檳榔多酚對(duì)大鼠高原肺水腫的預(yù)防作用

霍妍，趙安鵬，宋晶燕，李雪，李加忠，王榮*

1解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第940醫(yī)院藥劑科，蘭州 730050；2蘭州大學(xué)藥學(xué)院，蘭州 730000

高原一般指海拔2500 m以上的高海拔地區(qū)，具有低氧分壓、低氣壓、寒冷干燥、紫外線強(qiáng)等特點(diǎn)[1]，其中低氧分壓對(duì)機(jī)體的影響尤為顯著[2]。機(jī)體在短時(shí)間內(nèi)急進(jìn)高原，會(huì)產(chǎn)生一系列生理病理反應(yīng)，如頭痛、疲勞、厭食等，嚴(yán)重者甚至發(fā)展為急性高原病[3-5]。急性高原病主要分為三種：急性高原反應(yīng)、高原肺水腫(high altitude pulmonary edema，HAPE)和高原腦水腫[6]。HAPE是一種非心源性肺水腫，常發(fā)生于急進(jìn)海拔>3000 m地區(qū)的人群[7]，主要表現(xiàn)為體力喪失、呼吸困難、肺部濕啰音、發(fā)紺、咳嗽、粉紅泡沫痰等[8]，其誘因主要為高原低氧，常伴隨低氧血癥及氧化應(yīng)激損傷等[9]。隨著高原旅居人群的增多，HAPE的防治越來越受到重視[10]。關(guān)于HAPE的研究?；谙嚓P(guān)動(dòng)物模型，現(xiàn)有的HAPE動(dòng)物模型一般是在低壓低氧模擬艙內(nèi)，以輔助跑臺(tái)力竭運(yùn)動(dòng)的方式建立的[11]。模擬艙可模擬高原的低壓低氧環(huán)境，但高原環(huán)境復(fù)雜多樣，急進(jìn)高原的過程與模擬艙不同，在高原實(shí)地建立動(dòng)物模型能夠更準(zhǔn)確地復(fù)現(xiàn)HAPE的發(fā)病過程。目前，人們?cè)诩边M(jìn)高原前常選用紅景天膠囊預(yù)防急性高原病(包括HAPE)，但紅景天生長(zhǎng)環(huán)境海拔高，原料難得，故開發(fā)效果顯著、原料易得的預(yù)防高原疾病的藥物尤為重要。檳榔原產(chǎn)于馬來西亞，在中國(guó)主要分布于云南等地，屬于一種中藥材。檳榔的主要成分為檳榔多酚，主要是黃酮類物質(zhì)[12]。據(jù)報(bào)道，檳榔多酚具有較強(qiáng)的抗氧化應(yīng)激作用，檳榔的抗氧化活性主要來自多酚類化合物，多酚的含量與抗氧化、抗缺氧的能力密切相關(guān)[13]。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，檳榔多酚能夠減輕低氧對(duì)H9C2心肌細(xì)胞造成的損傷[14]，且800 mg/kg檳榔多酚能夠減輕大鼠在高原環(huán)境下的組織損傷[15]。本研究首次在4010 m高原實(shí)地建立HAPE動(dòng)物模型，評(píng)估檳榔多酚對(duì)HAPE的預(yù)防效果，以期為臨床預(yù)防HAPE提供候選藥物。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及儀器 紅景天膠囊(西藏軍區(qū)紅景天研制中心，批號(hào)：190402)；檳榔飲片(甘肅隴脈藥材有限公司)；BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(北京索萊寶科技有限公司)；總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、谷胱甘肽(glutathione，GSH)測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物跑臺(tái)(安徽正華生物儀器設(shè)備有限公司)；MDF-U2086S超低溫冰箱(日本SANYO公司)；3K15型4 ℃高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)(美國(guó)Sigma公司)；全自動(dòng)血?dú)夥治鰞x(美國(guó)Nova公司)；Tissuelyser-24多樣品組織研磨機(jī)(上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司)；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(常州普天儀器制造有限公司)；SpectraMax i3型全自動(dòng)熒光酶標(biāo)儀(美國(guó)Molecular公司)；渦旋混勻器(海門市其林貝爾儀器制造有限公司)；倒置顯微鏡(日本Olympus公司)。

