大便潛血試驗(yàn)聯(lián)合細(xì)胞游離亞鐵原卟啉檢測(cè)在直腸早癌診斷中的臨床意義

鄒曉紅，杜雪梅，周文婷，劉遠(yuǎn)富，楊光建

（成都市龍泉驛區(qū)第一人民醫(yī)院病理科 四川 成都 610100）

細(xì)胞游離亞鐵原卟啉（cells free ferrous protoporphyrin,FH）是細(xì)胞惡變過程中產(chǎn)生的一種效應(yīng)性生物因子，有研究指出，在惡性腫瘤細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)變化前FH 水平已經(jīng)有所提高，而且FH 水平與病變惡性程度存在密切關(guān)系，惡變程度越嚴(yán)重，則FH 水平越高[1]。目前，F(xiàn)H 試劑已經(jīng)在宮頸癌等惡性腫瘤早期篩查中得到應(yīng)用，具有較高敏感性，且操作簡(jiǎn)便，患者等待時(shí)間短[2]。本研究旨在探究直腸黏液中FH 檢測(cè)在直腸早癌診斷中的臨床意義，報(bào)告如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

抽取我院2018 年1 月—2020 年6 月收治的疑似直腸早癌患者89 例，男52 例，女37 例；年齡24 ～79 歲，平均年齡（48.17±5.36）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）均為疑似直腸癌患者，存在排便異常、消化不良、腹部不適或者血便等異常癥狀；（2）年齡在18 歲以上；（3）均接受腸鏡、大便潛血試驗(yàn)以及FH 檢測(cè)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）入組前1 周內(nèi)出現(xiàn)痔瘡出血或者肛裂等癥狀者；（2）處于月經(jīng)期或者哺乳、妊娠期女性；（3）伴有肝腎功能不全、傳染性疾病、血液病、甲亢或者心腦血管疾病等疾病。

1.2 方法

1.2.1 大便潛血試驗(yàn) 通過專用一次性糞便樣本采集管收集糞便約10 mg，24 h 內(nèi)用免疫法和化學(xué)法進(jìn)行檢測(cè)，所用儀器為珠?？朴蛏锕こ坦煞萦邢薰旧a(chǎn)的KUF10 自動(dòng)化糞便分析儀；嚴(yán)格按照儀器說明書進(jìn)行檢測(cè)，兩種檢測(cè)方法任一陽(yáng)性計(jì)為陽(yáng)性，均無(wú)陰性則計(jì)為陰性。

1.2.2 腸鏡檢查 囑患者做好檢查前準(zhǔn)備工作，包括檢查前1 d 進(jìn)食易消化食物，檢查當(dāng)天早晨禁食禁水，遵醫(yī)囑服用聚乙二醇電解質(zhì)散等；采用廣州瑞達(dá)醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的IRE 100 型電子直腸鏡進(jìn)行檢查，協(xié)助患者取左側(cè)臥位，屈曲雙膝，首先進(jìn)行肛門指檢，了解患者肛門以及直腸末端有無(wú)異常，無(wú)異常后插入腸鏡，并送入至小腸末端，在退鏡過程中仔細(xì)觀察各腸段，如果發(fā)現(xiàn)病變則取組織進(jìn)行病理活檢；確診為直腸癌計(jì)為陽(yáng)性，未發(fā)現(xiàn)問題或者良性病變計(jì)為陰性。

1.2.3 FH 檢測(cè) 操作者戴無(wú)菌手套，持一次性直腸采樣器經(jīng)肛門支撐器到達(dá)齒狀線，在齒狀線以上擦拭獲取足量直腸黏膜細(xì)胞滲液；把采樣器頭部放入C 試劑瓶?jī)?nèi)攪動(dòng)不少于10 次，混合均勻后備檢；旋轉(zhuǎn)折斷乳白色管，把A 試劑滴入測(cè)試池；用已空置的乳白色管充當(dāng)吸管，在C 試劑瓶?jī)?nèi)吸取樣本液1 mL 滴入測(cè)試池，旋轉(zhuǎn)折斷藍(lán)色管，把B 試劑滴入測(cè)試池；在120 s 內(nèi)與比色板對(duì)比顯色情況獲取結(jié)果，如果標(biāo)本未變色則計(jì)為陰性，出現(xiàn)藍(lán)色、藍(lán)綠色或者深黃色、棕紅色計(jì)為陽(yáng)性。試劑盒購(gòu)自青島東孚美倫生物科技有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）將腸鏡直視下活檢組織的病理診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，觀察大便潛血試驗(yàn)、FH 檢測(cè)以及二者聯(lián)合對(duì)直腸早癌的檢出情況；（2）比較大便潛血試驗(yàn)、FH 檢測(cè)以及二者聯(lián)合的診斷效能，包括敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值等，其中二者聯(lián)合任一結(jié)果為陽(yáng)性則計(jì)為陽(yáng)性，二者均為陰性則計(jì)為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

通過SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 不同檢查方法的直腸早癌檢出率

89 例疑似直腸早癌患者中，病理結(jié)果確診直腸早癌37 例，良性病變52 例，其中直腸息肉23 例、潰瘍性直腸炎6 例、直腸腺瘤17 例、其他6 例。大便潛血試驗(yàn)檢出直腸早癌陽(yáng)性18 例，F(xiàn)H 檢測(cè)檢出直腸早癌陽(yáng)性27 例，大便潛血試驗(yàn)聯(lián)合FH 檢測(cè)檢出直腸早癌陽(yáng)性34 例，大便潛血試驗(yàn)聯(lián)合FH 檢測(cè)檢出直腸早癌的檢出率顯著高于FH 檢測(cè)和大便潛血試驗(yàn)，F(xiàn)H 檢測(cè)檢出直腸早癌的檢出率顯著高于大便潛血試驗(yàn)（P＜0.05），見表1。

