山東省動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性的現(xiàn)狀、問(wèn)題及應(yīng)對(duì)措施

李有志　馮濤　魏茂蓮　魏秀麗

摘要：基于對(duì)山東省動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性和獸用抗菌藥使用情況的調(diào)研，分析了山東省動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性現(xiàn)狀和存在的問(wèn)題，并提出了防控策略。需深化綠色生態(tài)產(chǎn)品新制劑的研究;加強(qiáng)高效、低毒新型抗菌藥研制，優(yōu)化畜禽養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)控制;加快完善細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)體系構(gòu)建，嚴(yán)格落實(shí)獸用抗菌藥分類和科學(xué)精準(zhǔn)使用藥物;推進(jìn)獸用抗菌藥減量化示范行動(dòng)等綜合措施，從根本上遏制獸用抗菌藥濫用，以期降低細(xì)菌耐藥性的發(fā)生和發(fā)展，保障畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全。

關(guān)鍵詞：動(dòng)物源細(xì)菌;耐藥性;問(wèn)題;防控策略

Present Situation， Problems and Countermeasures of DrugResistance of Zoonotic Bacteria in Shandong Province

Li Youzhi， Feng Tao， Wei Maolian， Wei Xiuli

Abstract

Based on the investigation on drug resistance of zoonotic bacteria and use of veterinary antimi-crobial in Shandong Province， the present situation and problems of drug resistance were analyzed， and theprevention and control strategies were put forward. It should be necessary to deepen the research on new prep-arations of green ecological products， strengthen the development of new antimicrobial agents with high effi-ciency and low toxicity， optimize the ecosystem control of livestock and poultry breeding environment， acceler-ate the improvement and construction of a monitoring system for bacterial drug resistance， strictly carry out theclassification of veterinary antimicrobial drugs and scientific and accurate use of drugs， and promote the com-prehensive measures to reduce the use of anti - bacterial drugs ， so as to control the abuse of veterinary antimi-crobial drugs， reduce the occurrence and the development of the drug resistance of bacteria， and ensure thesafety of product quality of livestock and poultry.

Keywords

Zoontic bacterial; Drug resistance;Problem;Prevention and control strategy

近年來(lái)，隨著人們對(duì)食品安全和公共衛(wèi)生安全的高度重視，畜牧領(lǐng)域的環(huán)境污染、獸藥殘留和細(xì)菌耐藥性問(wèn)題越來(lái)越受到關(guān)注?！?·15晚會(huì)曝光飼料非法添加”、“毒雞蛋事件”等聚焦獸藥殘留、違禁用藥等突出問(wèn)題，2017年12月新華通訊社以“我國(guó)可能出現(xiàn)無(wú)藥可治的超級(jí)細(xì)菌”為標(biāo)題，詳細(xì)報(bào)道了我國(guó)農(nóng)業(yè)抗生素濫用問(wèn)題。我國(guó)動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性非常嚴(yán)重[1-3]，相關(guān)問(wèn)題已引起國(guó)家和有關(guān)部門的高度重視，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部首次把“開(kāi)展獸用抗菌藥綜合治理”列入2018年全國(guó)獸醫(yī)工作要點(diǎn)，5月19日在重慶組織啟動(dòng)了“獸用抗菌藥使用減量化行動(dòng)”，深入開(kāi)展養(yǎng)殖環(huán)節(jié)抗菌藥使用減量化示范創(chuàng)建活動(dòng)。

1 動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性的現(xiàn)狀

1.1 獸用抗菌藥物使用情況

我國(guó)批準(zhǔn)使用的獸用抗菌類藥物主要有B -內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、糖肽類、多肽類、氯霉素類和四環(huán)素類等8類，共56個(gè)品種;合成抗菌藥主要品種有磺胺類、喹諾酮類及其他，共3類45個(gè)品種。

山東省日前開(kāi)展獸用抗菌藥物使用專題調(diào)研，前三位的畜禽品種分別是生豬、奶牛和肉雞，約占全部抗菌藥物的70%左右;寵物及水產(chǎn)用約28%;肉牛、肉羊除疫苗防疫、驅(qū)蟲外，基本不用抗菌藥?？咕幰园被擒疹?、B -內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類、磺胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、氯霉素類較多。飼料藥物添加劑主要使用金霉素預(yù)混劑、桿菌肽鋅、地克珠利（肉雞）等（表1）。商品豬出欄每頭需要抗菌藥費(fèi)用10～15元左右，肉雞每只需要抗菌藥費(fèi)用0.5～0.8元，每頭泌乳奶牛年抗菌藥費(fèi)用300～400元，以上數(shù)據(jù)不包括防疫用疫苗費(fèi)用。

