中藥仙鶴草抗腫瘤作用研究進(jìn)展

李 麟 綜述，劉華寶 審校

(重慶市中醫(yī)院肝病科，重慶 400021)

仙鶴草(AgrimoniapilosaLedeb.)別名龍芽草、脫力草、狼牙草等，是薔薇科龍芽草的干燥地上部分。最早見于《淮南草本》，其性微甘、平，味苦、澀，歸肺、肝、脾、大腸經(jīng)，具有收斂止血、補(bǔ)虛強(qiáng)壯之功效?！端幮愿栀x》載：“仙鶴草澀，收斂補(bǔ)虛，出血可止，勞傷能愈”。《本草綱目》載：本品治“癥瘕血瘕”?！端庣R·拾遺賦》曰：“滾咽膈之痰，平翻胃之噦”“誰人認(rèn)得石打穿(仙鶴草)……穿腸穿胃能攻堅(jiān)，采掇莖葉搗汁用，蔗漿白酒佐使全，噎膈飲之痰立化，津咽平復(fù)功最先”。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)仙鶴草具有止血活血[1]、抗炎抗氧化[2-4]、抗腫瘤及調(diào)節(jié)血糖[5-6]等作用。

中醫(yī)藥在防治惡性腫瘤方面具有一定的優(yōu)勢，并在近年的研究中取得了一定的進(jìn)展。目前臨床上常用于抗腫瘤的中草藥及提取成分包括姜黃素、白藜蘆醇、黃芩苷、紫杉烷類化合物等，它們能夠通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、增加腫瘤細(xì)胞對化療藥物的敏感性、增強(qiáng)免疫細(xì)胞功能等方式發(fā)揮抗腫瘤作用。近年研究發(fā)現(xiàn)仙鶴草具有抗腫瘤的作用，并在其抗腫瘤機(jī)制的研究方面取得了一定的進(jìn)展，現(xiàn)就仙鶴草抗腫瘤的臨床應(yīng)用及抗腫瘤機(jī)制作一綜述。

1 仙鶴草抗腫瘤臨床應(yīng)用

中醫(yī)認(rèn)為多種因素綜合作用于機(jī)體，導(dǎo)致臟腑虛虧，為腫瘤發(fā)病的先決條件。腫瘤患者常有氣血虧虛、氣滯血瘀，而仙鶴草可補(bǔ)虛扶正、化瘀散結(jié)。早在明代，就有醫(yī)學(xué)家將仙鶴草用于治療食道癌、胃癌等，如蔣儀在《藥鏡·拾遺賦》中記載：“滾咽膈之痰，平翻胃之噦”?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，仙鶴草主要通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，改善患者癥狀、減輕化療不良反應(yīng)，從而起到抑癌、減毒增效的作用。因此，仙鶴草因其“抑癌”“減毒”“扶正”之功效可成為抗腫瘤治療的用藥選擇之一。臨床上以仙鶴草為主的復(fù)方對肺癌、胃癌、腸癌、肝癌及乳腺癌早期等都有一定的抗腫瘤作用。

