可溶性生長刺激表達基因2蛋白和IL-33水平變化在冠心病PCI患者中的臨床意義研究

錢靜宇，沙 敏

（泰州市人民醫(yī)院 中心實驗室，江蘇 泰州 225300）

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病，簡稱冠心病，是最常見的一種心血管疾病。冠心病嚴重威脅人類健康，已經成為全世界人類疾病死亡的主要原因之一。冠心病患者經皮冠狀動脈介入術（PCI術）能夠開通狹窄或阻塞的血管，使心臟供血得到改善[1]。臨床相關研究表明，可溶性生長刺激表達基因2 蛋白（soluble growth stimulation expressed gene 2，sST2）與冠心病的進展密切相關[2]。當心肌受到損傷后，血清中的sST2 水平會立即升高，大量的sST2 與IL-33 結合后激活相應的信號通路，心肌細胞出現(xiàn)纖維化以及心室肥大，最終導致心室重構[3]。IL-33是IL-1家族的重要細胞因子，其血清水平可以用來評估PCI 術后患者的預后及預測冠脈支架內再狹窄。IL-33 的血清水平與冠心病的嚴重程度密切相關，且冠心病患者PCI 術后血清IL-33 水平的升高與術后支架內狹窄的發(fā)生率相關，從而認為血清IL-33 水平可作為冠心病PCI 術后再狹窄的獨立預測因子[4,5]。本研究旨在進一步明確機體血清sST2 和IL-33水平變化在冠心病患者PCI術治療前后的相關性及效果評價方面的價值，為冠心病患者預后的預測提供有效依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 研究對象本次研究的對象為2019 年12 月至2020年12月期間至泰州市人民醫(yī)院行PCI 術的136 例冠心病患者，年齡：42～77 歲，其中男性88 例，女性48 例，平均年齡（55.364±5.72）歲；將136例冠心病患者分為3個臨床亞組：疾病類型分組：急性心肌梗死組（AMI）50 例、不穩(wěn)定型心絞痛組（UAP）43 例、穩(wěn)定性心絞痛組（SAP）43 例；根據(jù)Gensini 積分將患者分為3 個冠脈硬化程度亞組：輕度組（＜26.1 分）52 例、中度組（26.1～51.4分）48例、重度組（≥51.4分）36例。同時以本院體檢的80名健康者作為對照組，年齡40～76歲，平均年齡（49.82±5.93）歲。冠心病患者的冠脈造影和支架植入治療由兩名手術經驗豐富的醫(yī)師完成。冠心病患者與健康對照組在性別、年齡方面的差別無統(tǒng)計學意義，P＞0.05。

1.2 主要試劑與儀器可溶性生長刺激表達基因2 蛋白（ST2）檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法，中國重癥監(jiān)護診斷股份有限公司）；人白介素33（IL-33）檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法，中國上海哈靈生物科技有限公司）；多功能酶標儀（Synergyht，美國BioTek公司）。

1.3 血清sST2和IL-33水平檢測所有患者分別于入院次日（或術前）和術后次日晨空腹抽取肘靜脈血3 ml，4℃離心（3000 r/min，30 min）后吸取上清液，置于-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)錅y，期間要避免反復凍融。采用可溶性生長刺激表達基因2 蛋白檢測試劑盒和人白介素33 檢測試劑盒進行檢測，操作步驟嚴格按照試劑盒的說明進行。此次研究中，檢測sST2 和IL-33 水平的ELISA 系列的標準品均由試劑公司提供，其具體濃度為：可溶性生長刺激表達基因2蛋白（ST2）標準品濃度梯 度 為200ng/mL，100ng/mL，50ng/mL，25ng/mL，12.5ng/mL，6.3ng/mL，3.1ng/mL，0ng/mL；人白介素33（IL-33）標準 品 濃度 梯度 為400pg/mL，200pg/mL，100pg/mL，50pg/mL，25pg/mL，12.5pg/mL，0pg/mL。嚴格按照說明書配制標準品、生物素化抗體、酶標記物、洗滌液。

以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪制標準曲線。通過檢測出的樣本的OD值可以通過標準曲線計算其濃度。所有標本測定3 次，取其平均值進行統(tǒng)計分析。

1.4 統(tǒng)計學分析使用SPSS21.0軟件進行數(shù)據(jù)分析。數(shù)據(jù)采用“”表示，組間比較采用單因素方差分析；相關性檢驗采用Pearson 檢驗。P＜0.05有統(tǒng)計學差異。

2 結果

2.1 不同臨床亞組人員血清sST2和IL-33水平比較術前各組比較：與對照組相比，冠心病UAP組和AMI 組患者血清sST2 水平顯著升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表1；冠心病UAP 組和AMI組患者血清IL-33水平顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表2。PCI治療前后：UAP組和AMI組患者介入治療后血清sST2水平顯著下降，以AMI 組下降最明顯（P＜0.05），見表1；UAP 組和AMI 組患者介入治療后血清IL-33 水平顯著上升，以AMI組上升最明顯（P＜0.05），見表2。

