• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    珙桐幼苗生理生化指標(biāo)對(duì)重金屬鉛、鎘脅迫的響應(yīng)

    2021-10-16 12:48:37劉朝榮張柳青楊艷黃興黎云祥權(quán)秋梅朱曉華
    廣西植物 2021年9期
    關(guān)鍵詞:珙桐抗氧化酶

    劉朝榮 張柳青 楊艷 黃興 黎云祥 權(quán)秋梅 朱曉華

    摘 要:鉛和鎘在土壤中表現(xiàn)出很強(qiáng)的毒性,嚴(yán)重危害植物的生長(zhǎng)發(fā)育。該研究著眼于中國(guó)特有瀕危珍稀植物珙桐,探究盆栽實(shí)驗(yàn)條件下其抗氧化酶活性、丙二醛(MDA)以及游離脯氨酸、可溶性蛋白對(duì)不同濃度重金屬鉛、鎘脅迫的響應(yīng)規(guī)律。結(jié)果表明:(1)不同濃度鉛處理下,珙桐幼苗MDA濃度均顯著高于對(duì)照組,而鎘脅迫條件下除10 mg·kg-1濃度外,其余處理組MDA濃度也顯著高于對(duì)照組,表明了鉛和鎘污染加劇了珙桐膜脂過(guò)氧化進(jìn)程。(2)游離脯氨酸隨著鉛、鎘濃度的增加,表現(xiàn)出先增加后降低的現(xiàn)象,分別在鉛濃度≥800 mg·kg-1和鎘濃度≥20 mg·kg-1處理下顯著低于對(duì)照組??扇苄缘鞍诐舛入S著鉛濃度的增加也表現(xiàn)出先增后減的規(guī)律,其濃度在鎘脅迫下均顯著高于對(duì)照組??扇苄缘鞍缀陀坞x脯氨酸的增加可以提高珙桐抵抗低濃度重金屬危害的能力,高濃度重金屬對(duì)珙桐則產(chǎn)生抑制作用。(3)隨著鉛和鎘濃度的增加,珙桐抗氧化酶活性也表現(xiàn)出先增加后降低的特征,表明了低濃度重金屬(鉛濃度≤600 mg·kg-1,鎘濃度≤5 mg·kg-1)容易激活珙桐抗氧化應(yīng)激反應(yīng),有效地減少重金屬的危害,高濃度的重金屬則會(huì)抑制抗氧化酶活性。(4)通過(guò)相關(guān)性和主成分分析表明,珙桐幼苗中抗氧化酶、游離脯氨酸可以較好地反映珙桐對(duì)兩種重金屬脅迫的響應(yīng)規(guī)律。

    關(guān)鍵詞:珙桐,鉛,鎘,抗氧化酶,膜脂過(guò)氧化

    中圖分類(lèi)號(hào):Q945.78

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    文章編號(hào):1000-3142(2021)09-1401-10

    Abstract:Lead (Pb)and cadmium (Cd),which are very toxic heavy metals found in soil,severely impair plant growth. This study focuses on Davidia involucrata,a rare relic plant in China,exploring the responses of the antioxidant enzymes,malondialdehyde (MDA)and free proline,soluble protein to different concentrations Pb and Cd by pot experiment. The results were as follows:(1)The concentrations of MDA in D. involucrata seedlings were higher in different concentrations of Pb than that in the control group. The MDA concentrations of the different concentrations of Cd,except for the concentration was 10 mg·kg-1,was significantly higher than that in the control group,indicating the increased degree of cell membrane lipid peroxidation of D. involucrata. (2)Free proline concentration of osmoregulation substances initially increased and then decreased with the increase concentrations of Pb and Cd,which was lower than that in the control group under treatment of Pb concentration ≥800 mg·kg-1 and Cd concentration ≥20 mg·kg-1,respectively. With the increase of Pb concentration,the soluble protein concentration also showed an initial increase and then decrease trend. The concentrations of soluble protein were higher in the treatment groups of Cd than that in the control group. The increase of soluble protein and free proline enhanced the stress resistance of D. involucrata to resist the damage. In addition,the high concentration of heavy metals inhibited the growth of D. involucrata. (3)Antioxidant enzyme activities also initially increased and then decreased with the increase of Pb and Cd concentrations,indicating that low concentrations of heavy metals(Pb concentration≤600 mg·kg-1 and Cd concentration≤5 mg·kg-1)could easily activate the antioxidant capacity of D. involucrata and it could deal with the harm,while high concentrations of heavy metals could inhibit the activities of antioxidant enzymes. (4)The correlation and principal component analysis showed that antioxidant enzymes and free proline in D. involucrata seedlings had important indicative effects on the stresses of the two heavy metals.