1.2 檳榔多酚提取物的制備 檳榔多酚由本課題組自行制備。將檳榔飲片研磨成粉，以80%乙醇溶液作為提取溶劑(料液比1:30)，65 ℃提取2 h[15]。提取后的產(chǎn)物經(jīng)AB-8大孔樹脂純化，以95%乙醇洗脫。酒石酸法檢測(cè)顯示純化后的產(chǎn)物中檳榔多酚含量為45.03%。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 SPF級(jí)Wistar雄性大鼠36只，購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)：SCK(遼)2020-0001]，體重(200±20) g，隨機(jī)分成6組：對(duì)照組(參照文獻(xiàn)[16–19])、肺水腫模型組、紅景天組(作為陽(yáng)性對(duì)照，參照文獻(xiàn)[20–22])以及檳榔多酚低、中、高劑量組，每組6只。紅景天給藥劑量參照臨床劑量，按照體表面積折算法換算[大鼠的折算系數(shù)=(體型系數(shù)大鼠×W2/3大鼠)/(體型系數(shù)人×W2/3人)]，每日劑量為280 mg/kg。因本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，800 mg/kg檳榔多酚能夠減輕大鼠在高原環(huán)境下的組織損傷[15]，本研究中檳榔多酚給藥低、中、高劑量分別為400、800、1200 mg/kg。除對(duì)照組外，其余各組大鼠按照表1的方案預(yù)防給藥3 d后急進(jìn)高原(海拔4010 m)，運(yùn)送途中果凍補(bǔ)水。抵達(dá)高原后，繼續(xù)低氧暴露48 h，期間仍按表1的方案給藥，使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物跑臺(tái)對(duì)大鼠進(jìn)行強(qiáng)制力竭運(yùn)動(dòng)，12 h運(yùn)動(dòng)/12 h休息為1個(gè)周期，運(yùn)動(dòng)期間每1 h休息5～10 min，共進(jìn)行2個(gè)周期。于末次給藥后1 h進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，對(duì)照組同時(shí)開始實(shí)驗(yàn)。本研究通過聯(lián)勤保障部隊(duì)第940醫(yī)院科研倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(220KYLL112)，實(shí)驗(yàn)過程符合國(guó)家和單位有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理和使用規(guī)定。

表1 各高原肺水腫大鼠實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的給藥方案Tab.1 Administration scheme of experiment group and control group of rats with high altitude pulmonary edema

1.4 大鼠體重測(cè)定 實(shí)驗(yàn)開始前，各組大鼠稱重并記錄。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后即采血前，再次進(jìn)行稱重并記錄，比較各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后及不同組別之間體重的差異。

1.5 血?dú)庵笜?biāo)測(cè)定 末次給藥1 h后，腹腔注射水合氯醛麻醉大鼠，沿腹中線打開腹腔，取腹主動(dòng)脈血，使用血?dú)夥治鰞x檢測(cè)動(dòng)脈血氧飽和度(SatO2)、血液酸堿度(pH)、動(dòng)脈血二氧化碳分壓(PaCO2)、動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)、血漿實(shí)際碳酸氫根(HCO3–)、標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫鹽(SBC)等，判斷大鼠缺氧程度。

1.6 肺含水量(lung water content，LWC)測(cè)定 各組大鼠麻醉后，打開胸腔，取出右肺上葉，稱量肺組織濕重，然后置于烘箱烘干72 h，溫度設(shè)定56 ℃，稱量干重。LWC(%)=(肺組織濕重—肺組織干重)/肺組織濕重×100%。

1.7 肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)蛋白含量測(cè)定 各組大鼠麻醉后，打開胸腔，結(jié)扎右肺，插入氣管插管，用3 ml預(yù)冷的生理鹽水分2～3次沖洗左肺，采集BALF，800g離心10 min，取上清，用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定總蛋白濃度。

1.8 肺組織氧化應(yīng)激指標(biāo)測(cè)定 各組大鼠麻醉后，打開胸腔，取右肺下葉，加入預(yù)冷的生理鹽水(m:V=1:9)制備10%組織勻漿，采用試劑盒測(cè)定肺組織勻漿的蛋白濃度、T-SOD活力、MDA含量和GSH含量。

