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    蛛網膜下腔出血術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液CXCL13,IP-10水平表達及臨床意義

    2021-12-14 06:08:56趙東肖宋良月沈陽市第四人民醫(yī)院老年醫(yī)學中心遼寧沈陽110000
    現代檢驗醫(yī)學雜志 2021年6期
    關鍵詞:腦膜炎腦脊液計數

    趙東肖,宋良月(沈陽市第四人民醫(yī)院老年醫(yī)學中心,遼寧沈陽 110000)

    蛛網膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)術后腦膜炎是非常危急的術后并發(fā)癥,其發(fā)生率低,但卻顯著增加患者病殘率及死亡率[1]。目前,學者認為腦膜炎發(fā)病與機體感染、免疫調節(jié)、炎癥反應等因素相關[2-3]。趨化因子CXC 配體13(chemokine CXC ligand 13,CXCL13) 屬于CXC 趨化因子家族,其可活化淋巴細胞、招募免疫細胞、激活炎癥反應[4]。有關研究顯示,CXCL13 在多發(fā)性硬化癥患者中水平異常,其可能在疾病發(fā)展進程中發(fā)揮重要作用,CXCL13 有助于評估患者病情[5]。另有報道顯示,γ-干擾素誘導蛋白10(interferon-γ inducible protein 10,IP-10)是由脂多糖/γ-干擾素誘導產生的趨化因子,其在病毒性腦膜炎中顯著升高,IP-10 可能在疾病發(fā)展過程中起一定作用[6]。但CXCL13 和IP-10 在SAH 術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液中的水平及其對并發(fā)腦膜炎的診斷價值尚未發(fā)現有關報道。基于此,本研究通過檢測SAH 術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液CXCL13 和IP-10 水平,分析其臨床意義,以期為臨床早期診治術后并發(fā)腦膜炎提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 研究對象 本研究為回顧性研究,選取2015年12月~2019年12月沈陽市第四人民醫(yī)院收治的SAH 患者134 例為研究對象。SAH 診斷標準:參考2012年美國心臟協(xié)會/美國中風協(xié)會制定的《動脈瘤性蛛網膜下腔出血的診療指南》[7]有關SAH相關判定標準進行診斷。納入標準:①患者均符合SAH 有關診斷標準;②患者均進行開顱手術;③患者均無腰椎穿刺禁忌癥者;④患者或其直系親屬簽署知情同意書。排除標準:①既往存在顱內代謝疾病史、顱腦外傷史者;②既往或術后患有癲癇病史者;③術后出現循環(huán)功能障礙、呼吸障礙、腦血管痙攣癥狀者;③并發(fā)其他部位感染者;④無法判定是否為細菌性腦膜炎者。

    根據腦膜炎診斷標準[8]將患者分為未并發(fā)腦膜炎組(67 例)和并發(fā)腦膜炎組(67 例)。未并發(fā)腦膜炎組中男性41 例,女性26 例,年齡34~73 歲,平均年齡51.90±12.72 歲;并發(fā)冠心病者4 例,并發(fā)高血壓者22 例,并發(fā)糖尿病者4 例。并發(fā)腦膜炎組中男性36 例,女性31 例,年齡33~75 歲,平均年齡52.64±12.95 歲;并發(fā)冠心病者6 例,并發(fā)高血壓者24 例,并發(fā)糖尿病者7 例,且經細菌培養(yǎng)鑒定為細菌性腦膜炎患者。未并發(fā)腦膜炎組與并發(fā)腦膜炎組男女比例、年齡、并發(fā)基礎病比例比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。

    所有研究對象或其直系親屬或家屬知情同意,且本研究符合《赫爾辛基宣言》,獲得了沈陽市第四人民醫(yī)院倫理委員會批準。

    1.2 試劑與儀器 人 CXCL13 酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)試劑盒(貨號:YM-SZ0288)購于上海遠慕生物科技有限公司;人IP-10 ELISA 試劑盒(貨號:XLPCC)購于上海鑫樂生物科技有限公司。多功能酶標儀(型號:EnVision)購于珀金埃爾默企業(yè)管理(上海)有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 樣本采集: 兩組受試者在開顱手術后行腰椎穿刺/腰大池置管外引流術,收集2~3ml 腦脊液,3 500r/min 離心10min,取上清液,于-20℃冰箱中保存,待檢。

    1.3.2 ELISA 法檢測腦脊液CXCL13,IP-10 水平: 按照人CXCL13,IP-10 ELISA 試劑盒說明書配制一系列濃度標準品,以酶標儀檢測不同濃度標準品在450nm 處的吸光度,繪制CXCL13,IP-10 的標準品回歸曲線。取適量凍存腦脊液樣本,解凍,測定樣本在450nm 處的吸光度值,依據標準回歸曲線計算腦脊液CXCL13 和IP-10 濃度。

