CIN中P16INK4A 的表達(dá)及與HPV感染的關(guān)系探究

成 瑤

焦作市溫縣人民醫(yī)院病理科 (河南 焦作 454850)

宮頸癌是在臨床上婦科常見的惡性疾病之一，腫瘤組織擴(kuò)散，將其轉(zhuǎn)移到子宮下段及宮體，其危險(xiǎn)系數(shù)也隨之而增加，由于宮頸癌早期及宮頸上皮內(nèi)瘤變(cer vical intraepithelial neoplasia，CIN)有著類似的的臨床表現(xiàn)，鑒別診斷程度比較困難[1-2]。CIN是與宮頸浸潤(rùn)癌相關(guān)的癌變的總稱，可有效反映宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程[3]。由于多數(shù)CIN無(wú)明顯的臨床癥狀及體征，部分患者出現(xiàn)充血、白帶帶血、白帶增多等表現(xiàn)，但仍有絕大數(shù)患者無(wú)法準(zhǔn)確診斷，進(jìn)而導(dǎo)致臨床上漏診的現(xiàn)象發(fā)生。已有研究表明，人乳頭瘤病毒(HPV)與宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)生、發(fā)展具有密切的相關(guān)性[4-5]。本文選取自2018年2月至2020年2月期間本院收治的96例CIN患者，探討在CIN中P16INK4A的表達(dá)及與HPV感染的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料分析的方法為回顧性分析，研究對(duì)象為2018年2月至2020年2月期間我院收治的96例CIN患者。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患者及家屬有知情同意權(quán)并能完整參加本次的研究。

排除標(biāo)準(zhǔn)：孕產(chǎn)婦；免疫功能缺陷者；患有糖尿病者；嚴(yán)重的臟器疾??；精神疾病者；臨床資料不完整者。患者年齡在23～45歲之間，平均年齡(31.23±3.45)歲；CIN Ⅰ級(jí)有45例，CIN Ⅱ～Ⅲ級(jí)有30例，宮頸鱗癌有21例。

1.2 方法免疫組化技術(shù)SP法：取標(biāo)本，采用10%甲醛固定，并用石蠟固定。每一份標(biāo)本連續(xù)制作4張切片，行常規(guī)病理檢查、P16INK4A染色。切片經(jīng)過(guò)微波抗原修復(fù)預(yù)處理后，P16INK4A則采用性檸檬酸進(jìn)行高溫修復(fù)，所有操作均按照說(shuō)明書來(lái)操作。雜交捕獲二代法：從子宮頸管采集患者標(biāo)本，將其分泌物置于專用保存液中，并采用DL-2000基因雜交擴(kuò)大儀來(lái)進(jìn)行第二代雜交捕獲法。所有操作均按照說(shuō)明書來(lái)操作。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]P16INK4A陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：胞核或者胞漿著色，分為3+(棕褐色粗顆粒)、2+(棕黃色顆粒)、+(棕黃色細(xì)顆粒)、-(無(wú)棕黃色粗顆粒)。HPV-DNA的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：HPV-DNA＞1pg/L。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 13.0分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用百分比(%)表示，用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用(±s)表示，比較用t檢驗(yàn)，若P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

CIN Ⅰ級(jí)患者的HPV持續(xù)感染率明顯高于CIN Ⅱ～Ⅲ級(jí)、宮頸鱗癌患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CIN Ⅰ級(jí)患者的P16INK4A陰性率明顯高于CIN Ⅱ～Ⅲ級(jí)與宮頸鱗癌患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。隨著HPV陽(yáng)性率越高，P16INK4A表達(dá)強(qiáng)度也越高，具體見表1。

表1 P16INK4A、HPV感染在宮頸病變中的檢測(cè)分析[n(%)]

3 討論

宮頸癌是女性易發(fā)的惡性腫瘤之一，并且年輕的女性中發(fā)生率也越來(lái)越高，對(duì)女性的生命健康和生活質(zhì)量有著巨大的威脅，臨床癥狀主要為陰道流血和排液等，晚期癌癥患者還會(huì)出現(xiàn)一些繼發(fā)性的癥狀，如尿頻、尿急、下肢腫痛以及便秘等[7]。癌腫壓迫到輸尿管部位時(shí)，會(huì)使輸尿管發(fā)生梗阻、腎盂積水甚至出現(xiàn)尿毒癥等，晚期患者會(huì)出現(xiàn)貧血、惡病質(zhì)等危及生命的全身衰竭癥狀[8]。宮頸癌的早期癥狀不明顯，因此，通過(guò)及早發(fā)現(xiàn)、及時(shí)診斷及治療，進(jìn)而提高宮頸病變者的生存質(zhì)量。

HPV感染是宮頸鱗癌與上內(nèi)皮瘤變發(fā)生的必要因素，HPV感染是沒(méi)有癥狀的，在多數(shù)國(guó)家中，HPV感染較常見[9]。當(dāng)前已有100多種HPV病毒，大部分病毒屬于低危型病毒，并不會(huì)導(dǎo)致宮頸癌。另外有13種HPV可持續(xù)感染，常見的引起宮頸癌的HPV有16型、18型，其在溫暖潮濕的環(huán)境下會(huì)大量繁殖，人體的外生殖器和肛周部位是最容易產(chǎn)生感染的地方，感染后極易誘發(fā)宮頸癌[10]。在受到高危型HPV感染后，以整合形式進(jìn)入宿主細(xì)胞的DNA會(huì)引發(fā)癌基因E6、E7的表達(dá)。通過(guò)E6與p53蛋白、E7與pBb蛋白結(jié)合，會(huì)阻斷細(xì)胞周期的兩個(gè)抑制性環(huán)節(jié)，使宿主細(xì)胞發(fā)生惡性增殖。抑癌基因P16INK4A和它的產(chǎn)物會(huì)抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白發(fā)生磷酸化，會(huì)阻止細(xì)胞從G1期到達(dá)S期，從而抑制細(xì)胞的惡性增殖。被HPV感染的宮頸組織中的E7蛋白會(huì)造成pBb功能的失活，最終解除pBb對(duì)P16INK4A蛋白表達(dá)的抑制，導(dǎo)致P16INK4A表達(dá)過(guò)度。本研究結(jié)果顯示：隨著宮頸瘤病變程度的加重，P16INK4A表達(dá)水平也隨之而升高，表明P16INK4A蛋白水平檢測(cè)可鑒別宮頸瘤病變與宮頸癌。這也說(shuō)明HPV感染會(huì)引起宮頸瘤病變進(jìn)展為宮頸磷癌，這個(gè)過(guò)程中伴隨著細(xì)胞周期蛋白、癌基因之間的相互作用，采取聯(lián)合監(jiān)測(cè)HPV感染和P16INK4A的表達(dá)情況，會(huì)使宮頸癌的診斷率大大提高。

綜上所述，CIN中P16INK4A有著較高表達(dá)水平，在HPV持續(xù)感染患者中，通過(guò)監(jiān)測(cè)P16INK4A水平，可盡早診斷宮頸瘤變。