1.2 動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性情況

山東省是畜牧養(yǎng)殖大省，近30年來(lái)養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展，至2017年底，全省肉蛋奶總產(chǎn)量1490萬(wàn)噸;獸藥生產(chǎn)企業(yè)近300家，省級(jí)以上標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖示范企業(yè)近300家，規(guī)模養(yǎng)殖比重達(dá)71%。集約化和規(guī)模化養(yǎng)殖對(duì)病原菌的防控需要抗生素作為保障，但由于整體的抗藥性監(jiān)測(cè)體系薄弱，大量使用抗菌藥物造成細(xì)菌耐藥性快速發(fā)展，我國(guó)已成為世界上動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性最嚴(yán)重的國(guó)家之一，并陷入“耐藥性上升一用藥量/種類上升一耐藥性再上升”惡性循環(huán)。

獸醫(yī)臨床常用的四環(huán)素類、B -內(nèi)酰胺類和喹諾酮類等抗菌藥物療效已嚴(yán)重下降甚至失效;常見(jiàn)病原菌（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌、副豬嗜血桿菌、胸膜肺炎放線桿菌、巴氏桿菌、支原體、沙門氏菌、克雷伯菌、綠膿假單胞菌等）臨床分離株可耐受的藥物達(dá)5—20種，出現(xiàn)無(wú)藥可用的尷尬局面。不僅如此，人、畜共用同類甚至同種抗生素，加之一些人畜共患病原菌尤其是食源性病原菌（如沙門氏菌、彎曲桿菌等）多重耐藥株的出現(xiàn)和在人畜之間流行，對(duì)我國(guó)的動(dòng)物源食品安全和公眾衛(wèi)生構(gòu)成了嚴(yán)重威脅[1-3]。

張利鋒等對(duì)山東大型肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)、屠宰場(chǎng)分離的373株大腸桿菌進(jìn)行藥物斂感性檢測(cè)、blaCTX-M基因核酸檢測(cè)及序列分析。結(jié)果表明菌株對(duì)頭孢他啶、頭孢噻肟和哌拉西林耐藥率高，依次是89.3%、92.8%和91.7%，頭孢菌素類藥物間存在交叉耐藥性，菌株blaCTX-M基因的攜帶率高達(dá)54.7%，來(lái)自養(yǎng)殖和銷售等不同環(huán)節(jié)的菌株攜帶的blaCTX -M基因集中在4個(gè)亞型，分別是blaCTX-M-55、blaCTX-M-65、blaCTX -M-14和blaCTX-M-27，提示肉雞食品鏈不同環(huán)節(jié)可能存在大腸桿菌耐藥性的傳播[4]。

劉建民等對(duì)2010年以來(lái)分離自山東省濰坊市發(fā)病肉鴨的232株大腸桿菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星的耐藥率為54.31%～82.76%，質(zhì)粒介導(dǎo)氟喹諾酮類耐藥基因（ PMQR）攜帶率達(dá)到58.19%，26.29%的菌株攜帶兩種PMQR基因，1.72%的菌株攜帶三種PMQR基因。未檢測(cè)到qnr 4、qnrB、qnr C、qnr D與Qep A基因;qnr S、oqxA和oqxB基因在山東省禽源致病性大腸桿菌中分布較為廣泛，其檢出率依次為19.83%、41.81%和26.29%[5]。

刁有江等從山東部分地區(qū)的規(guī)模化肉鴨場(chǎng)分離到致病性大腸桿菌92株，對(duì)19種受試藥存在不同程度的耐藥性。70%以上的大腸桿菌分離株對(duì)氨芐青霉素、阿莫西林、多西環(huán)素、痢菌凈、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、諾氟沙星、磺胺甲基異惡唑/甲氧芐啶8種抗菌藥耐藥;此外，還有50%以上的菌株對(duì)卡那霉素、氧氟沙星以及黏菌素3種抗菌藥表現(xiàn)為耐藥。所有分離株均為多重耐藥菌株。78.26%的分離株對(duì)8種或8種以上的受試藥耐藥[6]。

王昌健采集山東部分地區(qū)的病豬病料分離大腸桿菌菌株79株，對(duì)紅霉素、磺胺嘧啶、氨芐西林的耐藥性非常高（100%分別占5、3、4個(gè)地區(qū)）;對(duì)多粘菌素敏感性高達(dá)100%;對(duì)頭孢噻肟耐藥性為21.51%;對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥率最高達(dá)82.72%，對(duì)洛美沙星、加替沙星、恩諾沙星、左氟沙星、諾氟沙星耐藥率分別為15.19%、20.20%、21.51%、26.58%、27.84%，對(duì)鏈霉素、復(fù)方新諾明、多西環(huán)素、氟苯尼考、慶大霉素的耐藥率均在58%以上，基本上不能用于臨床治療[7]。

