新型免疫分子TIM-4的結(jié)構(gòu)、配體及其在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展

池艷琳，卿吉琳，陳柳燕，黃小妹，陳治中

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，南寧530023;2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)瑞康臨床醫(yī)學(xué)院，南寧530011;3.廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院a.生殖醫(yī)學(xué)中心，b.精準(zhǔn)聯(lián)合檢驗(yàn)中心，南寧530021)

我國(guó)惡性腫瘤的發(fā)病率及病死率均高于世界平均水平，女性惡性腫瘤的發(fā)病率明顯高于男性［1］。惡性腫瘤負(fù)擔(dān)的持續(xù)加重，對(duì)公眾健康構(gòu)成重大威脅。目前用于臨床惡性腫瘤輔助診斷和預(yù)后判斷的高敏感性和高特異性的腫瘤標(biāo)志物有限，為了實(shí)現(xiàn)惡性腫瘤的早診斷、早治療，改善患者預(yù)后，提高腫瘤免疫治療的臨床療效，尋找新型的腫瘤標(biāo)志物迫在眉睫。

人類T細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白(T－cell immunoglobulin mucin，TIM)基因家族成員包括TIM－1、TIM－3和TIM－4。TIM－4選擇性表達(dá)于抗原呈遞細(xì)胞表面，特別是活化的樹突狀細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞表面。多項(xiàng)研究表明，TIM－4基因在結(jié)直腸癌［2］、肺癌［3］、宮頸癌［4］、腎癌［5］、神經(jīng)膠質(zhì)瘤［6］等腫瘤中均有表達(dá)。TIM－4可表達(dá)于樹突狀細(xì)胞來源的惡性腫瘤、惡性組織細(xì)胞肉瘤以及朗格漢斯細(xì)胞肉瘤，且咽旁脂肪肉瘤中也存在TIM－4的表達(dá)。TIM－4基因可能參與多種腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移進(jìn)程?，F(xiàn)就TIM－4的結(jié)構(gòu)、配體及其在腫瘤中的研究進(jìn)展予以綜述。

1 TIM-4概述

1.1 TIM－4基因的結(jié)構(gòu) TIM－4是TIM基因家族的Ⅰ型細(xì)胞表面糖蛋白，由信號(hào)肽、胞外N端免疫球蛋白可變區(qū)(immunoglobulin variable，IgV)樣結(jié)構(gòu)域、黏蛋白樣結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)內(nèi)尾組成。在TIM家族成員中，TIM－4基因片段最長(zhǎng)，含有大量蘇氨酸、絲氨酸和脯氨酸片段，細(xì)胞內(nèi)區(qū)域包含42～77個(gè)氨基酸，是小鼠和人類同源物中高度保守的區(qū)域［7］。TIM－4胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域缺少酪氨酸活化殘基，可能無法直接介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，故可通過TIM－4胞外N端IgV樣結(jié)構(gòu)域作為介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的載體實(shí)現(xiàn)間接信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。TIM－4的IgV樣結(jié)構(gòu)域被廣泛研究，該結(jié)構(gòu)域有兩個(gè)關(guān)鍵位點(diǎn):①與磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine，PS)結(jié)合的口袋FG－CC＇環(huán)可識(shí)別并結(jié)合凋亡細(xì)胞［8］;②與整合素結(jié)合的精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸(Arg－Gly－Asp，RGD)基序可介導(dǎo)細(xì)胞的遷移和黏附［3］，這兩個(gè)位點(diǎn)可能是TIM－4實(shí)現(xiàn)介導(dǎo)凋亡細(xì)胞吞噬、參與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移等功能的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)。

