應(yīng)用低離子凝聚胺實施交叉配血檢驗的效果觀察

趙新艷

（新鄉(xiāng)市中心血站供血科，河南新鄉(xiāng) 458000）

交叉配血試驗的方法主要包括鹽水法、酶法、低離子凝聚胺法等。本研究對比低離子凝聚胺法與鹽水法檢驗準確性以及靈敏度，闡述低離子凝聚胺法在輸血治療中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：本研究供血者均為本院血液中心健康義務(wù)獻血人員，受血者為本院2018 年6 月至2020 年5 月140 例輸血治療患者，將低離子凝聚胺實施交叉配血檢驗方法設(shè)定為低離子凝聚胺法，鹽水法開展交叉配血試驗為鹽水法。140 例受血患者中男74 例，女66 例；年齡5～78 歲，平均（42.38±9.41）歲；疾病類型包括：車禍38 例，食管靜脈破裂19 例，胃癌25 例，產(chǎn)后大出血26 例，髖關(guān)節(jié)置換手術(shù)13 例，慢性貧血19 例。納入標準：無傳染病、精神疾病；臨床病例資料完整；經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，患者知情同意。排除標準：合并免疫疾??；合并肝腎功能不全或衰竭；妊娠期及哺乳期婦女。

1.2 方法

1.2.1 鹽水法：分別取受血者以及供血者血樣各3mL，轉(zhuǎn)速3000r/min，離心2min，將血清分離后，紅細胞配制成為3%～5%的紅細胞鹽水懸液。選擇潔凈試管1 支，標注為主測管，將受血者的血清和供血者細胞分別置入試管中；另取潔凈試管，標注為次測管。將一滴供血者的血清滴入到主測管中，1滴受血者血清滴入到次測管中，混合后進行離心，1000r/min 處理1min，觀察結(jié)果。

1.2.2 低離子凝聚胺法：取潔凈試管標明主次測管。加入2 滴受血者血清以及1 滴供血者紅細胞懸液到主測管中，另外加入2 滴供血者血清和1 滴受血者紅細胞懸液到次測管中。兩支試管均分別加入0.5mL 的低離子介質(zhì)，混合均勻，于25℃下靜置1min 左右后分別加入凝聚胺試劑2 滴，混勻后3500r/min 離心15s，離心結(jié)束去除上清液，觀察試管底部的凝集狀態(tài)，后在兩支測管中加入假凝集清除液2 滴，充分混勻后再次進行觀察。

1.2.3 不規(guī)則抗體譜細胞鑒定：將Combs 卡上端的錫紙膜平行向后拉扯至所需孔完全暴露，于孔內(nèi)加入50μL 譜細胞懸液以及50μL 病人自身紅細胞，在對應(yīng)孔內(nèi)加入25μL 病人血漿，37℃條件下孵育15min，將Combs 卡置于離心機中進行離心9min，轉(zhuǎn)速為1100r/min，離心結(jié)束后于白色背景前觀察結(jié)果。

1.3 判斷標準：鹽水法判斷標準：20min 內(nèi)于顯微鏡下觀察，若有紅細胞凝集的現(xiàn)象發(fā)生則判定為陽性；低離子凝聚胺法判斷標準：2 支測管或單獨一側(cè)試管中的紅細胞若一直為凝集狀態(tài)，則判定為陽性，若凝集狀態(tài)在60s 后消失，則判定為陰性；不規(guī)則抗體譜細胞鑒定判定結(jié)果：紅細胞均沉淀于微管底部，則為陰性，若紅細胞處于微管下端1/3 至微管頂部截段內(nèi)則為陽性。

1.4 觀察指標：①統(tǒng)計陽性檢出情況，并以不規(guī)則抗體譜細胞鑒定結(jié)果為金標準，判定兩種檢測結(jié)果假陽性出現(xiàn)情況；②比較兩種檢測方法靈敏度、準確度以及穩(wěn)定性，靈敏度=檢測陽性/陰性+假陰性；準確度=檢驗結(jié)果與金標準一致結(jié)果/總例數(shù)；穩(wěn)定性=紅細胞凝集明顯例數(shù)/總例數(shù)；③記錄兩種方法檢測耗時情況。

1.5 統(tǒng)計學方法：運用SPSS23.0 統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用卡方檢驗，計量資料采用t 檢驗，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組陽性檢出率比較：低離子凝聚胺法中，通過低離子凝聚胺技術(shù)檢測出陽性20 例，陽性率為20.00%；鹽水法中，利用鹽水法檢測出陽性13 例，陽性率為9.26%，低離子凝聚胺法陽性率高于鹽水法（P<0.05）；低離子凝聚胺法有4 例為假陽性，鹽水法有3 例為假陽性，兩組假陽性率比較無統(tǒng)計學意義（P>0.05），詳見表1。

表1 兩組患者陽性檢出率比較 [n（%）]

2.2 兩種方法檢測效能比較：低離子凝聚胺法靈敏度、穩(wěn)定度、準確度分別為94.00%、91.00%、90.00%，均高于鹽水法78.00%、76.00%、74.00%（P<0.05），詳見表2。

表2 兩種檢測方法檢測效能比較 （%）

2.3 兩種檢測方法耗時比較：低離子凝聚胺法平均耗時（7.24±1.75）長于鹽水法平均耗時（4.17±0.56）min（P<0.05）。

3 討論

交叉配血試驗是測定受血者和供血者血清中是否存在對雙方紅細胞形成破壞的抗體，可作為判斷能否可進行輸血的重要依據(jù)，其準確性直接與患者生命安全相關(guān)[1-2]。目前臨床上交叉配血多樣，其中鹽水法操作簡單，成本低，一度得到較為廣泛的應(yīng)用。然而，鹽水法具有相當大的局限性，其雖能較好地檢測出一般抗體IgM，但對于特殊類型和不完全抗體無法準確檢出，只適合用于ABO 系統(tǒng)檢測，不能確保檢測準確性，在保障患者生命方面，安全系數(shù)不夠高[3-4]。而低離子凝聚胺實施交叉配血不僅能夠準確檢測出完全抗體，同時對于特異性和不完全抗體均能夠快速檢出，準確性較高[5]。凝聚胺為陽離子聚合物，可在溶解之后生成大量正電荷，與紅細胞表面負電荷中和，拉近紅細胞之間的距離，發(fā)生紅細胞特異性凝集，另外，低離子凝聚胺加入重懸液可有效減少假陽性，顯著提高試驗結(jié)果的可靠性，應(yīng)用價值高[6]。

本研究中，對低離子凝聚胺實施交叉配血以及鹽水法兩種方法檢測出陽性率進行比較，低離子凝聚胺法陽性率高于鹽水法，兩者陽性檢出率具有統(tǒng)計學差異。本研究通過統(tǒng)計兩種方法檢測靈敏度、穩(wěn)定性以及準確性發(fā)現(xiàn)低離子凝聚胺實施交叉配血靈敏度94.00%，穩(wěn)定性91.00%，準確性90.00%，均高于鹽水法。低離子凝聚胺法所需要檢測時間明顯高于鹽水法。本研究僅比較低離子凝聚胺實施交叉配血檢驗與鹽水法檢測結(jié)果，未與微柱凝膠法、酶法等檢測方法進行比較，未能全面說明低離子凝聚胺實施交叉配血檢驗在輸血治療中的應(yīng)用價值。

綜上所述，低離子凝聚胺實施交叉配血檢驗可有效防止溶血性輸血反應(yīng)，確保輸血安全。