微小RNA在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中的作用研究進展

巴思，莫祥蘭

【關(guān)鍵詞】miRNA ;鼻咽癌 ;細胞增殖;侵襲;轉(zhuǎn)移

中圖分類號：R766.3文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.11.014

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是鼻咽部上皮來源的惡性腫瘤，與EB病毒（EBV）感染密切相關(guān)，發(fā)病人群具有顯著的地理分布特征，好發(fā)于中國南部和東南亞地區(qū);95%以上病例為未分化非角化型鱗狀細胞癌，對放療敏感。雖然早期經(jīng)規(guī)范治療大部分患者可治愈，但NPC發(fā)病部位隱蔽，早期即經(jīng)淋巴道或血道轉(zhuǎn)移。約70%患者就診時已為中晚期，治療效果差。因此，有必要深入研究NPC發(fā)生發(fā)展分子機制，尋找特異度和敏感度高的早期診斷NPC分子標志物，及早發(fā)現(xiàn)NPC患者，及早進行規(guī)范治療，進一步提高NPC患者治愈率和生存質(zhì)量。研究已證實NPC的發(fā)生與EBV感染、遺傳因素、環(huán)境因素等密切相關(guān)。近年研究發(fā)現(xiàn)，miRNA表達失衡參與了NPC的發(fā)生和進展，但miRNA致NPC分子機制仍在探討中。

1miRNA與人類惡性腫瘤

miRNA是一類長度為19～25個核苷酸的單鏈非編碼小分子RNA，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達。miRNA具有高度保守性，在哺乳動物基因組中廣泛存在。隨著對miRNA研究的深入，發(fā)現(xiàn)其參與包括細胞增殖、分化、胚胎發(fā)育和組織形成等各種生理病理過程[1]。miRNA表達異常與人類多種疾?。ò[瘤）的發(fā)生密切相關(guān)。miRNA在人類惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演著類似于癌基因或抑癌基因的角色。新近研究發(fā)現(xiàn)食道癌細胞miR-483-5P表達上調(diào)，其通過靶向下調(diào)鉀離子通道亞家族Q成員1（KCNQ1）表達促進食道癌細胞的增殖、遷移和侵襲[2];提示miR-483-5P在食道癌發(fā)生發(fā)展過程中扮演癌基因角色。另一研究發(fā)現(xiàn)胃癌組織及細胞系miR-125b表達明顯下調(diào)，miR-125b模擬物可抑制胃癌細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，在胃癌發(fā)生發(fā)展中扮演抑癌基因角色，其抑癌機制是通過靶向下調(diào)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子3（STAT3）表達而實現(xiàn)的[3]。MAMINEZHAD等[4]研究發(fā)現(xiàn)6種血漿miRNA（miR-19a、miR-20a、miR-150、let-7a、miR-143和miR-145）可作為診斷大腸癌的分子標志物。大腸癌患者外周血miR-19a、miR-20a、miR-150和 let-7a表達顯著上調(diào)并與進展期密切相關(guān)，而 miR-143和miR-145則顯著下調(diào)。推測在大腸癌發(fā)生發(fā)展過程中miR-19a、miR-20a、miR-150和 let-7a扮演癌基因角色，而miR-143和miR-145則扮演抑癌基因角色。它們促癌或抑癌分子機制如何尚待研究。

2miRNA在NPC發(fā)生發(fā)展中的作用

NPC是鼻咽黏膜上皮細胞來源的惡性腫瘤。NPC的發(fā)生發(fā)展是多因素參與的復(fù)雜過程。研究已證實多種癌基因和抑癌基因表達異常導(dǎo)致多條信號通路包括Wnt/β-catenin、Rho/ROCK、PI3K/AKT、NF-κB、mTOR、MAPK等持續(xù)活化促進了NPC發(fā)生和進展。新近研究發(fā)現(xiàn)miRNA表達異常與NPC發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[5～9]。他們在NPC發(fā)生發(fā)展過程起促癌或抑癌作用。

