基于網(wǎng)絡(luò)藥理探討四妙散治療骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制

朱凱　梁學(xué)振　劉金豹　許波　盛韋菖　李剛　

摘要 目的：基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討四妙散治療骨性關(guān)節(jié)炎（OA）的作用機(jī)制。方法：從中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）中檢索四妙散中黃柏、蒼術(shù)、薏苡仁、牛膝的活性成分，以口服生物利用度（OB）≥30%，類藥性（DL）≥0.18為條件進(jìn)行篩選，通過(guò)Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測(cè);通過(guò)TTD、Drugbank、CTD、Gencards、OMIM、PharmGKB、GAD、KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)獲取OA的相關(guān)靶標(biāo)，并進(jìn)一步對(duì)藥物和疾病靶點(diǎn)相映射得到四妙散治療OA的潛在靶點(diǎn)，運(yùn)用Cytoscape和STRING軟件構(gòu)建“中藥-成分-靶點(diǎn)”與蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)圖，篩選可能發(fā)揮治療作用的重要成分及靶點(diǎn)，并對(duì)相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書(shū)（KEGG）通路富集分析獲知其潛在的作用機(jī)制。結(jié)果：從四妙散中共篩選出活性成分67個(gè)，包括槲皮素、豆甾醇、β-谷甾醇、漢黃芩素、非洲防己堿等，與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的作用靶點(diǎn)524個(gè)，包括TNF、IL6、MAPK1、PTGS2、MAPK8等。四妙散主要通過(guò)調(diào)節(jié)TNF信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路、NOD樣受體、Toll樣受體信號(hào)通路等發(fā)揮治療骨關(guān)節(jié)炎的作用。結(jié)論：本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)了四妙散治療OA可能的活性成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)及作用通路，體現(xiàn)了中藥治療疾病具有“多成分、多靶點(diǎn)、多途徑”的特點(diǎn)，為其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制研究提供了理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞 四妙散;骨性關(guān)節(jié)炎;活性成分;靶點(diǎn);網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);作用機(jī)制

Abstract Objective：To explore the mechanism of Simiao Powder in the treatment of osteoarthritis based on network pharmacology.Methods：The active components of Phellodendron Phellodendri，Atractylodes，Coix seed and Achyranthes bidentata in Simiao Powder were retrieved from TCMSP database，screened under the condition of OB≥30%，DL≥0.18，and the target was predicted by Uniprot database.The related targets of osteoarthritis were obtained through the databases of TTD，Drugbank，CTD，Gencards，OMIM，PharmGKB，GAD and KEGG，and the important targets of Simiao Powder in the treatment of osteoarthritis were further mapped by drugs and disease targets.The PPI network of “traditional Chinese medicine-active ingredient-important target” and protein interaction was constructed with Cytoscape and STRING，and the main treating components and key targets were screened.The potential action mechanism of the targets was obtained by GO functional enrichment and KEGG pathway enrichment analysis.Results：A total of 67 active components were screened from Simiao Powder，including quercetin，stigmasterol，β-sitosterol，wogonin，Tetrandrine，etc，and 524 targets related to osteoarthritis，including TNF，IL6，MAPK1，PTGS2，MAPK8 and so on.Simiao Powder mainly played a role in the treatment of osteoarthritis by regulating signal pathways of TNF，HIF-1，NOD-like receptor，Toll-like receptor.Conclusion：In this study，the possible active components，key targets and pathways of Simiao Powder in the treatment of osteoarthritis were predicted by the method of network pharmacology，which reflects the characteristics of “multi-components，multi-targets and multi-pathways” in the treatment of traditional Chinese medicine.It provides a theoretical foundation for the study of its pharmacodynamic material base and functional mechanism.

Keywords Simiao Powder; Osteoarthritis; Active ingredient; Target; Network Pharmacology; Mechanism of Action