1.9 HE染色觀察肺組織病理變化 每組各取2只大鼠，麻醉后打開胸腔，取出完整右肺中葉，用預(yù)冷的生理鹽水洗凈血液，并用多聚甲醛固定液固定，使組織充分展開。組織固定后，切片(厚4 μm)、脫水、石蠟包埋、蘇木精-伊紅染色、脫水、樹脂封片，顯微鏡下觀察肺組織病理學(xué)變化。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有數(shù)據(jù)以表示，組間比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后體重變化 如表2所示，與實(shí)驗(yàn)前比較，實(shí)驗(yàn)后對(duì)照組、紅景天組和檳榔多酚中劑量組大鼠體重增加(P<0.05)，其余組實(shí)驗(yàn)前后體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)前后，各組間大鼠體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后體重變化(g，±s，n=6)Tab.2 Changes of body weight of rats in each group before and after experiment (g, ±s, n=6)

表2 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后體重變化(g，±s，n=6)Tab.2 Changes of body weight of rats in each group before and after experiment (g, ±s, n=6)

組別 實(shí)驗(yàn)前 實(shí)驗(yàn)后 P對(duì)照組 205.17±3.19 219.33±5.82 <0.001肺水腫模型組 209.33±2.94 217.83±9.52 0.063紅景天組 206.83±6.85 218.33±4.50 0.006檳榔多酚低劑量組 208.00±6.69 212.67±7.99 0.299檳榔多酚中劑量組 205.50±9.59 218.50±7.92 0.028檳榔多酚高劑量組 209.50±4.85 215.17±9.60 0.226

2.2 各組大鼠血?dú)庵笜?biāo)比較 與對(duì)照組比較，肺水腫模型組大鼠SatO2、血液pH、PaO2、PaCO2、PO2/FIO2、SBC、二氧化碳總量(TCO2)、HCO3–分別降低11.19%、1.21%、37.44%、20.87%、37.46%、19.07%、21.11%、24.93%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)，且SatO2、血液pH、PaO2、PaCO2均低于正常范圍(表3)。

與肺水腫模型組比較，紅景天組及檳榔多酚低、中、高劑量組大鼠S a t O2分別升高6.56%(P<0.01)、1.79%(P<0.01)、6.10%(P<0.01)、4.6 3%(P<0.0 1)，血液p H 均升高至正常范圍(P<0.05)。與肺水腫模型組比較，紅景天組、檳榔多酚中劑量組、檳榔多酚高劑量組大鼠PaO2分別升高9.54%(P<0.01)、8.72%(P<0.01)、5.79%(P<0.01)，檳榔多酚低劑量組、檳榔多酚中劑量組大鼠PaCO2明顯升高5.56%(P<0.05)、10.78%(P<0.01)。與肺水腫模型組比較，檳榔多酚低、中、高劑量組大鼠SBC分別升高10.88%(P<0.01)、13.18%(P<0.05)、1 0.3 8%(P<0.0 1)，紅景天組和檳榔多酚中劑量組大鼠PO2/FIO2分別升高11.06%(P<0.01)和5.16%(P<0.05)(表3)。檳榔多酚各劑量組在血?dú)庵笜?biāo)改善方面與紅景天組效果相近。

表3 各組大鼠血?dú)庵笜?biāo)比較(±s，n=6)Tab.3 Comparison of arterial blood gas index of rats in each group (±s, n=6)

表3 各組大鼠血?dú)庵笜?biāo)比較(±s，n=6)Tab.3 Comparison of arterial blood gas index of rats in each group (±s, n=6)

動(dòng)脈血氧飽和度(SatO2)正常范圍95%～100%；血液pH正常范圍7.35～7.45；動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)正常范圍60～90 mmHg；動(dòng)脈血二氧化碳分壓(PaCO2)正常范圍35～45 mmHg；PO2/FlO2. 氧合指數(shù)；SBC. 標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫鹽；TCO2. 二氧化碳總量；HCO3–. 血漿實(shí)際碳酸氫根；P50. 半飽和氧分壓；與對(duì)照組比較，(1)P<0.05，(2)P<0.01；與肺水腫模型組比較，(3)P<0.05，(4)P<0.01。