1.1肺部腫瘤 仙鶴草在臨床治療肺癌中應(yīng)用廣泛，其主要發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞增殖、改善患者癥狀、提高生存質(zhì)量及增效減毒等作用。肺癌患者氣陰兩虛、氣血兩虛或肺虛絡(luò)損時(shí)，中藥復(fù)方中常加用仙鶴草。沈水杰[7]在一項(xiàng)隨機(jī)對照研究中采用養(yǎng)肺控瘤方(黃芪45 g、生曬參15 g、北沙參30 g、白花蛇舌草30 g、仙鶴草30 g、薏苡仁30 g)為核心的中藥聯(lián)合化療[含鉑兩藥方案全身化療，AP(培美曲塞+順鉑)、DP(多西他賽+順鉑)、GP(吉西他濱+順鉑)，4個(gè)周期，每3周1次，后予單藥培美曲塞、多西他賽、吉西他濱維持2個(gè)周期，每4周1次，療程5個(gè)月]治療晚期非小細(xì)胞肺癌30例，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療在改善氣急癥狀、生存質(zhì)量評分、1年生存率、2年生存率、減輕化療毒副反應(yīng)、降低腫瘤指標(biāo)水平等方面具有明顯優(yōu)勢。李俊榮等[8]采用益肺方(魚腥草30 g、山海螺30 g、貓爪草30 g、黨參25 g、浙貝母15 g、天冬15 g、仙鶴草15 g等)治療中晚期非小細(xì)胞肺癌31例，結(jié)果顯示治療組緩解率(83.87%)顯著高于對照組(58.06%)，且治療毒副反應(yīng)明顯減輕，患者生存質(zhì)量得到提高。申剛磊等[9]基于國內(nèi)某三甲中醫(yī)院名中醫(yī)治療肺癌的臨床數(shù)據(jù)，分析發(fā)現(xiàn)仙鶴草的用藥頻次較高，是復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)中的重要藥物。周福等[10]分析整理近20年中國知網(wǎng)收錄的關(guān)于中醫(yī)藥治療肺癌的臨床研究文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)仙鶴草是常用藥物之一，主要發(fā)揮收斂止血的作用。仙鶴草也是國醫(yī)大師路志正治療肺癌處方中使用頻次最高的一味中藥，主要取其散結(jié)消積的作用[11]。以上研究表明，運(yùn)用包含仙鶴草的復(fù)方治療肺癌，可發(fā)揮其“減毒”“增效”之功效，如國醫(yī)大師周仲瑛教授常選用仙鶴草作為抗癌解毒藥，取其活血補(bǔ)虛、抗癌解毒之功效。對周仲瑛教授治療肺癌的病案進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，也發(fā)現(xiàn)包含仙鶴草的組方是其治療肺癌早期術(shù)后、化療后恢復(fù)體質(zhì)、預(yù)防復(fù)發(fā)的基本方藥[12]。

1.2消化道腫瘤 仙鶴草在消化道腫瘤中的應(yīng)用也較廣泛。多項(xiàng)治療消化道腫瘤的臨床研究發(fā)現(xiàn)包含仙鶴草的復(fù)方不僅具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖、調(diào)節(jié)免疫功能等作用，也具有改善血液流變學(xué)指標(biāo)的作用，即其“補(bǔ)虛”“活血”之功效。查鴦嵐[13]采用消癌解毒Ⅲ號(hào)方(白花蛇舌草20 g、仙鶴草15 g、石見穿15 g、法半夏10 g、潞黨參15 g等)聯(lián)合化療(SOX方案)治療Ⅳ期胃癌，能顯著提高患者免疫力、生活質(zhì)量、Karnofsky評分，減輕與緩解臨床癥狀。宋富利等[14]在FORFOX4方案化療聯(lián)合胸腺五肽治療結(jié)腸癌的基礎(chǔ)上每天給予患者口服仙鶴草鞣質(zhì)10 g，化療4個(gè)周期后，結(jié)果顯示治療組有效率(73.33%)明顯高于對照組(46.67%)，治療組降低白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)、血紅蛋白、CD4+/CD8+T、CEA、CA199明顯優(yōu)于對照組，表明仙鶴草鞣質(zhì)可明顯改善化療患者的免疫功能。王婷等[15]運(yùn)用四逆散聯(lián)合化痰消瘀湯劑(陳皮10 g、半夏10 g、茯苓15 g、莪術(shù)10 g、炒薏苡仁30 g、雞內(nèi)金10 g、半枝蓮15 g、蛇舌草15 g、仙鶴草15 g等)治療全胃胃炎伴胃癌前病變的患者，可顯著改善患者胃黏膜腺體萎縮、腸上皮化生等改變，提高幽門螺桿菌轉(zhuǎn)陰率，減少膽汁反流。高夢捷[16]采用沙參石斛湯(北沙參20 g、姜竹茹10 g、炒谷芽25 g、仙鶴草15 g、炒白術(shù)15 g、石斛15 g等)聯(lián)合化療(S1單藥、XELOX方案，4周為1個(gè)周期，治療2周)治療40例中晚期胃癌患者，結(jié)果顯示聯(lián)合用藥組可顯著改善患者中醫(yī)證候、KPS評分，對于減輕化療的毒副反應(yīng)也具有一定的效果。國醫(yī)大師徐經(jīng)世常使用自擬“扶正安中湯”(生黃芪、仙鶴草、山藥、石斛、綠梅花等)治療胃癌術(shù)后患者，取仙鶴草止血解毒、補(bǔ)腎不足的功效[17]。全國名中醫(yī)單兆偉在治療消化道腫瘤時(shí)常選用仙鶴草配伍白花蛇舌草、半枝蓮等，單老認(rèn)為祛瘀之法不可攻之過急，當(dāng)意在緩圖，所以運(yùn)用活血化瘀藥物時(shí)，每將仙鶴草與參三七、紫丹參等配伍使用，取其既能活血又能止血之功效，以達(dá)到活血止血的目的。單老認(rèn)為仙鶴草對多種消化系統(tǒng)腫瘤均有明顯的抑殺作用，故凡消化道腫瘤性痰瘤均可在辨證基礎(chǔ)上加用此藥，以提高療效[18]。