1.2 TIM－4的表達(dá)與功能 TIM－4是一種PS受體，選擇性表達(dá)于巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等抗原呈遞細(xì)胞［7］。TIM－4基因通過介導(dǎo)去除抗原特異性T細(xì)胞的適應(yīng)性免疫，可能在調(diào)節(jié)免疫功能中發(fā)揮重要作用［9］。TIM－4與TIM－1結(jié)合可參與抗原呈遞細(xì)胞T細(xì)胞的相互作用，為T細(xì)胞的活化提供共刺激信號(hào)，參與T細(xì)胞增殖的調(diào)控。T細(xì)胞又稱胸腺依賴性淋巴細(xì)胞，T細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答是細(xì)胞免疫，細(xì)胞免疫的形式主要有兩種:①與靶細(xì)胞特異性結(jié)合破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞;②釋放淋巴因子，最終使免疫效應(yīng)擴(kuò)大和增強(qiáng)。因此，TIM－4基因可通過調(diào)控T細(xì)胞增殖間接參與免疫調(diào)節(jié)。

此外，TIM－4對(duì)于清除體內(nèi)凋亡體至關(guān)重要，TIM－4缺乏導(dǎo)致凋亡異常持續(xù)，使淋巴細(xì)胞激活異常。研究顯示，TIM－4可介導(dǎo)凋亡細(xì)胞的吞噬作用［10］。TIM－4的IgV結(jié)構(gòu)域FG－CC＇環(huán)與凋亡細(xì)胞表面的PS結(jié)合，將凋亡細(xì)胞固定在巨噬細(xì)胞上，促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬凋亡細(xì)胞。TIM－4具有一定的黏附功能，TIM－4的IgV樣結(jié)構(gòu)域中的RGD基序可與整合素結(jié)合，介導(dǎo)細(xì)胞的遷移和黏附［3］。TIM－4的表達(dá)高度局限于髓系細(xì)胞，可能在腫瘤微環(huán)境中調(diào)節(jié)髓系細(xì)胞和抗原特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的相互作用［11］。而髓系細(xì)胞形成的耐受微環(huán)境對(duì)腫瘤進(jìn)展和抗腫瘤藥物耐藥性的誘導(dǎo)至關(guān)重要。由此可見，TIM－4基因在多種腫瘤中表達(dá)，可參與免疫調(diào)節(jié)、介導(dǎo)凋亡細(xì)胞的吞噬作用、介導(dǎo)細(xì)胞的遷移和黏附。對(duì)腫瘤中TIM－4基因的深入研究可能有助于調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境，為腫瘤免疫治療提供新思路。

1.3 TIM－4的配體

1.3.1 PS PS是一種膜脂，可在細(xì)胞凋亡和(或)細(xì)胞應(yīng)激時(shí)外翻至細(xì)胞膜外表面。PS屬于TIM－4配體，凋亡細(xì)胞表面的PS可與TIM－4特異性結(jié)合［8］。凋亡細(xì)胞表面表達(dá)的PS被吞噬細(xì)胞通過PS結(jié)合蛋白直接或間接識(shí)別。PS結(jié)合蛋白TIM－4將凋亡細(xì)胞固定在吞噬細(xì)胞上，促進(jìn)吞噬凋亡細(xì)胞。有研究顯示，IgV樣結(jié)構(gòu)域缺失后，TIM－4的促吞噬作用完全消失，證實(shí)TIM－4主要通過IgV樣結(jié)構(gòu)域的結(jié)合位點(diǎn)促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的吞噬作用［3］，即TIM－4通過其IgV樣結(jié)構(gòu)域的FG－CC＇環(huán)識(shí)別凋亡細(xì)胞表面暴露的PS，介導(dǎo)巨噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的吞噬。此外，腫瘤可利用PS外翻信號(hào)增強(qiáng)腫瘤的免疫逃逸，因此抑制PS介導(dǎo)的免疫逃逸策略可能提高免疫治療的療效。在腫瘤微環(huán)境中，PS介導(dǎo)的免疫抑制常被稱為凋亡擬態(tài)。外化的PS可以驅(qū)動(dòng)胞吐或激活PS受體，促進(jìn)局部免疫抑制。以PS或激活PS受體為靶點(diǎn)的單克隆抗體已經(jīng)被開發(fā)出來，并正在進(jìn)行臨床前和臨床試驗(yàn)［12］。PS外翻是TIM－4促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬凋亡細(xì)胞的關(guān)鍵信號(hào)，PS信號(hào)亦被用于抗腫瘤免疫治療研究。