    1.4 統(tǒng)計學分析 利用SPSS 25.0 軟件分析數據。符合正態(tài)分布的計量數據以均數±標準差(±s)表示,組間比較行獨立樣本t檢驗;非正態(tài)分布的計量數據以中位數(四分位數間距)表示,行Mann-WhitneyU檢驗;計數資料以頻數n表示,組間比較行χ2檢驗;以Pearson 相關性分析法分析SAH 術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液CXCL13 水平與IP-10 的關系;以ROC 曲線評價腦脊液CXCL13和IP-10 聯合預測SAH 術后并發(fā)腦膜炎的價值;Logistic 回歸分析影響SAH 患者術后并發(fā)腦膜炎的因素。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結果

    2.1 各組腦脊液CXCL13,IP-10 水平及實驗室指標比較 見表1。與未并發(fā)腦膜炎組相比,并發(fā)腦膜炎組患者腦脊液CXCL13,IP-10 水平及白細胞計數、蛋白含量、乳酸含量均升高,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。

    表1 兩組腦脊液CXCL13,IP-10 及實驗室指標水平比較(±s)

    表1 兩組腦脊液CXCL13,IP-10 及實驗室指標水平比較(±s)

    指 標 未并發(fā)腦膜炎組(n=67) 并發(fā)腦膜炎組(n=67) t/Z P CXCL13(pg/ml) 224.92±84.05 485.73±171.90 11.157 <0.001 IP-10(ng/L) 275.08±95.33 587.49±182.45 12.422 <0.001白細胞計數(×106/L) 66.23(15.03, 142.78) 575.96(72.84, 994.64) 32.379 <0.001蛋白含量(g/L) 1.32±0.42 1.98±0.59 7.459 <0.001乳酸含量(mmol/L) 3.48±1.06 6.26±1.75 11.122 <0.001

    2.2 SAH 術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液CXCL13 水平與IP-10 的相關性 見圖1。Pearson 法分析顯示,SAH 術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液CXCL13 水平與IP-10 呈正相關(r=0.471,P<0.05)。

    圖1 術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液CXCL13 水平與 IP-10 的關系

    2.3 腦脊液CXCL13 和IP-10 水平對SAH 術后并發(fā)腦膜炎的診斷價值 見圖2。ROC 曲線顯示,腦脊液CXCL13 對SAH 術后并發(fā)腦膜炎診斷的曲線下面積(area under curve,AUC) 為0.855(95%CI:0.788~0.922),截斷值為327.84 pg/ml,約登指數為0.642,其靈敏度、特異度分別為80.6%,83.6%;腦脊液IP-10 對SAH 術后并發(fā)腦膜炎的AUC 為0.862(95%CI:0.797~0.928),截斷值為451.43 ng/L,約登指數為0.642,其靈敏度、特異度分別為74.6%和89.6%;兩者聯合診斷SAH 術后并發(fā)腦膜炎的AUC 為0.914(95%CI:0.862~0.966),約登指數為0.777,其靈敏度、特異度分別為89.6%,88.1%。

    圖2 腦脊液CXCL13,IP-10 水平診斷SAH 術后并發(fā)腦膜炎的ROC 曲線

    2.4 影響SAH 患者術后并發(fā)腦膜炎的Logistic 回歸分析 見表2。以SAH 患者是否并發(fā)腦膜炎為因變量,以白細胞計數、蛋白含量、乳酸含量、CXCL13 和IP-10 水平為自變量,行Logistic 回歸分析,結果顯示,白細胞計數、CXCL13,IP-10是影響SAH 患者術后并發(fā)腦膜炎的危險因素(P<0.05)。

    表2 Logistic 回歸分析SAH 患者術后并發(fā) 腦膜炎的影響因素

    3 討論

    SAH 進行開顱手術治療后,可能會引起術后感染,進而繼發(fā)腦膜炎。術后腦膜炎是患者術后出現意識障礙、發(fā)生癲癇的重要原因,嚴重時可導致患者死亡,對患者生命安全構成極度威脅[9]。此外,臨床多利用體征、臨床癥狀、腦脊液相關實驗室指標判定腦膜炎,但顱腦手術后,患者體征、臨床癥狀發(fā)生非特異性改變,刺激、出血等因素可影響腦脊液蛋白含量、白細胞水平[10],導致術后腦膜炎難以診斷,因此,尋找可早期評估SAH 術后發(fā)生腦膜炎的指標,及時監(jiān)控,是臨床診治開顱術后腦膜炎的關鍵環(huán)節(jié)。