馮敏燕等采用96點(diǎn)陣藥敏檢測(cè)法，測(cè)定從臨床上分離鑒定的2008 -2014年山東省不同地區(qū)雞場(chǎng)的210株大腸桿菌對(duì)14種抗生素的耐藥性。結(jié)果顯示13種（多西環(huán)素除外）的耐藥性在這7年間有所增長(zhǎng)，其中對(duì)10種抗生素的耐受性在7年間近乎翻了1倍甚至更高。根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果，建議在山東地區(qū)暫停使用頭孢噻呋治療雞大腸桿菌病，推薦使用多西霉素、大觀霉素，將慶大霉素、新霉素、恩諾沙星、氟苯尼考作為次級(jí)藥物使用[8]。

王娟等采用微量肉湯稀釋法對(duì)298株生豬屠宰環(huán)節(jié)中沙門氏菌進(jìn)行8大類13種藥物的藥敏試驗(yàn)。結(jié)果顯示多西環(huán)素、四環(huán)素的耐藥率較高，分別為97.99%、80.20%，對(duì)粘桿菌素E最為敏感，耐藥率僅為2.01%，多重耐藥率為81.88%，優(yōu)勢(shì)耐藥譜型為四環(huán)素一多西環(huán)素[9]。

孫璐等從山東省不同地市肉雞屠宰生產(chǎn)鏈中分離的233株沙門氏菌對(duì)慶大霉素的耐藥率最高（100%）;對(duì)多西環(huán)素、氨芐西林、大觀霉素、四環(huán)素、氟苯尼考和磺胺異惡唑耐藥率分別為84.94%、75.73%、67.78%、56.00%、52.00%和50.00%。72.00%的菌株表現(xiàn)為多重耐藥（≥3），產(chǎn)生了57種耐藥譜型[10]。

李秀梅等采用紙片擴(kuò)散法測(cè)定從奶牛場(chǎng)分離的121株金黃色葡萄球菌對(duì)6種抗生素的敏感性：耐苯唑西林金黃色葡萄球菌（ MRSA）為26株，占21.5%;對(duì)苯唑西林敏感菌（MSSA）為93株，占76.9%;中介菌株為2株，占1.6%;金黃色葡萄球菌對(duì)6種抗生素耐藥率最低的是頭孢噻肟，為2株，占1.6%。MSSA對(duì)大部分抗生素仍保持良好的敏感性，而MRSA表現(xiàn)為多重耐藥性[11]。

由以上文獻(xiàn)可以看出山東省不同地區(qū)、不同年代，大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌對(duì)不同藥物的耐藥水平有所不同，但隨著年代的變化，耐藥性逐年升高，且為多重耐藥性，耐藥基因在產(chǎn)業(yè)鏈中可以傳播;氟喹諾酮類藥物的多種藥物耐藥率居高不下，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部于2016年1月1日開(kāi)始禁止經(jīng)營(yíng)及使用洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星等4種人獸共用抗菌藥物用于食品動(dòng)物，也是出于人類健康和生態(tài)安全考慮。頭孢菌素類藥物的耐藥性近兩年也有所提升，磺胺類藥物、四環(huán)素類藥物的耐藥性普遍很高。

中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)駐場(chǎng)獸醫(yī)認(rèn)為，現(xiàn)在單純用抗菌藥物來(lái)防治動(dòng)物疫病難度越來(lái)越大、成本越來(lái)越高，多數(shù)藥物按照推薦劑量進(jìn)行治療往往效果不理想，加大用藥量的現(xiàn)象比較普遍。鑒于細(xì)菌耐藥性問(wèn)題已經(jīng)列為了本世紀(jì)最重要的公共安全事件之一，動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性問(wèn)題可能會(huì)成為繼獸藥殘留之后動(dòng)物源性食品貿(mào)易的又一技術(shù)壁壘，因此運(yùn)用互聯(lián)網(wǎng)盡快建成山東省細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)大數(shù)據(jù)平臺(tái)，實(shí)現(xiàn)一藥多菌、一菌多藥的時(shí)空查詢迫在眉睫。

1.3 相關(guān)法律法規(guī)、監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 法律法規(guī)我國(guó)涉及動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性的法律尚缺失，三個(gè)行政法規(guī)從不同層面強(qiáng)調(diào)了動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)的重要性，對(duì)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)防控工作起到了提綱挈領(lǐng)的作用。

