鹽脅迫條件下‘巴麻火麻’內(nèi)生真菌的分離鑒定與多樣性分析

李娥 黃勇 孟園園 李璇 杜光輝 劉飛虎，

（1. 云南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，昆明 650091；2. 云南大學(xué)農(nóng)學(xué)院，昆明 650091）

土壤鹽漬化問(wèn)題已經(jīng)嚴(yán)重影響了農(nóng)業(yè)和環(huán)境的發(fā)展。早在1997年，Shannon［1］就預(yù)測(cè)世界上1/3的耕地資源受到鹽害的影響［2］。目前，受鹽害的土地面積正在逐年增加。植物內(nèi)生真菌是指在其生活史的一定階段或全部階段，生活于活體植物組織內(nèi)且不引起明顯病害癥狀的一類(lèi)真菌［3］。近來(lái)研究表明，一些內(nèi)生真菌可以通過(guò)穩(wěn)定植物營(yíng)養(yǎng)元素吸收和保持離子平衡［4-6］，提高植物滲透調(diào)節(jié)能力［7］，保持植物光合作用和水分利用效率［8-10］，增強(qiáng)植物抗氧化防御系統(tǒng)［11-12］，產(chǎn)生次生代謝物或誘導(dǎo)相關(guān)耐鹽基因表達(dá)［13-14］等方面來(lái)保護(hù)宿主植物，減輕鹽害。

大麻（Cannabis sativa L.）為大麻科大麻屬的一年生草本植物，雌雄異株［15-16］。工業(yè)大麻是大麻的品種類(lèi)型，其 THC 含量＜0.3%，在紡織、醫(yī)藥等多個(gè)領(lǐng)域都有運(yùn)用，其產(chǎn)業(yè)前景樂(lè)觀［17-19］。工業(yè)大麻因其生長(zhǎng)量大、適應(yīng)性廣、抗逆性強(qiáng)，而成為鹽堿地大面積種植的重要經(jīng)濟(jì)作物［20-21］。項(xiàng)目組前期研究發(fā)現(xiàn)，工業(yè)大麻品種‘巴麻火麻’苗期對(duì)NaCl脅迫的耐性較強(qiáng)［22］，但關(guān)于其內(nèi)生真菌，特別是與大麻共生提高其耐鹽性的內(nèi)生真菌的研究有待加強(qiáng)。為此，本研究以前期篩選的耐鹽工業(yè)大麻品種‘巴麻火麻’為研究材料，分別通過(guò)0、100、200、300 mmol/L NaCl鹽處理，探究大麻不同鹽濃度的內(nèi)生真菌的變化情況，結(jié)合優(yōu)勢(shì)度等參數(shù)篩選疑似大麻耐鹽內(nèi)生真菌，期望為挖掘與大麻共生提高大麻耐鹽性的內(nèi)生真菌提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

供試工業(yè)大麻品種‘巴麻火麻’由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供。

1.2 方法

1.2.1 大麻鹽脅迫處理及樣品采集 試驗(yàn)采用盆栽法，塑料盆底直徑16 cm、高19 cm（帶托盆），裝入泥炭基質(zhì)（挪威JIFFY公司生產(chǎn)）1 kg，每盆施復(fù)合肥（NPK比例為13∶11∶11）10 g。一次性澆透水，每天保持適宜的土壤濕度，每隔1周移動(dòng)塑料盆的位置，保證大麻光照均勻。出苗1周后間苗，每盆留下長(zhǎng)勢(shì)相同的5株大麻，待4對(duì)真葉時(shí)，每盆追肥300 mL（300 g復(fù)合肥+20 g尿素溶于10 L水中）。追肥一周后，盆栽大麻分為4組，每組4盆，分別澆濃度為100 mmol/L、200 mmol/L和300 mmol/L的NaCl溶液及清水（對(duì)照），每隔4 d澆一次，每次每盆澆溶液（或清水）300 mL；持續(xù)5次后停止?jié)补唷aCl處理結(jié)束7 d后，從每個(gè)處理中隨機(jī)挑選4株長(zhǎng)勢(shì)一致的大麻植株，分別采集根、莖、葉。其中，從上往下數(shù)第3、6、9對(duì)真葉分別標(biāo)記為上葉（sy）、中葉（zy）和下葉（xy）；莖從上往下15 cm、15-45 cm、45-60 cm 分為上莖（sj）、中莖（zj）和下莖（xj）。各處理、各部位樣品分別放入滅菌的牛皮紙中。標(biāo)記，封口，4℃低溫保存。

