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    玖玟枳椇純露對CCl4致小鼠急性肝損傷的預(yù)防作用

    2021-11-17 13:41:32谷崇高周亞偉
    關(guān)鍵詞:枳椇四氯化碳生藥

    谷崇高 周亞偉

    [摘? ? ? ? ? ?要]? 目的:采用腹腔注射0.12 %的四氯化碳玉米油溶液0.1 mL/10g,造成小鼠急性肝損傷模型,觀察玖玟枳椇純露對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的預(yù)防作用。方法:60只小鼠隨機(jī)分組,分為空白組、模型組、雙環(huán)醇片組(200 mg/kg)及玖玟枳椇純露高劑量組(6 g生藥/kg)、中劑量組(3 g生藥/kg)、低劑量組(1.5 g生藥/kg),每組10只,0.2 mL/10g灌胃給藥雙環(huán)醇,0.3 mL/10 g灌胃給藥玖玟枳椇純露,每天一次,連續(xù)6天,第6天給藥后的8 h進(jìn)行建模,腹腔注射0.12 %四氯化碳玉米油溶液0.1 mL/10g,建模后禁食15 h,再給藥一次,藥后1 h取血,分離血清測定ALT和AST。結(jié)果:與空白組比較,模型組小鼠血清ALT和AST顯著升高。與模型組比較,雙環(huán)醇片組和玖玟枳椇純露高劑量組小鼠血清中ALT和AST顯著降低,有效。結(jié)論:玖玟枳椇純露具有預(yù)防四氯化碳引起小鼠急性肝損傷的作用。

    [關(guān)? ? 鍵? ?詞]? 玖玟枳椇純露;實(shí)驗(yàn);預(yù)防作用

    [中圖分類號]? G642? ? ? ? ? ? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]? A? ? ? ? ? ? ? ? ? [文章編號]? 2096-0603(2021)42-0235-02

    一、實(shí)驗(yàn)材料

    (一)藥物與試劑

    玖玟枳椇純露,規(guī)格:10g生藥/50mL,批號:20181125,有效期至:20201125,廠家:山西保仁堂生物科技有限責(zé)任公司。

    CCl4,規(guī)格:500 mL,批號:20181102,有效期至:無,廠家:北京化學(xué)試劑廠。

    雙環(huán)醇片,規(guī)格:25 mg/片×18片,批號:20190514,有效期至:2022.04,廠家:北京協(xié)和藥廠。

    谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)試劑盒,規(guī)格:R1:60 mL×4,R2:60 mL×2,批號:20191127,有效期至:20201126,廠家:中生北控生物科技股份有限公司。

    谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)試劑盒,規(guī)格:R1:60 mL×4,R2:60 mL×2,批號:20191016,有效期至:20201015,廠家:中生北控生物科技股份有限公司。

    (二)實(shí)驗(yàn)動物

    昆明種小鼠60只,SPF級,雌雄各半,體重18~22 g。購自斯貝福(北京)生物科技有限公司,許可證號:SCXK(京)2019-0010。

    (三)實(shí)驗(yàn)儀器

    半自動生化儀,型號:威圖300,廠家:荷蘭威圖公司。

    離心機(jī),型號:TDL-5-A,廠家:上海安亭科學(xué)儀器廠。

    電子天平,型號:DT-500A,廠家:中國輕工業(yè)總公司常熟市衡器廠。

    分析天平,型號:FAE100,廠家:梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司。

    二、實(shí)驗(yàn)方法

    (一)藥物劑量設(shè)置依據(jù)

    玖玟枳椇純露劑量設(shè)置依據(jù)

    根據(jù)藥品說明書,人的臨床用量:2瓶/日,即100 mL/日。計算出人臨床劑量為:20 g生藥/70 kg=0.3 g生藥/kg。

    根據(jù)《中藥新藥研究指南》中規(guī)定,小鼠劑量為人臨床量的5~20倍。所以小鼠采用人臨床劑量的20倍,10倍,5倍設(shè)置為高,中,低劑量組,因此,高劑量為0.3 g生藥/kg×20=6 g生藥/kg,中劑量為3 g生藥/kg,低劑量為1.5 g生藥/kg。