    Key words:Davidia involucrata,Pb,Cd,antioxidant enzymes,membrane lipid peroxidation

    隨著城鎮(zhèn)化進(jìn)程的加快,人類(lèi)活動(dòng)強(qiáng)度加劇,加速了污染物向大氣、水和土壤的釋放,進(jìn)而降低自然資源質(zhì)量,危害動(dòng)植物和人類(lèi)的健康。土壤是重要的物質(zhì)和能量交換媒介,也是陸生植物生長(zhǎng)繁殖的物質(zhì)基礎(chǔ),由于人為的干擾導(dǎo)致了土壤污染的加劇。其中,土壤重金屬污染具有難降解、易遷移、潛伏期長(zhǎng)等污染特征,我國(guó)受污染最嚴(yán)重的兩種重金屬污染物是鉛(Pb)和鎘(Cd)。對(duì)于植物而言,鉛、鎘并非植物生長(zhǎng)所需要的元素,但它們會(huì)通過(guò)植物根系吸附作用遷移到植物體內(nèi),過(guò)量的鉛、鎘會(huì)抑制植物細(xì)胞酶的活性和功能,干擾植物的呼吸和光合作用,進(jìn)而阻礙植物的生長(zhǎng)發(fā)育,造成累積毒害現(xiàn)象。植物抗氧化酶通常作為植物抵抗重金屬脅迫的重要指示指標(biāo),重金屬刺激植物產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),生成較多的超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化物酶(POD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)等自主清除體內(nèi)過(guò)多的氧自由基。因此,其活性增加表明植物抵御不利環(huán)境的能力也增強(qiáng)。另外,游離脯氨酸的積累也是植物在受到不利環(huán)境條件下的一種重要解毒機(jī)制。可溶性蛋白受到重金屬毒害作用后主要表現(xiàn)出變性、降解等現(xiàn)象,從而使酶參與的代謝活動(dòng)發(fā)生功能紊亂(楊惠等,2013;唐探等,2015)。然而,MDA的積累則指示植物受到逆境傷害的程度較高,尤其是細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)被破壞的程度。

    珙桐(Davidia involucrata),俗稱(chēng)鴿子樹(shù),屬于珙桐科(Davidiaceae)落葉喬木,是第三紀(jì)古熱帶植物區(qū)的遺跡種,我國(guó)特有屬種,已被列為重點(diǎn)保護(hù)野生植物。目前,我國(guó)現(xiàn)有的野生種僅分布在四川省西南部、湖北省中部及周邊地區(qū)。由于珙桐具有較高的觀賞價(jià)值、經(jīng)濟(jì)價(jià)值和藥用價(jià)值,已被廣泛地引種在自然保護(hù)區(qū)、風(fēng)景名勝區(qū)等地區(qū)(王寧寧等,2011)。許多學(xué)者對(duì)珙桐展開(kāi)了研究,主要集中在人工繁殖和引種、種群生態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)等領(lǐng)域(朱利君等,2007)。賀金生等(1995)研究了珙桐及珙桐林的天然分布特征和分布區(qū)的自然環(huán)境狀況;Tang et al.(2017)運(yùn)用物種分布模型預(yù)測(cè)了珙桐氣候適宜區(qū)域的未來(lái)分布狀況;劉周莉等(2009)在42 ℃熱處理下對(duì)珙桐幼苗進(jìn)行了基于RNA-Seq的基因表達(dá)分析,對(duì)珙桐的研究有利于提高其存活率以及較好地規(guī)劃保護(hù)措施,具有重要的意義。由于重金屬污染物質(zhì)會(huì)通過(guò)大氣干濕沉降、污水灌溉等進(jìn)入到土壤中,一部分有害重金屬被截留在土壤中,通過(guò)植物富集和遷移轉(zhuǎn)化進(jìn)入植物體內(nèi)阻礙其正常生長(zhǎng)發(fā)育、降低生物量等(韓琳等,2020)。珙桐對(duì)其生長(zhǎng)環(huán)境有較高的要求,土壤質(zhì)量的優(yōu)劣對(duì)珙桐的生長(zhǎng)具有重要的影響作用。然而,關(guān)于土壤重金屬污染對(duì)珙桐幼苗的生理生化指標(biāo)影響的研究較少,相關(guān)資料比較缺乏。因此,本研究分析了珙桐幼苗的抗氧化酶、MDA、可溶性蛋白以及游離脯氨酸在不同濃度土壤重金屬鉛、鎘污染條件下的活性或濃度變化規(guī)律,以期探討珙桐對(duì)重金屬污染的響應(yīng)機(jī)制和潛在影響因素,為進(jìn)一步研究珙桐在逆境下的生存能力提供了研究資料,也為保護(hù)珙桐、提高成活率及制定合理的保護(hù)規(guī)劃提供了參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    珙桐幼苗(三年生)均來(lái)自四川省什邡市,實(shí)驗(yàn)所使用的土壤pH為7.67±0.07,全氮、全磷含量分別為513.47、472.5 mg·kg-1,其中Pb、Cd的背景值含量分別為5.71、0.09 mg·kg-1。

