紫蘇葉藥理作用研究進(jìn)展

唐飛，馮五文，敖慧

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院西南特色中藥資源國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 611137；2.成都中醫(yī)藥大學(xué) 中醫(yī)藥創(chuàng)新研究院，四川 成都 611137)

紫蘇Perillafrutescens(L.) Britt.為唇形科紫蘇屬植物，是我國(guó)前衛(wèi)生部公布的藥食兩用的60種中藥之一[1]。《本草綱目》記載，其葉、梗、子均可入藥。紫蘇葉解表散寒、行氣和胃；紫蘇梗理氣寬中、止痛安胎；紫蘇子降氣消痰、平喘潤(rùn)腸。研究表明，紫蘇葉含有多種有效成分，如揮發(fā)油類，主要為紫蘇醛、β-石竹烯、芳樟醇等[2]；黃酮類，如芹菜素、木犀草素等[3]；花色苷類，如天竺葵苷、芍藥素-3-葡萄糖苷等[4]；酚酸類，主要為迷迭香酸、咖啡酸[5]；苷類，如紫蘇苷、苯丙素苷等[6]；三萜類，如齊墩果酸、熊果酸[6]；甾體類，如β-谷甾醇、豆甾醇等[6]。紫蘇葉具有廣泛的藥理活性，如抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗炎等。本文就近幾年紫蘇葉藥理作用的研究進(jìn)展作一綜述。

1 抗氧化、抗衰老

大量研究表明，紫蘇葉中提取的花色苷、揮發(fā)油、花青素、多糖、黃酮類和酚酸類物質(zhì)具有良好的抗氧化作用，可開發(fā)為天然的抗氧化劑及食品添加劑；對(duì)抗機(jī)體的氧化衰老也有一定作用。研究表明，紫蘇葉的水提物[7]、醇提物[8-9]、花青素[10]、黃酮[11]、揮發(fā)油[12]均有清除OH-、O2-、DPPH氧化自由基的能力，其水提物和醇提物主要成分為總黃酮、多糖、迷迭香酸類，其中50%甲醇提取物活性最好,可能與提取物中迷迭香酸類成分含量較高有關(guān)[13]。紫蘇葉水提物對(duì)大鼠肝臟氧化損傷具有一定保護(hù)作用，能降低谷胱甘肽和丙二醛(Malonaldehyde,MDA)等氧化應(yīng)激指標(biāo)，減少丁基過(guò)氧化氫(Tert-butyl Hydroperoxide,t-BHP)誘導(dǎo)的肝細(xì)胞變性和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)[14]。蔡寧晨等[15]通過(guò)熒光漂白恢復(fù)法(Fluorescence Bleaching Recovery,FRAP)、清除DPPH和ABTS+試驗(yàn)、ORAC法，發(fā)現(xiàn)紫蘇葉提取物具有良好的抗氧化能力，但其活性部位花色苷類成分具有更好的活性，約為紫蘇葉提取物的兩倍。此外，紫蘇葉總黃酮還有潛在的治療慢性腎病的活性，其對(duì)H2O2所致人腎小管上皮細(xì)胞HK-2細(xì)胞毒性損傷有保護(hù)作用，且能明顯提高HK-2細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫酶(Catalase,CAT)、活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(Glutathione Peroxidase,GSH-Px)等抗氧化酶的活性[16]。此外，蘇葉揮發(fā)油能提高D-半乳糖亞急性衰老模型大鼠的體能和記憶能力，增加大鼠負(fù)重游泳時(shí)間，減少大鼠在水迷宮的逃避潛伏期，升高其SOD水平，降低其MDA水平，其機(jī)制可能與通過(guò)減少血液中的自由基有關(guān)[17]。

2 抗菌

紫蘇葉對(duì)G+菌有良好的抗菌活性，其抗菌的活性成分為揮發(fā)油、黃酮、酚酸[5]、萜類等化合物。紫蘇葉水提物對(duì)金黃色葡萄球菌具有良好的抑制作用，MIC為0.312 5 g/L[18]。紫蘇葉的水浸液、水煎液、醇提液對(duì)大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、八疊球菌、金黃色葡萄球菌均有抑制作用，其中水浸液效果較好，對(duì)枯草桿菌的抑制作用最顯著，MIC為62.5 mg/mL[19]。此外，紫蘇葉醇提物對(duì)口腔變形鏈球菌具有抑制活性，當(dāng)紫蘇葉醇提物的濃度≥3.13 mg/mL時(shí)，具有明顯抑制變形鏈球菌粘附和產(chǎn)酸的作用；抑制變形鏈球菌體外生長(zhǎng)的MIC值為12.5 mg/mL[20]。孫也評(píng)[21]從紫蘇葉乙酸乙酯部位分離出5個(gè)具有抗菌活性的化學(xué)成分，如5-羥基-6,7-甲氧基黃酮、香樹脂醇等，其對(duì)金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、耐喹諾酮金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌均有抑制作用。紫蘇葉總?cè)埔簿哂休^強(qiáng)的廣譜抗菌作用，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌的抗菌作用最明顯，MIC范圍為0.48～15.50 mg/mL，MBC≥0.97 mg/mL[22]。

