氟尼辛葡甲胺注射液的制備及性狀初步研究

郭金梅，朱術(shù)會，李申華，郭華亮，王成森

（1.濰坊市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山東 濰坊 261061；2.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東 濰坊 261061；3.山東金瑞生物科技有限公司，山東 濰坊 261061）

氟尼辛葡甲胺（Flunixin meglumine）是一種非甾體動物用解熱鎮(zhèn)痛藥[1]，屬于環(huán)氧化酶抑制劑[2]。該藥物具有較強的解熱、鎮(zhèn)痛和消炎作用，獸醫(yī)臨床上單獨或與抗生素聯(lián)合使用來治療馬、牛及豬的內(nèi)臟絞痛、肌肉及骨骼的疼痛、發(fā)熱和炎癥[3-4]；還可以用于動物因感染引起的急性炎癥的治療[5-6]，如關(guān)節(jié)炎、母豬乳房炎、子宮炎及無乳綜合征[7]。

氟尼辛葡甲胺可口服、靜脈注射及肌肉注射[8]，其注射液在大型家畜疾病治療中應(yīng)用較廣，臨床需求量大，本試驗在氟尼辛葡甲胺注射劑制備中使用具有助溶和促進藥物吸收作用的輔料聚維酮K-30、聚乙二醇-6000和甘油，以期制備的氟尼辛葡甲胺注射液性質(zhì)穩(wěn)定，在獸醫(yī)臨床治療中有較好的作用。

1 材 料

1.1 主要試劑

試驗用氟尼辛葡甲胺原料及氟尼辛葡甲胺標準品，由山東金瑞生物科技有限公司贈送；聚維酮K-30（批號為20171220）、聚乙二醇-6000（批號為20180112）、甘油（批號為20170625）、液相色譜級甲醇（批號為20180114）、亞硫酸氫鈉（批號為20171106）、EDTA-2Na（批號為20171009），均購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

1.2 主要儀器

高效液相色譜儀（型號為LC-10A），購自島津（中國）有限公司；電子天平（型號為JH4101），購自上海精科天美貿(mào)易有限公司；澄明度測定儀（型號為YB-2），購自天津盛達三合光學(xué)儀器有限公司；數(shù)顯恒溫磁力攪拌器（型號為MYP11-2），購自上海梅穎儀器有限公司。

2 方 法

2.1 制劑制備及性狀考察

稱取處方量的氟尼辛葡甲胺原料置于一定量的注射用水中，不斷攪拌，60 ℃水浴加熱20 min，待氟尼辛葡甲胺充分溶解后，分別加入處方量的聚乙二醇-6000、聚維酮K-30、甘油、亞硫酸氫鈉和EDTA-2Na，充分攪拌并60 ℃水浴加熱至完全溶解，調(diào)pH 值為7.8～8.0，用注射用水定容，0.45 μm濾膜過濾，灌封，滅菌。

取3批次氟尼辛葡甲胺注射液樣品進行性狀考察，參考2020 年版《中國獸藥藥典》二部附錄溶液顏色和溶液澄清度檢測方法，對氟尼辛葡甲胺注射液進行外觀、顏色、澄明度和pH值檢查。

2.2 含量測定

參考文獻，采用高效液相色譜（HPLC）外標法測定[9]，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-水-冰醋酸（60∶39∶1）為流動相；檢測波長為254 nm，流速1 mL·min-1，進樣20 μL。

2.3 穩(wěn)定性考察

2.3.1 強光照射試驗

取3 批次氟尼辛葡甲胺注射液樣品，置于（4 500±500）lx 光照強度下放置20 d，分別于第0、5、10、15 天和第20 天取一定量樣品進行含量測定，分別考察氟尼辛葡甲胺注射液的性狀、澄明度和pH值。

2.3.2 高溫試驗

取3批次氟尼辛葡甲胺注射液樣品置于60 ℃條件下放置15 d，分別于第0、5、10 天和第15 天時取樣測定氟尼辛葡甲胺的含量，并分別考察其性狀、澄明度和pH值。

2.3.3 長期試驗

取3 批次氟尼辛葡甲胺注射液樣品室溫放置0、30、60、120、180 d 后分別取樣進行含量測定，并分別考察其性狀、澄明度和pH值。

2.4 臨床解熱作用試驗

取濰坊市某養(yǎng)豬場自然感染并發(fā)熱、體溫在40 ℃以上、體重60 kg左右育肥豬20頭，隨機分為A、B組。其中A組按2.0 mg·kg-1（以氟尼辛葡甲胺計）肌肉注射氟尼辛葡甲胺注射液，B 組為空白對照組，不給予藥物治療。藥物注射后分別于3、6、9、12 小時測定直腸溫度，記錄數(shù)據(jù)并進行分析。健康豬體溫38～39.5 ℃。