    1.2 栽培和處理

    根據(jù)土壤環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(GB15618-1995),使用Pb(NO3)2和CdCl2·2.5H2O制備重金屬溶液,分別模擬低濃度、中濃度和高濃度鉛和鎘脅迫環(huán)境(表1)。配制的溶液添加到土壤中并混合均勻,用盆栽土培的實(shí)驗(yàn)方法于西華師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)基地培養(yǎng)90 d(2018年6月至2018年8月),每組處理均重復(fù)3次。

    1.3 生理生化指標(biāo)測(cè)定

    1.3.1 株高 重金屬處理前,用卷尺測(cè)量每株珙桐幼苗的株高,3次重復(fù)。經(jīng)90 d重金屬處理后,再次測(cè)量每株幼苗的株高,均3次重復(fù)。計(jì)算株高增量,即處理后株高減去處理前株高。

    1.3.2 MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白 摘取同一功能區(qū)的葉片3~5片,置于冰盒中,立即送回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)。MDA采用硫代巴比妥方法測(cè)定(AbdElgawad et al.,2019),游離脯氨酸使用磺基水楊酸法測(cè)定(Jin et al.,2019),可溶性蛋白采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定(Cheng et al.,2016)。

    1.3.3 抗氧化酶活性 SOD、POD和CAT采用分光光度計(jì)法測(cè)定。稱(chēng)取葉片0.2 g于研磨缽中,添加2 mL磷酸鹽緩沖液并置于冰浴中快速研磨,然后在4 ℃下10 000 r·min-1離心15 min,收集上清液作為待測(cè)樣品。根據(jù)Donahue et al.(1997)的方法,波長(zhǎng)560 nm處的OD值引起50%硝基藍(lán)四氮唑(NBT)還原速率抑制所需的酶量來(lái)測(cè)量SOD活性。POD活性通過(guò)愈創(chuàng)木酚氧化法測(cè)定(Merey et al.,2018),測(cè)量波長(zhǎng)470 nm處吸光度的增加值。CAT活性被定量為底物H2O2的消耗而導(dǎo)致波長(zhǎng)240 nm處的吸光度的減少值(Jing et al.,2018)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)分析

    采用SPSS 23.0(IBM Inc.,美國(guó))對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,包括均值和標(biāo)準(zhǔn)差、不同處理組間的顯著性差異分析以及皮爾遜相關(guān)性分析,采用Origin 2018進(jìn)行主成分分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 珙桐幼苗株高變化特征

    由圖1可知,經(jīng)重金屬鉛、鎘脅迫90 d后,珙桐幼苗的株高均有所增加,隨著鉛濃度的增加,株高的增量先變大后減小。其中鉛濃度在200~800 mg·kg-1范圍內(nèi)對(duì)珙桐生長(zhǎng)的抑制作用較低,而1 000 mg·kg-1具有較強(qiáng)抑制作用。且600和800 mg·kg-1處理下株高增量顯著高于對(duì)照組。隨著鎘濃度的升高,珙桐幼苗株高的增量也出現(xiàn)先增后減的規(guī)律,鎘濃度為5 mg·kg-1時(shí),株高的增量最明顯,但整體上無(wú)顯著性差異。

    2.2 MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白的特征

    由圖2:A,C,E可知,MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白濃度隨鉛濃度的增加先升高后下降。對(duì)照組MDA的濃度顯著低于其他處理組(P<0.05),鉛濃度在400~800 mg·kg-1范圍內(nèi),MDA濃度顯著高于其他處理組。鉛濃度為400 mg·kg-1時(shí),游離脯氨酸的濃度最高(P<0.05);800和1 000 mg·kg-1濃度的鉛脅迫下,游離脯氨酸濃度顯著降低(P<0.05)??扇苄缘鞍诐舛仍阢U濃度為200和400 mg·kg-1時(shí)顯著高于其他處理組(P<0.05);鉛濃度超過(guò)400 mg·kg-1時(shí),對(duì)可溶性蛋白的影響無(wú)顯著差異。

    鎘脅迫對(duì)MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白的影響與鉛脅迫存在一定的差異(圖2:B,D,F(xiàn))。鎘濃度為10 mg·kg-1濃度時(shí),MDA濃度最低,其次是對(duì)照組,均顯著低于其他處理組(P<0.05)。鎘濃度為20和30 mg·kg-1時(shí),游離脯氨酸的濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。不同濃度鎘脅迫下可溶性蛋白的濃度均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),但各處理組之間無(wú)顯著差異。