中圖分類號(hào)：R289.4;R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.18.006

骨性關(guān)節(jié)炎（Osteoarthritis，OA）是一種退行性關(guān)節(jié)疾病，可逐漸影響關(guān)節(jié)功能。以關(guān)節(jié)軟骨和軟骨下骨重建的退行性丟失和異常修復(fù)為特征，可以致殘，并極大地影響個(gè)人生命質(zhì)量[1]。世界衛(wèi)生組織（WHO）估計(jì)，在60歲及以上的老年群體中，約10%的男性和18%的女性有OA癥狀，其中80%有活動(dòng)障礙表現(xiàn)[2]。據(jù)預(yù)測(cè)，到2050年，60歲以上的人口將顯著增加，在全球范圍內(nèi)達(dá)到20多億，老年人口的增長(zhǎng)將導(dǎo)致全球OA發(fā)病率的增加[3]。OA的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，涉及許多危險(xiǎn)因素，如年齡、性別、職業(yè)、種族、肥胖、遺傳、創(chuàng)傷、炎癥、飲食、激素等[4-5]。骨關(guān)節(jié)炎在臨床中常常表現(xiàn)為關(guān)節(jié)僵硬和間歇性疼痛的輕微癥狀，關(guān)節(jié)活動(dòng)受限和持續(xù)劇烈疼痛的嚴(yán)重癥狀，以及關(guān)節(jié)不穩(wěn)定和跛行等更為嚴(yán)重的癥狀[6]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療早、中期OA多選用氨基葡萄糖、非甾體抗炎藥等藥物，但常引起上消化道出血及肝腎損害等不良反應(yīng)[7]，晚期嚴(yán)重者需行關(guān)節(jié)鏡和手術(shù)治療。近年來(lái)，中醫(yī)藥對(duì)于OA的治療有較好的療效，特別是在OA的早、中期，中醫(yī)藥治療具有明顯優(yōu)勢(shì)。中醫(yī)古籍中無(wú)“骨性關(guān)節(jié)炎”一詞，但根據(jù)其癥狀及其表現(xiàn)可歸屬中醫(yī)學(xué)“痹證”“骨痹”范疇。

四妙散出自清代張秉成的《成方便讀》一書(shū)，該方由黃柏、蒼術(shù)、薏苡仁、牛膝組成，具有清熱利濕、補(bǔ)益肝腎的功效。方中黃柏性味苦寒，善清下焦?jié)駸?，蒼術(shù)燥濕健脾，薏苡仁祛濕熱，利筋絡(luò)，牛膝補(bǔ)肝腎強(qiáng)筋骨，還可加強(qiáng)諸藥走入下焦之力。其組方全面嚴(yán)謹(jǐn)，功專效宏，是作為臨床治療濕熱痹癥的常用方。吳鵬飛[8]研究結(jié)果證實(shí)四妙散加減能夠顯著改善膝關(guān)節(jié)OA患者的臨床癥狀，提高治療有效率。梅宗志[9]運(yùn)用四妙散加味治療觀察組膝關(guān)節(jié)OA患者的有效率高達(dá)90.32%，明顯改善膝關(guān)節(jié)的疼痛及活動(dòng)程度。鐘邱等[10]運(yùn)用四妙散加味聯(lián)合針灸推拿治療膝關(guān)節(jié)OA，療效顯著。

中醫(yī)藥治療骨關(guān)節(jié)炎的方法在臨床上應(yīng)用較廣泛，且取得了較好的療效，但中醫(yī)藥臨床辨證施治和各種治療方式的應(yīng)用與普及，一直缺乏可被接受的科研規(guī)范，阻礙中醫(yī)藥療法成為治療骨關(guān)節(jié)炎的主流治療方法[11]。目前，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)作為一門(mén)新興交叉學(xué)科。它構(gòu)建了“藥物-靶向-疾病”的多層網(wǎng)絡(luò)，利用網(wǎng)絡(luò)分析觀察藥物對(duì)疾病網(wǎng)絡(luò)的干預(yù)和影響，從而更好地理解藥物對(duì)疾病的治療作用[12]。其強(qiáng)調(diào)從“一個(gè)目標(biāo)，一種藥物”向“網(wǎng)絡(luò)目標(biāo)，多組分治療”的范式轉(zhuǎn)變，具有整體性和系統(tǒng)性特點(diǎn)。而這與中醫(yī)藥的整體思維及中醫(yī)辨證論治的整體思想相一致[13-15]?；诖耍狙芯客ㄟ^(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)挖掘分析四妙散治療OA的活性成分及作用靶點(diǎn)，并為其作用機(jī)制提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 軟件與數(shù)據(jù)庫(kù) 分析軟件使用Cytoscape 3.7.2，所用數(shù)據(jù)庫(kù)名稱及其網(wǎng)址見(jiàn)表1[16-26]。

1.2 藥活性成分及藥物靶點(diǎn)的篩選 通過(guò)中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP），分別輸入黃柏、蒼術(shù)、牛膝、薏苡仁4味中藥的名稱，搜索獲取活性成分，以口服生物利用度（OB）≥30%，類藥性（DL）≥0.18為條件進(jìn)行篩選，匯總活性成分，并檢索對(duì)應(yīng)的靶標(biāo)蛋白。利用Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.uniprot.org/）查詢靶標(biāo)蛋白所對(duì)應(yīng)的基因名稱，對(duì)重復(fù)的靶點(diǎn)進(jìn)行刪除，加以匯總。