1.3.2 TIM－1 TIM－1是TIM－4的天然配體［9］。TIM－1與TIM－4結(jié)合參與抗原呈遞細(xì)胞T細(xì)胞的相互作用，為T細(xì)胞的活化提供了共刺激信號(hào)，參與T細(xì)胞增殖的調(diào)控［9］。T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞免疫應(yīng)答主要有兩種形式:①通過與靶細(xì)胞特異性結(jié)合破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞;②通過釋放淋巴因子，最終使免疫效應(yīng)擴(kuò)大和增強(qiáng)。TIM－1與TIM－4相互作用調(diào)節(jié)T細(xì)胞的增殖和效應(yīng)功能，這種效應(yīng)輔助性T細(xì)胞(helper T cell，Th細(xì)胞)，尤其是Th2細(xì)胞調(diào)節(jié)上表現(xiàn)更明顯。研究表明，TIM－1和TIM－4均可與暴露在凋亡細(xì)胞或外泌體上的PS結(jié)合，促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的吞噬作用［8］。凋亡細(xì)胞表面表達(dá)PS，被吞噬細(xì)胞通過PS結(jié)合蛋白直接或間接識(shí)別。有研究顯示，TIM－4特異性結(jié)合TIM－1的作用可被TIM－1抗體抑制，證實(shí)TIM－1是TIM－4的天然配體，且TIM－4通過中間載體PS間接與TIM－1發(fā)生相互作用，促進(jìn)了凋亡細(xì)胞的清除［9］。

1.3.3 纖維連接蛋白1(fibronectin－1，F(xiàn)n1) Fn1是一種新型TIM－4結(jié)合蛋白，可能是TIM－4基因的配體，F(xiàn)n1水平的變化可影響TIM－4誘導(dǎo)的胞外增殖，通過破壞TIM－4和Fn1的相互作用則可消除TIM－4介導(dǎo)的胞外增殖;Fn1的水平?jīng)Q定了TIM－4誘導(dǎo)胞外增殖的能力，證實(shí)TIM－4與Fn1可直接結(jié)合［13］。TIM－4與Fn1直接結(jié)合，并通過支架蛋白Fn1與整合素結(jié)合形成TIM－4－Fn1－整合素復(fù)合物，促使TIM－4與整合素協(xié)同作用，從而實(shí)現(xiàn)高效的胞外增殖［13］。近年來，人工栓系受體誘導(dǎo)胞外增殖成為研究熱點(diǎn)。在同等實(shí)驗(yàn)條件下，TIM－4誘導(dǎo)胞外增殖的效果較人工栓系受體(糖基化磷脂酰肌醇錨定蛋白－膜聯(lián)蛋白A5)更好［13］。因此，F(xiàn)n1是TIM－4基因的潛在配體，可作為中間載體直接與TIM－4基因結(jié)合，連接TIM－4與整合素，在Fn1等輔助機(jī)制的作用下，TIM－4的表達(dá)能力和作用可能增強(qiáng)，且能夠更有效地協(xié)同協(xié)調(diào)凋亡細(xì)胞的栓系和攝取，促進(jìn)凋亡細(xì)胞的清除，可用于細(xì)胞增多缺陷所致疾病的治療。

1.3.4 整合素 整合素又稱整聯(lián)蛋白，是一種跨膜的異質(zhì)二聚體，由兩個(gè)非共價(jià)結(jié)合的跨膜亞基(即α和β亞基)組成，可能是TIM－4基因的潛在配體。整合素糖基化的α和β鏈通過非共價(jià)鍵結(jié)合。TIM－4通過載體Fn1與整合素αvβ3緊密定位結(jié)合，使TIM－4與整合素協(xié)同作用，實(shí)現(xiàn)高效的胞外增殖［13］;TIM－4通過IgV結(jié)構(gòu)域中固有的RGD基序與整合素蛋白結(jié)合并相互作用，提示TIM－4可能具有一定的黏附功能［3］。TIM－4可通過Fn1和RGD基序兩條途徑與整合素結(jié)合。實(shí)驗(yàn)證明，骨橋蛋白中的RGD基序通過與整合素αvβ3的相互作用控制腫瘤生長(zhǎng)［14］。研究證實(shí)，過表達(dá)TIM－4通過IgV結(jié)構(gòu)域的RGD基序促進(jìn)S期肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和積累［3］，說明TIM－4可能通過與整合素結(jié)合直接或間接參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展。通過調(diào)節(jié)TIM－4與整合素的結(jié)合有望控制腫瘤的生長(zhǎng)，且有助于腫瘤患者的免疫治療。

