多重PCR在急診創(chuàng)傷后膿毒癥患者病原體檢測(cè)中的應(yīng)用*

王真珍，李璐，唐蘇予（鄭州市第七人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，河南 鄭州450000）

膿毒癥是對(duì)感染反應(yīng)失調(diào)導(dǎo)致的器官功能障礙綜合征，臨床表現(xiàn)為寒戰(zhàn)，高熱、心慌、氣促等，可導(dǎo)致器官功能不全和機(jī)體循環(huán)障礙，病死率很高［1，2］。細(xì)菌、真菌、病毒及寄生蟲等都可引起感染，造成膿毒血癥［3］。膿毒血癥的發(fā)生常見于嚴(yán)重創(chuàng)傷或有嚴(yán)重感染性疾病的患者［4］。對(duì)于膿毒血癥的治療，臨床上需積極給予液體復(fù)蘇、以控制感染為主，對(duì)癥治療，用藥方案需根據(jù)患者的感染菌群來(lái)制定［5，6］。急診創(chuàng)傷后膿毒癥患者起病急、發(fā)展快，需快速確定用藥方案，而常規(guī)血培養(yǎng)速度慢，不能滿足目前的需求。多項(xiàng)研究表明［7］，多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）能快速測(cè)出病原體，對(duì)臨床用藥給予早期指導(dǎo)。本研究探討多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）在急診創(chuàng)傷后膿毒癥患者病原體檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年3月～2021年3月在本院確診的80例急診創(chuàng)傷后膿毒癥患者設(shè)為膿毒血癥組，其中男48例、女32例；年齡18～50（33.98±7.43）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合膿血癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)［8］；并因急診創(chuàng)傷入院伴全身炎性反應(yīng)。選取同期80例健康體檢人群的血液標(biāo)本作為對(duì)照組，其中男50例、女30例，年齡18～50（33.99±7.42）歲。兩組年齡、性別等一般資料比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，患者及家屬了解并知情同意。

1.2 方法 所有入試者均采用一次性抗凝管抽取肘靜脈外周血5ml，分為兩部分，一部分行血培養(yǎng)，一部分行多重PCR進(jìn)行血液病原體檢測(cè)。血培養(yǎng)采用珠海迪爾生物工程有限公司的全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)，貨號(hào)為DL002。多重PCR試劑盒均采自于廣州英贊生物科技有限公司。

1.3 臨床觀察指標(biāo) 比較兩種方法的敏感度、特異度及檢測(cè)速度和病原體種類檢測(cè)的差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料以±s表示，行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血培養(yǎng)和多重PCR檢測(cè)陽(yáng)性率比較 兩種檢測(cè)方法對(duì)于對(duì)照組均未檢出陽(yáng)性；對(duì)于膿毒血癥組，血培養(yǎng)檢測(cè)陽(yáng)性62例，陽(yáng)性率為77.50%，多重PCR檢測(cè)陽(yáng)性72例，陽(yáng)性率為90.00%，多重PCR的檢測(cè)陽(yáng)性率高于血培養(yǎng)（P＜0.05）。見表1。

表1 血培養(yǎng)和多重PCR的檢測(cè)陽(yáng)性率比較［n（%）］

2.2 兩種方法檢測(cè)時(shí)間比較 血培養(yǎng)檢測(cè)時(shí)間為29.63±1.32h，多重PCR檢測(cè)時(shí)間為5.98±0.48h，多重PCR的檢測(cè)時(shí)間少于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.3 多重PCR檢測(cè)效能 多重PCR檢測(cè)的靈敏度為98.39%，特異度為27.78%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為0.824，陰性預(yù)測(cè)值為0.833。見表2。

表2 多重PCR檢測(cè)效能（%）

2.4 病原菌分布 在血培養(yǎng)檢出的62例陽(yáng)性病例中檢出金黃色葡萄球菌26株（41.94%）、銅綠假單胞菌14株（22.58%）、表皮葡萄球菌10株（16.13%）、鮑曼不動(dòng)桿菌12株（19.35%），在多重PCR檢測(cè)中可檢測(cè)出以上菌群的DNA。

3 討論

膿毒癥是由各種類型的創(chuàng)傷和感染引起的局部或全身的炎癥反應(yīng)，可發(fā)展為嚴(yán)重膿毒癥和膿毒性休克，導(dǎo)致器官功能衰竭和機(jī)體循環(huán)障礙，對(duì)患者的生命造成很大的威脅，且醫(yī)療經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)重［9，10］。因此，對(duì)患者的積極對(duì)癥治療很重要。臨床上在急診使用時(shí)一般采用廣譜抗菌藥物來(lái)進(jìn)行預(yù)防治療，效果不佳，且極易引發(fā)耐藥菌的出現(xiàn)，為后續(xù)治療增加難度。臨床上常用的檢查方法為生化指標(biāo)的檢測(cè)和血培養(yǎng)，但生化指標(biāo)容易受到外在因素的影響，而血培養(yǎng)作為檢測(cè)病原菌群的金標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)周期長(zhǎng)，不能及時(shí)反饋［11］。近年來(lái)，多重PCR在感染疾病中的檢測(cè)的運(yùn)用越來(lái)越廣泛，且在檢測(cè)中的效果較好［12］。本研究選取80例因急診創(chuàng)傷后導(dǎo)致的膿毒癥患者，比較了血培養(yǎng)和多重PCR在檢測(cè)膿毒癥患者的敏感度、特異度及檢測(cè)速度，為臨床選擇檢測(cè)方法作出參考。

本研究結(jié)果顯示，兩種檢測(cè)方法對(duì)于對(duì)照組均未檢出陽(yáng)性；對(duì)于膿毒血癥組，血培養(yǎng)檢測(cè)陽(yáng)性62例，陽(yáng)性率為77.50%，多重PCR的檢測(cè)陽(yáng)72例，陽(yáng)性率為90.00%，多重PCR的檢測(cè)陽(yáng)性率高于血培養(yǎng)，說(shuō)明多重PCR在膿毒癥患者的檢測(cè)中，陽(yáng)性率較血培養(yǎng)的高。研究結(jié)果顯示，血培養(yǎng)檢測(cè)時(shí)間為29.63±1.32h，多重PCR的檢測(cè)時(shí)間為5.98±0.48h，多重PCR的檢測(cè)時(shí)間少于對(duì)照組，應(yīng)建飛等［13］研究指出，多重PCR的檢測(cè)速度比血培養(yǎng)快，且多重PCR能檢出患者血培養(yǎng)標(biāo)本中的病原體，特別是對(duì)已經(jīng)抗生素治療的患者，可減少漏檢，提高感染的診斷率。本研究結(jié)果也顯示，多重PCR檢測(cè)的靈敏度較高，且在血培養(yǎng)檢測(cè)出的病原體菌落，多重PCR均可檢出相應(yīng)的菌種DNA。

綜上所述，多重PCR在急診創(chuàng)傷后膿毒癥患者病原體檢測(cè)中具有較高的靈敏度，檢測(cè)時(shí)間較血培養(yǎng)短，可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)病原體進(jìn)行快速檢測(cè)，對(duì)臨床用藥方案給予指導(dǎo)。