1.2.2 內(nèi)生真菌的分離和純化 用自來(lái)水將大麻各組織樣本沖洗30 min，去除表面的泥土及附屬物。用濾紙吸干表面水分，用剪刀或者解剖刀截取2-3 cm的小段，置于滅菌燒杯中，放入超凈工作臺(tái)。經(jīng)75%乙醇漂洗30 s，無(wú)菌水沖洗3-4次，再用NaClO（有效氯含量為3%）漂洗5 min，最后無(wú)菌水沖洗3-5次。將消毒后的組織材料用無(wú)菌刀片剪成若干0.5 cm×0.5 cm小塊，各處理小塊分別置于含有硫酸鏈霉素和氨芐青霉素的PDA平板上，處理組各取5株大麻，每株的7個(gè)部位各取10片組織片，每個(gè)處理共有70個(gè)組織片，5個(gè)重復(fù)。取最后一次洗液200 μL涂布于PDA培養(yǎng)基作為對(duì)照組，將組織片按壓在PDA培養(yǎng)基上按壓3次，在整個(gè)操作過(guò)程中打開(kāi)3個(gè)培養(yǎng)皿，將3種檢驗(yàn)方法的培養(yǎng)皿在相同條件下培養(yǎng)［23］。于（25±2）℃恒溫箱中暗培養(yǎng)。接種組織塊后第8天，統(tǒng)計(jì)內(nèi)生真菌數(shù)量。

1.2.3 內(nèi)生真菌鑒定 對(duì)分離得到的真菌進(jìn)行ITS序列進(jìn)行比對(duì)分析。DNA提取采用尿素法，分別以真菌通用引物 ITS5（5′-3′：GGAAGTAAAAGTCGTAACAACG）和 ITS4（5′-3′：TCCTCCGCTTATTGATATGC）（碩擎生物公司合成）為上下游引物進(jìn)行擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系如下：DNA模板2.5 μL，ITS4 1 μL，ITS5 1 μL，2×Taq mix 12.5 μL，ddH2O 8 μL。PCR擴(kuò)增程序：94℃預(yù)變性5 min，94℃變性30 s，54℃退火 30 s，72℃延伸 1 min，35個(gè)循環(huán)，72℃延伸 8 min，4℃ 保存。PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物于l.2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，將檢測(cè)出目的條帶的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海生物工程公司測(cè)序，測(cè)序結(jié)果用CExpress軟件等進(jìn)行序列校對(duì)，再通過(guò)ClustalX（1.8）和Phylip等軟件進(jìn)行OTU分析，相同序列選其中一條作代表序列，登錄NCBI進(jìn)行Blast比對(duì)（相似性97%以上為同種）。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 利用Excel 2016進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)。采用分離率（該指標(biāo)可以衡量在一個(gè)特定的植物組織樣品中內(nèi)生真菌的豐度以及植物組織樣品中多重侵染的頻率）、Berger-parker優(yōu)勢(shì)度（表示一個(gè)種屬在群落中的地位與作用）、Sorenson相似性指數(shù)（反映內(nèi)生真菌群落的相似性系數(shù)）、Shannon-Wiener多樣性指數(shù)指數(shù)（反映種群豐富度和均勻度）等指標(biāo)反映不同濃度鹽脅迫下大麻內(nèi)生真菌的分離情況。各參數(shù)計(jì)算公式如下：

式中：k為某樣品中內(nèi)生真菌種數(shù)；pi是指某樣品中某種（屬）內(nèi)生真菌i數(shù)量占全部?jī)?nèi)生真菌菌株總數(shù)的百分比。

式中：K指兩種樣品中共有的內(nèi)生真菌種類(lèi)數(shù)，a指其中一種樣品的內(nèi)生真菌種類(lèi)數(shù)，b指另一種樣品的內(nèi)生真菌種類(lèi)數(shù) 。

式中：H為多樣性指數(shù)，S為菌種類(lèi)型總數(shù)。

式中：S是菌種類(lèi)型總數(shù)，N是菌株總數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 不同鹽濃度下大麻內(nèi)生真菌種類(lèi)