1.3.5 白細(xì)胞單免疫球蛋白樣受體5(leukocyte mono－immunoglobulin－like receptor 5，LMIR5) LMIR5是LMIR家族的成員之一，其本質(zhì)是一種主要表達(dá)于髓細(xì)胞的分子量為12 000的DNAX活化蛋白偶聯(lián)活化受體。LMIR5可能是TIM－4的內(nèi)源性配體，可結(jié)合TIM－4;TIM－4與LMIR5的結(jié)合位點(diǎn)可能與PS的結(jié)合位點(diǎn)十分靠近，且LMIR5與TIM－4結(jié)合的親和力較PS與TIM－4結(jié)合的親和力更低，故LMIR5與TIM－4在PS結(jié)合位點(diǎn)附近結(jié)合對(duì)TIM－4介導(dǎo)的凋亡細(xì)胞吞噬作用無影響;但是肥大細(xì)胞具有弱吞噬功能，說明LMIR5與TIM－4結(jié)合間接參與凋亡細(xì)胞的清除［15］。因此，LMIR5可能是TIM－4的內(nèi)源性配體，LMIR5與TIM－4結(jié)合并誘導(dǎo)激活表達(dá)LMIR5的肥大細(xì)胞，肥大細(xì)胞激活并脫顆粒釋放生物活性介質(zhì)，在組織內(nèi)引起速發(fā)型超敏反應(yīng)，說明TIM－4可能間接參與過敏性疾病以及免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展。

2 TIM-4與惡性腫瘤

2.1 TIM－4與消化系統(tǒng)腫瘤

2.1.1 TIM－4與結(jié)直腸癌 消化道惡性腫瘤在我國(guó)高發(fā)，且發(fā)病率及病死率呈逐年上升趨勢(shì)。Tan等［2］研究發(fā)現(xiàn)，與鄰近正常組織相比，結(jié)直腸癌小鼠模型的結(jié)直腸癌組織中TIM－4的表達(dá)明顯升高;統(tǒng)計(jì)分析顯示，TIM－4表達(dá)升高與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期和結(jié)直腸癌患者總生存期縮短密切相關(guān)?？梢姡∈蠼Y(jié)直腸癌模型體內(nèi)穩(wěn)定過表達(dá)的TIM－4可顯著誘導(dǎo)結(jié)直腸癌的發(fā)生;TIM－4的穩(wěn)定過表達(dá)可使乙醛脫氫酶－1水平升高，表明TIM－4穩(wěn)定過表達(dá)后，癌癥干細(xì)胞樣特性提高，癌細(xì)胞通過募集腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞促進(jìn)結(jié)直腸癌的進(jìn)展，且結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖和腫瘤間質(zhì)重構(gòu)增加;此外，磷脂酰肌醇－3－激酶/蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路的激活在腫瘤發(fā)展中起關(guān)鍵作用。該研究還發(fā)現(xiàn)，TIM－4可激活結(jié)直腸癌細(xì)胞磷脂酰肌醇－3－激酶/蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路。綜上，TIM－4過表達(dá)可通過募集腫瘤相關(guān)的巨噬細(xì)胞、促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖和腫瘤間質(zhì)重構(gòu)、激活磷脂酰肌醇－3－激酶/蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路，促進(jìn)結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展。TIM－4在相關(guān)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮直接或間接的促進(jìn)作用。

