獸藥殘留

    Simultaneous Determination of Four Veterinary Drugs in Edible Muscle Tissues by High Performance

    Liquid Chromatography-Ttandem Mass Spectrometry

    GENG Ning1,2, LU Jian2,*

    (1.Quality Association of Jiangsu Province, Nanjing 210029, China;

    2.Jiangsu Product Quality Inspection and Testing Institute, Nanjing 210007, China)

    Abstract: A novel, simple and rapid method was established for the simultaneous determination of four veterinary drugs (neomycin, griseofulvin, polymyxin B, olaquindox and its metabolite 3-methyl-quinoxaline-2-carboxylic acid (MQCA)) in muscle tissues of food-producing animals by solid phase extraction (SPE) coupled with high performance liquid chromatography tandem triple quadrupole mass spectrometry (HPLC-MS-MS). After homogenized, muscle tissues were extracted with a mixture of acetonitrile and 5% formic acid solution and the extract was purified by an HLB solid phase extraction column, separated by HPLC, detected by positive electrospray ionization in multiple reaction monitoring mode (MRM), and quantified by an external standard method. Under the optimal conditions, the calibration for all five analytes showed a linear relationship in the range of 1.0–200.0 ?g/L with correlation coefficients higher than 0.998 0 and the limit of detection was

    5.0 ?g/kg for neomycin, griseofulvin, polymyxin B and 0.5 ?g/kg for olaquindox and MQCA, respectively. The mean recoveries of spiked samples (spiked concentration levels: 20.0, 40.0 and 200.0 ?g/L for neomycin, griseofulvin and polymyxin B; 2.0, 4.0 and 20.0 ?g/L for qlaquindox and its metabolite) were ranged from 82.1% to 98.4% with relative standard deviation (RSD, n = 6) between 2.2% and 6.7%. This method is accurate, simple, rapid and applicable to the detection of veterinary drugs in muscle tissues.

    Key words: high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS); solid phase extraction; muscle tissue; veterinary drugsendprint

    DOI:10.7506/rlyj1001-8123-201708008

    中圖分類號:O657.7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1001-8123(2017)08-0039-05

    隨著現(xiàn)代養(yǎng)殖技術(shù)的迅速發(fā)展,獸藥在畜禽養(yǎng)殖過程中的使用比例逐漸增加。獸藥不僅能夠用于畜禽的殺菌治療,還有促進(jìn)生長的作用。然而由于養(yǎng)殖人員的技術(shù)和知識水平參差不齊,因此經(jīng)常出現(xiàn)盲目用藥、重復(fù)給藥、藥物亂用、實驗性用藥等現(xiàn)象,這不僅導(dǎo)致畜禽體內(nèi)大量的獸藥殘留,還給食品安全帶來了巨大隱患[1-3]。

    2017年的3·15晚會針對獸藥濫用問題做了專題報道,主要涉及到的獸藥包括喹乙醇、新霉素、灰黃霉素和黏菌素等殺菌、促生長類藥物。其中喹乙醇是一種新型“瘦肉精”,它可以促進(jìn)畜禽生長,近年來被廣泛用于牛、雞、豬的飼養(yǎng)[4-6],但毒理學(xué)研究表明,喹乙醇對動物具有致癌、致畸的作用。因此,歐盟在1998年禁止在可食性動物飼養(yǎng)中使用喹乙醇,但目前美國和中國仍允許將喹乙醇用于生豬飼養(yǎng),并規(guī)定其在豬肌肉和豬肝中的代謝物3-甲基喹啉-2-羧酸(3-methyl-quinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)的最高殘留限量分別為4 μg/kg和50 μg/kg。黏菌素是另一種具有抗感染和促生長作用的獸藥,它對腎及神經(jīng)系統(tǒng)具有毒害性[7-8]。動物飼養(yǎng)過程中大量使用黏菌素可造成其在動物體內(nèi)的大量殘留,并通過蛋、乳、肉等食品傳遞給人類。我國和歐盟均嚴(yán)格規(guī)定了黏菌素的殘留量,其在動物肝臟和肌肉中的殘留量分別不得超過200 μg/kg和150 μg/kg[9]。

    鑒于獸藥濫用造成動物體內(nèi)大量獸藥殘留的現(xiàn)狀,建立一種行之有效的同時檢測動物肌肉組織中多種獸藥殘留的方法至關(guān)重要。目前針對喹乙醇[10-13]、灰黃霉素[14-17]、

    新霉素[18-21]和黏菌素[21-24]等獸藥的檢測方法已有部分報道。GB/T 20797—2006《肉與肉制品中喹乙醇?xì)埩袅康臏y定》[25]和GB/T 20746—2006《牛、豬肝臟和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》[26]也規(guī)定了牛、豬的肝臟和肌肉中喹乙醇代謝物的檢測方法;鄭玲等[27]利用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)法對動物源食品中的喹乙醇進(jìn)行了檢測;蘇萌等[28]建立了檢測動物源食品中黏桿菌素和多黏菌素的HPLC-MS/MS法。上述報道僅針對1~2 種獸藥建立了檢測方法,無法滿足多種獸藥同時篩查、同時檢測的要求。鑒于此,本研究利用固相萃取凈化技術(shù)和HPLC-MS/MS儀建立同時測定肌肉組織中新霉素、灰黃霉素、多黏菌素B、喹乙醇及其代謝物MQCA殘留量的分析方法,并對方法的準(zhǔn)確度和精密度進(jìn)行評價,對同時測定肌肉組織中上述4 種獸藥的殘留量具有積極意義。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    雞肉(8 份)、豬肉(8 份)、兔肉(4 份)樣品,隨機(jī)購自廣州各市場。