3 抗炎、抗過(guò)敏

研究表明，紫蘇葉對(duì)急、慢性炎癥，局部組織和全身炎癥有一定的治療作用，其抗炎的活性物質(zhì)為揮發(fā)油、黃酮和酚酸[5]等。紫蘇葉水提物對(duì)DFE(粉塵螨)引起的小鼠皮炎也有改善作用，能抑制表皮和真皮層的增生和炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，降低血清骨膜素和胸腺的TARC水平，抑制脾T細(xì)胞的CD4+/CD8+比率[23]。紫蘇葉醇提物能夠減弱LPS刺激RAW264.7細(xì)胞的活化；抑制IL-6、IL-8、TNF-α、COX-2和iNOS的mRNA表達(dá)，減少NO產(chǎn)生和前列腺素E2(Prostaglandin,PGE2)分泌；抑制絲裂原活化的蛋白激酶，上調(diào) NF-κB-α抑制劑(Inhibitor of NF-κB-α，IκB-α)水平，并下調(diào)核因子(Nuclear factor-κB，NF-κB)的水平[24]。紫蘇葉揮發(fā)油能顯著減輕角叉菜膠致去腎上腺大鼠足跖腫脹，降低炎癥組織PGE2含量，抑制胸腔滲出液中蛋白含量和白細(xì)胞數(shù)，降低NO含量。機(jī)制可能與其抑制白細(xì)胞游走、減少蛋白質(zhì)滲出、清除氧自由基、抑制PGE2等炎癥介質(zhì)生成有關(guān)，而與腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)無(wú)關(guān)[25]。紫蘇葉中異麥芽酮能夠抑制LPS刺激的RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生NO、MCP-1、IL-6，表明異麥芽酮具有體外抗炎活性。且超臨界二氧化碳萃取的異麥芽酮含量較醇提物高[26]。紫蘇葉中木犀草素能抑制大鼠腹膜肥大細(xì)胞炎性細(xì)胞因子如IL-1β和TNF-α分泌，抑制釋放組胺，降低5-羥色胺誘導(dǎo)的ICR小鼠的血管通透性[27]。從紫蘇葉乙酸乙酯部位分離出紫蘇葉酸A和8-羥基-6,7-二甲氧基黃烷酮等黃酮類化合物，能抑制由IL-1β引起的大鼠肝細(xì)胞的一氧化氮生成，提示其有一定的抗炎活性[28]。

此外，紫蘇葉醇提物可改善惡唑酮、卵清蛋白血清誘導(dǎo)的小鼠過(guò)敏性耳水腫，抑制Ts細(xì)胞，降低IL-2、TNF-α等因子水平，降低耳血管通透性，緩解過(guò)敏性耳水腫，主要活性成分為迷迭香酸[29-30]。還可降低OVA致敏小鼠血清、脾臟和鼻黏膜 IgE以及組胺水平，抑制IL-1β、IL-6、NF-κB、Caspase-1等的表達(dá)，使肥大細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)增加，從而改善過(guò)敏性鼻炎和過(guò)敏性鼻結(jié)膜炎[31]，能抑制塵螨致敏的小鼠肺中IL-4和IL-5以及嗜酸細(xì)胞活化趨化因子的蛋白表達(dá)，抑制小鼠氣道周圍的嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量，從而改善過(guò)敏性哮喘[32]。