（1）2016年8月25日，國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委等14部門聯(lián)合發(fā)布的《遏制細(xì)菌耐藥國(guó)家行動(dòng)計(jì)劃（2016-2020年）》提出：到2020年健全醫(yī)療機(jī)構(gòu)、動(dòng)物源抗菌藥物應(yīng)用和細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)，人獸共用抗菌藥物或易產(chǎn)生交叉耐藥性的抗菌藥物作為動(dòng)物促生長(zhǎng)應(yīng)用逐步退出，加強(qiáng)獸用抗菌藥物監(jiān)督管理，制定獸用抗菌藥物安全使用指導(dǎo)原則和管理辦法，推動(dòng)動(dòng)物專用抗菌藥物和可替代抗菌藥物的動(dòng)物疾病預(yù)防與促生長(zhǎng)產(chǎn)品研究與開(kāi)發(fā)等措施，使動(dòng)物源主要耐藥菌增長(zhǎng)率得到有效控制。

（2）2017年5月12日國(guó)家發(fā)展改革委、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部、質(zhì)檢總局、林業(yè)局聯(lián)合發(fā)布的《全國(guó)動(dòng)植物保護(hù)能力提升工程建設(shè)規(guī)劃（2017-2025年）》提出：獸藥質(zhì)量監(jiān)察能力建設(shè)主要是建設(shè)中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所和省級(jí)獸藥檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室。

（3）2017年6月23日農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的《全國(guó)遏制動(dòng)物源細(xì)菌耐藥行動(dòng)計(jì)劃（2017-2020年）》明確提出六大行動(dòng)：一是實(shí)施“退出行動(dòng)”，推動(dòng)促生長(zhǎng)用抗菌藥物逐步退出;二是實(shí)施“監(jiān)管行動(dòng)”，強(qiáng)化獸用抗菌藥物監(jiān)督管理;三是實(shí)施“監(jiān)測(cè)行動(dòng)”，健全動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)體系;四是實(shí)施“監(jiān)控行動(dòng)”，強(qiáng)化獸用抗菌藥物殘留監(jiān)控;五是實(shí)施“示范行動(dòng)”，開(kāi)展獸用抗菌藥物使用減量化示范創(chuàng)建;六是實(shí)施“宣教行動(dòng)”，加強(qiáng)從業(yè)人員培訓(xùn)和公眾宣傳教育。

1.3.2 監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和方法 目前，國(guó)內(nèi)動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)技術(shù)缺少統(tǒng)一的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，201 8年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)都以《2018年動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)計(jì)劃》附件的形式發(fā)布。我國(guó)動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)的過(guò)程控制，主要針對(duì)病死畜禽、健康畜禽和新鮮牛奶等。同時(shí)，為保證動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)采樣過(guò)程的規(guī)范性和代表性，除了無(wú)菌采樣的基本要求外，還要求各監(jiān)測(cè)單位須將定點(diǎn)采樣和隨機(jī)采樣相結(jié)合，每個(gè)耐藥性監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室每年選擇10～20個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)或屠宰廠（要求規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)和小型養(yǎng)殖場(chǎng)各占一半）進(jìn)行隨機(jī)采樣，選擇2個(gè)定點(diǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)為跟蹤監(jiān)測(cè)場(chǎng)。

各監(jiān)測(cè)單位采用相同的方法開(kāi)展目標(biāo)菌的分離和鑒定，主要包括大腸桿菌、腸球菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、彎曲桿菌等，檢測(cè)手段日趨多元化。

（1）耐藥表型檢測(cè)[12]。瓊脂擴(kuò)散法：紙片擴(kuò)散法、E-Test;稀釋法：微量肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法。目前歐盟等國(guó)際通用的檢測(cè)方法為微量肉湯稀釋法，我國(guó)多采用微量肉湯稀釋法[13]。山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院根據(jù)CLSI、EUCAST標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合自行研制的智能化藥敏檢測(cè)儀，制定了山東省地方標(biāo)準(zhǔn)DB37/T 2806-2016《獸醫(yī)病原菌瓊脂稀釋法藥物敏感性試驗(yàn)規(guī)范》，準(zhǔn)確定量檢測(cè)動(dòng)物源細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的最小抑菌濃度值（MIC值），然后登陸動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性數(shù)據(jù)庫(kù)，將采樣信息以及耐藥性檢測(cè)結(jié)果錄入數(shù)據(jù)庫(kù)，運(yùn)用數(shù)據(jù)庫(kù)的強(qiáng)大分析功能，統(tǒng)一進(jìn)行結(jié)果的匯總分析和數(shù)據(jù)的溯源。

（2）耐藥基因型檢測(cè)。PCR技術(shù)：普通PCR、多重（元）PCR、PCR - RFLP，LAMP等;DNA 測(cè)序：基因突變分析;基因探針：DNA探針、RNA探針;基因芯片：可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)已知的重要耐藥基因;全基因組測(cè)序：具有較好敏感性和特異性，可全面分析耐藥基因。