    硫酸新霉素(純度>90.0%)、灰黃霉素(純度>

    98.0%)、硫酸多黏菌素B(純度>84.0%)、喹乙醇(純度>99.0%)、MQCA(純度>99.0%)標(biāo)準(zhǔn)品

    德國Dr.Ehrenstorfe公司;甲醇、乙腈(均為色譜純) 德國Merck公司;甲酸(色譜純) 上海安譜實驗科技股份有限公司;實驗用水均為超純水;其他試劑均為分析純 廣州化學(xué)試劑廠。

    1.2 儀器與設(shè)備

    HLB固相萃取小柱(200 mg,6 mL) 德國CNW公司;1260超高效液相色譜儀、6490串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜儀 美國Agilent公司;MS3 Basic漩渦振蕩器、T18高速均質(zhì)機(jī) 德國IKA公司;Milli-Q純水儀 美國

    Millipore公司;KQ-250DV超聲波清洗儀(250 W)

    昆山市超聲儀器有限公司;KDC-1044離心機(jī) 北京中科佳儀科技有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

    準(zhǔn)確稱取5 種標(biāo)準(zhǔn)品10.0 mg,分別置于100 mL棕色容量瓶中,用10 mL乙腈-1%甲酸水溶液(50∶50,V/V)溶解,用乙腈定容,得到質(zhì)量濃度為100 mg/L的單標(biāo)儲備液;分別吸取5 種單標(biāo)儲備液各1.0 mL,用乙腈定容至100 mL,得到5 種標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度均為1.0 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。實驗中所需的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液均通過乙腈逐級稀釋得到。所有標(biāo)準(zhǔn)溶液均于-18 ℃保存。

    1.3.2 樣品處理

    1.3.2.1 提取

    將肌肉組織切碎后使用均質(zhì)機(jī)打碎,混合均勻,準(zhǔn)確稱取5.00 g(精確至0.01 g)均質(zhì)后的樣品于50 mL塑料離心管內(nèi),加入10 mL提取溶劑,渦旋1 min后,超聲提取10 min,于4 000 r/min條件下離心3 min;將上清液轉(zhuǎn)移至25 mL比色管中,用10 mL提取溶劑重復(fù)提??;合并2 次提取所得上清液,用提取溶劑定容至25.0 mL,搖勻,待凈化。

    其中提取溶劑分別選用乙腈、甲醇、5%甲酸水溶液等單一溶劑或二元溶劑提取體系,根據(jù)5 種化合物的提取效果選擇最適提取溶劑。

    1.3.2.2 凈化

    預(yù)先將HLB固相萃取柱分別用5 mL甲醇、10 mL超純水活化后,取10 mL上述提取液上樣;待液體完全流出后,用5 mL超純水淋洗固相萃取柱,減壓抽干;用10 mL凈化洗脫液洗脫目標(biāo)化合物至15 mL離心管,將洗脫液于50 ℃條件下氮氣濃縮至近干;用1.0 mL初始流動相溶解濃縮物,0.22 μm濾膜過濾,進(jìn)行HPLC-MS/MS測定。endprint

    其中分別用10 mL乙腈含量不同的乙腈-5%甲酸水溶液(乙腈體積分?jǐn)?shù)分別為100%、80%、50%和20%)作為凈化洗脫液洗脫目標(biāo)化合物,根據(jù)5 種化合物的凈化效果選擇最適洗脫液。

    1.3.3 實驗條件

    1.3.3.1 色譜條件

    選擇Welch Ultimate AQ-C18(4.6 mm×150 mm,5.0 μm)、Welch Ultimate XB-Phenyl(4.6 mm×150 mm,5.0 μm)和Welch Ultimate XB C18(4.6 mm×150 mm,5.0 μm)3 種色譜柱進(jìn)行實驗,根據(jù)5 種化合物的分離效果選擇合適的色譜柱;流動相A:0.1%甲酸水溶液,流動相B:0.1%甲酸乙腈溶液;梯度洗脫程序:0~3.0 min,流動相B體積分?jǐn)?shù)由15%升至80%,3.0~5.5 min,流動相B體積分?jǐn)?shù)80%,5.5~5.6 min,流動相B體積分?jǐn)?shù)由80%降至15%,5.6~7.0 min,流動相B體積分?jǐn)?shù)15%。柱溫:35 ℃;流速:0.50 mL/min;進(jìn)樣量:10 μL。