采用涂布檢驗(yàn)、組織壓片法檢驗(yàn)、超凈工作臺(tái)檢驗(yàn)3種方法的PDA培養(yǎng)基均無(wú)菌落長(zhǎng)出，說(shuō)明表面消毒徹底，分離的真菌屬于內(nèi)生真菌（圖1）。本研究4個(gè)處理7個(gè)部位的1 400個(gè)大麻組織中共分離得到內(nèi)生真菌543株，合并后得到88株菌，隸屬于14個(gè)科18個(gè)屬44個(gè)種。其中，對(duì)照組上葉、中葉、下葉、上莖、中莖、下莖和根7個(gè)部位中分別分離到9、14、41、7、11、21和50株真菌；100 mmol/L NaCl處理下分別分離到4、19、44、4、6、18和21株真菌；200 mmol/L NaCl處理下分別分離到4、15、32、5、16、8和44株菌；300 mmol/L NaCl處理下分別分離到14、12、25、10、5、34和50株菌。各處理分離得到內(nèi)生真菌種屬見(jiàn)表1。根據(jù)不同處理下分離得到內(nèi)生真菌屬繪制相對(duì)豐度，0 mmol/L NaCl處理下‘巴麻火麻’內(nèi)生真菌主要包括以下類(lèi)群 ：Alternaria、Annulohypoxylon、Aphanocladium、Chaetomium、Cladosporium、Colletotrichum、Diaporth、Nemania、Neocosmospora、Nigrospora、Hypoxylon和Trichoderma，其中Trichoderma、Cladosporium和Chaetomium為優(yōu)勢(shì)屬；100 mmol/L NaCl處理下‘巴麻火麻’內(nèi)生真菌主要包括以下類(lèi)群：Alternaria、Annulohypoxylon、Aphanocladium、Chaetomium、Cladosporium、Fusarium、Hansfordia、Kretzschmaria、Nemania、Neocosmospora、Nigrospora和 Trichoderma，其中Trichoderma、Nigrospora、Cladosporium為優(yōu)勢(shì)屬；200 mmol/L NaCl處理下‘巴麻火麻’內(nèi)生真菌主要包括以下類(lèi)群：Annulohypoxylon、Chaetomium、Cladosporium、Diaporth、Fusarium、Hansfordia、Trichoderma，其中Trichoderma Cladosporium和Fusarium為優(yōu)勢(shì)屬；300 mmol/L NaCl處理下‘巴麻火麻’內(nèi)生真菌主要包括以下類(lèi)群：Alternaria、Annulohypoxylon、Chaetomium、Cladosporium、Diaporth、Fusarium、Nigrospora、Pleosporales、Hypoxylon和Trichoderma，其中Trichoderma、Cladosporium和Fusarium為優(yōu)勢(shì)屬、枝孢霉和哈茨木霉在各處理組中占比都大（圖2）。

圖1 內(nèi)生真菌滅菌效果檢測(cè)圖Fig. 1 Sterilization effect of endophytic fungi

圖2 不同鹽處理下內(nèi)生真菌的相對(duì)豐度Fig. 2 Relative abundance of endophytic fungi under different salt treatments