1.4 山東省動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)情況

動(dòng)物源細(xì)菌的耐藥性問(wèn)題已在世界范圍內(nèi)引起廣泛關(guān)注，世界衛(wèi)生組織（ WHO）、世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）和聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織（FAO）均建議各國(guó)特別是發(fā)展中國(guó)家，盡快建立切實(shí)可行的檢測(cè)監(jiān)測(cè)方法，開(kāi)展細(xì)菌耐藥性調(diào)查，建立國(guó)家監(jiān)測(cè)網(wǎng)，控制以致消除細(xì)菌耐藥性問(wèn)題。20世紀(jì)90年代中期，發(fā)達(dá)國(guó)家意識(shí)到細(xì)菌耐藥性的潛在危害，先后成立了國(guó)家耐藥性監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，如美國(guó)的NARMS、瑞典的SWARM、丹麥的DAN - MAP、加拿大的CIPARS等，分別監(jiān)測(cè)動(dòng)物、食品和人體內(nèi)分離的食源性病原菌耐藥性，并發(fā)布耐藥性監(jiān)測(cè)年度報(bào)告。

我國(guó)自2008年起由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部牽頭成立了國(guó)家獸藥安全評(píng)價(jià)（耐藥性監(jiān)測(cè)）實(shí)驗(yàn)室，開(kāi)始組建動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，監(jiān)測(cè)范圍覆蓋全國(guó)22個(gè)?。ㄗ灾螀^(qū)）和4個(gè)直轄市[13]，并根據(jù)耐藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果停止了粘菌素用作飼料添加藥物，禁用了4種人用喹諾酮類抗菌藥物，但整個(gè)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)覆蓋的取樣點(diǎn)數(shù)量依然較小，監(jiān)測(cè)細(xì)菌的種類也僅限于沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和彎曲桿菌等8種。2018年《動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)計(jì)劃》監(jiān)測(cè)單位由原來(lái)的各省市畜牧獸醫(yī)局?jǐn)U展到包括科研院所在內(nèi)的23家，監(jiān)測(cè)力度進(jìn)一步加強(qiáng)。

山東省是國(guó)內(nèi)最早開(kāi)展細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)工作的省份之一，早在2008年山東省獸藥質(zhì)量檢驗(yàn)所就對(duì)多發(fā)的大腸桿菌、沙門氏菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌等常見(jiàn)病原菌進(jìn)行分離、鑒定并建立菌株保藏庫(kù)，開(kāi)展了耐藥機(jī)理研究。2012年山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所、萊陽(yáng)市大房禽病研究所、六和、中慧、民和、春雪、益生、仙壇和九聯(lián)等9家單位簽訂了《山東省雞病原菌抗藥性監(jiān)測(cè)與合理精確用藥的倡議》，在大型養(yǎng)殖企業(yè)建立了細(xì)菌耐藥性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。2016年1月，山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院與山東省畜牧獸醫(yī)局共建“山東省獸醫(yī)抗藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)”（Varms），采集收藏了2007年至今的萬(wàn)株耐藥菌株和耐藥信息，撰寫了我國(guó)首部獸醫(yī)抗藥性監(jiān)測(cè)與防控年報(bào);2016-2018年連續(xù)舉辦了三屆“齊魯國(guó)際講堂”，成立了“中歐獸醫(yī)藥敏試驗(yàn)合作實(shí)驗(yàn)室”、“中英噬菌體合作研發(fā)實(shí)驗(yàn)室”，加強(qiáng)了在這一領(lǐng)域與發(fā)達(dá)國(guó)家及人醫(yī)、疾控的廣泛交流與合作。

1.4.1 Varms近十年菌株庫(kù) 2007-2017菌株總數(shù)為10512株，主要包括大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、變形桿菌、銅綠假單胞菌、里默氏菌、腸球菌等;菌株覆蓋山東各地市重點(diǎn)養(yǎng)殖企業(yè)，少數(shù)來(lái)自廣東、河南、吉林等地;菌株來(lái)源包括種雞、肉雞、肉鴨、豬、奶牛、毛皮動(dòng)物等畜種及對(duì)應(yīng)環(huán)境和從業(yè)人員;菌株包括來(lái)自感染動(dòng)物的內(nèi)臟病原菌分離株、健康動(dòng)物糞樣、鼻拭子正常菌群的分離株。

1.4.2 藥敏數(shù)據(jù)庫(kù) 2010-2017細(xì)菌藥敏MIC數(shù)據(jù)共為65163個(gè)，藥物包括臨床常用荮物，細(xì)菌抗藥表型具體到確定的MIC值。根據(jù)CLSI、EUCAST和山東省地方標(biāo)準(zhǔn)（Varms），可以查詢菌株的MIC分布和抗藥率。

