脾氨肽口服凍干粉輔助治療肺炎支原體肺炎患兒的療效及對血清sB7-H3及GM-CSF表達(dá)的影響

王琴，湯瑤瑤，龔琳霞

(南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，江蘇南京 210000)

肺炎支原體肺炎(Mycoplasmapneumoniaepneumonia，MPP)是常見的兒童社區(qū)獲得性肺炎之一，占兒童社區(qū)獲得性肺炎的10%～40%，由支原體感染引起，是一種嚴(yán)重的呼吸道感染性疾病，學(xué)齡期及學(xué)齡前期兒童常見，臨床表現(xiàn)輕重不一，常表現(xiàn)為發(fā)熱、畏寒、咳嗽、頭痛等癥狀，若治療不及時，可引起其他系統(tǒng)器官的功能損害，嚴(yán)重危害患兒身體健康[1]。目前，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素仍是治療小兒支原體肺炎的首選藥物，其中阿奇霉素作為代表藥物，組織穿透性強，可以進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)，抑制支原體蛋白的合成，具有殺菌及免疫增強作用，但兒童用藥容易出現(xiàn)腹痛、嘔吐、惡心、腹瀉等胃腸道不良反應(yīng)[2]。脾氨肽口服凍干粉作為機體免疫增強劑，能通過刺激機體產(chǎn)生固有免疫和適應(yīng)性免疫，調(diào)節(jié)CD4+/CD8+細(xì)胞的比例失調(diào)，改善機體的免疫狀態(tài)，發(fā)揮輔助抗菌作用。有研究[3]發(fā)現(xiàn)，脾氨肽口服凍干粉可以糾正支原體肺炎患兒的免疫平衡紊亂，有助于患兒康復(fù)并減少MPP復(fù)發(fā)，臨床使用安全。共刺激分子血清可溶性B7-H3(soluble B7-H3，sB7-H3)是趨化因子家族成員之一，被證實直接參與了MPP疾病的發(fā)展過程，血清sB7-H3水平可作為預(yù)測MPP嚴(yán)重程度和評估治療效果的生物標(biāo)志物[4]。粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF)是在炎性反應(yīng)過程中產(chǎn)生的一種生長因子，對中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞有直接趨化作用，有研究發(fā)現(xiàn)[5]其能增加MPP患兒支氣管肺泡灌洗液中粒細(xì)胞的數(shù)量和活性，介導(dǎo)其病理反應(yīng)。sB7-H3、GM-CSF對MPP患兒病情及臨床歸轉(zhuǎn)評估具有重要臨床價值。本文通過脾氨肽口服凍干粉治療小兒肺炎支原體肺炎觀察其對血清sB7-H3及GM-CSF表達(dá)的影響，旨在為臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年8月至2020年8月于我院就診的支原體肺炎患兒100例，按照隨機數(shù)字表法分為觀察組和對照組，觀察組50例，男28例，女22例；年齡2～10(5.75±1.28)歲；體質(zhì)量(16.81±3.63)kg；病程1～5(3.20±0.64)d；體溫(38.80±0.70)℃；肺炎類型：非重癥MPP 46例，重癥MPP 4例。對照組50例，男31例，女19例；年齡2～10(5.54±1.33)歲；體質(zhì)量(17.25±3.14)kg；病程1～5(3.15±0.70)d；體溫(38.65±0.75)℃；肺炎類型：非重癥MPP 41例，重癥MPP 9例。兩組患兒一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)，患兒家屬均簽署知情同意書。

表1 兩組患兒一般資料比較

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合第8版《諸福棠實用兒科學(xué)》[6]中肺炎支原體肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)血清IgM≥1∶160；(3)胸片可見間質(zhì)性改變，或從肺門向肺葉外周伸展的扇形陰影，偶有肺門淋巴結(jié)腫大和少量胸腔積液；(4)鼻咽部吸取物經(jīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)檢測肺炎支原體DNA拷貝數(shù)≥2.5×103/mL。以上納入標(biāo)準(zhǔn)符合其中1～2條，以臨床診斷且入院前未接受過其他治療即可入組。