1.3其他腫瘤 仙鶴草除了在肺部、消化道腫瘤的治療中被廣泛應(yīng)用，其在乳腺癌等疾病中的應(yīng)用也有報(bào)道，主要取其“減毒”“增效”的功效。丁潔等[19]運(yùn)用扶正抑癌湯(西洋參10 g、靈芝15 g、生黃芪30 g、豬苓30 g、仙鶴草15 g等)治療91例乳腺癌術(shù)后患者，發(fā)現(xiàn)扶正抑癌湯能夠改善乳腺癌患者臨床癥狀評分，降低血清腫瘤標(biāo)志物CEA、CA153和CA125的表達(dá)，并能調(diào)節(jié)CD4+/CD8+T、NK細(xì)胞比例。采用人參、仙鶴草和敗醬草聯(lián)合放化療治療1例51歲女性雙側(cè)乳腺黏液樣癌伴雙側(cè)肺及皮膚轉(zhuǎn)移患者，治療4個(gè)月后血清腫瘤標(biāo)志物降低，癥狀明顯減輕，存活時(shí)間延長，并且無嚴(yán)重程度大于2級(jí)的血液學(xué)不良反應(yīng)發(fā)生[20]。分析名老中醫(yī)米逸穎治療102例乳腺癌的處方用藥特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)其常選用仙鶴草入方，特別是針對手術(shù)、放化療不良反應(yīng)所致腹瀉時(shí)，米老常選用仙鶴草與桔梗連用[21]，仙鶴草這種“增效減毒”的作用為探索和拓展其臨床應(yīng)用提供了新的線索。此外，李旭枝等[22]研究發(fā)現(xiàn)平消膠囊(郁金、仙鶴草、五靈脂、白礬、硝石等)對人甲狀腺癌細(xì)胞株SW579裸鼠移植瘤的生長具有明顯的抑制作用，且呈明顯的量效關(guān)系，而對主要臟器無明顯影響。上述臨床應(yīng)用表明仙鶴草用于治療腫瘤性疾病時(shí)可明顯減輕患者癥狀、提高患者生存質(zhì)量、延長生存時(shí)間并減輕放化療不良反應(yīng)。此外，目前臨床上治療惡性腫瘤時(shí)運(yùn)用活血化瘀中藥尚有爭議，而仙鶴草既能活血又能止血，減少腫瘤血流量、殺傷癌細(xì)胞，而不影響正常血管和細(xì)胞，因此臨床上加用仙鶴草可預(yù)防中草藥“活血”太過之功效。

