荊防感冒口服液的制備及研究

陳景堅(jiān)，羅 瑜，李學(xué)明

(韶關(guān)市中醫(yī)院，廣東 韶關(guān) 512000)

近年來(lái)，隨著中醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，制備安全有效且質(zhì)量可控的抗流行性感冒口服中藥制劑成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一大研究重點(diǎn)。荊防感冒口服液由防風(fēng)、黃芩、柴胡等諸多中藥材組成，有平喘化痰、辛溫祛濕、疏風(fēng)化表以及鎮(zhèn)痛等功效，可用于治療流行性感冒癥狀。為確保該口服液的安全性有效性，從制備工藝的角度入手展開(kāi)分析。

1 儀器和方法

1.1 儀器

在此次研究中，采用的儀器主要包括由日本島津提供的高效液相色譜儀LC-2010AHT和分析天平AUV220D，由上海奧譜樂(lè)儀器有限公司提供的756紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，以及由廣東固特超聲股份有限公司提供的超聲儀KMH-100U等。

1.2 處方

荊防感冒口服液的組方為甘草6g，金銀花、茯苓各15g，防風(fēng)、黃芩、柴胡、荊芥、桔梗、前胡、薄荷各10g，連翹12g，南板藍(lán)根30g[1]。

1.3 制備工藝

利用多功能提取爐，將處方中的藥材在其中浸泡2h。浸泡完成后，在水蒸氣加熱下，進(jìn)行煎煮，2次冷凝回流后收集由其產(chǎn)生的乳濁液和揮發(fā)油。其中，第一次進(jìn)行水煎時(shí)，時(shí)間為2h，藥材量是原藥材量的8倍；在第二次進(jìn)行水煎時(shí)，時(shí)間為2.5h，藥量是原藥材量的6.5倍。在此基礎(chǔ)上，將2次水煎液進(jìn)行過(guò)濾，濃縮，直至比重為0.9后，加入乙醇，沉淀靜置，靜置時(shí)間為4h-6h。在完成上述操作后，取上清液，過(guò)濾，將乙醇回收，直至比重達(dá)到1.05。在揮發(fā)油-環(huán)胡精的比例為1∶8下，稱取環(huán)胡精，并在蒸餾水的作用下研磨、加熱成糊狀，然后加入乳濁液、揮發(fā)油，攪拌5h，并加入適量的蜂蜜、蔗糖等，灌封，以完成制備。

2 結(jié)果

2.1 防風(fēng)溶液的制備

在制備防風(fēng)供試品溶液時(shí)，選取10mL該制劑樣品，在加入15mL的乙醚后，經(jīng)2次萃取，將水層取出，將正丁醇加入其中，進(jìn)行2次提取，合并溶液后，在其中加入40mL的氨試劑，然后將上層溶液保留，蒸發(fā)，選取1mL甲醇溶解殘留物，完成供試品溶液的制備。陰性對(duì)照品溶液為缺少防風(fēng)的該口服液，制備方法同上。在制備對(duì)照藥材溶液時(shí)，選取1g防風(fēng)，在其中加入20mL丙酮，經(jīng)20min超聲處理后，將藥渣濾除，在1mL甲醇中溶解殘留物，完成對(duì)照藥材溶液的制備。對(duì)照品溶液制備的過(guò)程中，采用甲醇配制成含1g 5-O-甲基維斯阿米醇苷和1g升麻素苷的混合溶液。

在TLC法下，取8μL供試品溶液，2μL其他溶液，通過(guò)觀察同一硅膠G薄層板，在展開(kāi)劑下展開(kāi)、取出，晾干后，在紫外燈下進(jìn)行檢視。顯示在于對(duì)照藥材和對(duì)照品相應(yīng)位置呈現(xiàn)出的顏色相同的熒光斑點(diǎn)，并且陰性無(wú)干擾。

2.2 黃芩苷溶液的制備

黃芩苷溶液制備時(shí)，1mL樣品+2mL乙醇(75%)，經(jīng)搖勻以完成制備。陰性對(duì)照溶液是選取缺少黃芩的該口服液，方法同上。對(duì)照藥材溶液制備的過(guò)程中，1g黃芩+30mL甲醇—乙醇乙酯(1∶3)，提取、過(guò)濾，蒸干，然后采用5mL的甲醇進(jìn)行溶解。在制備對(duì)照品溶液的過(guò)程中，采用乙醇配制含0.1mg黃芩苷的溶液。在TLC法下，展開(kāi)劑為醋酸，顯示出在相應(yīng)位置上呈現(xiàn)的顏色相同的斑點(diǎn)，并且陰性不受到干擾。

在制備黃芩素、漢黃芩素溶液時(shí)，供試品溶液制備的過(guò)程中，20mL制劑樣品+20mL乙酸乙醇，經(jīng)2次提取，然后進(jìn)行溶液合并，蒸發(fā)，采用2mL的乙醇將殘留物溶解，完成供試品溶液的制備。陰性對(duì)照溶液與對(duì)照藥材溶液制備的方法同黃芩苷對(duì)應(yīng)溶液的制備方法。對(duì)照品溶液制備的過(guò)程中，采用甲醇配制成含0.5mg的黃芩素、漢黃芩素。在TLC法下，顯示出在相應(yīng)位置上呈現(xiàn)的顏色相同的斑點(diǎn)，并且陰性無(wú)干擾。