排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)由其他病原體(如細(xì)菌、真菌、病毒等)引起的肺炎；(2)合并其他類型肺炎或其他呼吸系統(tǒng)疾病；(3)合并心、肝、腦、腎、免疫等其他系統(tǒng)疾??；(4)合并其他全身嚴(yán)重感染。

1.2 方法

兩組患兒均給予肺炎常規(guī)治療，根據(jù)病情給予止咳化痰治療，高熱者可進(jìn)行物理降溫或適當(dāng)使用解熱藥物，充分休息，多飲水，給予易于消化和富有營養(yǎng)飲食，維持水電解質(zhì)平衡；呼吸道護(hù)理：定期更換體位，及時清理口鼻咽分泌物，保持呼吸道通暢；呼吸支持：根據(jù)病情給予氧療、通氣支持等。

對照組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上根據(jù)病情輕重給予阿奇霉素注射液(峨眉山通惠制藥有限公司，每支0.25 g，國藥準(zhǔn)字H20066565)治療，10～15 mg/(kg·d)，靜脈滴注3 d，停用4 d，病情改善后改為口服阿奇霉素片(廣東逸舒制藥有限公司，每袋0.25 g，國藥準(zhǔn)字H20083430)治療，10 mg/(kg·d)(最大劑量≤500 mg)，口服3 d，停用4 d，1周為1個療程，共治療3～4個療程。

觀察組在對照組治療基礎(chǔ)上聯(lián)合脾氨肽口服凍干粉(浙江豐安生物制藥有限公司，規(guī)格2 mg×5支，國藥準(zhǔn)字H10970214)治療，2 mg 脾氨肽凍干粉用10 mL涼開水溶解后口服，每次2 mg，每天1次，連續(xù)治療4周。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 療效判定[7]治愈：癥狀體征(如咳嗽、乏力、頭痛、發(fā)熱、肺部陰影及濕啰音)完全或基本消失，病原學(xué)檢查為陰性(血清IgM<1∶160或肺炎支原體DNA拷貝數(shù)<2.5×103/mL)；好轉(zhuǎn)：以上癥狀體征較治療前顯著改善，病原學(xué)檢查為陰性或陽性；無效：上述癥狀體征未見改善或反而加重?？傆行?(治愈例數(shù)+好轉(zhuǎn)例數(shù))/總例數(shù)×100%。

1.3.2 臨床癥狀 治療4周后觀察記錄患兒發(fā)熱、咳嗽、肺部啰音等臨床癥狀的改善情況及白細(xì)胞(white blood cell，WBC)計數(shù)恢復(fù)正常時間。

1.3.3 炎性因子 分別于治療前、治療4周后抽取患兒空腹外周靜脈血5 mL，室溫靜置60 min，賽默飛離心機3 000 r/min離心分離10 min，獲取血清，以酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測兩組患兒血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和C反應(yīng)蛋白(CRP)水平。ELISA試劑盒由上海酶聯(lián)生物耗材有限公司提供。

1.3.4 血清細(xì)胞因子 分別于治療前、治療4周后以ELISA法檢測兩組患兒治療前后血清中sB7-H3及GM-CSF的表達(dá)水平。

1.3.5 不良反應(yīng) 觀察并記錄用藥期間患兒出現(xiàn)頭暈、心悸、轉(zhuǎn)氨酶升高和胃腸道反應(yīng)等不良反應(yīng)的情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒臨床療效比較

觀察組治療后有效率為96.00%，高于對照組的78.00%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=7.161，P<0.05)，見表2。

表2 兩組患兒臨床療效比較 例(%)