1.4.3 主要細(xì)菌的抗藥狀況 對(duì)于臨床常見(jiàn)藥物，所有細(xì)菌表現(xiàn)出普遍抗藥性。綜合看來(lái)，大腸桿菌抗藥率最高，沙門氏菌次之，金黃色葡萄球菌相對(duì)較低;從2010-2017年，大腸桿菌對(duì)常用藥物的抗藥率普遍較高，在2013年和2014年出現(xiàn)抗藥高峰，近年有下降趨勢(shì);綜合看來(lái)，肉雞和豬來(lái)源的細(xì)菌抗藥性普遍高于奶牛源分離的細(xì)菌，不同畜種對(duì)不同藥物又呈現(xiàn)出不同的抗藥性水平。

健康動(dòng)物來(lái)源的大腸桿菌和病料來(lái)源的大腸桿菌在不同藥物的抗藥性上存在一定差異，總體來(lái)講，健康來(lái)源的大腸桿菌抗藥性略高。來(lái)自健康動(dòng)物的大腸桿菌可以做為山東畜牧行業(yè)抗藥性水平的指示菌，其抗藥性水平在一定程度上說(shuō)明養(yǎng)殖業(yè)抗藥性背景。山東省內(nèi)重點(diǎn)養(yǎng)殖地區(qū)抗藥性水平高，存在顯著的地區(qū)差異，據(jù)此可以開(kāi)展輪換用藥和分級(jí)管理。

2 動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性問(wèn)題分析

2.1 養(yǎng)殖環(huán)節(jié)抗菌藥濫用問(wèn)題突出

細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生與抗菌藥物濫用密切相關(guān)。一些中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)由于飼養(yǎng)方式粗放、臨床獸醫(yī)缺乏等原因，獸藥使用檔案記錄不全或未建檔案，往往盲目地向飼料和飲水中投放抗菌藥進(jìn)行群體性預(yù)防和治療，又不設(shè)休藥期，直接導(dǎo)致了嚴(yán)重的動(dòng)物細(xì)菌耐藥和產(chǎn)品藥殘超標(biāo)。在生產(chǎn)中目前能替代抗菌藥物的臨床解決方案不多，除疫苗產(chǎn)品外，其它中獸藥產(chǎn)品、抗菌肽類和微生態(tài)制劑等因顯性成本高或療效不明顯難以被養(yǎng)殖者認(rèn)同，缺少行之有效的綠色高效制劑替代解決方案。

2.2 對(duì)耐藥性帶來(lái)危害的認(rèn)識(shí)不清

過(guò)量使用抗菌藥物造成的細(xì)菌耐藥性不僅體現(xiàn)在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)，也對(duì)整個(gè)食品安全和公共衛(wèi)生造成了嚴(yán)重后果，影響波及到經(jīng)濟(jì)社會(huì)和生態(tài)各個(gè)環(huán)節(jié)。目前，人們對(duì)衛(wèi)生健康領(lǐng)域的耐藥性有了一定的認(rèn)識(shí)，相關(guān)法律法規(guī)和措施逐步健全，但對(duì)畜牧領(lǐng)域的耐藥性問(wèn)題認(rèn)識(shí)仍不到位，特別是以減抗替抗為方向的健康養(yǎng)殖模式研究很少，養(yǎng)殖廢棄物處理方面也少見(jiàn)針對(duì)抗菌藥處理的研究，由此造成以原型和代謝物形式進(jìn)入環(huán)境的抗菌藥最終到達(dá)人體，對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康造成很大損害。

2.3 耐藥性監(jiān)測(cè)體系機(jī)制未有效建立

山東省動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)工作起步較晚，目前仍存在體系化薄弱、監(jiān)測(cè)覆蓋范圍小和技術(shù)力量單薄等諸多問(wèn)題，監(jiān)測(cè)還僅停留在省級(jí)層面和科研領(lǐng)域，養(yǎng)殖企業(yè)參入的主動(dòng)性和檢測(cè)數(shù)據(jù)的實(shí)用性不強(qiáng)。監(jiān)測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)體系尚未有效形成，多年來(lái)檢測(cè)的依據(jù)還僅僅停留在部頒指令上，行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)范對(duì)這一領(lǐng)域的指導(dǎo)性有待提高。政策法規(guī)的配套出臺(tái)嚴(yán)重滯后，工作更多地是靠行政命令推行和參與者的自覺(jué)行為，至今未有對(duì)過(guò)量使用抗菌藥物造成細(xì)菌耐藥的處罰措施，未形成通過(guò)對(duì)藥物敏感性測(cè)定指導(dǎo)臨床動(dòng)物用藥的體制機(jī)制。

