○陳道軍 祭仲石 王中清 韋 艷
斑點(diǎn)叉尾鮰簡稱鮰魚,其肉質(zhì)鮮美、無肌間刺,深受消費(fèi)者喜愛,國內(nèi)鮰魚消費(fèi)市場穩(wěn)步上升,養(yǎng)殖面積和產(chǎn)量逐年提高。而鮰魚養(yǎng)殖密度不斷提高,加上鮰魚種質(zhì)資源退化,近年來鮰魚養(yǎng)殖病害爆發(fā)嚴(yán)重。由鮰愛德華菌引起的鮰魚腸道敗血癥,其發(fā)病時間長,難以治療,是斑點(diǎn)叉尾鮰養(yǎng)殖過程中的一種高致死類病害,給斑點(diǎn)叉尾鮰養(yǎng)殖帶來業(yè)造成重大損失。鮰魚腸道敗血癥主要有兩個表現(xiàn)型,急性腸道敗血癥表現(xiàn)為病魚腹部膨大,體表可見明顯點(diǎn)狀潰瘍、眼球突出,解剖可見腹腔積水、肝脾腎腫大、腸套疊等癥狀;慢性道敗血癥最明顯的特征是頭部發(fā)紅、潰爛,俗稱裂頭病。
2021年8 月,江蘇大豐某鮰魚養(yǎng)殖塘口鮰魚出現(xiàn)鮰魚死亡,前往塘口查看詳情,判斷為鮰魚鮰愛德華菌病,取樣進(jìn)行病原菌的分離和藥敏實(shí)驗(yàn),指導(dǎo)養(yǎng)殖戶用藥,得到良好的治療效果。通過本文,以期為當(dāng)?shù)匕唿c(diǎn)叉尾鮰養(yǎng)殖過程中的腸道敗血癥治療提供一定的參考。
發(fā)病鮰魚2021年8月底取自大豐某鮰魚魚種養(yǎng)殖場,發(fā)病魚200g左右;實(shí)驗(yàn)用藥敏紙片采購自杭州微生物試劑有限公司;實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基采購自O(shè)XOID。
在超凈工作臺中,用酒精燈灼燒接種環(huán)后從鮰魚的肝、腎處取樣,在BHI培養(yǎng)基上劃線分離。30℃培養(yǎng)24小時。挑選優(yōu)勢菌落接種于斜面培養(yǎng)基,30℃培養(yǎng)24小時,4℃冰箱保存?zhèn)溆谩男泵媾囵B(yǎng)基上挑取菌落,接種到BHI液體培養(yǎng)基中,30℃培養(yǎng)24小時。
采用紙片擴(kuò)散法,在超凈工作臺中,將分離到的致病菌用生理鹽水制備成濃度約107-108cfu/mL細(xì)菌懸濁液,然后取100μL涂布于BHI平板,等待15分鐘,將不同的藥敏紙片均勻的貼在BHI平板上,30℃培養(yǎng)24小時后,觀察結(jié)果,量取抑菌圈直徑,確定致病菌對各藥物的敏感性。
發(fā)病塘口位于江蘇大豐,塘口面積22畝,南北朝向,南北方向水泥護(hù)坡,東西方向土坡,水深1.8-2m,進(jìn)排水配套設(shè)施完善。2021年8月23日,開始有零星死魚,并快速增長,呈爆發(fā)趨勢,8月25日取樣,病死魚見圖1,病死魚體表有明顯的點(diǎn)狀潰瘍、肛門紅腫,解剖可見明顯腹水、腸套疊等癥狀,根據(jù)現(xiàn)場病魚表現(xiàn)的癥狀,初步判斷該發(fā)病塘口為急性鮰魚腸道敗血癥。
圖1 患病鮰魚癥狀
使用水產(chǎn)上常用的恩諾沙星、氟苯尼考、強(qiáng)力霉素、硫酸新霉素、氨芐青霉素、紅霉素、復(fù)方新諾明和復(fù)方磺胺嘧啶等8種抗生素對分離的致病菌進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn),藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1,結(jié)果表明,分離的致病菌對恩諾沙星最敏感、抑菌圈達(dá)到28mm,氟苯尼考次之,而對紅霉素、氨芐青霉素和復(fù)方新諾明表現(xiàn)為耐藥、幾乎無抑菌圈。
表1 各抗生素藥敏結(jié)果
根據(jù)藥敏結(jié)果,指導(dǎo)養(yǎng)殖戶使用恩諾沙星進(jìn)行治療。8月27日開始使用恩諾沙星拌料治療,同時配合外用二氧化氯消毒,治療期間損魚數(shù)量見表2,通過幾天的治療,該塘口病情得到好轉(zhuǎn),于投喂恩諾沙星后第3天達(dá)到高峰,一天損魚量260尾左右,然后開始大幅下降,經(jīng)過6天的抗生素治療,塘口沒有發(fā)現(xiàn)病死魚。
表2 治療期間損魚統(tǒng)計(jì)
隨著鮰魚養(yǎng)殖規(guī)模越來越大,而鮰魚種質(zhì)資源的不斷退化,導(dǎo)致鮰魚從剛開始無病害到現(xiàn)在病害爆發(fā)嚴(yán)重。我國水產(chǎn)從業(yè)者習(xí)慣大劑量使用抗生素,導(dǎo)致上市的水產(chǎn)品頻繁發(fā)生食品安全問題,同時還帶來了致病菌耐藥性增加的問題。鮰愛德華菌是多種魚類的致病菌,尤其對無鱗魚危害較大,可以引起鮰魚腸道敗血癥和黃顙魚的裂頭等病害,目前,治療該類細(xì)菌性疾病,主要還是通過投喂抗生素,但如何選擇正確的抗生素成為治療成敗的關(guān)鍵因素。使用不對癥的楊武進(jìn)行治療,往往無法達(dá)到預(yù)期的效果,造成不必要的損失。本文結(jié)果表明,分離的鮰愛德華菌對紅霉素、氨芐青霉素等多種抗生素有較高的耐藥性,對恩諾沙星和氟苯尼考較為敏感。
我們在治療魚類細(xì)菌性疾病時,需要科學(xué)的選擇抗生素,通過藥敏實(shí)驗(yàn),可以挑選出致病菌最敏感的抗生素,對癥下藥,可以有效避免盲目用藥導(dǎo)致疾病無法控制的局面,減少病害帶來的損失。本文發(fā)病塘口在藥敏實(shí)驗(yàn)后,確認(rèn)恩諾沙星為最敏感藥物,選擇恩諾沙星進(jìn)行拌料治療,添加20mg/kg魚體重的恩諾沙星,并配合二氧化氯進(jìn)行水體消毒,治療6天后,該魚塘病情得到有效控制,從每天死亡兩百多尾逐漸降低,直到?jīng)]有死魚。通過本文結(jié)果,希望可以給當(dāng)?shù)仵t魚細(xì)菌性病害的防控提供一定的參考,讓水產(chǎn)從業(yè)者用科學(xué)的理念指導(dǎo)養(yǎng)殖用藥,真正做到科學(xué)用藥,減緩致病菌耐藥性的產(chǎn)生。
(通聯(lián):224151,上海市海豐水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司,17306253169)