農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)關(guān)鍵環(huán)節(jié)控制

李紫蘭

（宣城市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管局，安徽 宣城 242000）

現(xiàn)代農(nóng)作物種植離不開農(nóng)藥的使用，農(nóng)藥為預(yù)防病蟲害和提高農(nóng)作物產(chǎn)量具有重要價值。但是，農(nóng)藥一旦使用不科學(xué)，就會給植物性產(chǎn)品質(zhì)量和食用者生命安全帶來威脅。隨著我國農(nóng)業(yè)技術(shù)的發(fā)展，農(nóng)藥殘留檢測手段和靈敏度都在逐步提升。本文從農(nóng)藥殘留檢測的樣品前處理、定性、定量檢測分析和檢測過程的質(zhì)量控制4個環(huán)節(jié)進(jìn)行闡述。

1 農(nóng)藥殘留檢測樣品前處理過程控制

1.1 待檢樣品的稱取

待檢樣品須通過天平進(jìn)行稱取。首先準(zhǔn)備1個開口大的容器，將待檢樣品進(jìn)行剪碎或研磨處理，減少樣品在容器壁上的粘連。若樣品為冷凍樣品，需要將冰晶一同進(jìn)行勻漿處理，解凍樣品需要盡快檢測，避免反復(fù)凍融。

1.2 待檢樣品的提取

實(shí)驗室一般采用勻漿提?。ńM織搗碎法）。該方法快速、簡單，對儀器設(shè)備沒有較高要求，且提取效果好。若樣品含水量低，可以在處理前加入適量蒸餾水，室溫靜置30 min 再勻漿提取。若樣品含水量高，如橙子、番茄或冷凍產(chǎn)品，可以先用食品料理機(jī)打碎再進(jìn)行勻漿提取，具體試驗方法可參照SOP進(jìn)行。

1.3 鹽析

實(shí)驗室用乙腈作為提取劑時，需完全分離乙腈和水相，提高農(nóng)藥殘留的回收量[1]。在鹽析過程中，若加鹽量不足或振蕩不充分，則會導(dǎo)致乙腈和水相不易分開，造成農(nóng)藥殘留的回收率降低。因此，只有加入足量的鹽形成過飽和溶液，才能促進(jìn)乙腈和水相完全分離。由于某些農(nóng)藥不耐熱，所以需要控制加鹽的順序來把控系統(tǒng)放熱，在加入乙腈充分混勻后再添加足量的鹽。否則，會影響農(nóng)藥殘留的回收率。

1.4 濃縮

濃縮的方式和濃縮裝置有關(guān)。氣流吹蒸濃縮裝置適合體積小、易揮發(fā)的提取液，主要通過空氣流（或氮?dú)饬鳎┐祫訋С鋈軇虼嗽摲椒ǖ霓r(nóng)藥損失量大。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)裝置不僅熱量傳遞快，還可以一邊減壓一邊旋轉(zhuǎn)，不會發(fā)生爆沸，最后獲得的農(nóng)藥殘留的回收率較高。在使用過程中，為避免發(fā)生爆沸，需要注意水塔溫度，最好低于40℃且濃縮液的體積不宜超過瓶身的1/3。若濃縮后不需要凈化，可以用梨形瓶進(jìn)行濃縮。若需要凈化，則使用茄形瓶進(jìn)行濃縮。濃縮結(jié)束后需要繼續(xù)冷卻，溫度不超過5℃，可以提高回收率。

1.5 凈化

凈化的方法有柱層析法、吹掃蒸餾法、液—液分配法、固相萃取法等。一般采用QuEChERS 方法，原理同固相萃取法，即利用吸附劑填料與基質(zhì)中的雜質(zhì)相互作用來吸附雜質(zhì)，最終獲取純度較高的回收物[2]。若用乙腈作為提取劑，在凈化結(jié)束后不能直接用氣相色譜儀或氣質(zhì)聯(lián)用儀測定，需要用氮?dú)獯蹈梢译?，再用丙酮或乙酸乙酯等溶劑溶解后進(jìn)行上機(jī)檢測，否則會損害色譜柱。

2 農(nóng)藥殘留定性檢測異常分析

2.1 假陽性結(jié)果分析

2.1.1 基質(zhì)干擾產(chǎn)生假陽性

基質(zhì)干擾產(chǎn)生假陽性主要出現(xiàn)于氣相色譜和氣相色譜/質(zhì)譜法。若樣品勻漿過程中待檢樣品某次成分（蒜氨酸）、酶和底物發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生含硫化合物，如氨、丙酮酸，這些物質(zhì)和有機(jī)磷、有機(jī)農(nóng)藥性質(zhì)相似，傳統(tǒng)凈化也無法去除，因此用氣相色譜和氣相色譜/質(zhì)譜法不能分辨出植物性產(chǎn)品自身是否存在農(nóng)藥殘留問題。解決方法：可將蔥、蒜等植物樣品切斷，微波加熱25 s 再進(jìn)行提?。欢ㄒ?、結(jié)球甘藍(lán)、白菜等十字花科植物含有硫氰酸酯和異硫氰酸酯類化合物，此類物質(zhì)和氧樂果、甲胺磷、三唑酮等農(nóng)藥相似；香料、茶葉、香菇等植物由于具有小分子氣味也會產(chǎn)生基質(zhì)干擾，可使用基質(zhì)加標(biāo)并利用液相二級質(zhì)譜測定[3]。