Alternaria sp..，m m，m③ladosporium sp②kahawae，ospora（22）albu e，igrospora usariu entosa，ocladium ania rospora dosporium eocosm -2018，ig Hypoxylon ph Hypoxylon fragiform dium arzianum，ium globosu maria pavim ia diffusa，N，N an Fusarium ypoxylon Colletotrichum la atroroseum，em usarium sp.，globosum，Cladosporium dosporium sp.，F(xiàn) s of salt stress ia diffusa②，richoderma Nemania diffusa，Leptosphaeria phanocla ypoxylon stygium，N a h ，H SP troroseum，ypoxylon stygium，A m oxysporum②，iseti②haan e novem，N Kretzsch crospora，C-2018，arzianum②，ma 20）lobosum②la sp.，m equ Annulohypoxylon stygium，F(xiàn) an Chaetomium leospora m oxysporum（11）m sp.，T globosum②，usariu Diaporth erma h les sp. 9 M Nigrospora sphaerica，A etomoxysporum②eris（20）em nulohypoxylon bovei，C Trichoderm Alternaria nn SP Nigrospora sphaerica，N，Cem arzianum，C uloh aria sp.，F(xiàn) usariu richod Diaporthe novem，N m sp.，P Annulohypoxylon a haetom m g olletotrichu aetomium tion rzianum，rium nnulohypoxylon s cucum Nigrospora oryzae，Species iu usariu Hypoxylon trugodes（centra An nn m，ovem②，uloh Pleosporales sp. 9 M X40，ia sp. JP38-6，oryzae，AHa nulohypoxylon stygium，A microscopica，A erianu nsfordia a h usariu fragiforme，CCh aria sp，R60.1，equ iseti，F(xiàn)sa Altern Fu sp.，an solani，C m，種An albu Fusarium Neocosmospora rubicola，sp.，bicola，T nia sp. ANema diffusa，Hansford Trichoderm equiseti，F(xiàn) Diaporthe n oryzae，F(xiàn) Altern atephoru ru pilgha Th較，，，igrospora 黑m 枝 孢 孢 團(tuán) 霉霉孢m毛 墊 霉 （8）殼菌菌 霉孢霉孢屬，菌菌菌菌 屬孢孢屬ifferent con孢屬屬，種er d比類(lèi)孢，lternaria鏈m鐮 孢霉離nd usariu lternaria鏈iu m鐮ypoxylon炭斯les格菌ladosporiu霉ladosporiu m鐮菌p” u格ansfordia漢分igrospora 黑m 枝 孢 疽 屬 菌em 點(diǎn)格oderma木屬ladosporiu usariu leospora真em ，N ，C ，F(xiàn)菌菌屬，C ，H olletotrichum炭孢團(tuán)腔，A haetomania炭，N，N usariu igrospora 黑m 枝，A rich ，F(xiàn)屬，H屬屬，H生a h，C olletotrichum炭 菌 腔 （14），C屬屬，C iaporth莖屬，N，F(xiàn)，C霉病屬eptosphaeria小菌霉霉屬 屬屬屬屬屬屬，P菌菌 菌菌內(nèi)am ypoxylon炭球richoderma木屬屬屬枝菌屬霉，T（13）霉菌菌菌孢菌孢屬團(tuán)殼ber of each species，D團(tuán)殼格iaporth莖孢屬麻”dium絲oderma木墩um ium毛ium毛鏈疽菌團(tuán)殼etomania炭霉a木，D ia nulohypoxylon炭 團(tuán)ha dosporium 枝菌屬Hypoxylon炭porth莖疽屬點(diǎn)腔，L etomania炭ted from “B maria炭Genera ospora炭霉屬墊em火em eocosm nulohypoxylon炭nulohypoxylon炭團(tuán)墊枝點(diǎn)病，T ha巴，N孢霉，N ia漢rich etom phanocla麻ium毛la lternaria usariu ha，N，C，D，A leosporales格菌屬，T目” refer to the n屬，A 數(shù)下“l(fā)a 屬An屬，C，F(xiàn) nulohypoxylon炭An，C屬病，P的迫，C屬Kretzsch病Neocosmospora炭菌Aphanocladium絲m鐮斯屬霉屬屬屬屬霉An 屬 屬Hansford An 屬 霉 疽 屬Trichoderm（13）個(gè)種and ③脅度tic fun gi iso，，，） 各，②鹽科科 ，科到，科離菌科is（6）殼菌ocreales incertae科蓋菌濃hy菌菌分蓋，孢，孢示同op 竹 ，孢 竹科枝殼科科枝表從竹科枝1 不 殼f end從殼ypocreales赤蓋ectriaceae ocreaceae殼iaporthaceae，菌ladosporiaceae，H③”，赤iaceae 毛 殼n of species o yp yp ，D eratobasidiaceae（9 ladosporiaceae②、ocreaceae表科，C球，H藻haetom iaceae 毛，H ，H，H iaceae 毛ectriaceae iaceae 毛ladosporiaceae藻 ，C，N科ypocreaceae era and species，and “①①、毛，“，C球 科，C科haetom，C科球赤殼藻殼haetom ylariales incertae sed haetom毛科菌，C科科目gi，gen赤數(shù)，C菌科科，C科菌毛總菌pariso 從Trichosphaeriaceae從 孢菌科枝蓋 科孢aeriaceae殼腔從小科孢Nectriaceae的小赤球科，X科孢菌iaporthaceae，Nyp角多 角多 角多 種ber of fun Families 炭Xylariaceae炭richosphaeriaceae erellaceae，um richosph Xylariaceae屬科incertae sedis，D小炭炭，ble 1 C om osporiaceae竹Glom，T Pleosporaceae科Glom，T sedis，科（9）Xylariaceae Pleosporaceae Xylariales incertae sedis（9）角Clad Hypocreaceae Xylariaceae Pleosporaceae erellaceae菌科Leptosphaeriaceae真到Ta Salt concentration離refer to the total n示分）”數(shù)bers in “（表字里面um度濃mm ol·L-1）（）”he n注Note：“：T鹽/（0000102030