2.2 兩組患兒臨床癥狀改善情況比較

觀察組患兒發(fā)熱、咳嗽、肺部啰音等臨床癥狀消失時間及WBC計數(shù)恢復(fù)正常時間均短于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 兩組患兒臨床癥狀改善情況比較 d

2.3 兩組患兒炎性因子水平比較

治療前兩組患兒TNF-α和CRP水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，治療后觀察組TNF-α和CRP水平明顯低于對照組(P<0.01)，見表4。

表4 兩組患兒治療前后炎性因子水平比較

2.4 兩組患兒血清細(xì)胞因子水平比較

治療前兩組患兒sB7-H3及GM-CSF水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，治療后觀察組sB7-H3及GM-CSF水平顯著低于對照組(P<0.01)，見表5。

表5 兩組患兒治療前后血清細(xì)胞因子的比較

2.5 兩組患兒不良反應(yīng)比較

用藥期間觀察組患兒出現(xiàn)頭暈、心悸、轉(zhuǎn)氨酶升高和胃腸道反應(yīng)等不良反應(yīng)發(fā)生率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.102，P>0.05)，見表6。

表6 兩組患兒不良反應(yīng)比較

3 討論

小兒肺炎支原體肺炎是臨床常見小兒肺部疾病，是由肺炎支原體引起的肺間質(zhì)或肺實質(zhì)急性感染，以秋冬季較為常見，其潛伏期較長，潛伏期就可傳染，由于肺炎支原體與人體某些組織器官存在共同抗原，感染后可對患兒機體多個器官造成損傷[8]。肺炎支原體無細(xì)胞壁，可通過黏附及細(xì)胞毒效應(yīng)對呼吸道上皮造成直接損傷，也可通過免疫反應(yīng)引起肺炎及其他系統(tǒng)損傷，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素通過干擾其蛋白質(zhì)合成發(fā)揮作用，其中阿奇霉素半衰期長，抗生素后效應(yīng)顯著，組織滲透性強，不良反應(yīng)輕，已成為治療首選[9]。脾氨肽凍干粉是一種具有免疫活性的二肽分子，口服進(jìn)入機體后能激活自然殺傷(NK)細(xì)胞，促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，調(diào)節(jié)Th1/Th2值，促進(jìn)細(xì)胞免疫反應(yīng)，臨床上也開始將其應(yīng)用于肺炎支原體肺炎的治療。有研究[10]報道脾氨肽口服凍干粉可通過調(diào)節(jié)機體免疫功能治療小兒難治性肺炎支原體肺炎，增強患兒免疫功能，進(jìn)而提高臨床療效。

本研究在阿奇霉素治療的基礎(chǔ)上聯(lián)用脾氨肽口服凍干粉治療支原體肺炎患兒，結(jié)果顯示，觀察組治療后有效率為96.00%，高于對照組的78.00%，觀察組患兒發(fā)熱、咳嗽、肺部啰音等臨床癥狀消失時間及白細(xì)胞計數(shù)恢復(fù)正常時間均顯著短于對照組；此外，治療前兩組患兒TNF-α和CRP水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，治療后觀察組TNF-α和CRP水平明顯低于對照組(P<0.01)。這是因為，脾氨肽能通過增強非特異性自然免疫及細(xì)胞免疫反應(yīng)，調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞亞群的增殖，增加CD4+/CD8+值，此外還可以激活單核細(xì)胞的吞噬活性和中性粒細(xì)胞的趨化功能，誘導(dǎo)生成抗炎因子，有效降低TNF-α及CRP等炎性因子水平，與阿奇霉素協(xié)同發(fā)揮抗炎作用。TNF-α和CRP作為臨床中常用的炎癥標(biāo)志物，被證明都參與了支原體肺炎的發(fā)病過程，MPP患兒體內(nèi)TNF-α和CRP水平明顯升高，二者可反映患兒體內(nèi)炎癥水平，檢測二者變化可以反映病情的嚴(yán)重程度[11]。已有研究表明脾氨肽口服凍干粉可以顯著增加小兒支原體肺炎患兒foxp3基因的表達(dá)和Treg細(xì)胞的比例，增加Th1/Th2值，增強患兒免疫功能[12]。脾氨肽口服凍干粉聯(lián)合阿奇霉素能有效改善機體免疫功能，降低血清TNF-α等炎性因子水平，改善機體炎癥狀態(tài)，增強肺功能[13]。

