癲癇病人視頻腦電圖異常程度與血清炎性因子、IL-1β、Bax、Caspase-3水平的關(guān)系

賴錦星，黃靖如，吳鵬程，鐘 婷，曾祥俊，賴朝暉，盧知娟

癲癇是大腦神經(jīng)元突發(fā)性異常放電，導(dǎo)致短暫的大腦功能障礙的一種慢性疾病[1]。由于異常放電的起始部位和傳遞方式不同，癲癇發(fā)作的臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，可表現(xiàn)為發(fā)作性運動、感覺、自主神經(jīng)、意識及精神障礙。癲癇不僅嚴重影響病人的生活質(zhì)量，而且大腦皮層持續(xù)放電可能會引起神經(jīng)元的損傷及炎性因子的釋放，加重病人神經(jīng)系統(tǒng)癥狀[2-3]。目前癲癇的治療主要以控制及預(yù)防為主，其中腦電圖是最常用的診斷及預(yù)后評估方式。近年來，隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)越來越多的血清學(xué)指標與癲癇相關(guān)，如半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bax、白細胞介素-1β(IL-1β)等[4-5]。本研究分析癲癇病人視頻腦電圖(V-EEG)異常程度與血清IL-1β、Bax、Caspase-3水平的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月—2020年1月贛州市人民醫(yī)院收治的癲癇病人100例，根據(jù)V-EEG異常程度分為重度異常組和輕度異常組，每組50例。同時選取未合并癲癇的健康志愿者30名作為對照組。重度異常組：年齡29～75(58.8±4.6)歲；體重53～72(63.4±5.4)kg；高血壓14例，糖尿病9例。輕度異常組：年齡28～76(58.2±4.5)歲；體重52～74(63.5±5.5)kg；高血壓12例，糖尿病7例。對照組：年齡28～76(58.4±4.2)歲；體重53～75(63.4±5.2)kg；高血壓7例，糖尿病5例。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準，病人及家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準 納入標準：確診為癲癇；無嚴重傳染性疾??；病程在3年以內(nèi)；符合第8版《內(nèi)科學(xué)》中癲癇的診斷標準[6]。排除標準：合并顱腦外傷；合并其他原因引起的神經(jīng)系統(tǒng)損傷者；合并呼吸道急性感染者；各種原因無法完成本研究者。

1.3 試驗方法 腦電圖由我院神經(jīng)內(nèi)科專業(yè)技師進行測定并評估。病人就診時采集肘前正中靜脈全血5 mL于肝素抗凝管內(nèi)送檢。離心機離心10 min(4 000 r/min)后取出樣本，分離血漿及血清。血清Caspase-3、Bax、IL-1β濃度均采用酶聯(lián)免疫吸附法測定。以上實驗室檢查均由我院中心實驗室按照試劑盒說明書進行操作。比較不同腦電圖異常程度受試者的一般情況及血清Bax、IL-1β、Caspase-3水平。

1.4 評價標準 V-EEG采用Synek分級進行評價，重度異常：Synek Ⅳ級或Ⅴ級；輕度異常：SynekⅡ級或Ⅲ級[7]。

2 結(jié) 果

2.1 3組IL-1β、Bax、Caspase-3比較 與對照組比較，重度異常組和輕度異常組IL-1β、Bax、Caspase-3明顯升高，與輕度異常組比較，高度異常組IL-1β、Bax、Caspase-3明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 3組IL-1β、Bax、Caspase-3比較(±s) 單位：pg/mL

2.2 腦電圖重度異常的單因素分析 不同水平血清Bax、IL-1β、Caspase-3及受教育程度癲癇病人的腦電圖重度異常發(fā)生率比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 癲癇病人腦電圖重度異常相關(guān)因素分析

2.3 腦電圖重度異常相關(guān)因素的Logistic回歸分析 Bax、IL-1β、Caspase-3為腦電圖重度異常發(fā)生的影響因素(P<0.05)。詳見表3。