    CXCL13 在大腦中主要分布于星形膠質細胞及神經元的細胞質、細胞膜,其可通過與其特異性體C-X-C 趨化因子受體5(C-X-C chemokine receptor type 5,CXCR5)結合進而調控海馬神經干細胞增殖、分化及凋亡[11];CXCL13 作為重要免疫炎癥反應因子,參與多發(fā)性硬化癥、原發(fā)性中樞神經系統(tǒng)淋巴瘤、癲癇、腦脊髓膜炎、腦膜炎等中樞神經系統(tǒng)疾病[12-13]。動物學研究顯示,CXCL13 可能通過影響海馬神經發(fā)生,進而參與并影響相關性腦病[14]。國外報道顯示,CXCL13 在神經萊姆病兒童腦脊液中水平異常,其可能在疾病發(fā)展中具有重要作用,CXCL13 具有輔助診斷神經萊姆病的潛在價值[15]。此外,LI 等[16]研究發(fā)現CXCL13 在頑固性顳葉癲癇患者中表達上調,CXCL13/CXCR5 信號通路可能通過參與炎癥反應,從而促進癲癇發(fā)作。以上研究表明,CXCL13 水平異??赡芘c中樞神經疾病有關,其可反映腦脊液炎癥狀態(tài)。本研究中并發(fā)腦膜炎組患者腦脊液CXCL13 水平明顯高于未并發(fā)腦膜炎組,提示CXCL13 可能在SAH 術后并發(fā)腦膜炎過程中起重要作用,推測可能原因,高水平CXCL13 可能與CXCR5 相結合,通過激活炎癥反應,促進SAH 術后發(fā)生腦膜炎。此外,本文中腦脊液CXCL13 診斷SAH 術后并發(fā)腦膜炎的AUC 為0.855,當CXCL13 水平>327.84 pg/ml 時,SAH 術后并發(fā)腦膜炎的幾率增加,提示腦脊液CXCL13 對SAH 術后并發(fā)腦膜炎有一定診斷價值,測定腦脊液CXCL13 水平有助于判定SAH 患者術后是否并發(fā)腦膜炎。

    IP-10 是趨化因子CXC 亞家族成員之一,其可趨化單核細胞等多種炎癥細胞,募集炎性細胞浸潤,促進多種細胞因子分泌,與炎癥反應性疾病密切相關[17-18]。動物學研究顯示,IP-10 在癲癇中呈異常水平,其可能參與并影響癲癇發(fā)病過程[19]。研究發(fā)現,IP-10 在腦膜炎等中樞神經系統(tǒng)感染患者中水平升高,其水平變化可能與神經毒性色氨酸代謝產物相關,IP-10 在腦膜炎炎癥反應中具有潛在作用[20]。以上研究證實,異常水平的IP-10 可能與中樞神經系統(tǒng)炎癥性疾病關系密切。本研究中并發(fā)腦膜炎組患者腦脊液IP-10 水平明顯高于未并發(fā)腦膜炎組,提示IP-10 可能參與SAH 術后腦膜炎發(fā)展過程,究其原因,高水平IP-10 可能通過募集炎性細胞浸潤,增加炎性介質釋放,促進腦部炎癥反應,進而促進SAH 術后并發(fā)腦膜炎。本研究顯示,腦脊液IP-10 診斷SAH 術后并發(fā)腦膜炎的AUC 為0.862,當IP-10 水平>451.43 ng/L 時,SAH 患者術后并發(fā)腦膜炎風險較大,IP-10 有望成為臨床診斷SAH 患者術后并發(fā)腦膜炎的輔助指標。

    本研究中SAH 術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液CXCL13 水平與IP-10 呈正相關,提示CXCL13 可能與IP-10 相互影響,進而共同影響SAH 術后并發(fā)腦膜炎進程,但具體影響機制需進一步研究證實。進一步研究顯示,CXCL13 和IP-10 聯合診斷SAH術后并發(fā)腦膜炎的AUC 為0.914,相應靈敏度為89.6%,特異度為88.1%,提示兩者聯合可一定程度提高對SAH 術后并發(fā)腦膜炎診斷的靈敏度,增加對SAH 術后并發(fā)腦膜炎的診斷效能,可更好地篩查術后并發(fā)腦膜炎患者。此外,本文中白細胞計數、CXCL13 和IP-10 是影響SAH 患者術后并發(fā)腦膜炎的危險因素,提示白細胞計數、CXCL13 和IP-10水平升高均會增加SAH 術后并發(fā)腦膜炎的風險,及時監(jiān)控腦脊液白細胞計數、CXCL13 和IP-10 水平有助于判定SAH 患者術后并發(fā)腦膜炎的風險。

    綜上,SAH 術后并發(fā)腦膜炎患者腦脊液CXCL13 和IP-10 水平均顯著升高,兩者可能均在術后發(fā)生腦膜炎過程中起作用,兩者聯合可提高對術后并發(fā)腦膜炎的診斷價值,有一定臨床參考價值。但本研究未探究CXCL13 和IP-10 在術后并發(fā)腦膜炎的作用機制,后期將進行深入研究。

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