項(xiàng)目 對(duì)照組 肺水腫模型組 紅景天組 檳榔多酚低劑量組 檳榔多酚中劑量組 檳榔多酚高劑量組SatO2(%) 96.50±0.56 85.70±0.28(2) 91.32±0.81(2)(4) 87.23±1.54(2)(4) 90.93±0.81(2)(4) 89.67±1.19(2)(4)pH 7.41±0.02 7.32±0.04(2) 7.39±0.01(3) 7.41±0.01(3) 7.41±0.02(3) 7.41±0.02(3)PaO2(mmHg) 86.13±3.08 53.88±1.99(2) 59.02±1.06(2)(4) 54.18±1.97(2) 58.58±1.81(2)(4) 57.00±1.21(2)(4)PaCO2(mmHg) 38.67±3.47 30.60±0.65(1) 30.45±1.37(1) 32.30±0.64(1)(3) 33.90±1.07(4) 32.77±2.80 PO2/FlO2(mmHg) 412.12±14.57 257.75±9.51(2) 286.27±6.99(2)(4) 259.22±9.42(2) 271.05±11.72(2)(3) 268.85±8.96(2)SBC(mmol/L) 24.65±0.94 19.95±0.69(2) 20.90±0.60(2) 22.12±0.62(2)(4) 22.58±1.19(3) 22.02±0.46(2)(4)TCO2(mmol/L) 25.67±1.66 20.25±1.43(2) 20.20±0.75(2) 21.53±0.94(2) 22.28±1.66(1) 21.07±0.43(2)HCO3–(mmol/L) 24.47±1.59 18.37±1.32(2) 19.22±0.73(2) 20.55±0.92(2) 21.25±1.62(1) 20.55±0.78(2)P50(mmHg) 26.33±0.18 26.70±0.06(1) 26.62±0.04 26.65±0.05(1) 26.58±0.08 26.50±0.06(4)

2.3 各組大鼠LWC、BLAF蛋白含量及肺組織氧化應(yīng)激指標(biāo)比較 LWC測(cè)定結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，肺水腫模型組大鼠LWC明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(80.63%±0.25%vs. 79.00%±0.68%，P<0.0 1)。在預(yù)防性給予紅景天膠囊以及低、中、高劑量檳榔多酚后，大鼠LW C 分別降至79.67%±0.54%、79.07%±0.26%、78.49%±0.30%及78.10%±0.38%，且檳榔多酚效果優(yōu)于紅景天，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)(表4)。

BL AF蛋白含量測(cè)定結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，肺水腫模型組大鼠BLAF蛋白含量升高1.42倍(P<0.01)；與肺水腫模型組比較，紅景天組及檳榔多酚低、中、高劑量組大鼠BLAF蛋白含量明顯降低(P<0.01)，且基本降至對(duì)照組水平(表4)。與紅景天組相比，檳榔多酚低、中、高劑量組對(duì)大鼠BLAF蛋白含量的改善效果相近。

與對(duì)照組比較，肺水腫模型組大鼠肺組織SOD活力、GSH含量分別降低19.59%、37.29%，MDA含量升高20.29%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與肺水腫模型組比較，紅景天組大鼠肺組織SOD活力、GSH含量明顯升高20.32%(P<0.05)、72.97%(P<0.05)；檳榔多酚中劑量組大鼠肺組織SOD活力明顯升高25.86%(P<0.01)，GSH含量明顯升高1.35倍(P<0.01)；檳榔多酚高劑量組大鼠肺組織SOD活力升高26.54%(P<0.01)，MDA含量降低18.58%(P<0.05)，GSH含量升高1.19倍(P<0.01)。檳榔多酚低劑量組與肺水腫模型組大鼠肺組織SOD活力、MDA含量及GSH含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表4)。檳榔多酚各劑量組在緩解氧化應(yīng)激損傷方面優(yōu)于紅景天。

表4 各組大鼠LWC、BLAF蛋白含量及肺組織氧化應(yīng)激指標(biāo)比較(±s，n=6)Tab.4 Comparison of LWC, BLAF protein content and oxidative stress level of lung tissue in each group of rats (±s, n=6)