表3 腦電圖重度異常相關(guān)因素的Logistic回歸分析結(jié)果

3 討 論

癲癇是一種反復(fù)發(fā)作的神經(jīng)性疾病，即重復(fù)發(fā)作或長或短的嚴重抽搐癥狀，可能會造成物理性傷害，甚至骨折。大腦皮層異常放電是癲癇發(fā)作的主要機制，按照放電的范圍可有不同表現(xiàn)[8]。大腦皮層全范圍的放電可導(dǎo)致癲癇病人“整體發(fā)作”，表現(xiàn)為全身痙攣的整體性強直發(fā)作(大發(fā)作)和不伴隨痙攣而主要是喪失意識失神性發(fā)作(小發(fā)作)等；局部大腦皮層放電引發(fā)稱為“部分發(fā)作”；不伴隨意識障礙的稱為“單純部分發(fā)作”；伴隨意識障礙的稱為“復(fù)雜部分發(fā)作”，另外還有泛肌陣攣性發(fā)作、強直發(fā)作、脫力發(fā)作等。研究表明，大腦皮層的異常放電不僅導(dǎo)致病人各種臨床癥狀的產(chǎn)生，越來越多的血清學(xué)指標證明，長期異常放電可能會引起神經(jīng)系統(tǒng)的免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)，嚴重時會造成神經(jīng)元損傷[9-10]。腦電圖作為臨床診斷及評估癲癇病人預(yù)后的主要手段，在癲癇的診療過程中具有十分重要的意義。若能進一步明確腦電圖與各項血清學(xué)指標變化的關(guān)系，將有助于癲癇的臨床診療。

IL-1β是一種重要的細胞因子，具有廣泛的生物學(xué)活性，IL-1β不僅對多種免疫活性細胞有調(diào)節(jié)作用，而且參與造血、神經(jīng)內(nèi)分泌及抗腫瘤等多種生理過程，并與發(fā)熱、炎癥以及某些疾病的病理變化有關(guān)[11]。IL-1β是重要的炎性介質(zhì)，能促進骨髓釋放中性粒細胞，誘導(dǎo)單核細胞和多核細胞趨化浸潤到炎癥局部，在局部釋放溶酶體酶[12]。研究發(fā)現(xiàn)，癲癇病人體內(nèi)IL-1β水平明顯升高，可能與癲癇病人神經(jīng)元異常放電有關(guān)[13]。Bax是近年來發(fā)現(xiàn)的一種凋亡促進因子，通過與其他分子的相互作用在許多細胞行為中發(fā)揮重要作用，如增加線粒體內(nèi)細胞色素C的釋放。有研究發(fā)現(xiàn)，隨著病程增加，癲癇病人體內(nèi)Bax水平有升高趨勢，而Bax的增加與大腦皮層神經(jīng)元凋亡明顯相關(guān)[14-15]。Caspase-3是一種特殊的蛋白酶，在細胞凋亡中有不可替代的作用，Caspase-3基因過度表達可引起細胞凋亡，但此過程可被Bcl-2阻斷，在發(fā)生凋亡的細胞提取液中去除Caspase-3后，提取液就失去了誘導(dǎo)細胞凋亡的能力[16]。

本研究結(jié)果顯示，與對照組比較，重度異常組和輕度異常組IL-1β、Bax、Caspase-3明顯升高，與輕度異常組比較，重度異常組IL-1β、Bax、Caspase-3明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。表明癲癇病人腦電圖不同程度異常病人血清IL-1β、Bax、Caspase-3水平存在明顯差異，可能與癲癇病人大腦皮層異常放電引起的炎性因子釋放及神經(jīng)元凋亡有關(guān)。其中IL-1β是早期產(chǎn)生的促炎細胞因子，能夠誘導(dǎo)免疫活性細胞產(chǎn)生炎癥介質(zhì)，參與癲癇發(fā)病，過量表達與大腦海馬損害及硬化有關(guān)；Bax是神經(jīng)元凋亡因子，能夠誘導(dǎo)細胞凋亡，其與癲癇發(fā)病有關(guān)；Caspase-3作為目前已知的細胞凋亡最直接和最關(guān)鍵的執(zhí)行分子，激活Caspase-3后可以讓細胞質(zhì)、細胞核以及細胞骨架中的重要蛋白質(zhì)失活降解，放大蛋白酶級聯(lián)反應(yīng)，引發(fā)細胞凋亡，加重癲癇[17-18]。Joshi等[19]研究發(fā)現(xiàn)，癲癇病人血清炎性免疫因子存在不同程度變化，可能與長期異常放電下神經(jīng)元興奮性的改變有關(guān)。本研究結(jié)果表明，癲癇病人腦電圖異常程度與血清Bax、IL-1β、Caspase-3水平存在一定的相關(guān)性。Limotai等[20]研究發(fā)現(xiàn)，癲癇病人大腦皮層異常放電可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)免疫應(yīng)答和炎性反應(yīng)的激活，并對大腦神經(jīng)元造成不可逆損傷。故對癲癇病人進行血清學(xué)監(jiān)測，可能有助于病人癲癇病情以及預(yù)后的評估。

綜上所述，血清Bax、Caspase-3、IL-1β與癲癇病人腦電圖異常程度有相關(guān)性，隨著Bax、Caspase-3、IL-1β水平升高，腦電圖異常程度顯著升高，值得臨床關(guān)注。