將4個(gè)處理始終存在的內(nèi)生真菌通過(guò)NCBI序列比對(duì)，相似性97%以上為同種，4個(gè)處理始終存在的內(nèi)生真菌的具體信息見(jiàn)表2，不同鹽處理始終存在的內(nèi)生真菌有球毛殼菌（Chaetomium globosum）、炭墊菌（Nemania diffusa）和炭團(tuán)菌（Annulohypoxylon stygium）主要存在于大麻中葉和下葉中，而哈茨木霉（Trichoderma harzianum）主要在大麻根中存在，枝孢霉（Cladosporium）在各組織部位均存在（表3）。

表2 不同濃度鹽脅迫下“巴麻火麻”始終存在的內(nèi)生真菌及其ITS序列分析Table 2 Endophytic fungi and its sequence analysis of ‘Bama hemp’ under different concentrations of salt stress

表3 不同濃度鹽脅迫下“巴麻火麻”始終存在的內(nèi)生真菌分離數(shù)目Table 3 Number of endophytic fungi isolated from ‘Bama hemp’ under different concentrations of salt stress

2.2 內(nèi)生真菌多樣性分析

在0-300 mmol/L NaCl處理下，大麻內(nèi)生真菌的豐富度指數(shù)在1.11-2.31之間，呈現(xiàn)先降后升趨勢(shì)，200 mmol/L NaCl處理下內(nèi)生真菌的豐富度指數(shù)最低，且與其他處理差異顯著（圖3-A）；均勻度指數(shù)卻呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，300 mmol/L NaCl處理下最低，且與其他處理差異顯著（圖3-B）；在0-300 mmol/L NaCl處理下，內(nèi)生真菌的分離率在23%-42.85%之間，呈現(xiàn)先降后升趨勢(shì)，100 mmol/L NaCl處理下最低，且與其他組差異顯著（圖3-C）；在0-300 mmol/L NaCl處理下，多樣指數(shù)在1.30-1.78之間，呈現(xiàn)先降后升趨勢(shì)，200 mmol/L NaCl處理下與其他3組差異顯著（圖3-D）。不同鹽濃度間大麻內(nèi)生真菌相似性比較發(fā)現(xiàn)，相似性系數(shù)差異不顯著，但均小于0.5，說(shuō)明鹽處理影響了真菌群落組成（表4）。

表4 不同鹽濃度間大麻內(nèi)生真菌相似性系數(shù)比較Table 4 Comparison of similarity coefficient of hemp endophytic fungi among different salt concentrations

圖3 不同濃度鹽處理下大麻內(nèi)生真菌的多樣性分析Fig. 3 Diversity analysis of endophytic fungi in hemp under different concentrations of salt treatment

3 討論

‘巴麻火麻’為廣西省當(dāng)?shù)氐淖延霉I(yè)大麻品種。項(xiàng)目組的前期研究發(fā)現(xiàn)，其耐鹽堿能力較強(qiáng)［20］。除了自身組織結(jié)構(gòu)、生理特性以及分子機(jī)制外，大麻內(nèi)生真菌是否能夠增強(qiáng)其耐鹽性，值得深入分析。本研究的結(jié)果初步發(fā)現(xiàn)：各處理相似性系數(shù)均小于0.5，說(shuō)明鹽處理影響了內(nèi)生真菌的群落組成。隨著鹽濃度增加內(nèi)生真菌多樣性指數(shù)、豐富度、分離率先降后增，100 mmol/L NaCl處理下內(nèi)生真菌分離率最低，200 mmol/L NaCl處理的內(nèi)生真菌豐富度、多樣性指數(shù)最低，說(shuō)明一定的鹽濃度會(huì)導(dǎo)致一些耐鹽內(nèi)生真菌數(shù)量和種類(lèi)減少，一些對(duì)鹽敏感的內(nèi)生真菌死亡，使一類(lèi)或者幾類(lèi)耐鹽內(nèi)生真菌占優(yōu)勢(shì)地位。