    (二)實(shí)驗(yàn)方法

    取清潔級昆明種小鼠60只,雌雄各半,體重18~22 g,隨機(jī)分為空白對照組、模型對照(CCl4)組、雙環(huán)醇片(200 mg/kg)組、玖玟枳椇純露高(6 g生藥/kg)、中(3 g生藥/kg)、低(1.5 g生藥/kg)劑量組,共6組,每組10只。每天按照0.2 mL/10 g灌胃相應(yīng)受試物,空白組和模型組灌胃相應(yīng)體積蒸餾水。給藥第6天給藥后8 h,除空白對照組外,其余各組小鼠按0.1 mL/10 g體積腹腔注射0.12 %的CCl4玉米油溶液造模,空白組給相應(yīng)體積生理鹽水,造模后禁食不禁水,造模后15 h進(jìn)行末次給藥,給藥后1 h后眼眶取血,血液靜置30 min,在3000 r/min離心15 min,取上清測定血清ALT、AST酶的含量。

    (三)測定方法

    1.試劑準(zhǔn)備

    雙液體試劑,使用前室溫穩(wěn)定30min。

    2.檢測步驟

    (1)基本操作步驟:(如下表1)

    (2)用威圖300半自動生化儀測定:開機(jī)→清洗→試劑空白→校準(zhǔn)→質(zhì)控→樣品檢測。

    (3)校準(zhǔn):建議使用試劑盒配套的校準(zhǔn)品,使用線性法校準(zhǔn),校準(zhǔn)周期為2天。

    (4)檢測結(jié)果的計算:生化分析儀會自動給出檢測結(jié)果。

    (四)統(tǒng)計學(xué)方法

    數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±SD)表示,方差齊性檢驗(yàn)運(yùn)用F檢驗(yàn),組間比較運(yùn)用t檢驗(yàn)或方差分析。

    與空白組比較,模型組小鼠血清中ALT顯著升高,與模型組比較,雙環(huán)醇片組小鼠血清中ALT顯著降低。與模型組比較,玖玟枳椇純露高、中、低劑量組小鼠血清中ALT顯著降低。

    與空白組比較,模型組小鼠血清中AST顯著升高,與模型組比較,雙環(huán)醇片組小鼠血清中AST顯著降低。與模型組比較,玖玟枳椇純露高、中、低劑量組小鼠血清中AST顯著降低。

    三、結(jié)論

    玖玟枳椇純露具有預(yù)防四氯化碳引起小鼠急性肝損傷的作用。

    參考文獻(xiàn):

    [1]邢彥超,鄭彧,劉刈,等.大棗多糖與柴胡疏肝散聯(lián)用對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷治療作用[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2016(11):29-31.

    [2]胡恒龍,馬連虎.D-氨基半乳糖誘導(dǎo)肝損傷的過氧化機(jī)理和鋅的保護(hù)作用[J].中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志,1993,7(2):81-86.

    [3]黎旸,李瑾翡,蔣忠軍,等.CCl4致小鼠急性肝損傷模型的研究[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志,2010,10(6).

    [4]張倩,游云.聯(lián)苯雙酯的藥理作用機(jī)制研究綜述[J].中國藥物評價,2017(4).

    [5]胡鳳嬌,宋文杰,王張,等.四氯化碳致小鼠急性肝損傷模型造模要素及中醫(yī)藥防治的數(shù)據(jù)挖掘研究[J].中藥與臨床,2018,9(5):38-41+48.

    [6]時濤,王曉玲,陳振德,等.枳椇子化學(xué)成分及其藥理活性研究進(jìn)展[J].中藥材,2006,29(5):510-513.

    [7]徐博,田晶,馬寧,等.肝損傷動物模型的研究進(jìn)展[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2019(14).

    ◎編輯 張 慧

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