表1 大便潛血試驗(yàn)、FH 檢測(cè)以及二者聯(lián)合對(duì)直腸早癌的檢出情況比較（例）

2.2 不同檢查方法的直腸早癌診斷效能

大便潛血試驗(yàn)聯(lián)合FH 檢測(cè)的敏感度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值均顯著高于大便潛血試驗(yàn)和FH 檢測(cè)，F(xiàn)H 檢測(cè)的敏感度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值顯著高于大便潛血試驗(yàn)（P＜0.05）；3 種方法的特異度比較無(wú)顯著差異（P＞0.05）。見表2、表3。

表2 大便潛血試驗(yàn)、FH 檢測(cè)以及二者聯(lián)合檢查與病理結(jié)果對(duì)照（例）

表3 大便潛血試驗(yàn)、FH 檢測(cè)以及二者聯(lián)合檢查直腸早癌的診斷效能觀察[%（n/N）]

2.3 大便潛血試驗(yàn)、FH 檢測(cè)以及二者聯(lián)合檢查與病理結(jié)果的一致性分析

經(jīng)Kappa 一致性檢驗(yàn)分析，大便潛血試驗(yàn)、FH 檢測(cè)以及二者聯(lián)合檢查均與病理結(jié)果存在一致性（P＜0.05），見表4。

表4 大便潛血試驗(yàn)、FH 檢測(cè)以及二者聯(lián)合檢查與病理結(jié)果的一致性

3.討論

亞鐵血紅素廣泛存在于機(jī)體細(xì)胞內(nèi)，參與多種酶構(gòu)成，正常生理狀態(tài)下，主要是以結(jié)合蛋白形式來發(fā)揮作用，而在抑癌基因尤其是抑癌基因p53發(fā)生突變或者缺失后，破壞了細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致親脂性物質(zhì)進(jìn)入含亞鐵原卟啉細(xì)胞蛋白的疏水核內(nèi)，使位居其疏水核中的亞鐵原卟啉脫落，成為FH 物質(zhì)[3]。游離FH 物質(zhì)結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，能夠奪取鄰近組織電子，進(jìn)而穩(wěn)定自己的結(jié)構(gòu)，但被奪取電子的蛋白質(zhì)、脂肪等組織，會(huì)形成自由基，進(jìn)而奪取其他組織的電子，對(duì)細(xì)胞造成嚴(yán)重?fù)p傷，隨著細(xì)胞損傷加重，會(huì)引起細(xì)胞分化降低、凋亡減少以及增生加速等，最終導(dǎo)致惡變的發(fā)生。

王瑩等[4]的研究指出，宮頸滲液中FH 檢測(cè)診斷宮頸癌的特異度要明顯高于宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，可作為宮頸癌篩查重要指標(biāo)。本研究中，大便潛血試驗(yàn)對(duì)直腸早癌的檢出率為48.65%，F(xiàn)H 檢測(cè)檢出率為72.97%，而二者聯(lián)合的檢出率達(dá)到了91.89%，說明對(duì)于直腸早癌，F(xiàn)H 檢測(cè)對(duì)直腸早癌的檢出效果優(yōu)于大便潛血試驗(yàn)，而二者聯(lián)合有助于提升檢出效果。本研究發(fā)現(xiàn)，大便潛血試驗(yàn)漏診19 例，誤診10 例，漏誤診例數(shù)較多，其原因?yàn)橹蹦c癌早期時(shí)增生組織滲出血液較少或者無(wú)血液滲出，而且容易受到潰瘍性出血的影響，因而容易出現(xiàn)漏、誤診，不過大便潛血試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，可作為直腸癌早期篩查的主要手段[5]。FH 檢測(cè)漏診10 例，誤診8 例，其原因可能為直腸癌發(fā)病部位可以是直腸任何部位，而本研究中取樣部位為患者肛管直腸的下段，因而出現(xiàn)漏診；在腸道良性疾病中，脫落上皮細(xì)胞中FH 物質(zhì)極少，但是當(dāng)標(biāo)本中混有血液時(shí)可出現(xiàn)藍(lán)色染色的情況，因而出現(xiàn)誤診。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，大便潛血試驗(yàn)聯(lián)合FH 檢測(cè)的敏感度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值均顯著高于大便潛血試驗(yàn)和FH 檢測(cè)，F(xiàn)H 檢測(cè)的敏感度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值顯著高于大便潛血試驗(yàn)，說明FH 檢測(cè)對(duì)直腸早癌的診斷效能優(yōu)于大便潛血試驗(yàn)。同時(shí)，大便潛血試驗(yàn)聯(lián)合FH 檢測(cè)診斷直腸早癌與病理結(jié)果的一致性最高，進(jìn)一步說明，二者聯(lián)合可提高直腸早癌診斷的效果。

綜上所述，在直腸早癌診斷中，直腸黏液FH 檢測(cè)的診斷效能要優(yōu)于大便潛血試驗(yàn)，且與病理診斷一致性較高，二者聯(lián)合可進(jìn)一步提高診斷效能。