    1.3.3.2 質(zhì)譜條件

    電噴霧離子源,正離子模式,多反應(yīng)監(jiān)測(multi reaction monitoring,MRM)采集模式;毛細(xì)管電壓3 000 V;氮氣為干燥氣,氣體溫度280 ℃,流速

    14 L/min;氮氣輔助氣溫度350 ℃,流速11 L/min;駐留時間25 ms。待測化合物的監(jiān)測離子對(質(zhì)荷比,

    m/z)、碎裂電壓和碰撞能量如表1所示。

    1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    在最優(yōu)實驗條件下,分別對不同質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液(5 種標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量濃度分別為1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0 μg/L)進(jìn)行測定,以待測化合物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(x),定量離子對的峰面積為縱坐標(biāo)(y)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。各化合物的儀器檢出限(the instrument detection limit,ILOD)根據(jù)3 倍信噪比(RS/N=3)計算得到。

    1.3.5 回收率和精密度實驗

    在最優(yōu)實驗條件下,選取豬肉和兔肉的陰性樣品,分別添加3 個質(zhì)量濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液,計算方法的加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)。新霉素、灰黃霉素和多黏菌素B的添加水平分別為20.0、40.0、200.0 μg/kg,喹乙醇和MQCA的添加水平分別為2.0、4.0、20.0 μg/kg。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    使用安捷倫質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集工作站(Version B.08.00)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集,Origin 8.0軟件進(jìn)行繪圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 樣品提取和凈化條件的選擇

    動物肌肉組織中含有許多脂溶性的內(nèi)源性物質(zhì),這些物質(zhì)在檢測過程中會嚴(yán)重干擾化合物的響應(yīng),因此需要選擇合適的提取溶劑和凈化方式來去除干擾物質(zhì)。

    2.1.1 提取溶劑的選擇

    新霉素、多黏菌素B和喹乙醇極性較大,使用極性溶劑較易提取,而灰黃霉素和MQCA極性相對較小,需使用有機(jī)溶劑進(jìn)行提取。由于新霉素和多黏菌素B在酸性條件下的提取效率較高,本研究比較了乙腈、甲醇、5%甲酸水溶液等單一溶劑或二元溶劑提取體系下的提取效果。結(jié)果表明,單一有機(jī)溶劑體系對灰黃霉素、喹乙醇和MQCA均有一定的提取效果,但對新霉素和多黏菌素B的提取效果較差,而單一的5%甲酸水溶液對灰黃霉素幾乎沒有提取效果。使用有機(jī)溶劑-5%甲酸水溶液二元體系進(jìn)行提取時,乙腈或甲醇作為有機(jī)相時的提取效果差別不大,但二者在溶劑體系中的比例會影響提取或凈化過程。有機(jī)相比例過低時(<10%),灰黃霉素的提取率低于60%,有機(jī)相比例過高時(>30%),提取液中的脂溶性干擾物質(zhì)較多,影響固相萃取凈化效果。綜上所述,選擇乙腈-5%甲酸水溶液(20∶80,V/V)作為提取溶劑,此時5 種化合物的提取率均達(dá)82%以上。

    2.1.2 凈化洗脫液的選擇

    固相萃取技術(shù)利用固相萃取小柱對提取液進(jìn)行凈化,可以有效去除雜質(zhì),減少基質(zhì)干擾。本研究利用HLB固相萃取柱對肌肉組織提取液進(jìn)行凈化,分別用10 mL乙腈含量不同的乙腈-5%甲酸水溶液洗脫目標(biāo)化合物。結(jié)果表明,用乙腈的體積分?jǐn)?shù)為20%和50%的洗脫液進(jìn)行洗脫時雜質(zhì)最少,但仍有部分灰黃霉素未被洗脫(約30%~45%);純乙腈洗脫液所得雜質(zhì)最多,而采用80%乙腈-5%甲酸水溶液做洗脫液時,不僅洗脫后溶液中的雜質(zhì)較少,而且5 種化合物的回收率均在80%以上。因此,選擇10 mL 80%乙腈-5%甲酸水溶液為洗脫液。

    2.2 色譜柱的選擇

    5 種化合物的結(jié)構(gòu)和極性不同,如灰黃霉素含有弱極性、疏水性的苯環(huán)和苯并呋喃酮環(huán),新霉素含有多羥基和氨基,具有較強(qiáng)的極性和親水性,因此需選擇合適的色譜柱進(jìn)行分離。本研究比較了3 種色譜柱對5 種化合物的分離效果。結(jié)果表明,灰黃霉素在AQ-C18色譜柱上的保留效果較差,不僅出峰時間短,而且峰形較差,不能實現(xiàn)很好的分離,這是由AQ-C18柱填料極性封端,對于弱極性、苯環(huán)較多的灰黃霉素保留作用較弱導(dǎo)致的,而

    XB-Phenyl色譜柱填料鍵合了丙基苯基,對含有苯環(huán)的灰黃霉素有較好的保留作用,但對其他4 種化合物的保留較弱,整體上不能達(dá)到良好的分離效果。XB-C18色譜柱采用新型鍵合和雙封尾技術(shù),對強(qiáng)極性和弱極性化合物均有保留作用,可以實現(xiàn)4 種獸藥的分離。采用優(yōu)化后的方法對5 種化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定的提取離子色譜圖如圖1所示。