表4 各組大鼠LWC、BLAF蛋白含量及肺組織氧化應(yīng)激指標(biāo)比較(±s，n=6)Tab.4 Comparison of LWC, BLAF protein content and oxidative stress level of lung tissue in each group of rats (±s, n=6)

LWC. 肺含水量；BALF. 肺泡灌洗液；SOD. 超氧化物歧化酶；MDA. 丙二醛；GSH. 谷胱甘肽；與對(duì)照組比較，(1)P<0.05，(2)P<0.01；與肺水腫模型組比較，(3)P<0.05，(4)P<0.01。

組別 LWC(%) BALF蛋白含量(mg/ml) SOD活力(U/mg prot) MDA含量(nmol/mg prot) GSH含量(mg/g prot)對(duì)照組 79.00±0.68 0.24±0.06 146.98±17.37 3.40±0.35 0.59±0.10肺水腫模型組 80.63±0.25(2) 0.58±0.05(2) 118.18±16.09(1) 4.09±0.54(1) 0.37±0.03(1)紅景天組 79.67±0.54(3) 0.27±0.04(4) 142.20±17.94(3) 3.55±0.39 0.64±0.11(3)檳榔多酚低劑量組 79.07±0.26(4) 0.26±0.06(4) 120.50±14.18(1) 3.89±0.66 0.49±0.07檳榔多酚中劑量組 78.49±0.30(4) 0.25±0.06(4) 148.74±23.27(4) 3.61±0.50 0.87±0.17(4)檳榔多酚高劑量組 78.10±0.38(4) 0.28±0.07(4) 149.54±21.58(4) 3.33±0.83(3) 0.81±0.35(4)

2.4 各組大鼠肺組織病理變化情況 HE染色結(jié)果顯示，對(duì)照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整，肺泡呈空泡狀薄壁結(jié)構(gòu)，肺泡腔內(nèi)無細(xì)胞及液體滲出，未出現(xiàn)明顯病理改變(圖1A)；肺水腫模型組大鼠肺泡壁明顯增厚，肺泡腔縮小并存在紅細(xì)胞及粉紅色蛋白物質(zhì)，伴有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)(圖1B)；預(yù)防給藥400、800、1200 mg/kg檳榔多酚和280 mg/kg紅景天后，大鼠肺泡結(jié)構(gòu)趨于完整，肺泡壁變薄，肺泡腔內(nèi)滲出減少甚至消失，炎性細(xì)胞減少，且1200 mg/kg檳榔多酚組改善作用較紅景天組更顯著(圖1C－F)。

圖1 各組大鼠肺組織病理變化(HE ×20)Fig.1 Pathological changes of lung tissue in rats of each group (HE ×20)

3 討 論

高原低氧是一系列高原疾病的主要誘因，HAPE的發(fā)生常伴有低氧血癥，血?dú)庵笜?biāo)能夠衡量機(jī)體的呼吸功能和血液酸堿平衡狀況，通常用來評(píng)估機(jī)體的缺氧程度[23-24]。SatO2反映了動(dòng)脈血中氧合血紅蛋白與總血紅蛋白的比例，可用于評(píng)估機(jī)體的血氧狀況。HAPE大鼠的SatO2明顯低于90%，提示發(fā)生了低氧血癥，預(yù)防性給予檳榔多酚能夠明顯提升SatO2，緩解機(jī)體低氧血癥，有效預(yù)防HAPE的發(fā)生。血液pH的正常范圍為7.35～7.45，HAPE大鼠血液pH低于7.35，提示機(jī)體出現(xiàn)酸中毒[25]，預(yù)防性給予檳榔多酚后，血液pH基本恢復(fù)正常水平。PaO2正常范圍為60～90 mmHg，一般PaO2<80 mmHg時(shí)，機(jī)體可能處于低氧狀態(tài)，PaO2<60 mmHg提示機(jī)體出現(xiàn)呼吸功能障礙。PaCO2正常范圍為35～45 mmHg，PaCO2<35 mmHg提示機(jī)體出現(xiàn)呼吸性堿中毒或代謝性酸中毒。本研究結(jié)果表明，HAPE大鼠的呼吸功能嚴(yán)重受損，血液酸堿度異常降低，出現(xiàn)呼吸性堿中毒合并代謝性酸中毒，而在預(yù)防性給予檳榔多酚后，高原低氧條件下大鼠的低氧血癥及呼吸功能障礙得到明顯緩解，有效預(yù)防了HAPE的發(fā)生。