2.1miRNA靶向調(diào)控抑癌基因表達促進NPC發(fā)生和發(fā)展研究證實部分miRNA促進NPC發(fā)生和發(fā)展。 NPC組織miRNA-630表達水平明顯上調(diào)并與預(yù)后不良密切相關(guān);體外實驗發(fā)現(xiàn)，NPC細胞外源性過表達miRNA-630促進細胞增殖;其可能通過靶向下調(diào)抑癌基因P53誘導(dǎo)核蛋白2（TP53INP2）表達促進腫瘤發(fā)展[6]。NPC組織miR-103表達上調(diào)，而腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移抑制基因基質(zhì)金屬蛋白酶-3組織抑制物（TIMP-3）表達水平明顯降低;NPC細胞外源性過表達miR-103促進細胞增殖、遷移和侵襲，Wnt/β-catenin通路相關(guān)基因β-catenin 和cyclin D1表達上調(diào)[7]，提示 miR-103通過靶向抑制TIMP-3表達，激活Wnt/β-catenin通路促進NPC發(fā)生和發(fā)展。另一研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-215在NPC組織中表達上調(diào)并與預(yù)后差密切相關(guān);NPC細胞外源性過表達miR-215促進了細胞增殖、遷移和侵襲;miR-215通過靶向抑制抑癌基因RB1表達促進了NPC的發(fā)展;此外，miR-215通過促進NPC上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）、激活Wnt/β-catenin通路促進NPC侵襲和轉(zhuǎn)移[8]。NPC組織miR106a-5p表達上調(diào)，其表達水平與疾病晚期、復(fù)發(fā)和不良臨床預(yù)后密切相關(guān);功能研究發(fā)現(xiàn) miR106a-5p通過靶向抑制抗增殖因子3（BTG3），抑制自噬而增強了NPC惡性表型;由miR106a-5p/BTG3軸介導(dǎo)的自噬減弱是通過激活MAPK通路而實現(xiàn)[9]。miR-141的功能具有組織特異性。NPC組織miR-141-3p表達上調(diào)并與不良預(yù)后相關(guān)，外源性過表達miR-141-3p促進了NPC細胞的增殖、遷移和侵襲，其通過靶向抑制腫瘤抑制基因DLC1表達、激活mTOR通路從而促進NPC的進程[10]。NPC組織高表達miRNA-19a-3p，而凋亡促進基因程序性細胞死亡5（PDCD5）表達下調(diào)，兩者表達水平呈負相關(guān);生存分析顯示，高表達miRNA-19a-3p或低表達PDCD5者預(yù)后較差，他們是影響NPC預(yù)后的獨立危險因素[11]，提示miRNA-19a-3p在NPC中扮演癌基因角色。研究還發(fā)現(xiàn)NPC患者血漿miR-214-3p表達與臨床分期和復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，在NPC患者治療后的隨訪過程中，血漿miR-214-3p表達逐漸降低，復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的患者總是在同一時間點伴有更高水平的血漿miR-214-3p[12]，提示miR-214-3p可能在NPC發(fā)生發(fā)展中扮演癌基因角色。SUN等[13]研究發(fā)現(xiàn)，NPC患者外周血miR-93表達水平顯著增高并與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及5年總生存期顯著相關(guān)，是預(yù)測NPC預(yù)后的獨立因素;體外實驗表明，敲低miR-93可抑制NPC細胞增殖;進一步功能學(xué)實驗證明，其通過靶向抑制PDCD4表達促進NPC增殖。除人類miRNA外，部分EBV編碼的miRNA（EBV-miRNA）亦可促進NPC發(fā)生和發(fā)展。NPC組織高表達EBV-miRNA-BART8-3p并與遠處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[14];其通過激活NF-κB促進EMT從而促進NPC侵襲和轉(zhuǎn)移[15]。EBV-miR-BART2-5p在NPC中高表達，高表達與遠處轉(zhuǎn)移和預(yù)后差密切相關(guān);體外實驗發(fā)現(xiàn)EBV-miR-BART2-5p通過靶向調(diào)控Rho家族GTP酶 3（RND3）表達，導(dǎo)致ROCK信號通路功能異常，最終引起NPC侵襲和轉(zhuǎn)移[16]。因此，部分miRNA包括EBV-miRNA能促進NPC發(fā)生發(fā)展，他們通過靶向下調(diào)抑癌基因表達，促進細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的相關(guān)信號通路持續(xù)活化，導(dǎo)致NPC發(fā)生和進展。