    2.3 線性方程和檢出限

    由表2可知,喹乙醇和MQCA標(biāo)準(zhǔn)線性方程的R2分別為0.998 2和0.999 1,其他3 種化合物的R2均大于0.998 0,說明5 種化合物的定量離子對峰面積與其質(zhì)量濃度間的線性關(guān)系良好。綜合考慮前處理過程中的濃縮倍數(shù)(2 倍)和前處理回收率,計算得到5 種化合物的方法檢出限(the method detection limit,MLOD)。喹乙醇和MQCA的ILOD為1.0 μg/L,MLOD為0.5 μg/kg;其他3 種化合物的ILOD為10.0 μg/L,MLOD為5.0 μg/kg。表明方法靈敏度高,適用于5 種目標(biāo)獸藥的定量分析。endprint

    2.4 回收率和精密度實驗

    由表3可知,5 種化合物的回收率在82.1%~98.4%之間,RSD在2.2%~6.7%之間,表明方法的回收率和精密度均能夠滿足肌肉組織中5 種化合物的檢測要求。

    2.5 實際樣品測定

    由表4可知,1 份雞肉樣品中檢測出新霉素,含量為41.7 μg/kg;2 份豬肉樣品和1 份兔肉樣品中檢測出喹乙醇或MQCA,其含量分別為21.7、59.1、11.4 μg/kg,其他樣品中沒有檢測出4 種獸藥。

    3 結(jié) 論

    本研究采用固相萃取凈化技術(shù)和HPLC-MS/MS法建立了肌肉組織中新霉素、灰黃霉素、多黏菌素B、喹乙醇及MQCA 4 種獸藥殘留的檢測方法。該方法前處理過程簡單、干擾較少,檢測結(jié)果準(zhǔn)確,方法定量限、回收率及精密度等均能夠滿足肌肉組織中獸藥的定性與定量檢測要求。

    參考文獻(xiàn):

    [1]徐敏. 獸藥濫用的危害性及其防控芻議[J]. 湖北畜牧獸醫(yī), 2017, 38(1): 41-43. DOI:10.16733/j.cnki.issn1007-273x.2017.01.023.

    [2]于書洋. 濫用獸藥的危害性分析[J]. 中國畜牧獸醫(yī)文摘, 2015, 31(5): 225.

    [3]柳錦根. 獸藥在動物源食品中的殘留及控制措施[J]. 上海畜牧獸醫(yī)通訊, 2015(4): 94-95. DOI:10.14170/j.cnki.cn31-1278/s.2015.04.039.

    [4]孫興權(quán), 李哲, 林維宣. 動物源性食品中多肽類抗生素殘留檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 中國食品衛(wèi)生雜志, 2008, 20(3): 263-266. DOI:10.13590/j.cjfh.2008.03.018.

    [5]LI Daowen, DAI Chongshan, ZHOU Yan, et al. Effect of GADD45a on olaquindox-induced apoptosis in human hepatoma G2 cells: involvement of mitochondrial dysfunction[J]. Environmental Toxicology and Pharmacology, 2016, 46: 140-146. DOI:10.1016/j.etap.2016.07.012.

    [6]LI Daowen, DAI Chongshan, YANG Xiayun, et al. GADD45a regulates olaquindox-induced DNA damage and sphase arrest in human hepatoma G2 cells via JNK/p38 pathways[J]. Molecules, 2017, 22(1): 124-142. DOI:10.3390/molecules22010124.

    [7]王影, 李艷然, 韓鐫竹, 等. 多黏菌素耐藥性的研究進(jìn)展[J]. 微生物學(xué)通報, 2017, 44(1): 200-206. DOI:10.13344/j.microbiol.china.160272.

    [8]POIREL L, JAYOL A, NORDMANN P. Polymyxins: antibacterial activity, susceptibility testing, and resistance mechanisms encoded by plasmids or chromosomes[J]. Clinical Microbiology Reviews, 2017, 30(2): 557-596. DOI:10.1128/cmr.00064-16.

    [9]European Union. Amending Council Directive 70/524/EEC concerning additives in feeding stuffs as regards the withdrawal of authorisation for certain growth promoters[J]. Official Journal of the European Communities, 1998, 3: 347.

    [10]殷居易, 倪梅林, 壽成杰, 等. 雞肉中喹乙醇、卡巴多及其代謝物的殘留檢測[J]. 中國獸藥雜志, 2006, 40(1): 11-15.

    [11]YU Ying, ZHANG Jing, SHAO Bing, et al. Development of a simple liquid chromatography-tandem mass spectrometry method for multiresidue determination of antifungal drugs in chicken tissues[J]. Journal of Aoac International, 2011, 94(5): 1650-1658. DOI:10.5740/jaoacint.10-244.

