乳腺癌彩色多普勒血流成像與雌激素受體、人表皮生長因子受體 2、p53和Ki-67的相關(guān)性分析

張鵬飛，王茂，冉兵#

陜西中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院1超聲科，2腫瘤乳腺外科，陜西 咸陽 712000

乳腺癌是臨床婦科上常見的一種惡性疾病，近年來，其發(fā)病率呈不斷增高趨勢，所以早期診斷治療對乳腺癌患者具有的重要意義。超聲、X線檢查、CT等影像學手段是臨床診斷乳腺癌的主要方法，其中超聲因操作簡便、可重復性強成為首選篩查手段，尤其是高頻彩色多普勒血流成像（color Doppler flow imaging，CDFI）。在腫瘤發(fā)展過程中，分子生物具有重要意義，可在一定程度上影響腫瘤的形態(tài)、惡性程度等，進而影響其影像學征象。國內(nèi)外文獻發(fā)現(xiàn)，雌激素受體（estrogen receptor，ER）、人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）、p53及Ki-67等免疫組織化學指標與乳腺癌診治、預后關(guān)系密切。本研究旨在探討乳腺癌CDFI征象與ER、HER2、p53及Ki-67的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年9月至2020年12月陜西中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院收治的乳腺癌患者。納入標準：①經(jīng)病理組織學檢查確診為乳腺癌；②無超聲檢查禁忌證；③未進行放療、化療等治療；④臨床資料完整。排除標準：①孕婦；②伴精神性疾病，有意識、溝通障礙；③合并其他臟器惡性腫瘤、器官衰竭等嚴重疾?。虎馨檠h(huán)功能嚴重障礙、肝腎功能嚴重損傷。根據(jù)納入與排除標準，本研究共納入76例乳腺癌患者，其中年齡26～86歲，平均（44.33±8.24）歲。

1.2 檢查方法

1.2.1 超聲檢查 選用西門子彩色多普勒超聲診斷儀，頻率為9～11 MHz的線陣探頭。患者均充分暴露胸部和腋窩，行常規(guī)二維超聲多切面掃描，觀察病灶回聲、位置、大小等情況，利用CDFI觀察血流情況。

1.2.2 免疫組織化學法 取乳腺癌患者手術(shù)切除24 h內(nèi)的乳腺癌組織，使用4%甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm連續(xù)厚切片。免疫組織化學染色鏈霉抗生物素蛋白-過氧化物酶（streptavidin-peroxidase，SP）法檢測ER、HER2、p53、Ki-67，分別用兔抗人ER及鼠抗人HER2、p53、Ki-67單克隆抗體，染色試劑購自福建邁新生物科技制劑公司。根據(jù)陽性細胞百分比、染色強度評分進行染色結(jié)果判斷，其中陽性細胞百分比評分：無陽性細胞為0分，＜10%為1分，10%～50%為2分，＞50%為3分；染色強度評分：無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。陽性細胞百分比評分與染色強度評分的乘積為總分，總分≥3分即判斷為陽性。

1.3 觀察指標

觀察患者的CDFI特征（腫瘤直徑、邊緣毛刺征、微鈣化、血流分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、后方回聲衰減），并分析其與ER、HER2、p53及Ki-67表達的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 ER、HER 2、 p53及Ki-67的陽性表達情況

乳腺癌患者ER、HER2、p53及Ki-67陽性表達率分別為 73.68%（56/76）、60.53%（46/76）、48.68%（37/76）、40.79%（31/76），其中ER陽性表達率最高，Ki-67陽性表達率最低。

2.2 不同超聲特征的乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER 2、 p53及Ki-67陽性表達率的比較

不同腫瘤直徑、后方回聲衰減情況的乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER2、p53及Ki-67陽性表達率比較，差異均無統(tǒng)計學意義（

P

＞0.05）。有邊緣毛刺征、血流分級為0～1級、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者乳腺癌組織中ER陽性表達率均高于無邊緣毛刺征、血流分級為2～3級、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學意義（

χ

=29.545、8.924、30.456，

P

＜0.05）。有微鈣化、血流分級為2～3級、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者乳腺癌組織中HER2陽性表達率均高于無微鈣化、血流分級為0～1級、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學意義（

χ

=29.690、57.199、16.374，

P

＜0.05）。血流分級為2～3級、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者乳腺癌組織中p53及Ki-67陽性表達率均高于血流分級為0～1級、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學意義（

χ

=17.620、4.699，

χ

=29.127、8.440，

P

＜0.05）。（表1）

表1 不同超聲特征的乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER 2、 p53及Ki-67陽性表達情況（ n=76）