4 抗腫瘤

紫蘇葉提取物中主要成分如揮發(fā)油、迷迭香酸[5]、黃酮類[33]、花色苷等對(duì)腫瘤細(xì)胞有一定的抑制作用。紫蘇葉醇提物對(duì)人體結(jié)直腸癌細(xì)胞(Human Colon Cancer Cell Line,HCT116)和肺癌細(xì)胞(Human Lung Cancer Cells,H1299)也具有抑制作用，350 μg/mL的紫蘇葉醇提物能明顯抑制2種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，導(dǎo)致細(xì)胞核形態(tài)的改變并顯著增加2種細(xì)胞中的亞G1細(xì)胞群，有效抑制H1299細(xì)胞的遷移和HCT116、H1299細(xì)胞的黏附，表明其在體外對(duì)結(jié)腸癌和肺癌有一定的抗癌活性[35]。紫蘇葉揮發(fā)油對(duì)人肺癌LTEP-α-2細(xì)胞有一定的抑制作用，且呈劑量和時(shí)間依賴性，在20～30 mg/mL時(shí)抑制效果最好[34]。采用提取離子色譜分析技術(shù)等從紫蘇葉花色苷提取物中分離出Cyanidin3-O-阿魏酰葡萄糖苷-5-O-葡萄糖苷等7種花色苷，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)對(duì)人宮頸腺癌HeLa細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)花色苷提取物能誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡，且具有劑量依賴性[36]。

5 降血脂、降血糖、抗動(dòng)脈粥樣硬化

研究表明，紫蘇葉提取物有良好的降脂作用，其作用機(jī)理與其影響脂肪合成、蛋白質(zhì)代謝及抗氧化作用有關(guān)；此外，還有降血糖、抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用。

紫蘇葉醇提物對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞[37]和ICR肥胖小鼠[38-39]均有一定抑制作用。紫蘇葉醇提物可減少ICR肥胖小鼠的體質(zhì)量、內(nèi)臟脂肪量及附睪脂肪量，降低血糖、胰島素水平。使過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ和增強(qiáng)子結(jié)合蛋白-α的表達(dá)。也可抑制其甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c和基轉(zhuǎn)移酶等脂肪合成基因。也能夠降低固醇酰輔酶A脫氫酶-1抗體和脂肪酸合成酶靶基因的表達(dá)水平，上調(diào)轉(zhuǎn)氨酶CPT1基因表達(dá)。表明紫蘇葉醇提物可通過(guò)影響脂肪轉(zhuǎn)錄因子的基因和蛋白表達(dá)來(lái)影響脂質(zhì)代謝，這為臨床研究肥胖癥和相關(guān)的代謝綜合征藥物提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。紫蘇葉醇提物對(duì)高脂飼料喂養(yǎng)的高脂血癥小鼠有顯著的降血脂和抗氧化作用，能降低其血清中總膽固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白膽固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-c)水平，提高高密度脂蛋白膽固醇(High Density LipoproteinsCholesterol,HDL-c)、CAT、GSH-Px及SOD活力[40]。

紫蘇葉總黃酮能降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖、血脂水平及血清MDA含量，提高血清SOD的活性，其降糖機(jī)制可能與提高糖尿病小鼠抗氧化能力及改善血脂、血糖水平有關(guān)[41]。通過(guò)腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)60 mg/kg復(fù)制糖尿病小鼠模型，紫蘇葉多糖連續(xù)給藥28 d，發(fā)現(xiàn)其能改善小鼠的口服葡萄糖耐量，上調(diào)血清中空腹血清胰島素(Fasting Serum Insulin,FINS)、HDL-c水平和磷脂酰肌醇-3-羥激酶、磷酸化蛋白激酶B、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)水平，同時(shí)下調(diào)血清中空腹血糖(Fasting Plasma Glucose,FBG)、LDL-c、TC、TG水平以及胰腺組織中MDA水平[42]。而在高脂高糖飼料聯(lián)合腹腔注射STZ法建立 T2DM大鼠模型中，紫蘇葉多糖也可降低其大鼠FBG、肝指數(shù)、TG、TC、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶及肝組織 MDA、反應(yīng)蛋白-c、IL-6、TNF-α水平及Ac-FoxO1蛋白表達(dá)水平，從而改善大鼠的肝損傷[43]。

紫蘇葉水提物能降低家兔甘油三酯、總膽固醇含量，通過(guò)調(diào)整血脂代謝、抗脂質(zhì)過(guò)氧化，從而起到抗動(dòng)脈粥樣硬化作用[44]。