3 結(jié)果與分析

3.1 氟尼辛葡甲胺注射液性狀考察

本試驗制備的氟尼辛葡甲胺注射液為淡黃色澄清透明液體，無纖維、顆粒色塊等可見異物，pH值為7.8～9.0，性狀符合2020版《中國獸藥典》注射液性狀要求，合格率100%，3批次性狀考察結(jié)果見表1。

表1 氟尼辛葡甲胺注射液性狀考察

3.2 氟尼辛葡甲胺注射液含量測定

目前市場銷售的氟尼辛葡甲胺注射劑規(guī)格多為10 mL，0.5 g；含量為5%，本試驗制備的氟尼辛葡甲胺注射劑規(guī)格為50 mL，5.0 g；含量為10%，試驗采用高效液相色譜法對3個批次的制劑含量進行了測定，結(jié)果見表2，藥物含量在為（99.54±1.17）～（102.24±0.96）mg·mL-1，含量在標示量的95%～105%的區(qū)間，符合注射劑含量一般要求。

表2 氟尼辛葡甲胺注射液樣品含量測定結(jié)果 mg·mL-1

3.3 氟尼辛葡甲胺注射液穩(wěn)定性考察

3.3.1 強光照射試驗

氟尼辛葡甲胺注射液在（4 500±500）lx 光照強度下10 d，外觀性狀、澄明度、pH 值和含量均無明顯變化，但到第15 天后，氟尼辛葡甲胺制劑的顏色加深，結(jié)果見表3。表明該制劑在強光照下會發(fā)生顏色變化，因此該制劑存儲及運輸過程中應(yīng)盡量避免強光照射。

表3 氟尼辛葡甲胺注射液強光照射試驗結(jié)果

3.3.2 氟尼辛葡甲胺注射液高溫試驗

3個批次的樣品在60 ℃條件下放置10 d，外觀性狀、澄明度、pH值和含量均無明顯變化，到15 d后氟尼辛葡甲胺注射液顏色變深，相對含量下降，結(jié)果見表4。表明該制劑在長期高溫下放置發(fā)生分解。

表4 氟尼辛葡甲胺注射液高溫試驗結(jié)果

3.3.3 氟尼辛葡甲胺注射液長期試驗

氟尼辛葡甲胺注射液在室溫放置180 d，3 個批次的氟尼辛葡甲胺注射液的含量變化不明顯，制劑外觀、澄明度及pH 值均符合規(guī)定，在長期試驗中未觀察到結(jié)晶現(xiàn)象，結(jié)果見表5。說明該制劑在室溫下長時間放置性質(zhì)穩(wěn)定。

表5 氟尼辛葡甲胺注射液長期試驗結(jié)果

3.4 臨床解熱作用試驗

健康豬體溫為38～39.5 ℃，試驗A 組豬肌肉注射試驗制備的氟尼辛葡甲胺注射液3 h 后，有4頭豬的體溫為38～39.5 ℃，注射藥物6 h后有9頭豬體溫為38～39.5 ℃，12 h 后10 頭豬體溫全部為38～39.5 ℃，全部試驗豬體溫恢復(fù)正常，見表6。B 組為對照組，9 頭豬未經(jīng)藥物治療，12 h后體溫超過39.5 ℃。從試驗結(jié)果來看，發(fā)熱豬經(jīng)肌肉注射氟尼辛葡甲胺注射液12 h 后，體溫能夠恢復(fù)正常，這說明本研究制備的氟尼辛葡甲胺注射液對豬的發(fā)熱癥狀具有解熱作用。

表6 氟尼辛葡甲胺注射液臨床解熱作用試驗結(jié)果

4 結(jié)論

本研究制備的氟尼辛葡甲胺注射液為淡黃色均一透明液體，pH值7.8～9.0；性狀和含量符合注射劑的一般要求；該制劑室溫放置性質(zhì)穩(wěn)定，在強光照下顏色發(fā)生變化，高溫60 ℃條件下放置15 d 后相對含量下降，臨床試驗結(jié)果顯示對豬發(fā)熱癥狀具有解熱作用。