LWC可反映肺水腫的整體嚴(yán)重程度[26]。本研究結(jié)果顯示，HAPE大鼠LWC較對(duì)照組明顯升高，表明肺部出現(xiàn)明顯水腫，HAPE模型建立成功。相較肺水腫模型組，檳榔多酚組能明顯降低LWC，且呈劑量依賴性。

BALF蛋白含量可反映肺泡毛細(xì)血管的通透性，肺泡毛細(xì)血管通透性增加是HAPE發(fā)生的典型特征[27]。本研究結(jié)果顯示，肺水腫模型組大鼠BALF蛋白含量較對(duì)照組明顯升高，提示肺泡毛細(xì)血管通透性明顯增加，而相較肺水腫模型組，檳榔多酚組大鼠的肺泡毛細(xì)血管通透性均有極大程度的改善，接近對(duì)照組水平，表明檳榔多酚可減輕HAPE。

HAPE伴隨著一系列氧化應(yīng)激損傷。機(jī)體內(nèi)自由基的生成與清除處于動(dòng)態(tài)平衡，這種平衡主要通過以SOD[28]、谷胱甘肽過氧化氫酶(GSH-Px)[29]為主的酶系統(tǒng)來維持。自由基與脂質(zhì)的過氧化反應(yīng)終產(chǎn)物是MDA，通常用MDA含量來評(píng)價(jià)組織膜系統(tǒng)的損傷程度[30]。本研究結(jié)果顯示，肺水腫模型組大鼠肺組織SOD活力及GSH含量明顯降低，而MDA含量明顯升高，表明肺水腫模型組大鼠肺組織發(fā)生了明顯的氧化應(yīng)激損傷。在預(yù)防性給予高劑量檳榔多酚(1200 mg/kg)后，氧化應(yīng)激損傷程度有明顯緩解。

本研究中大鼠在高原條件下進(jìn)行跑臺(tái)力竭運(yùn)動(dòng)后，病理切片顯示肺組織有明顯損傷：肺泡壁增厚，肺泡腔縮小并存在紅細(xì)胞及粉紅色蛋白物質(zhì)，伴有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。預(yù)防性給予紅景天膠囊及檳榔多酚后，大鼠的肺泡結(jié)構(gòu)趨于完整，肺泡壁變薄，肺泡腔內(nèi)滲出減少甚至消失，炎性細(xì)胞減少，其中檳榔多酚高劑量組減輕肺組織病理?yè)p傷的效果尤為明顯，且優(yōu)于紅景天膠囊。

檳榔多酚對(duì)HAPE的預(yù)防作用與劑量有一定的相關(guān)性，1200 mg/kg的劑量有更為明顯的預(yù)防效果，但800 mg/kg也具有明顯的作用。在實(shí)驗(yàn)過程中未發(fā)現(xiàn)1200 mg/kg檳榔多酚對(duì)大鼠具有明顯的毒性作用，但仍需進(jìn)一步深入研究。而最優(yōu)給藥方案應(yīng)結(jié)合藥效及劑量綜合評(píng)價(jià)，因此，800 mg/kg及1200 mg/kg的劑量均具有較高的臨床參考價(jià)值。本研究中，檳榔多酚的純度仍有一定的優(yōu)化空間，以此降低檳榔多酚的給藥劑量，并需深入研究其發(fā)揮藥效的主要成分，探索其作用靶點(diǎn)，為成藥研究提供理論依據(jù)。

綜上所述，本研究在高原實(shí)地配合跑臺(tái)強(qiáng)制力竭運(yùn)動(dòng)成功建立了HAPE大鼠模型，并證實(shí)檳榔多酚對(duì)于HAPE具有明顯的預(yù)防作用，800 mg/kg及1200 mg/kg檳榔多酚可減輕HAPE大鼠的低氧血癥及水腫程度，維持肺泡毛細(xì)血管通透性，減輕氧化應(yīng)激損傷及病理?yè)p傷，從而有效預(yù)防HAPE的發(fā)生。