1.3 疾病相關(guān)靶點(diǎn)的檢索 通過(guò)TTD、Drugbank、CTD、Gencards、OMIM、PharmGKB、GAD、KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)分別以疾病名稱“Osteoarthritis”進(jìn)行檢索，根據(jù)不同的篩選條件總結(jié)歸納，進(jìn)而得到OA的相關(guān)靶點(diǎn)。將中藥活性成分的作用靶點(diǎn)與OA疾病靶點(diǎn)交互映射，以獲取潛在靶點(diǎn)。

1.4 中藥-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建 將四妙散4味中藥的名稱、主要活性成分及其靶點(diǎn)的相關(guān)數(shù)據(jù)導(dǎo)入至Cytoscape 3.7.2軟件以繪制中藥-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 建潛在靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò) 將四妙散作用于OA的潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)，設(shè)置蛋白質(zhì)種類為“homo sapiens”，其他參數(shù)默認(rèn)，構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)模型，其中自由度（Degree）表示與該節(jié)點(diǎn)直接連接的節(jié)點(diǎn)數(shù)目。利用Cytoscape 3.7.2進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵傩苑治?，以篩選出四妙散治療OA的關(guān)鍵靶點(diǎn)。在STRING數(shù)據(jù)庫(kù)中導(dǎo)入33個(gè)潛在靶點(diǎn)以繪制PPI網(wǎng)絡(luò)圖。圖中圓點(diǎn)代表靶點(diǎn)，若顏色越深，形狀越大，則代表該節(jié)點(diǎn)與其他節(jié)點(diǎn)之間的連線越多，關(guān)系越密切。

1.6 基因本體（GO）富集分析與京都基因和基因組百科全書(shū)（KEGG）信號(hào)通路富集分析 DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)作為一種基因注釋工具，可充分發(fā)掘基因與疾病間的相關(guān)性，并對(duì)相關(guān)基因進(jìn)行富集分析[26]。利用該數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)四妙散治療OA的潛在靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（Gene Ontology，GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書(shū)（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）信號(hào)通路富集分析，找出其關(guān)鍵通路。

2 結(jié)果

2.1 中藥活性成分及藥物靶點(diǎn)的篩選結(jié)果 共檢索到四妙散中黃柏、蒼術(shù)、薏苡仁、牛膝的活性成分分別為140、49、38、176個(gè)，以O(shè)B≥30%，DL≥0.18為篩選條件，共獲取活性成分67個(gè)，其中黃柏38個(gè)，蒼術(shù)9個(gè)，薏苡仁9個(gè)，牛膝21個(gè)。靶點(diǎn)預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)，黃柏736個(gè)、蒼術(shù)68個(gè)、薏苡仁87個(gè)、牛膝444個(gè)，去除重復(fù)靶點(diǎn)后共獲得84個(gè)。

2.2 OA相關(guān)靶點(diǎn)檢索結(jié)果 通過(guò)TTD、Drugbank、CTD、Gencards、OMIM、PharmGKB、GAD、KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)分別檢索到10、14、384、76、65、1、63、2個(gè)靶點(diǎn)，合并及刪除重復(fù)靶點(diǎn)后共獲得524個(gè)重要靶點(diǎn)。

2.3 中藥-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建結(jié)果 將四妙散活性成分靶點(diǎn)與OA靶點(diǎn)進(jìn)行映射，獲得四妙散治療OA的33個(gè)潛在靶點(diǎn)，以韋恩圖的形式展示。見(jiàn)圖1。通過(guò)Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建中藥-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，從中可見(jiàn)該網(wǎng)絡(luò)共有155個(gè)節(jié)點(diǎn)，包括4個(gè)藥物、67個(gè)活性成分及84個(gè)靶點(diǎn)節(jié)點(diǎn)，共有1 384條邊。Degree值前10位的活性成分主要有MOL000098（槲皮素）、MOL000449（豆甾醇）、MOL000358（β-谷甾醇）、MOL000173（漢黃芩素）、MOL000785（非洲防己堿）等。見(jiàn)表2。此外，每個(gè)活性成分平均與20.66個(gè)靶點(diǎn)互相作用，而每個(gè)靶點(diǎn)平均與15.56個(gè)活性成分互相作用。見(jiàn)圖2。