6 對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用

研究表明，紫蘇葉提取物如揮發(fā)油、花色苷、迷迭香酸、黃酮類對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)有一定的作用，與其能修復(fù)神經(jīng)創(chuàng)傷、影響神經(jīng)遞質(zhì)傳遞有關(guān)，且與其抗氧化活性有關(guān)。紫蘇葉醇提物可以明顯改善小鼠的神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)，能增加SOD、GSH-Px水平，降低MDA水平，與其含有的花色苷能減輕氧化應(yīng)激對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損傷有關(guān)[45]。紫蘇葉乙酸乙酯提取物和迷迭香酸對(duì)D-半乳糖衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙具有改善作用。能有效地提高衰老小鼠腦SOD和GSH-Px水平，降低MDA、NO、NOS、Ach-E水平，并改善海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞受損狀態(tài)[46]。紫蘇葉揮發(fā)油能改善輕度應(yīng)激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)誘導(dǎo)的小鼠抑郁模型，升高5-HT和5羥基吲哚乙酸在海馬區(qū)中的表達(dá)，降低IL-6、IL-1β和TNF-α水平，增加小鼠蔗糖消耗和開放場(chǎng)活動(dòng)的時(shí)間。其機(jī)制可能與改變5-羥色胺及其代謝產(chǎn)物的水平有關(guān)[47]。此外，紫蘇葉黃酮能抑制6-羥基多巴胺誘導(dǎo)的偏側(cè)帕金森病小鼠腦內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元的損失，上調(diào)星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞中HO-1的表達(dá)[48]。

7 對(duì)消化系統(tǒng)的作用

紫蘇葉石油醚提取物和醇提物能增加大鼠小腸碳末推進(jìn)百分率與胃部總酸度和總酸排出量，且呈現(xiàn)量效關(guān)系[49]，表明其具有促進(jìn)腸胃消化吸收的作用。紫蘇葉醇提物能降低葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎模型血清中TNF-α、IL-17A和IL-10的水平，抑制促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生并升高IL-10的水平。其主要成分木犀草素抑制促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生；芹菜素抑制IL-17A的分泌并增加抗炎細(xì)胞因子IL-10；迷迭香酸調(diào)節(jié)T細(xì)胞群[50]。

8 其他

紫蘇葉揮發(fā)油還能提高小鼠的免疫能力，增強(qiáng)小鼠血清中酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,ACP)活力，升高溶菌酶、NO、IL-2和IgM水平，且存在一定的量效關(guān)系[51]。紫蘇葉注射液對(duì)犬頸總動(dòng)脈血管搭橋手術(shù)后血管內(nèi)膜增生均有不同程度的抑制作用，且呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系，表明紫蘇葉注射液對(duì)犬搭橋術(shù)后血管內(nèi)膜增生有良好的抑制作用[52]。紫蘇葉多糖能明顯提高運(yùn)動(dòng)疲勞小鼠力竭后體內(nèi)肝糖原、肌糖原等的含量，加速清除某些導(dǎo)致疲勞的代謝物質(zhì)，維持細(xì)胞的正常生理功能,加快疲勞的恢復(fù)[53]。紫蘇葉成分Vicenin2對(duì)離體大鼠回腸有松弛作用，能抑制神經(jīng)和肌肉活性，表現(xiàn)出抗胃腸道痙攣的作用[54]。在酵母膏與氧嗪酸鉀的復(fù)配劑建立的高尿酸血癥小鼠模型，紫蘇葉灌胃給藥四周后能緩解小鼠腎小管管腔擴(kuò)張，下調(diào)小鼠的腎指數(shù)、尿酸、肌酐和尿素水平，促進(jìn)尿酸排泄從而保護(hù)腎臟[55]，其也可通過(guò)抑制黃嘌呤氧化酶(IC50為5.80 mg/mL)，從而改善高尿酸血癥[56]。紫蘇葉揮發(fā)油也可顯著舒張氯化鉀(60 mmol/L)誘導(dǎo)的大鼠胸主動(dòng)脈血管收縮(EC50為8.6 μg/mL，且其活性與其主要成分紫蘇醛有關(guān)[57]。此外，紫蘇葉揮發(fā)油也可通過(guò)抑制結(jié)腸平滑肌細(xì)胞Ca2+-ATPase活性,促進(jìn)細(xì)胞膜流動(dòng)，進(jìn)而調(diào)控結(jié)腸平滑肌細(xì)胞的收縮[58]。

9 總結(jié)

紫蘇葉作為藥食兩用的植物，具有很高的藥用價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。紫蘇葉含有多種活性成分，主要是酚酸類、揮發(fā)油類、黃酮類。具有抗氧化、抗衰老、抗菌、抗炎、抗過(guò)敏、抗腫瘤等多種藥理活性，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)均有一定的作用。目前對(duì)紫蘇葉藥理活性的研究多基于揮發(fā)油和粗提物，其物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確，對(duì)黃酮類、酚酸類等其他活性成分研究尚有不足，成分之間活性的篩選報(bào)道也不多，關(guān)于其體內(nèi)活性的研究也較少。因此，需對(duì)紫蘇葉其他活性成分展開充分研究，分析其主要活性部位的物質(zhì)基礎(chǔ)、作用機(jī)制。通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定其作用，為紫蘇葉的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。