2.2miRNA靶向調(diào)控癌基因表達抑制NPC發(fā)生和發(fā)展除促進NPC發(fā)生和發(fā)展外，部分miRNA在NPC發(fā)生中起抑癌作用。GAO等[17]研究發(fā)現(xiàn)所有NPC細胞系miR-233表達均下調(diào)，以高轉(zhuǎn)移性細胞系表達下調(diào)尤為明顯;體外實驗證實了miR-233能抑制NPC細胞增殖、EMT、遷移和侵襲，其抑癌作用是通過靶向下調(diào)結(jié)構(gòu)特異性識別蛋白SSRP1表達，抑制EMT而實現(xiàn)的。另一研究發(fā)現(xiàn)miR-424-5P在NPC組織和細胞系中均低表達并且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期呈負相關(guān)，轉(zhuǎn)染miR-424-5p模擬物可抑制NPC細胞增殖、遷移和侵襲;其通過下調(diào) AKT3表達抑制AKT信號通路從而抑制NPC發(fā)生和發(fā)展[18]。miRNA-296-5p可通過逆轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化生長因子-β誘導(dǎo)的EMT抑制NPC細胞轉(zhuǎn)移和侵襲[19];miRNA-379-5p/YBX1軸調(diào)節(jié)NPC細胞EMT抑制NPC細胞的侵襲和遷移[20]。新近研究發(fā)現(xiàn)miR-206作為抑癌基因參與了多種人類惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展[21～25]。在NPC細胞中，miR-206顯著下調(diào)細胞周期促進基因周期素依賴激酶9（CDK9）的表達，導(dǎo)致細胞活性降低，細胞生長受抑制，遷移和侵襲能力減弱并誘導(dǎo)細胞凋亡[26]。研究還發(fā)現(xiàn)miRNA-331-3p在NPC組織和細胞系中表達明顯降低;NPC細胞外源性過表達miRNA-331-3p導(dǎo)致細胞增殖和侵襲轉(zhuǎn)移受抑制，細胞凋亡增加;其通過靶向下調(diào)真核細胞翻譯起始因子4B（eIF4B）的表達，抑制PI3K-AKT信號通路而抑制NPC進展[27]。NPC細胞低表達miR-375，高表達丙酮酸脫氫酶激酶1（PDK1），兩者表達水平呈負相關(guān); miR-375通過靶向抑制PDK1從而抑制NPC細胞的增殖和侵襲[28]。鼻咽癌組織和細胞系低表達 miR-204，高表達趨化因子受體CXCR4，兩者表達呈負相關(guān);miR-204通過靶向CXCR4調(diào)控NF-κB信號通路活性抑制鼻咽癌增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移[29]。miR-34a在鼻咽癌組織中低表達，鼻咽癌細胞外源性過表達miR-34a抑制了細胞遷移和侵襲力，其通過抑制AKT信號通路抑制鼻咽癌侵襲和轉(zhuǎn)移[30]。因此，部分miRNA在NPC發(fā)生發(fā)展過程中起抑癌作用，其抑癌功能是通過靶向下調(diào)癌基因表達導(dǎo)致相關(guān)信號通路受抑制從而抑制腫瘤進程。NPC組織中抑癌miRNA表達下調(diào)促進NPC增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。

3展望

miRNA表達失衡參與了NPC發(fā)生和發(fā)展。miRNA通過靶向調(diào)控細胞內(nèi)癌基因或抑癌基因表達從而激活或抑制相關(guān)信號通路，進而促進或抑制NPC進程。研究已證實與NPC密切相關(guān)的miRNA眾多，哪些 miRNA是NPC的啟動基因？他們在早期診斷NPC的價值如何？尚待進一步研究。

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（收稿日期：2021-06-23修回日期：2021-08-04）

（編輯：梁明佩）