本研究治療前兩組患兒sB7-H3及GM-CSF水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，治療后觀察組sB7-H3及GM-CSF水平明顯低于對照組(P<0.01)，表明脾氨肽口服凍干粉聯(lián)合阿奇霉素可以顯著降低血清sB7-H3及GM-CSF的表達(dá)水平。分析認(rèn)為脾氨肽口服凍干粉可能通過促進(jìn)Toll樣受體2(toll-like receptor，TLR2)和人類白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen-DR，HLA-DR)分子的表達(dá)，誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞的成熟和抗炎因子的生成，抑制sB7-H3的表達(dá)，降低機體炎癥反應(yīng)，改善氣道功能和臨床癥狀；同時還能促使T淋巴細(xì)胞向Th1淋巴細(xì)胞分化，改善全身免疫功能，降低sB7-H3和GM-CSF的表達(dá)水平，減少對肺部及全身其他器官的損傷，改善預(yù)后。這是因為，小兒支原體肺炎作為常見的下呼吸道感染性疾病，與免疫功能紊亂和炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，其中，sB7-H3是T細(xì)胞的輔助性刺激因子，對T細(xì)胞有共刺激和共抑制兩方面的調(diào)節(jié)作用，既可促進(jìn)干擾素(IFN)-γ、TNF-α、IL-6的分泌，也可抑制其分泌。目前研究發(fā)現(xiàn)，sB7-H3與MPP的發(fā)生密切相關(guān)，可以誘導(dǎo)趨化因子和補體成分的激活，加劇肺部上皮細(xì)胞的自身免疫性損傷，進(jìn)而促進(jìn)MPP患兒病情的進(jìn)展。Wu P等[14]報道，MPP患兒血清sB7-H3水平明顯增加，檢測sB7-H3水平可能有助于MPP的早期診斷和評估病情嚴(yán)重程度。GM-CSF是粒細(xì)胞的激活因子，主要由巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、上皮和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生，并被IL-1、IL-6和TNF-α激活，能通過激活中性粒細(xì)胞的氧化應(yīng)激功能，提高中性粒細(xì)胞存活能力，減少細(xì)胞凋亡，加劇對肺泡組織的炎癥損傷。吳愛萍等[15]和夏利等[16]等均發(fā)現(xiàn)，MPP患兒的血清 sB7-H3、GM-CSF水平明顯升高，提示二者與患兒病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。有研究[17]指出，脾氨肽口服凍干粉可以減少呼吸道感染治療中抗生素的使用，增加免疫球蛋白水平及免疫調(diào)節(jié)活性的T淋巴細(xì)胞亞群。有研究[18]也發(fā)現(xiàn)，脾氨肽口服凍干粉聯(lián)合阿奇霉素治療兒童肺炎支原體肺炎可有效殺死病原微生物，還可以抑制炎性遞質(zhì)的釋放，從而減少炎性因子的表達(dá)。用藥期間觀察組患兒出現(xiàn)頭暈、心悸、轉(zhuǎn)氨酶升高和胃腸道反應(yīng)等不良反應(yīng)的發(fā)生率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，說明脾氨肽凍干粉不會增加患者用藥期間的不良反應(yīng)，安全可靠，臨床值得推廣應(yīng)用。

綜上所述，脾氨肽口服凍干粉可以有效地改善肺炎支原體肺炎患兒的血清sB7-H3和GM-CSF的表達(dá)水平，降低炎癥反應(yīng)，恢復(fù)氣道功能，改善預(yù)后，安全可靠。