2 仙鶴草抗腫瘤作用機(jī)制研究

2.1抑制細(xì)胞增殖 仙鶴草主要含有仙鶴草酚、黃酮類、鞣質(zhì)、揮發(fā)油、三萜類、多糖類等成分，實(shí)驗(yàn)研究主要涉及全草提取物、部分活性成分等，可通過多成分、多靶點(diǎn)、多途徑發(fā)揮作用。例如，楊云英等[23]利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的分析方法發(fā)現(xiàn)仙鶴草中的內(nèi)酯類、黃酮類活性成分可能通過HIF-1、PI3K/Akt等多種信號(hào)通路參與治療結(jié)腸癌。而現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，仙鶴草中主要的抗腫瘤活性成分如酚類、黃酮類成分，主要通過抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激等方式發(fā)揮抗腫瘤作用。仙鶴草水提液(1.6 mg/mL)聯(lián)合不同濃度順鉑對肺癌細(xì)胞(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株HCC827、H358、H1650、H1299)有顯著的增殖抑制作用[24]。蔡田恬等[25]發(fā)現(xiàn)仙鶴草水提液可顯著抑制人胰腺癌細(xì)胞株BXPC-3和PANC-1的增殖，且呈現(xiàn)劑量依賴性和時(shí)間依賴性，高濃度的仙鶴草水提液能誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞BXPC-3的凋亡。仙鶴草石油醚提取物對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116、人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231、人前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3的增殖均有抑制作用[26]。田露露等[27]研究發(fā)現(xiàn)仙鶴草不同藥用部位均具有抑制細(xì)胞增殖的作用，且存在明顯差異，其中，仙鶴草莖對人肝癌細(xì)胞株HepG2、人胃癌細(xì)胞株HGC-27和人結(jié)腸癌細(xì)胞株Caco-2的增殖抑制作用明顯強(qiáng)于根、葉和花。以上研究表明仙鶴草中多種成分對腫瘤細(xì)胞具有不同程度的增殖抑制作用，但目前研究主要關(guān)注仙鶴草抑制腫瘤細(xì)胞增殖的效應(yīng)，尚缺乏對仙鶴草調(diào)控細(xì)胞增殖相關(guān)機(jī)制的研究。

2.2誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是目前許多中藥治療腫瘤的主要作用機(jī)制之一，研究顯示仙鶴草中的多種成分主要通過線粒體途徑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。仙鶴草揮發(fā)性成分及主要單體成分棕櫚酸、反式角鯊烯和α-亞麻酸不僅均可顯著抑制HepG2細(xì)胞增殖活性，與對照組相比，還可顯著升高細(xì)胞的早期凋亡和晚期凋亡比例[28]。TENG等[29]研究了仙鶴草內(nèi)酯對不同腫瘤細(xì)胞株的作用，發(fā)現(xiàn)異香豆素類仙鶴草內(nèi)酯僅對人源胃腺癌細(xì)胞株AGS敏感，其IC50為25.9 μmol/L，并且異香豆素類仙鶴草內(nèi)酯濃度大于5 μmol/L時(shí)，對AGS細(xì)胞的增殖呈劑量依賴性抑制作用，而對肝癌、乳腺癌、結(jié)腸癌細(xì)胞株均無明顯抗癌活性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)異香豆素類仙鶴草內(nèi)酯可通過抑制細(xì)胞周期進(jìn)展、調(diào)控Bax/Bcl-2比例、促進(jìn)ERK1/2和p38蛋白磷酸化、活化caspase-3蛋白等途徑來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。從仙鶴草干燥部位中提取的均質(zhì)多糖(25、50 μg/mL和100 μg/mL)能抑制骨肉瘤細(xì)胞株U-2 OS的活力，并通過caspase-3依賴的線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并且這種抑制作用呈劑量依賴性；動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)也表明該均質(zhì)多糖成分對BALB/c裸鼠腫瘤的生長也有抑制作用[30]。張婷婷等[31-32]研究發(fā)現(xiàn)仙鶴草水提物對HepG2細(xì)胞具有增殖抑制作用，且抑制作用呈時(shí)間依賴性和劑量依賴性，這種抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用可能是通過上調(diào)線粒體凋亡通路中Bax、caspase-3的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。