2.1.2 試劑、樣品、操作過程中出現(xiàn)污染

如試劑盒內(nèi)的某個試劑不純造成假陽性；試劑制備或處理前沒有更換槍頭或清洗相關(guān)器皿；進(jìn)樣過程中枕頭清洗不完全。解決方法：每批樣品檢測設(shè)有空白對照，上機(jī)時按從低到高的標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度進(jìn)行檢測，增添洗針進(jìn)樣方式。

2.2 假陰性結(jié)果分析

第一，待檢樣品提取方法不合理，沒有嚴(yán)格按照SOP 操作，實(shí)驗員隨意更改提取條件或試劑配方，造成目標(biāo)物丟失。解決方法是嚴(yán)格參照SOP 操作進(jìn)行待檢樣品提取，對酸堿度敏感的目標(biāo)物要在中性條件下提取。第二，某些農(nóng)藥不耐熱（辛硫磷、敵百蟲等）或?qū)λ釅A過于敏感（滅菌丹、克菌丹等），進(jìn)樣時自我分解出現(xiàn)假陰性。解決方法是進(jìn)樣時對柱溫或流動相進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)。第三，濃縮過程中使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)吹過干，造成目標(biāo)物流失。解決方法是用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)吹近干時取出，再用橡皮球慢慢吹干或自然晾干。第四，凈化過程中目標(biāo)物未淋洗掉或沒有吸附到柱子上。解決方法是可以參照相似相容的原則選擇合適的淋洗試劑，根據(jù)基質(zhì)類型合理選擇凈化柱。

3 農(nóng)藥殘留定量檢測的關(guān)鍵控制

3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

在植物性產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測中，標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置直接關(guān)乎結(jié)果的準(zhǔn)確性和靈敏度。使用前，查看試劑有效期限和使用說明。配置時根據(jù)逐級稀釋的方式進(jìn)行配置，新配置的標(biāo)準(zhǔn)溶液需要對第1 次測定的圖譜進(jìn)行保存，在相同操作條件下可以使用這次圖譜，若差異大，則需要重新配置標(biāo)準(zhǔn)溶液。單點(diǎn)校正時選取的校正點(diǎn)和目標(biāo)物濃度相差不易超過2 倍，曲線校正時，目標(biāo)物的待測濃度要落在校準(zhǔn)曲線范圍之內(nèi)，否則會影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.2 基質(zhì)效應(yīng)的消除

在利用氣相色譜儀或氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀測定時，若分析物不能匹配標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖或目標(biāo)物回收率不在計算范圍內(nèi)都會出現(xiàn)基質(zhì)效應(yīng)，可以用不含待測物的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校正。當(dāng)檢查樣本種類較多，可以對樣本進(jìn)行分類檢測，每類樣本用1 個基質(zhì)標(biāo)樣，減少污染或干擾。還可以通過多次凈化提取液，對其最終的提取液進(jìn)行稀釋，減少樣品濃度來消除基質(zhì)效應(yīng)。

4 檢測過程的質(zhì)量控制

質(zhì)量控制直接決定了樣本農(nóng)藥殘留檢測的精密度和最終結(jié)果，只有對污染、加標(biāo)回收率、目標(biāo)物回收率和超標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行把控，才能提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。第一，排除檢測過程中的污染，不同批次檢測需要設(shè)置相應(yīng)的空白試驗，當(dāng)空白值較高時分析是否有試劑污染、用具污染或樣品殘留。第二，不同批次植物性產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測時利用加標(biāo)回收率提高結(jié)果準(zhǔn)確性，每個加標(biāo)做2～3個平行。第三，每次測定樣品時，每24 個樣品配套1 個加樣回收率試驗，加樣水平是方法定量限的2 倍，當(dāng)回收率超過70%～120%則重新檢測[4]。第四，當(dāng)檢測值接近限量值或超標(biāo)，可以重復(fù)1次試驗確保準(zhǔn)確率。若結(jié)果相同，可用氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行定性試驗。

5 結(jié)語

農(nóng)藥殘留問題不僅影響農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和食用者的生命健康，也會污染生態(tài)環(huán)境。因此，必須通過強(qiáng)有力的手段，規(guī)范農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的使用。雖然提高農(nóng)藥檢測方法的準(zhǔn)確性和靈敏度可以減少農(nóng)藥殘留高的農(nóng)產(chǎn)品流入市場，但是無法從根源上解決問題，需要提高農(nóng)藥生產(chǎn)、流通和使用的規(guī)范性，政府和市場應(yīng)對農(nóng)戶進(jìn)行系統(tǒng)性的農(nóng)藥劑量和使用培訓(xùn)，杜絕濫用農(nóng)藥。