3 細(xì)菌耐藥性控制對(duì)策與措施

畜牧業(yè)中疫病防控、動(dòng)物促生長(zhǎng)和細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)是一個(gè)系統(tǒng)工程，需要采取綜合防控戰(zhàn)略。通過(guò)開(kāi)發(fā)綠色飼料添加劑提高動(dòng)物機(jī)體免疫力、優(yōu)化畜禽養(yǎng)殖環(huán)境、嚴(yán)格執(zhí)行防疫制度和科學(xué)精準(zhǔn)使用抗菌藥等綜合措施，才能從根本上遏制獸用抗菌藥濫用，減少動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生。

3.1 嚴(yán)格獸用抗菌藥分類和使用管理

首先要加強(qiáng)獸藥在審批、生產(chǎn)和使用環(huán)節(jié)的監(jiān)督管理，嚴(yán)格區(qū)分處方與非處方用藥、人用藥和動(dòng)物用藥，嚴(yán)格規(guī)定獸用抗菌藥的休藥期，逐步禁止抗菌藥在飼料中的添加使用。目前，美國(guó)和歐盟都已全面禁止將抗菌藥物用作飼料添加劑，我國(guó)也停止了硫酸粘菌素用于動(dòng)物促生長(zhǎng)，并禁止了氧氟沙星等4種氟喹諾酮類藥物在食品動(dòng)物中使用;農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2638號(hào)公告決定2019年4月30日后禁止在食品動(dòng)物中使用氨苯胂酸、洛克沙砷、喹乙醇相關(guān)制劑[14];今后還應(yīng)繼續(xù)加大在這一領(lǐng)域的整治力度。同時(shí)，嚴(yán)格新獸藥注冊(cè)和臨床使用審批，對(duì)新批準(zhǔn)抗菌藥進(jìn)行包括耐藥性在內(nèi)的系統(tǒng)安全評(píng)價(jià)，做好投放市場(chǎng)后的跟蹤監(jiān)測(cè)，全面評(píng)價(jià)細(xì)菌耐藥性情況。

3.2 加快細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)體系構(gòu)建

充分發(fā)揮國(guó)家在細(xì)菌耐藥性領(lǐng)域的政策、組織和人才資源，統(tǒng)籌規(guī)劃區(qū)域布局，加快構(gòu)建覆蓋全國(guó)的區(qū)域性、省級(jí)、科研機(jī)構(gòu)和企業(yè)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)體系。在“國(guó)家獸藥安全評(píng)價(jià)（耐藥性監(jiān)測(cè)）實(shí)驗(yàn)室”的統(tǒng)一指導(dǎo)下，依托國(guó)家動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性數(shù)據(jù)庫(kù)系統(tǒng)，開(kāi)發(fā)相關(guān)軟件，建立數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)模塊、分析模塊、算法庫(kù)等，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)匯集、數(shù)據(jù)信息快速分析、實(shí)時(shí)監(jiān)控、信息共享等功能，建立國(guó)家“互聯(lián)網(wǎng)+細(xì)菌耐藥性大數(shù)據(jù)平臺(tái)”。以全國(guó)動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)技術(shù)平臺(tái)為依托，持續(xù)開(kāi)展區(qū)域性動(dòng)物源細(xì)菌的耐藥性監(jiān)測(cè)、耐藥趨勢(shì)的追蹤和報(bào)告，綜合藥物、動(dòng)物和細(xì)菌三要素，研究建立MIC折點(diǎn)（MIC breakpoint（ Ecoff值）[15]標(biāo)準(zhǔn)。加強(qiáng)耐藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法研究，制定耐藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，為行政部門和獸醫(yī)臨床提供及時(shí)、準(zhǔn)確的細(xì)菌耐藥技術(shù)支撐，指導(dǎo)養(yǎng)殖企業(yè)臨床精準(zhǔn)選用抗菌藥物，提高治療效果以及控制耐藥菌的擴(kuò)散和傳播。

3.3 深化綠色植物提取類新制劑研究

綠色植物類產(chǎn)品如微生態(tài)制劑、中獸藥、抗菌肽、酸化劑、免疫增強(qiáng)劑等，以其殘留低、不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)深受規(guī)模養(yǎng)殖企業(yè)青睞。著力解決傳統(tǒng)微生態(tài)制劑療效不確切，作用機(jī)制不明確的問(wèn)題，開(kāi)發(fā)能夠在腸道定植的精準(zhǔn)微生態(tài)制劑并進(jìn)行作用機(jī)制機(jī)理的研究。中獸藥對(duì)畜禽具有多方位調(diào)節(jié)和治療作用，很多中草藥中的多糖類、有機(jī)酸類、生物堿類、苷類和揮發(fā)油類等.都對(duì)增加動(dòng)物機(jī)體免疫力有特效，可有效替代抗菌藥物在動(dòng)物促生長(zhǎng)方面的作用。研發(fā)具有天然抗菌性的中獸藥產(chǎn)品和增強(qiáng)機(jī)體免疫力的中獸藥保健品，突破天然藥物超微粉碎、發(fā)酵和純化等現(xiàn)代化工藝技術(shù)，深入研究能實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)的精油、多糖和多酚類成分的提取分離等關(guān)鍵技術(shù)，為市場(chǎng)提供更多的綠色投入品。