以往的研究，只是基于常規(guī)栽培環(huán)境下的內(nèi)生真菌的分離、鑒定和分析［24-25］。但是缺乏在鹽脅迫下大麻內(nèi)生真菌的研究。本研究設(shè)置了不同濃度的NaCl處理，希望通過(guò)鹽濃度的變化，發(fā)現(xiàn)大麻內(nèi)生真菌的變化情況，尋找到與大麻共生提高大麻耐鹽性的內(nèi)生真菌。研究發(fā)現(xiàn)，各鹽處理組內(nèi)生真菌種類(lèi)不同，但有3個(gè)科始終存在（炭角科、毛殼科和枝孢菌科），5個(gè)屬始終存在（炭團(tuán)菌屬、毛殼菌屬、枝孢霉屬、炭墊菌屬和木霉菌屬），5個(gè)種始終存在（毛殼菌、哈茨木霉、炭墊菌、枝孢霉和炭團(tuán)菌）。雖然，本研究分離到的毛殼菌、鐮孢菌、鏈格孢、小球腔菌、格孢腔菌、枝孢菌、球護(hù)殼菌、炭團(tuán)菌和炭墊菌等是常見(jiàn)的植物內(nèi)生真菌［26-27］，但不同鹽處理下枝孢菌、球毛殼菌、炭團(tuán)菌、炭墊菌和哈茨木霉始終存在，這5種內(nèi)生真菌不隨鹽濃度增加而消失，推測(cè)這幾種菌可能與提高植物耐鹽性有關(guān)。

有報(bào)道稱(chēng)，枝孢菌、球毛殼菌為耐鹽內(nèi)生真菌［26］，球毛殼菌能拮抗多種病原菌［28］，還能產(chǎn)生赤霉素和吲哚乙酸和提高干旱條件下辣椒生長(zhǎng)［29］，但關(guān)于球毛殼菌、枝孢霉、炭團(tuán)菌協(xié)助植物抵御鹽脅迫的研究未見(jiàn)報(bào)道。哈茨木霉則已經(jīng)報(bào)道能在鹽脅迫下提高水稻、玉米、小麥［30］、芥菜［31］等多種植物耐鹽性［32］。炭墊菌是重要的生防菌，但炭墊菌的耐鹽性或協(xié)助植物抵御鹽脅迫的研究還未見(jiàn)報(bào)道。

目前，關(guān)于植物內(nèi)生真菌協(xié)助植物抵御鹽脅迫機(jī)制涉及穩(wěn)定植物營(yíng)養(yǎng)元素吸收［33］、提高植物滲透調(diào)節(jié)能力［34］，保持植物光合作用和水分子利用率［10］、提高植物抗氧化能力［35］、分泌植物促生長(zhǎng)相關(guān)激素［36］、拮抗鹽脅迫中的致病菌［37］及誘導(dǎo)相關(guān)耐鹽基因表達(dá)［38］等，但沒(méi)有統(tǒng)一定論。本研究發(fā)現(xiàn)，‘巴麻火麻’在0-200 mmol/L NaCl處理下，其內(nèi)生球毛殼菌和哈茨木霉的數(shù)量會(huì)隨致病菌的增加而增多。而報(bào)道稱(chēng)球毛殼菌和哈茨木霉可以抑制相關(guān)致病菌[38]，故推測(cè)鹽脅迫導(dǎo)致致病菌入侵植物根部機(jī)率增加，從而導(dǎo)致拮抗致病菌的植物內(nèi)生真菌增殖。

4 結(jié)論

在不同鹽濃度處理下，分析‘巴麻火麻’7個(gè)部位1 400個(gè)組織片中內(nèi)生真菌變化情況發(fā)現(xiàn)：5種內(nèi)真菌枝孢菌、球毛殼菌、炭墊菌、炭團(tuán)菌、哈茨木霉在不同處理下始終存在，且變化有一定規(guī)律。推測(cè)幾種內(nèi)生真菌與大麻耐鹽性有關(guān)。