表1 不同臨床亞組人員血清sST2水平比較（）

表1 不同臨床亞組人員血清sST2水平比較（）

注：*表示治療前，臨床亞組與對照組相比，差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；#表示臨床亞組治療后與治療前相比，數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表2 不同臨床亞組人員血清IL-33水平比較（）

表2 不同臨床亞組人員血清IL-33水平比較（）

注：*表示治療前，臨床亞組與對照組相比，差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；#表示臨床亞組治療后與治療前相比，數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.2 不同冠脈硬化程度亞組人員血清sST2和IL-33 水平比較PCI 治療前，與對照組相比，冠脈硬化重度組和中度組患者血清sST2 水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3，且隨著冠脈硬化程度加重，血清sST2 水平逐漸升高；PCI治療前，與對照組相比，冠脈硬化重度組和中度組患者血清IL-33 水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表4，且隨著冠脈硬化程度加重，血清IL-33 水平逐漸降低。PCI 術后，中、重組患者血清sST2 水平較術前有明顯降低，以AMI 組下降最明顯（P＜0.05），見表3；PCI 術后，中、重組患者血清IL-33 水平較術前有明顯升高，以AMI組升高最明顯（P＜0.05），見表4。

表3 冠脈硬化程度亞組人員血清sST2水平比較（）

表3 冠脈硬化程度亞組人員血清sST2水平比較（）

注：*表示治療前，冠脈硬化程度亞組與對照組相比，差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；#表示冠脈硬化程度亞組治療后與治療前相比，數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表4 冠脈硬化程度亞組人員血清IL-33水平比較（）

表4 冠脈硬化程度亞組人員血清IL-33水平比較（）

注：*表示治療前，冠脈硬化程度亞組與對照組相比，差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；#表示冠脈硬化程度亞組治療后與治療前相比，數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.3 冠心病患者PCI 手術前后血清sST2與IL-33濃度相關性分析采用Pearson相關性分析：冠心病患者PCI手術前后血清中sST2與IL-33的水平均為顯著負相關（P＜0.05）。其中術前兩者的相關系數(shù)為-0.733（圖1A）；術后兩者相關系數(shù)為-0.792（圖1B）。手術前后血清sST2 濃度呈顯著降低趨勢，而IL-33 濃度呈顯著升高趨勢，表明二者皆與冠心病嚴重程度密切相關。

圖1 冠心病患者PCI手術前后血清sST2與IL-33濃度相關性分析

3 討論

冠心病的主要病理基礎為冠狀動脈血管粥樣硬化，血管腔循環(huán)受阻，斑塊破裂導致冠狀動脈管腔部分或完全堵塞從而導致心肌細胞缺血缺氧或壞死，同時不同類型ACS的臨床癥狀和預后等存在差異[6]。PCI 術已成為治療冠心病的一種重要手段，且效果顯著，可迅速重建血運，改善患者心肌細胞缺血缺氧的狀態(tài)。但是PCI術同時會導致心內膜撕裂剝脫、斑塊破裂、微血栓形成等風險，引發(fā)冠狀動脈痙攣或穿孔等從而損傷心肌細胞，誘發(fā)相關細胞因子水平出現(xiàn)異常，進而影響ACS患者的預后[7]。因此，探究不同類型ACS患者PCI術前和術后血清中相關炎癥因子的變化及其相關性，對于預測不良心血管事件及改善預后具有重要臨床意義。

sST2/IL-33 與動脈粥樣硬化相關，IL-33 的升高與冠脈支架內再狹窄相關，但sST2/IL-33 在冠心病患者PCI 手術前后的表達水平差異和兩者相關性研究尚未見報道。本研究主要探討了sST2 和IL-33在冠心病患者PCI手術前后的表達差異，結果顯示，冠心病UAP組和AMI組患者血清sST2水平顯著升高，而血清IL-33水平顯著降低；PCI術后1 個月，冠心病UAP 組和AMI 組血清sST2 水平均顯著下降，而血清IL-33 水平顯著升高，提示ACS患者血清sST2、IL-33水平變化與其斑塊穩(wěn)定性、危險分層密切相關，隨著病情加重，血清sST2水平逐漸升高、IL-33水平逐漸降低，PCI 可促進心外膜大血管的血流恢復，改善心肌供血不足，減輕心肌損傷，從而降低血清sST2、提高IL-33水平，提示治療過程中IL-33/sST2通路被大量激活。本實驗還證實冠心病PCI手術前后血清IL-33 與sST2 水平之間呈負相關，提示sST2 作為IL-33/sST2通路的負反饋調節(jié)劑，參與了冠心病患者PCI術后炎癥因子水平的調節(jié)。

綜上所述，血清sST2 在病情嚴重的ASC 患者中呈高表達狀態(tài)，在PCI 術后可出現(xiàn)不同程度的下降；且血清IL-33 在病情嚴重的ASC 患者中呈低表達狀態(tài)，在PCI術后可出現(xiàn)不同程度的升高；兩者在PCI 手術前后均存在負相關，臨床應密切關注血清sST2 和IL-33 水平變化，以監(jiān)測冠心病患者病情進展及預后情況，對評估冠心病患者冠脈狹窄程度及PCI術后患者隨訪有較明確的作用。