3.4 支持窄譜、高效、低毒新型抗菌藥及生物制劑的研制

目前多數(shù)獸藥企業(yè)從改變抗菌藥劑型、研發(fā)緩釋產(chǎn)品和仿制藥等人手，在當(dāng)前獸用抗菌藥減量化的大背景下，對(duì)獸藥行業(yè)轉(zhuǎn)型具有積極意義。此外，生物制品預(yù)防動(dòng)物疫病一直是大型生物制品企業(yè)的研發(fā)重點(diǎn)，細(xì)菌疫苗能顯著提高易感動(dòng)物對(duì)病原菌的抵抗力，降低病原菌感染的發(fā)生率，有利于感染性疾病的預(yù)防。噬菌體作為特異性細(xì)菌病毒，裂解細(xì)菌效率高，無(wú)殘留，可以針對(duì)流行菌株篩選裂解性噬菌體定點(diǎn)清除而不造成腸道菌群紊亂[16]。隨著國(guó)家獸用抗菌藥使用減量化行動(dòng)的實(shí)施，噬菌體、基因工程疫苗和復(fù)合干擾素的研發(fā)必將迎來(lái)歷史性的發(fā)展機(jī)遇期。

3.5 優(yōu)化畜禽養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)控制

順應(yīng)“保健為先、預(yù)防為主、養(yǎng)防結(jié)合、健康養(yǎng)殖”的行業(yè)大趨勢(shì)，把動(dòng)物疫病防控的重點(diǎn)前移，強(qiáng)化養(yǎng)殖舍環(huán)境控制和糞污無(wú)害化處理，降低病原微生物的傳播風(fēng)險(xiǎn)，從源頭上控制疫病的發(fā)生，減少抗菌藥物的使用帶來(lái)的耐藥性風(fēng)險(xiǎn)。養(yǎng)殖舍環(huán)境控制應(yīng)綜合應(yīng)用信息化、智能化和網(wǎng)絡(luò)化技術(shù)，優(yōu)化軟硬件配置，融合溫度、濕度、空氣、光照、飼喂、清糞等各要素自動(dòng)控制，利用動(dòng)態(tài)的物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)控，為動(dòng)物飼養(yǎng)創(chuàng)造適宜的環(huán)境條件。養(yǎng)殖糞污處理在國(guó)家環(huán)保督察的大背景下正如火如荼展開(kāi)，但糞污資源化須慎重考慮抗菌藥物殘留的影響，若處理不徹底的抗菌藥隨水肥進(jìn)入土壤，勢(shì)必誘導(dǎo)細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性基因隨食物鏈進(jìn)人人體，對(duì)人類健康造成嚴(yán)重傷害，因此應(yīng)加大在這一領(lǐng)域的技術(shù)研究和監(jiān)控。

3.6 推進(jìn)獸用抗菌藥減量化示范行動(dòng)

農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在2018年5月19日重慶全國(guó)畜博會(huì)上舉行了“獸用抗菌藥使用減量化行動(dòng)”啟動(dòng)儀式，拉開(kāi)了全國(guó)性獸用抗菌藥綜合治理的序幕，也標(biāo)志著我國(guó)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)工作進(jìn)入了新征程。獸用抗菌藥綜合治理是一個(gè)系統(tǒng)工程，需要政府、科研、檢驗(yàn)、推廣和企業(yè)等全員參入，協(xié)調(diào)開(kāi)展、統(tǒng)籌推進(jìn)。這一過(guò)程中，各方應(yīng)深抓國(guó)家政策出臺(tái)的有利契機(jī)，深入推進(jìn)抗菌藥物減量示范創(chuàng)建，加快制定不同養(yǎng)殖區(qū)域的畜禽用藥指導(dǎo)目錄，有效激發(fā)起養(yǎng)殖企業(yè)參人的積極性。同時(shí)，充分發(fā)揮電視、報(bào)紙和互聯(lián)網(wǎng)等媒體作用，加強(qiáng)科學(xué)用藥控制細(xì)菌耐藥性的培訓(xùn)和宣傳，進(jìn)一步提高養(yǎng)殖從業(yè)人員和基層獸醫(yī)合理、規(guī)范用藥意識(shí)，減少和杜絕抗菌藥物的濫用。

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