    [12]WANG Hongwu, YAO Su, LIU Yanqing, et al. Molecularly imprinted electrochemical sensor based on Au nanoparticles in carboxylated multi-walled carbon nanotubes for sensitive determination of olaquindox in food and feedstuffs[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2017, 87: 417-421. DOI:10.1016/j.bios.2016.08.092.endprint

    [13]宋春美, 侯玉澤, 劉宣兵, 等. 喹乙醇的危害及檢測方法研究進(jìn)展[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué), 2009, 38(12): 13-17. DOI:10.15933/j.cnki.1004-3268.2009.12.036.

    [14]高淑霞, 姜文學(xué), 楊麗萍, 等. LC-MS/MS方法檢測家兔組織中的灰黃霉素[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報, 2012, 25(2): 686-690. DOI:10.3969/j.issn.1001-4829.2012.02.068.

    [15]LI Y S, LIU K L, BEIER R C, et al. Simultaneous determination of mequindox, quinocetone, and their major metabolites in chicken and pork by UPLC-MS/MS[J]. Food Chemistry, 2014, 160(10): 171-179. DOI:10.1016/j.foodchem.2014.03.094.

    [16]PENG Juan, KONG Dezhao, LIU Liqiang, et al. Determination of quinoxaline antibiotics in fish feed by enzyme-linked immunosorbent assay using a monoclonal antibody[J]. Analytical Methods, 2015, 7(12): 5204-5209. DOI:10.1039/c5ay00953g.

    [17]LE Tao, ZHU Liqian, YU Huan. Dual-label quantum dot-based immunoassay for simultaneous determination of Carbadox and Olaquindox metabolites in animal tissues[J]. Food Chemistry, 2016, 199: 70-74. DOI:10.1016/j.foodchem.2015.11.116.

    [18]劉淑華, 何方洋, 馮才偉, 等. 牛奶中新霉素殘留膠體金免疫層析快速檢測技術(shù)的研制[J]. 食品工業(yè)科技, 2013, 34(6): 73-76. DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2013.06.052.

    [19]官斌, 袁東星. 牛奶樣品中新霉素殘留量的離子色譜法測定[J]. 分析實驗室, 2007, 26(7): 1-4. DOI:10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2007.0186.

    [20]劉永濤, 李樂, 徐春娟, 等. 固相萃取-高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法測定水產(chǎn)品中硫酸新霉素殘留量[J]. 分析科學(xué)學(xué)報, 2017, 33(1): 6-10. DOI:10.13526/j.issn.1006-6144.2017.01.002.

    [21]LE Tao, ZHU Liqian, SHU Lihui, et al. Simultaneous determination of five quinoxaline-1,4-dioxides in animal feeds using an immunochromatographic strip[J]. Food Additives and Contaminants: Part A-Chemistry Analysis Control Exposure and Risk Assessment, 2016, 33(2): 244-251. DOI:10.1080/19440049.2015.1124461.

    [22]KAHSAY G, ADEGOKE A O, VAN SCHEPDAEL A, et al.

    Development and validation of a reversed phase liquid chromatographic method for analysis of griseofulvin and impurities[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2013, 80(3): 9-17. DOI:10.1016/j.jpba.2013.02.035.

    [23]EL-DESOKY H S. A validated voltammetric procedure for quantification of the antifungal drug griseofulvin in bulk form, tablets, and biological fluids at a mercury electrode[J]. Analytical Letters, 2005, 38(11): 1783-1802. DOI:10.1080/00032710500210568.

    [24]梁雪琪, 劉紅, 何鳳芹. 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定牛奶中黏桿菌素和多黏菌素B的殘留量[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2013(22): 260-261; 268.

    [25]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心(北京), 商務(wù)部屠宰技術(shù)鑒定中心. GB/T 20797—2006 肉與肉制品中喹乙醇?xì)埩袅康臏y定[S]. 北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2006.

    [26]中華人民共和國秦皇島出入境檢驗檢疫局, 中華人民共和國深圳出入境檢驗檢疫局. GB/T 20746—2006 牛、豬肝臟和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[S]. 北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2006.

    [27]鄭玲, 吳玉杰, 趙永鋒, 等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定動物源食品中喹乙醇與卡巴氧殘留量[J]. 分析測試學(xué)報, 2014, 33(1): 21-26. DOI:10.3969/j.issn.1004-4957.2014.01.004.

    [28]蘇萌, 艾連峰, 段文仲, 等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定動物源食品中黏桿菌素、多黏菌素B的殘留量[J]. 分析實驗室, 2012, 33(3): 73-77. DOI:10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2012.0081.endprint