2.3 柴胡溶液的制備

在制備柴胡供試品溶液時(shí)，20mL樣品+25mL正丁醇，2次提取后，在50mL的氨試液下進(jìn)行洗滌，然后再次加入正丁醇，蒸發(fā)，然后采用1mL甲醇將殘留物溶解。陰性對(duì)照品溶液制備的過(guò)程中，選取缺少柴胡的該口服液，制備方法同上。對(duì)照藥材溶液制備的過(guò)程中，0.5g柴胡+20mL乙醇，經(jīng)10min超聲處理，濾除、濃縮，直至5mL，完成制備。在制備對(duì)照品溶液的過(guò)程中，采用甲醇進(jìn)行配制，制成含量0.5mg柴胡皂角α對(duì)照品的溶液。經(jīng)TLC法，顯示在相應(yīng)位置處呈現(xiàn)顏色相同的熒光斑點(diǎn)，并且陰性無(wú)干擾。

2.4 含量測(cè)定

2.4.1色譜條件

在含量測(cè)定的過(guò)程中，其色譜條件如下：色譜柱：Inertsil ODS-SP(150.00mm×4.60mm，5.00μm);流動(dòng)相：磷酸—甲醇溶液，比例為57∶43；柱溫度：25℃；進(jìn)樣量：10μL；流速：每分鐘1.00mL/min；波長(zhǎng)：280nm；理論塔板數(shù)：≥3000。

2.4.2試品溶液制備

在制備試品溶液時(shí)，其中對(duì)照品溶液的配制方法為首先稱取11.00mg的黃芩苷對(duì)照品，然后將其配制為含黃芩苷0.22mg/mL的溶液。在制備供試品溶液時(shí)，其方法為取2mL荊防感冒口服液，將其放置在容量瓶中，容量瓶為25mL，在甲醇定容下，20min超聲，對(duì)于減失質(zhì)量采用甲醇補(bǔ)足，均勻搖晃后過(guò)濾，供試品溶液為續(xù)濾液。在制備陰性對(duì)照品溶液時(shí)，即制備缺少黃芩的陰性對(duì)照溶液時(shí)，方法同供試品溶液制備方法。

2.4.3穩(wěn)定性試驗(yàn)

量取同批次荊防感冒口服液各20mL，經(jīng)計(jì)算樣品中黃芩苷含量的平均值，顯示其為44.35mg/mL,RSD為2.53%。在穩(wěn)定性試驗(yàn)中，量取供試品溶液10μL，并于0～10h偶數(shù)整時(shí)(如2h、4h時(shí))進(jìn)樣，并對(duì)其峰面積進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)計(jì)算顯示RSD為0.95%?？梢?jiàn)，該方法在含量測(cè)定時(shí)，其不僅具有較好的重復(fù)性，而且具有較高的穩(wěn)定性。在10h以內(nèi)，供試品溶液的穩(wěn)定性均較高。另外，還選取10μL對(duì)照品溶液，進(jìn)樣5次，對(duì)其峰面積進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)計(jì)算顯示，RSD為0.48%?？梢?jiàn)，采用的儀器其具有較為良好的精密度。

2.4.4試品的線性關(guān)系

在對(duì)照品溶液中，加入不同質(zhì)量濃度的黃芩苷對(duì)照品溶液，經(jīng)均勻振動(dòng)、搖晃并過(guò)濾，在規(guī)定的色譜條件下展開(kāi)含量測(cè)定。其中，X軸、Y軸分別代表橫縱坐標(biāo)。橫、縱坐標(biāo)分別表示進(jìn)樣量、峰面積積分。最終獲得如下線性回歸方程：

Y=3.059×10-5-0.0095

其中，r=0.9998。也就是說(shuō)，在8.80～88.00μg這一范圍內(nèi)，黃芩苷呈良好的線性關(guān)系。

2.4.5加樣回收率試驗(yàn)

選取同一批次下的荊防感冒口服液共9份，取樣量、樣品含量分別為1.00mL、2.80mg。在此基礎(chǔ)上進(jìn)行分組，共分為3組，每組3份。然后，在各組中分別加入質(zhì)量濃度為2.78mg/mL的黃芩苷對(duì)照溶液0.80mL、1.00mL、1.20mL。制備加樣回收供試品溶液，對(duì)峰面積進(jìn)行測(cè)定，對(duì)其中的黃芩苷回收率進(jìn)行計(jì)算。經(jīng)計(jì)算顯示，其平均回收率為101.62%，RSD為1.12%。如表1所示。

表1 黃芩苷加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果[n(%)]

通過(guò)對(duì)3批荊防感冒口服液的含量進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)樣為10μL時(shí)，1、2、3批該口服液對(duì)應(yīng)的黃芩苷含量分別為2.85mg/mL、2.76mg/mL、2.81mg/mL，平均含量為2.81mg/mL，RSD為1.18%。經(jīng)對(duì)該口服液中黃芩苷的含量進(jìn)行初步測(cè)定，其含量最低為2.23mg。

綜上所述，在制備荊防感冒口服液時(shí)，采用蒸餾法和水煮法進(jìn)行制備，制備工藝不僅科學(xué)，而且合理，同時(shí)經(jīng)定性鑒別和含量測(cè)定，這一制備工藝可促使該口服液中的黃芩苷含量達(dá)到要求。