2.4 潛在靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建結(jié)果 共有33個(gè)節(jié)點(diǎn)，274條邊，Degree均值為16.61，其中大于Degree均值的靶點(diǎn)共有15個(gè)。見(jiàn)圖3。網(wǎng)絡(luò)中的10個(gè)關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)可能在四妙散治療OA中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。見(jiàn)圖4。

2.5 GO功能富集及KEGG信號(hào)通路富集分析結(jié)果共得到211條GO富集條目（P<0.05），其中包括153個(gè)生物過(guò)程（Biological Processes，BP）、20類細(xì)胞組分（Cell Components，CC）和38種細(xì)胞功能（Molecular Function，MF）。BP主要富集在RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、凋亡過(guò)程、基因表達(dá)等;CC方面，在胞質(zhì)核周區(qū)、線粒體、核質(zhì)、胞外區(qū)、質(zhì)膜基因富集占比較高;MF方面主要富集在血紅素結(jié)合、類固醇激素受體活性、蛋白質(zhì)同二聚體活性、序列特異性DNA結(jié)合、轉(zhuǎn)錄活性等。見(jiàn)圖5。

共富集到與OA相關(guān)的KEGG信號(hào)通路79條，其中P<0.05的信號(hào)通路共有70條。其中主要顯著在癌癥途徑、TNF信號(hào)通路、恰加斯病、甲型流感、利什曼病、百日咳、沙門(mén)菌感染、破骨細(xì)胞分化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎通路、HIF-1信號(hào)通路、NOD樣受體信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路等。KEGG通路富集前20位（按P值排列）。見(jiàn)圖6。氣泡圖Y軸英文字母代表KEGG通路名稱，X軸數(shù)字代表基因的百分比，圓圈大小代表富集的基因個(gè)數(shù)，顏色代表-Log10 P值，其與富集的程度正相關(guān)。

3 討論

OA是一種以關(guān)節(jié)軟骨退化、骨贅形成、滑膜增生、軟骨下骨囊腫和硬化為特征的退行性關(guān)節(jié)疾病，是導(dǎo)致老年人群關(guān)節(jié)疼痛和功能障礙的主要原因之一[27]。流行病學(xué)研究表明，55歲和65歲患者的OA發(fā)病率分別為44%～70%和60%～70%[28]。盡管OA的患病率很高，但其發(fā)病機(jī)制仍不明確。OA在中醫(yī)古籍中未提及，但根據(jù)其癥狀及表現(xiàn)，將其歸于中醫(yī)“痹證”“骨痹”的范疇。中醫(yī)認(rèn)為人至中年，肝腎虧虛，筋骨肌肉漸失濡養(yǎng)，寒濕之邪易乘虛而入，滯于筋脈關(guān)節(jié)，引起關(guān)節(jié)腫痛，寒濕日久郁而化熱，進(jìn)而形成濕熱痹證。故肝腎虧虛是痹證的基本病機(jī)，清熱利濕更應(yīng)首當(dāng)其沖，補(bǔ)益肝腎亦不可加重濕熱，因此當(dāng)以清熱利濕為主兼顧補(bǔ)益肝腎[10]。而四妙散可清熱利濕，補(bǔ)益肝腎，是臨床治療濕熱痹癥常用方，已廣泛應(yīng)用證屬濕熱痹癥的關(guān)節(jié)疾病。