    猜你喜歡
    固相萃取串聯(lián)質(zhì)譜法肌肉組織
    高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法建立同時測定肌肉組織中4種藥物殘留的方法及其確認(rèn)
    超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定豬尿液中30種不同種類“瘦肉精”藥物殘留
    離子液體—基質(zhì)固相分散—超聲霧化—固相萃取結(jié)合高效液相色譜法檢測人參中三嗪類除草劑
    国产xxxxx性猛交| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲av成人一区二区三| av片东京热男人的天堂| 人成视频在线观看免费观看| 精品一品国产午夜福利视频| 超碰成人久久| 美女扒开内裤让男人捅视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 在线天堂中文资源库| 老司机深夜福利视频在线观看| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲黑人精品在线| 国产主播在线观看一区二区| 国产精品亚洲一级av第二区| 精品第一国产精品| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 一夜夜www| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲中文日韩欧美视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲黑人精品在线| 色94色欧美一区二区| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产亚洲av高清不卡| 黑人操中国人逼视频| 777米奇影视久久| 午夜精品在线福利| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 精品人妻在线不人妻| 亚洲 国产 在线| 曰老女人黄片| 午夜免费鲁丝| 首页视频小说图片口味搜索| 久久精品亚洲av国产电影网| 久久久国产精品麻豆| 国产高清激情床上av| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 搡老乐熟女国产| 免费不卡黄色视频| 男女之事视频高清在线观看| 欧美激情 高清一区二区三区| 婷婷精品国产亚洲av在线 | 欧美成人午夜精品| 亚洲成人手机| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲五月婷婷丁香| 人成视频在线观看免费观看| 国产淫语在线视频| av免费在线观看网站| 最新美女视频免费是黄的| 成人手机av| 一级,二级,三级黄色视频| 极品教师在线免费播放| 亚洲男人天堂网一区| 丁香欧美五月| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 色老头精品视频在线观看| av国产精品久久久久影院| 成熟少妇高潮喷水视频| 日韩有码中文字幕| 欧美在线一区亚洲| 天堂动漫精品| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 嫁个100分男人电影在线观看| 丁香欧美五月| 亚洲成人免费电影在线观看| 色老头精品视频在线观看| 成人精品一区二区免费| 久久人妻av系列| 高清av免费在线| 三级毛片av免费| 日本a在线网址| 黄频高清免费视频| 国产男女内射视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 黄色 视频免费看| 亚洲少妇的诱惑av| 身体一侧抽搐| 水蜜桃什么品种好| 麻豆成人av在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产99白浆流出| 亚洲中文字幕日韩| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产亚洲av高清不卡| 身体一侧抽搐| 身体一侧抽搐| 午夜精品国产一区二区电影| 国产成人欧美| 欧美日韩黄片免| 悠悠久久av| 99国产极品粉嫩在线观看| 日本五十路高清| 欧美 日韩 精品 国产| 美女视频免费永久观看网站| 午夜视频精品福利| av线在线观看网站| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲精品在线观看二区| 精品亚洲成国产av| 国产主播在线观看一区二区| av欧美777| 国产精品免费一区二区三区在线 | 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 美女国产高潮福利片在线看| 成年人午夜在线观看视频| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 天天添夜夜摸| 国产精品av久久久久免费| 国产精品久久视频播放| 欧美激情高清一区二区三区| 91av网站免费观看| 一级片免费观看大全| 69av精品久久久久久| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产精品久久视频播放| tocl精华| 女警被强在线播放| 国产亚洲欧美98| 国产精品欧美亚洲77777| 国产人伦9x9x在线观看| 黄色a级毛片大全视频| 怎么达到女性高潮| 九色亚洲精品在线播放| 丁香欧美五月| 99国产综合亚洲精品| 91国产中文字幕| 一级作爱视频免费观看| 国产麻豆69| 最新在线观看一区二区三区| 一级片'在线观看视频| 欧美大码av| 久久国产亚洲av麻豆专区| 美国免费a级毛片| 九色亚洲精品在线播放| 热re99久久精品国产66热6| 嫩草影视91久久| 无遮挡黄片免费观看| 成年动漫av网址| 国产欧美亚洲国产| 天天添夜夜摸| 最近最新免费中文字幕在线| 成人手机av| 亚洲欧美激情综合另类| 99热网站在线观看| 日韩欧美在线二视频 | 国产成人系列免费观看| 精品视频人人做人人爽| 亚洲av美国av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 亚洲精品久久午夜乱码| 国产1区2区3区精品| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 午夜激情av网站| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 999精品在线视频| 新久久久久国产一级毛片| 久久狼人影院| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 9色porny在线观看| 看黄色毛片网站| 老司机亚洲免费影院| 一边摸一边做爽爽视频免费| 欧美 日韩 精品 国产| 免费黄频网站在线观看国产| 精品人妻在线不人妻| 日韩三级视频一区二区三区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 色综合婷婷激情| www.