2.1.2 TIM－4與胃癌 胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率和病死率較高［16］。TIM－4與TIM－1的相互作用可調(diào)節(jié)T細(xì)胞的增殖和效應(yīng)功能，這種效應(yīng)在Th2細(xì)胞上更明顯。T細(xì)胞主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫，通過與靶細(xì)胞特異性結(jié)合破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞;或通過釋放淋巴因子，最終使免疫效應(yīng)擴(kuò)大和增強(qiáng)。樹突狀細(xì)胞通過TIM－1/TIM－4途徑與Th2細(xì)胞結(jié)合，誘導(dǎo)Th2細(xì)胞增殖。Sun等［17］利用體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯IM－4的IgV樣結(jié)構(gòu)域FG－CC＇環(huán)的干擾小RNA轉(zhuǎn)染到經(jīng)胃癌裂解液刺激的樹突狀細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，這些樹突狀細(xì)胞可以抑制胃癌的生長(zhǎng)，表明可通過TIM－4基因FG－CC＇環(huán)序列－干擾小RNA阻斷TIM－4的IgV樣結(jié)構(gòu)域的FG－CC＇環(huán)，增強(qiáng)樹突狀細(xì)胞疫苗的免疫功能，預(yù)防胃癌發(fā)生發(fā)展。由此可見，TIM－1/TIM－4途徑可調(diào)節(jié)T細(xì)胞的增殖和效應(yīng)功能，故調(diào)控TIM－4可能成為增強(qiáng)抗腫瘤免疫、促進(jìn)腫瘤化療的一種新策略。

2.1.3 TIM－4與肝癌 肝癌是第五大惡性腫瘤，全球因肝癌死亡人數(shù)居癌癥致死人數(shù)的第2位［18］。Liu等［19］比較未發(fā)生脂肪變性與發(fā)生脂肪變性的肝癌組織切片免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，與未發(fā)生脂肪變性的肝癌癌旁組織相比，發(fā)生脂肪變性的肝癌癌旁組織中TIM－4表達(dá)水平升高;免疫熒光染色顯示，與未發(fā)生脂肪變性的肝癌組織相比，發(fā)生脂肪變性肝癌組織中TIM－4的表達(dá)顯著升高，免疫組織化學(xué)染色與免疫熒光染色結(jié)果一致，進(jìn)一步證實(shí)了結(jié)果的可靠性?？梢?，TIM－4可直接或間接參與脂肪變肝癌的發(fā)生，促進(jìn)脂肪變肝癌的發(fā)展，TIM－4可能是腫瘤調(diào)控的潛在靶點(diǎn)，有望成為脂肪變肝癌的特異性腫瘤標(biāo)志物。

2.2 TIM－4與肺癌 肺癌是呼吸系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，也是主要的癌癥死亡原因［20］。肺癌以非小細(xì)胞肺癌(non－small－cell lung cancer，NSCLC)最常見，患者5年生存率低，Ⅰ～ⅢA期占14%～49%，ⅢB～Ⅳ期占比＜5%［21］。有學(xué)者對(duì)TIM－4在NSCLC中的表達(dá)及其作用機(jī)制進(jìn)行研究。Zhang等［3］研究發(fā)現(xiàn)，TIM－4在NSCLC組織中的表達(dá)明顯高于癌旁組織;且TIM－4表達(dá)水平升高與NSCLC組織分化及患者生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān);過表達(dá)TIM－4可促進(jìn)NSCLC細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，突變TIM－4分子結(jié)構(gòu)中RGD基序可弱化TIM－4對(duì)NSCLC細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用;進(jìn)一步通過免疫共沉淀分析發(fā)現(xiàn)，TIM－4通過RGD基序與整合素αvβ3相互作用，最終實(shí)現(xiàn)高效的胞外增殖?？梢?，TIM－4可通過RGD基序促進(jìn)NSCLC細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，還可通過RGD基序與整合素結(jié)合而發(fā)揮相互作用。TIM－4可能是肺癌的潛在生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)，也可能是NSCLC患者的不良預(yù)后指標(biāo)。