仙鶴草的抗腫瘤、誘導(dǎo)凋亡的活性還與其調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激的能力有關(guān)。將仙鶴草水提液作為還原劑和穩(wěn)定劑后的銀納米粒子快速合成系統(tǒng)可明顯增強(qiáng)該系統(tǒng)對人肺癌細(xì)胞株A549細(xì)胞的生長抑制作用[33]。仙鶴草總黃酮對HepG2、A549和人胃癌細(xì)胞株MKN-45等具有明顯的增殖抑制作用，這種作用可能與其抗氧化活性有關(guān)[34]。在LPS誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激和炎癥模型中，仙鶴草酚類和黃酮類提取物具有清除DPPH等氧自由基、誘導(dǎo)谷胱甘肽過氧化物酶表達(dá)、抑制LPS誘導(dǎo)的炎癥因子釋放的能力[35]。仙鶴草內(nèi)酯可促進(jìn)HepG2細(xì)胞中血紅素分解代謝限速酶HO-1的表達(dá)，減輕過氧化氫引起的細(xì)胞損傷，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)仙鶴草內(nèi)酯可清除氧自由基、活化Nrf2/ARE及下游MAPK信號(hào)通路，從而升高抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)的表達(dá)，仙鶴草內(nèi)酯通過以上機(jī)制調(diào)控HO-1表達(dá)，發(fā)揮抗氧化作用[36]。

2.3其他作用 中藥通常是通過多途徑、多種機(jī)制發(fā)揮作用，仙鶴草不僅能抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，還可通過調(diào)節(jié)免疫、調(diào)節(jié)化療相關(guān)基因表達(dá)等多種機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤作用。宋富利等[14]運(yùn)用化療、胸腺五肽聯(lián)合仙鶴草鞣質(zhì)治療結(jié)腸癌，治療組CD4+/CD8+T、CEA、CA199明顯優(yōu)于對照組，表明加用仙鶴草鞣質(zhì)可明顯改善化療患者的免疫功能。YU等[37]發(fā)現(xiàn)從仙鶴草、敗醬草、龍葵3種中草藥中提取的天然化合物不僅能抑制細(xì)胞生長、誘導(dǎo)凋亡，還能通過下調(diào)化療藥物耐藥相關(guān)基因的表達(dá)來增強(qiáng)5-氟尿嘧啶對直腸癌細(xì)胞株LoVo的細(xì)胞毒作用，這也與臨床應(yīng)用中取其“減毒”之功效相符合。仙鶴草水提液(4 g/kg)還可抑制H22肝癌皮下移植瘤小鼠的腫瘤生長，并通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的分析推測其抗腫瘤作用可能與PI3K/AKT信號(hào)通路、NF-κB信號(hào)通路、JAK/STAT信號(hào)通路等多種途徑相關(guān)[38]。

總之，仙鶴草中各成分發(fā)揮抗腫瘤作用的機(jī)制較復(fù)雜，既可抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，又可調(diào)節(jié)免疫等，其是通過多途徑、多環(huán)節(jié)發(fā)揮作用的，目前大部分研究僅限于對仙鶴草抗腫瘤表型的驗(yàn)證，故尚需深入的機(jī)制和調(diào)控研究。

3 小 結(jié)

通過對仙鶴草臨床應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)研究的回顧，仙鶴草在臨床應(yīng)用中具有“減毒增效”“補(bǔ)虛活血”等作用，其發(fā)揮抗腫瘤的作用主要是通過抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡等方式。然而，目前對仙鶴草發(fā)揮作用的分子機(jī)制尚不清楚，分析尚不夠深入，多數(shù)研究僅限于成分分析及功能驗(yàn)證層面，而缺乏對其抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡等的機(jī)制研究，且大部分研究集中于體外細(xì)胞模型中，缺乏體內(nèi)動(dòng)物模型的驗(yàn)證。對于其臨床應(yīng)用不良反應(yīng)的研究也較少，且仙鶴草臨床研究的病例數(shù)較少，多為經(jīng)驗(yàn)性用藥，療程較短，缺乏嚴(yán)格、統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。在今后的研究中需擴(kuò)大樣本、延長治療周期、規(guī)范研究步驟，并結(jié)合現(xiàn)代藥理學(xué)技術(shù)和方法，為觀察仙鶴草的臨床療效、深化其抗腫瘤的分子研究機(jī)制提供依據(jù)，以更好地指導(dǎo)仙鶴草的臨床應(yīng)用。