自偷自拍.com| 日韩免费av在线播放| 精品亚洲成国产av| 人妻 亚洲 视频| 老司机影院毛片| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久久性视频一级片| 欧美黄色淫秽网站| 91大片在线观看| 美国免费a级毛片| 欧美成人午夜精品| 丝瓜视频免费看黄片| 丰满的人妻完整版| 一个人免费在线观看的高清视频| 久久99一区二区三区| 99热国产这里只有精品6| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 看免费av毛片| 成年版毛片免费区| 丝瓜视频免费看黄片| 久久天堂一区二区三区四区| 午夜福利在线免费观看网站| 色精品久久人妻99蜜桃| e午夜精品久久久久久久| 欧美久久黑人一区二区| 欧美最黄视频在线播放免费 | 久99久视频精品免费| 国产成人啪精品午夜网站| 看片在线看免费视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产精品二区激情视频| 欧美在线一区亚洲| 很黄的视频免费| 9色porny在线观看| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 精品电影一区二区在线| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产成人精品在线电影| 高清毛片免费观看视频网站 | 欧美日韩乱码在线| tocl精华| 国产男女内射视频| 黄色毛片三级朝国网站| 下体分泌物呈黄色| 乱人伦中国视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产精品九九99| 最近最新免费中文字幕在线| 久久久久视频综合| 亚洲午夜理论影院| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 激情视频va一区二区三区| 色在线成人网| avwww免费| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 欧美精品一区二区免费开放| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产成人啪精品午夜网站| 看黄色毛片网站| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 老熟妇仑乱视频hdxx| 黄色女人牲交| 欧美激情高清一区二区三区| 国产av又大| 夫妻午夜视频| 国产在视频线精品| 午夜福利视频在线观看免费| 捣出白浆h1v1| 人成视频在线观看免费观看| 欧美日韩视频精品一区| 中出人妻视频一区二区| 热re99久久国产66热| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| av天堂在线播放| 天堂√8在线中文| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产精品亚洲av一区麻豆| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| e午夜精品久久久久久久| 久久久久久久久免费视频了| 欧美精品亚洲一区二区| 乱人伦中国视频| 18禁国产床啪视频网站| cao死你这个sao货| 国产区一区二久久| 久久 成人 亚洲| 久久婷婷成人综合色麻豆| 另类亚洲欧美激情| 丝袜美腿诱惑在线| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 人人澡人人妻人| 欧美成人午夜精品| 日韩精品免费视频一区二区三区| 老司机影院毛片| 精品熟女少妇八av免费久了| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 涩涩av久久男人的天堂| 国产男女超爽视频在线观看| 国产精品成人在线| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 三上悠亚av全集在线观看| 天堂动漫精品| 在线观看免费日韩欧美大片| 香蕉国产在线看| 亚洲成国产人片在线观看| 久久热在线av| 久久久精品区二区三区| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 丝袜美足系列| 亚洲专区中文字幕在线| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 欧美在线一区亚洲| 在线av久久热| 国精品久久久久久国模美| 不卡一级毛片| 久久久久精品人妻al黑| 国产成人影院久久av| 国产精品永久免费网站| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 村上凉子中文字幕在线| 露出奶头的视频| 美女 人体艺术 gogo| 看片在线看免费视频| 18禁观看日本| 欧美日本中文国产一区发布| 国产精华一区二区三区| 成人18禁在线播放| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲,欧美精品.| 成人手机av| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 成人av一区二区三区在线看| 久久久久精品人妻al黑| 国产欧美日韩一区二区精品| 精品第一国产精品| 丰满饥渴人妻一区二区三| 人妻一区二区av| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久久久精品国产欧美久久久| 手机成人av网站| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 成在线人永久免费视频| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 亚洲午夜理论影院| 亚洲少妇的诱惑av| 91成年电影在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产亚洲精品第一综合不卡| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 夜夜夜夜夜久久久久| netflix在线观看网站| av中文乱码字幕在线| 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久久国产成人精品二区 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 12—13女人毛片做爰片一| 国产精品九九99| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 无限看片的www在线观看| 91成人精品电影| 免费观看人在逋| 人妻久久中文字幕网| 国产精品免费视频内射| 免费在线观看完整版高清| 男人操女人黄网站| 美女福利国产在线| 久久国产乱子伦精品免费另类| 性色av乱码一区二区三区2| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 91在线观看av| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 日本一二三区视频观看| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品综合久久久久久久免费| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲欧美激情综合另类| 国产亚洲精品av在线| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 岛国在线免费视频观看| 99热这里只有精品一区| 女同久久另类99精品国产91| 88av欧美| 51国产日韩欧美| 天天一区二区日本电影三级| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 女警被强在线播放| 内射极品少妇av片p| 美女免费视频网站| 男女视频在线观看网站免费| 中文在线观看免费www的网站| 又粗又爽又猛毛片免费看| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产av一区在线观看免费| 1000部很黄的大片| 一个人免费在线观看的高清视频| 99久久精品国产亚洲精品| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产主播在线观看一区二区| 精品久久久久久久末码| 淫妇啪啪啪对白视频| 日韩人妻高清精品专区| 欧美一区二区亚洲| 欧美中文综合在线视频| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲18禁久久av| 一进一出抽搐动态| 又黄又粗又硬又大视频| 