2.3 TIM－4與宮頸癌 宮頸癌是女性最常見生殖系統(tǒng)腫瘤之一，患者3～5年生存率低于50%［22］。TIM－4可能是宮頸癌靶向治療的重要靶點(diǎn)，可能參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。王速捷等［4］通過免疫組織化學(xué)法檢測(cè)宮頸癌腫瘤組織及癌旁組織中TIM－4的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，宮頸癌組織標(biāo)本中的TIM－4表達(dá)水平明顯上調(diào)，且TIM－4表達(dá)水平與患者3年生存率呈負(fù)相關(guān);進(jìn)一步檢測(cè)血清分泌型TIM－4水平發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者外周血血清TIM－4水平較正常對(duì)照者明顯上調(diào);并且TIM－4可能與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)?？梢?，TIM－4參與了宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展，可能是宮頸癌靶向治療的重要靶點(diǎn)。

2.4 TIM－4與神經(jīng)膠質(zhì)瘤 神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的內(nèi)在惡性原發(fā)性腫瘤，其中膠質(zhì)母細(xì)胞瘤惡性程度最高，且耐藥性較強(qiáng)，TIM－4的表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤密切相關(guān)［23－25］。Li等［6］發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織中TIM－4的表達(dá)水平明顯高于正常癌旁組織。靶向干擾沉默TIM－4可誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡，抑制膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)，降低膠質(zhì)瘤細(xì)胞的克隆能力;而過表達(dá)TIM－4可促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，抑制其凋亡，增強(qiáng)其克隆潛能。研究顯示，腫瘤耐受性在腫瘤生長(zhǎng)和逃避免疫監(jiān)視中起重要作用，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在腫瘤耐受中起關(guān)鍵作用，而TIM－4參與免疫調(diào)節(jié)［26］。膠質(zhì)瘤來源的巨噬細(xì)胞吞噬表達(dá)PS的T細(xì)胞，獲得耐受性，可通過誘導(dǎo)腫瘤特異性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞抑制腫瘤特異性CD8+T細(xì)胞。因此，巨噬細(xì)胞衍生的TIM－4在膠質(zhì)瘤的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞誘導(dǎo)中起重要作用，TIM－4高表達(dá)的膠質(zhì)細(xì)胞源性巨噬細(xì)胞通過吞噬T細(xì)胞促進(jìn)腫瘤耐受。TIM－4有望成為腦膠質(zhì)瘤新的標(biāo)志物及腫瘤治療的新靶點(diǎn)。

2.5 TIM－4與腎癌 腎癌是泌尿系統(tǒng)的主要惡性腫瘤之一，以腎透明細(xì)胞癌(renal clear cell carcinoma，RCC)最常見［27］。RCC往往較易復(fù)發(fā)，且預(yù)后較差。為了降低復(fù)發(fā)率、改善患者預(yù)后、提高患者生活質(zhì)量，需要尋找新的靶點(diǎn)與治療策略以達(dá)到更好的治療效果。Yano等［5］對(duì)89例RCC患者的組織標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，癌細(xì)胞中TIM－4的高表達(dá)與患者生存時(shí)間短密切相關(guān)，且RCC細(xì)胞株(786－O、A498、ACHN和CAKI－1)中TIM－4信使RNA的表達(dá)水平均升高;沉默細(xì)胞表達(dá)后發(fā)現(xiàn)，786－O細(xì)胞株中TIM－4的表達(dá)下降，且TIM－4高表達(dá)與RCC患者的不良預(yù)后直接相關(guān)，進(jìn)一步的體外研究證實(shí)，干擾TIM－4表達(dá)可提高腎癌細(xì)胞對(duì)索拉非尼的敏感性。因此，TIM－4可能參與腎癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移，可能成為一種有用的腎癌預(yù)后判斷因子，有望成為治療RCC的新靶點(diǎn)，也可能是觀察腎癌患者療效的新指標(biāo)。

2.6 TIM－4與黑色素瘤 惡性黑色素瘤致死率高，極易發(fā)生轉(zhuǎn)移，目前缺乏有效的治療方法。TIM－4在黑色素瘤中也有相關(guān)研究。單克隆抗體特異性靶向TIM－4或TIM－3可以增強(qiáng)免疫接種對(duì)小鼠黑色素瘤的治療效果［28］?？筎IM－3單克隆抗體能夠提高腫瘤浸潤(rùn)性自然殺傷細(xì)胞的數(shù)量和活性，而抗TIM－4單克隆抗體主要招募CD8+T細(xì)胞作為抗腫瘤活性的來源。TIM－4與TIM－3單克隆抗體聯(lián)合阻斷可以提高腫瘤疫苗對(duì)已形成的黑色素瘤的療效。TIM－4有望成為抗腫瘤治療的新靶點(diǎn)，TIM－4單克隆抗體可參與提高腫瘤疫苗的療效，為腫瘤的免疫治療提供新思路。