2.3 不同超聲特征與乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER 2、 p53及Ki-67陽性表達的相關(guān)性分析

乳腺癌患者乳腺癌組織中ER陽性表達與腫瘤邊緣毛刺征、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)（

P

＜0.05），與血流分級呈負相關(guān)（

P

＜0.05），而與腫瘤直徑、微鈣化、后方回聲衰減均無相關(guān)性（

P

＞0.05）。乳腺癌患者乳腺癌組織中HER2陽性表達與腫瘤微鈣化、血流分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)（

P

＜0.05），而與腫瘤直徑、邊緣毛刺征、后方回聲衰減均無相關(guān)性（

P

＞0.05）。乳腺癌患者乳腺癌組織中p53、Ki-67陽性表達與血流分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)（

P

＜0.05），而與腫瘤直徑、邊緣毛刺征、微鈣化、后方回聲衰減均無相關(guān)性（

P

＞0.05）。（表2）

表2 不同超聲特征與乳腺癌患者乳腺癌組織中ER、HER 2、 p53及Ki-67陽性表達的相關(guān)性分析

3 討論

腫瘤細胞生物學行為與其分子生物學之間存在一定的聯(lián)系，對腫瘤的影像學特征有不同程度的影響，ER、HER2、p53及Ki-67等是目前臨床上評估乳腺癌生物學行為的常見標志物。故認為，上述指標表達情況與乳腺癌超聲特征可能存在某種聯(lián)系。

ER是調(diào)節(jié)細胞生長發(fā)育的雌激素受體，可刺激乳腺管生長。相關(guān)研究證實，腫瘤細胞的分化程度較高時，ER陽性表達率會提高，此時進行內(nèi)分泌治療會達到很好的治療效果，預后亦較好。本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌腫瘤直徑與ER表達無明顯相關(guān)性。由此可見，惡性腫瘤直徑并不隨其惡性程度升高而增加。而伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及毛刺征者ER陽性表達率更高，且相關(guān)性分析顯示，ER表達與上述特征具有一定相關(guān)性，說明伴邊緣毛刺征、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者ER陽性表達率較高，腫瘤生長依舊受激素調(diào)控，適合進行內(nèi)分泌治療。于喜法等指出，乳腺癌腫瘤伴邊緣毛刺征，ER陽性表達率更高，可預示腫瘤侵襲性行為低，臨床治療效果好，預后更佳。HER2是人體表皮生長因子之一，主要參與細胞生長、增殖及分化等過程，可作為預測腫瘤預后的指標之一。靳鳳梅等報道發(fā)現(xiàn)，乳腺原位癌鈣化常見于HER2的過度表達，HER2無表達時，多無鈣化。本研究中HER2陽性表達者伴微鈣化率顯著高于無微鈣化者，且微鈣化與HER2陽性表達呈正相關(guān)，與上述報道相符。

p53

是一種抑癌基因，其失活對腫瘤形成起重要作用，

p53

基因突變與乳腺癌的發(fā)生密切相關(guān)。溫瑜鵬等發(fā)現(xiàn)，p53陽性表達與乳腺癌直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定關(guān)系。但本研究結(jié)果顯示，p53與乳腺癌直徑無關(guān)，與文獻報道不符，推測可能與操作者技術(shù)、納入樣本量等因素有關(guān)。Ki-67是一種核抗原，Ki-67陽性表達率高者腫瘤細胞惡性程度高，侵襲性強，預后較差。本研究結(jié)果顯示，伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Ki-67陽性表達率顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是目前公認的預測乳腺癌預后的一個關(guān)鍵指標，而Ki-67的表達可導致細胞有絲分裂增強，進而增加腫瘤發(fā)生其他臟器轉(zhuǎn)移的風險。

乳腺癌是典型的血管依賴性病變，乳腺癌新生血管的存在是CDFI顯像的病理學基礎(chǔ)。從乳房腫瘤CDFI血流豐富程度來看，惡性程度多為2～3級，良性多為0～1級。本研究結(jié)果顯示，ER陽性表達者0～1級者多，而HER2、p53、Ki-67陽性表達者以2～3級居多，相關(guān)性結(jié)果亦顯示，血流分級與ER陽性表達呈負相關(guān)，與HER2、p53、Ki-67均呈正相關(guān)，提示ER低表達，HER2、p53、Ki-67高表達者臨床治療效果、預后可能更差。

綜上所述，乳腺癌患者CDFI征象與ER、HER2、p53及Ki-67陽性表達存在一定的相關(guān)性，在預測乳腺癌生物學特性中具有一定指導價值。