久久亚洲精品不卡| 亚洲av免费高清在线观看| 9191精品国产免费久久| 国产真人三级小视频在线观看| 俺也久久电影网| a级一级毛片免费在线观看| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲av第一区精品v没综合| 99久久综合精品五月天人人| 精品不卡国产一区二区三区| 深夜精品福利| 桃色一区二区三区在线观看| 免费av不卡在线播放| 精品久久久久久久毛片微露脸| 中出人妻视频一区二区| 精品人妻偷拍中文字幕| 69av精品久久久久久| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产极品精品免费视频能看的| 国产一区二区激情短视频| 女人被狂操c到高潮| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产精品一及| 熟女人妻精品中文字幕| 国产午夜精品论理片| 国产精品久久久久久精品电影| 日本一二三区视频观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 精华霜和精华液先用哪个| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲一区二区三区不卡视频| 久久精品国产清高在天天线| 美女 人体艺术 gogo| 国语自产精品视频在线第100页| 九色成人免费人妻av| 久久久国产成人精品二区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产三级黄色录像| 成年免费大片在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 99久久综合精品五月天人人| 久久精品91蜜桃| or卡值多少钱| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲 国产 在线| 最近最新免费中文字幕在线| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产野战对白在线观看| 夜夜爽天天搞| 国产激情偷乱视频一区二区| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 麻豆成人av在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 精品久久久久久久久久久久久| 欧美又色又爽又黄视频| 夜夜爽天天搞| 成人欧美大片| 国产精品av视频在线免费观看| 日韩有码中文字幕| 欧美不卡视频在线免费观看| 精品一区二区三区人妻视频| 日本黄大片高清| 黄色视频,在线免费观看| 欧美中文综合在线视频| 两个人的视频大全免费| 亚洲黑人精品在线| 成人一区二区视频在线观看| 国产不卡一卡二| 好男人在线观看高清免费视频| 国产午夜精品论理片| 国产精品,欧美在线| 亚洲人成伊人成综合网2020| 日本成人三级电影网站| 欧美一区二区亚洲| 成人一区二区视频在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲欧美激情综合另类| 国产精品久久久久久久电影 | 国产精品一区二区免费欧美| 精品电影一区二区在线| 久久精品91无色码中文字幕| h日本视频在线播放| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 床上黄色一级片| 内地一区二区视频在线| 婷婷精品国产亚洲av在线| 欧美乱妇无乱码| av福利片在线观看| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 欧美一级毛片孕妇| 欧美一区二区精品小视频在线| 久久久久国内视频| www日本在线高清视频| 久久久久久国产a免费观看| 欧美大码av| 热99在线观看视频| 国产单亲对白刺激| av天堂在线播放| 操出白浆在线播放| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲av熟女| 国产午夜精品论理片| 国产一区二区激情短视频| 最新美女视频免费是黄的| 欧美av亚洲av综合av国产av| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产精品女同一区二区软件 | АⅤ资源中文在线天堂| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲国产精品sss在线观看| 久99久视频精品免费| 九九在线视频观看精品| 亚洲国产精品成人综合色| 久久久久免费精品人妻一区二区| 亚洲av成人av| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| xxxwww97欧美| 午夜福利高清视频| 午夜精品在线福利| 亚洲av二区三区四区| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 国产精品美女特级片免费视频播放器| 手机成人av网站| 欧美日韩乱码在线| 韩国av一区二区三区四区| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲av成人精品一区久久| 久久99热这里只有精品18| 色av中文字幕| 在线视频色国产色| 免费在线观看成人毛片| 午夜福利高清视频| 好男人在线观看高清免费视频| 日本成人三级电影网站| 久久久久久久精品吃奶| 日本熟妇午夜| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲在线观看片| 色吧在线观看| 国产精品永久免费网站| 久久这里只有精品中国| 国产精品久久久久久久久免 | 欧美最黄视频在线播放免费| 精品乱码久久久久久99久播| 久久伊人香网站| 国产精品日韩av在线免费观看| 日韩大尺度精品在线看网址| 久久久久久久久久黄片| 日韩欧美国产在线观看| 久久久成人免费电影| 在线播放国产精品三级| 久久亚洲精品不卡| 精品日产1卡2卡| 国产野战对白在线观看| 国产视频内射| 亚洲美女黄片视频| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲欧美激情综合另类| 此物有八面人人有两片| 无人区码免费观看不卡| 亚洲精品亚洲一区二区| 午夜激情福利司机影院| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲中文字幕日韩| 午夜福利视频1000在线观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 精品免费久久久久久久清纯| 一个人看视频在线观看www免费 | 国产色婷婷99| 五月玫瑰六月丁香| 精品久久久久久久久久免费视频| 欧美bdsm另类| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 丁香欧美五月| 性欧美人与动物交配| 人人妻人人澡欧美一区二区| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久久久亚洲av毛片大全| 国产亚洲欧美98| 亚洲成人精品中文字幕电影| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲真实伦在线观看| 国内精品久久久久久久电影| 成人av一区二区三区在线看| 在线观看免费午夜福利视频| 日韩人妻高清精品专区| 欧美日韩福利视频一区二区| 91久久精品电影网| 免费在线观看成人毛片| 一级a爱片免费观看的视频| 精品日产1卡2卡| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 亚洲av五月六月丁香网| 精品久久久久久久末码| 亚洲电影在线观看av| 亚洲人成电影免费在线| 日本免费一区二区三区高清不卡| 少妇人妻精品综合一区二区 | 午夜免费激情av| 三级国产精品欧美在线观看| bbb黄色大片| 日韩成人在线观看一区二区三区|