2.7 TIM－4與其他腫瘤 TIM－4在其他惡性腫瘤中也有重要作用。有研究對(duì)1例30歲男性咽旁脂肪肉瘤(罕見疾病)患者術(shù)后腫瘤組織的免疫組織化學(xué)法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，咽旁脂肪肉瘤細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中均有TIM－4表達(dá)［29］。TIM－4在朗格漢斯細(xì)胞肉瘤組織切片中表達(dá)，免疫熒光雙染色實(shí)驗(yàn)顯示，TIM－4與Langerin共表達(dá)于朗格漢斯細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)上，而Langerin是檢測(cè)朗格漢斯細(xì)胞肉瘤的潛在生物標(biāo)志物［30－31］。由此可見，TIM－4可能參與咽旁脂肪肉瘤、朗格漢斯細(xì)胞肉瘤的發(fā)生發(fā)展，可能是咽旁脂肪肉瘤、朗格漢斯細(xì)胞肉瘤的新的標(biāo)志物。

3 TIM-4與腫瘤免疫治療

免疫治療通過增強(qiáng)機(jī)體對(duì)癌細(xì)胞的免疫反應(yīng)消滅敏感癌細(xì)胞，抑制腫瘤的生長(zhǎng)［32］。免疫治療可延長(zhǎng)惡性腫瘤患者的生存期，為惡性腫瘤的治療帶來了新的希望。靶向FG－CC＇環(huán)的干擾小RNA可以提高樹突狀細(xì)胞疫苗對(duì)胃癌的免疫效果［17］，因此靶向TIM－4中的FG－CC＇環(huán)可能有助于開發(fā)新的治療方法。最新腫瘤實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛿?shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，腫瘤相關(guān)樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞TIM－3和TIM－4表達(dá)的上調(diào)削弱了腫瘤疫苗和化療的抗腫瘤作用，表明聯(lián)合抗TIM－3和抗TIM－4單克隆抗體可進(jìn)一步提高腫瘤疫苗的療效［33］。TIM－3和TIM－4的治療操作可能為提高腫瘤免疫治療的臨床療效提供一種新的策略。TIM－4有望成為惡性腫瘤患者生存時(shí)間評(píng)估、腫瘤療效觀察和預(yù)后改善的指標(biāo)，可能為實(shí)現(xiàn)惡性腫瘤患者精準(zhǔn)免疫治療提供重要靶點(diǎn)。

4 小 結(jié)

TIM－4參與調(diào)節(jié)T細(xì)胞增殖，在免疫調(diào)控中發(fā)揮作用，參與多種免疫性疾病的發(fā)展［34－35］，可能成為腫瘤免疫反應(yīng)的潛在共刺激分子。TIM－4與暴露在凋亡細(xì)胞或外泌體上的PS結(jié)合，促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的吞噬作用。高表達(dá)TIM－4的膠質(zhì)細(xì)胞源性巨噬細(xì)胞通過吞噬T細(xì)胞促進(jìn)腫瘤耐受。TIM－4通過誘導(dǎo)腫瘤免疫耐受在抗腫瘤免疫中發(fā)揮負(fù)性作用，抗原呈遞細(xì)胞過表達(dá)TIM－4導(dǎo)致T細(xì)胞免疫應(yīng)答降低，使抗原特異性T細(xì)胞數(shù)量減少［26］。TIM－4在不同類型腫瘤組織及細(xì)胞中均有不同程度的表達(dá)，可直接或間接參與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，其與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可能成為新的腫瘤標(biāo)志物。TIM－4可能為增強(qiáng)抗腫瘤免疫、促進(jìn)腫瘤化療及免疫治療提供一種新的策略。