本研究初步篩選出四妙散中67個(gè)重要活性成分，檢索到四妙散治療骨關(guān)節(jié)炎84個(gè)重要靶點(diǎn)，繪制出中藥-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，結(jié)果顯示節(jié)點(diǎn)度值較高的活性成分主要有槲皮素、豆甾醇、β-谷甾醇等。其中槲皮素是一種天然黃酮類化合物，在抑制炎癥介質(zhì)生成、影響炎癥相關(guān)信號(hào)通路以及抑制ECM降解等方面起到保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨的作用，以延緩OA的發(fā)展[29]。豆甾醇、β-谷甾醇皆屬于植物甾醇，Chen等[30]研究發(fā)現(xiàn)豆甾醇在抑制基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)方面具有重要作用，能減少軟骨的降解，具備治療OA的潛力。Choi等[31]研究發(fā)現(xiàn)β-谷甾醇可明顯抑制NO的合成，減弱巨噬細(xì)胞IL-6的活性，從而減少TNF、IL-1等炎癥介質(zhì)的分泌而發(fā)揮其抗炎作用。四妙散治療OA的PPI網(wǎng)絡(luò)圖顯示共有33個(gè)靶點(diǎn)蛋白，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治龅玫降年P(guān)鍵靶點(diǎn)包括TNF、IL6、MAPK1、PTGS2、MAPK8等。有研究證實(shí)TNF在關(guān)節(jié)滑膜炎性病變及軟骨基質(zhì)的降解過(guò)程中起重要作用[32]。IL6作為炎癥介質(zhì)，通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)更新的速度，進(jìn)而加快關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞退化和凋亡[33]。MAPK1、MAPK8同屬于絲裂原活化蛋白激酶家族，有研究表明MAPK途徑是介導(dǎo)OA軟骨損傷極為重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，其主要機(jī)制是利用關(guān)節(jié)炎的特異性炎癥介質(zhì)、生長(zhǎng)因子等與細(xì)胞膜受體結(jié)合，以激活細(xì)胞內(nèi)MAPKs信號(hào)通路，引起相關(guān)反應(yīng)，例如MMPs表達(dá)增加、軟骨細(xì)胞凋亡、軟骨破壞等[34]。PTGS2是一種較為典型的炎癥反應(yīng)基因，在OA的發(fā)病機(jī)制中具有一定作用，有研究發(fā)現(xiàn)抑制T型VGCCs可通過(guò)降低PTGS2的表達(dá)來(lái)減弱軟骨細(xì)胞的OA樣表型[35]。

GO富集分析結(jié)果表明，四妙散治療OA主要通過(guò)轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，基因表達(dá)等生物過(guò)程實(shí)現(xiàn)的。KEGG信號(hào)通路結(jié)果顯示，四妙散主要通過(guò)干預(yù)炎癥反應(yīng)、細(xì)胞周期、破骨細(xì)胞分化等通路治療OA。與炎癥相關(guān)的通路主要是TNF信號(hào)通路及NOD樣受體信號(hào)通路。TNF是一種細(xì)胞因子，可與細(xì)胞膜上特異性受體結(jié)合，從而發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、凋亡及誘發(fā)炎癥的作用[36]。有研究發(fā)現(xiàn)TNF-α可通過(guò)促進(jìn)滑膜炎癥和激活軟骨細(xì)胞及滑膜成纖維細(xì)胞參與OA的發(fā)病機(jī)制[37]。在NOD樣受體信號(hào)通路中，NOD樣受體作為一種模式識(shí)別受體，在自身免疫反應(yīng)起始階段發(fā)揮重要作用，在受到刺激后活化，通過(guò)激活Caspase-1蛋白促進(jìn)細(xì)胞的死亡以及炎癥反應(yīng)，從而進(jìn)一步激活MAPK途徑，影響軟骨細(xì)胞內(nèi)基因的轉(zhuǎn)錄及修飾，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)基質(zhì)的降解和關(guān)節(jié)炎癥[38]。干預(yù)細(xì)胞周期相關(guān)的HIF-1通路，在骨發(fā)育、再生與成骨結(jié)合過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用，可介導(dǎo)軟骨細(xì)胞對(duì)缺氧的反應(yīng)，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成和抑制凋亡，在軟骨內(nèi)穩(wěn)中起關(guān)鍵作用[39]。Toll樣受體（TLRs）是一類天然免疫受體，在軟骨細(xì)胞中可表達(dá)，其中TLR4是最主要受體，在OA的進(jìn)展中具有重要作用[40]，錢(qián)臣和卞曉星[41]發(fā)現(xiàn)TLR4的表達(dá)活化與軟骨細(xì)胞的凋亡有密切聯(lián)系。此外，其他顯著性較高的通路，如癌癥通路、美洲錐蟲(chóng)病等通路也可能成為四妙散治療OA的重要通路，但相關(guān)文獻(xiàn)較少，仍待進(jìn)一步探索，可能成為今后研究的重點(diǎn)。

本研究為開(kāi)展四妙散的臨床應(yīng)用和科學(xué)研究提供了重要參考，證明了四妙散中多種成分可以作用于同一靶點(diǎn)，一種成分同樣可以通過(guò)不同靶點(diǎn)起作用，充分體現(xiàn)了四妙散治療OA具有“多成分、多靶點(diǎn)、多通路”的特點(diǎn)。但是四妙散成分多樣、作用機(jī)制復(fù)雜，本研究?jī)H通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)的檢索來(lái)分析四妙散治療OA的活性成分及可能作用機(jī)制，尚未進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，具有一定局限性，而后仍需大量的臨床及實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)。

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（2020-10-18收稿 責(zé)任編輯：楊覺(jué)雄）