    2.3 SOD、POD和CAT活性特征

    隨鉛濃度的增加,抗氧化酶SOD、POD和CAT的活性先升高后降低。鉛濃度為400 mg·kg-1時(shí),SOD活性最高;而鉛濃度高于600 mg·kg-1時(shí),SOD活性降低顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。對(duì)照組POD活性顯著低于其他處理組(P<0.05),鉛濃度為200、400和800 mg·kg-1時(shí),POD活性較高。除鉛濃度800 mg·kg-1外,各處理組CAT活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其中鉛濃度為200 mg·kg-1時(shí)CAT活性較高。

    鎘濃度分別為1、5和20 mg·kg-1時(shí),SOD活性顯著高于其他處理組(P<0.05)。POD和CAT活性在鎘濃度分別為5和1 mg·kg-1時(shí)最高。CAT活性隨鎘濃度的增加逐漸降低,且鎘濃度在10~30 mg·kg-1時(shí)顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

    2.4 抗氧化酶、MDA以及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)相關(guān)性分析

    由表2可知,在鉛脅迫下,SOD活性與游離脯氨酸、可溶性蛋白顯著正相關(guān)(P<0.01),POD活性與MDA濃度也顯著正相關(guān)(P<0.01),CAT活性與可溶性蛋白顯著相關(guān)(P<0.01)。由表3可知,SOD活性與CAT活性、MDA濃度顯著正相關(guān)(P<0.01,P<0.05),此外POD活性與MDA、可溶性蛋白也有顯著性正相關(guān)性(P<0.05)。不同種類(lèi)重金屬對(duì)珙桐各項(xiàng)生理生化指標(biāo)的影響存在差異,鉛、鎘脅迫下SOD和POD的產(chǎn)生與可溶性蛋白濃度的增加相關(guān),鉛脅迫環(huán)境下SOD活性的增強(qiáng)與游離脯氨酸濃度增加是相關(guān)的。此外,鎘脅迫下SOD活性的提升也伴隨著CAT活性的增強(qiáng)。

    2.5 抗氧化酶、MDA以及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的主成分分析

    由圖4:A可知,兩個(gè)主成分共同解釋了75.49%的信息,其中PC1解釋了45.63%,PC2解釋了29.86%??寡趸?、MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白為主成分PC1的主要指標(biāo),可溶性蛋白與PC1相關(guān)性最高??梢?jiàn)3種抗氧化酶、MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白都能在一定程度上反映珙桐對(duì)鉛脅迫的響應(yīng)規(guī)律。由圖4:B可知,PC1和PC2共同解釋了64.98%的信息,其中,PC1為39.98%、PC2為25%。除游離脯氨酸外,其余指標(biāo)均與PC1有較強(qiáng)的正相關(guān)性。游離脯氨酸、CAT和SOD與PC2有較強(qiáng)的相關(guān)性,MDA和可溶性蛋白與PC2有較強(qiáng)的負(fù)相關(guān)性。3種抗氧化酶、MDA濃度和可溶性蛋白能較好地指示珙桐對(duì)鎘的響應(yīng)特征。

    3 討論

    3.1 鉛、鎘對(duì)珙桐幼苗膜脂化、游離脯氨酸和可溶性蛋白的影響

    研究發(fā)現(xiàn),膜脂質(zhì)和蛋白質(zhì)也是植物在環(huán)境脅迫下活性氧的作用目標(biāo),因此認(rèn)為它們是氧化應(yīng)激可控調(diào)節(jié)的指示指標(biāo)(Liu et al.,2015)。MDA是植物中自由基和脂質(zhì)相互作用的產(chǎn)物,脅迫環(huán)境會(huì)引起MDA累積,進(jìn)而造成蛋白質(zhì)、核酸等大分子的交聯(lián)聚合,降低植物細(xì)胞中蛋白質(zhì)代謝效果,也會(huì)對(duì)細(xì)胞膜系統(tǒng)、光合作用等產(chǎn)生較大的危害(楊國(guó)遠(yuǎn)等,2014)。研究發(fā)現(xiàn),不同濃度的鉛脅迫均會(huì)引起珙桐幼苗MDA濃度的顯著增加,且鉛的濃度在低于800 mg·kg-1范圍內(nèi),其濃度越高,珙桐幼苗的膜脂過(guò)氧化程度也越強(qiáng)。這與王吉秀等(2011)的研究相同,意味著較高濃度的重金屬加劇珙桐膜脂化程度。游離脯氨酸和可溶性蛋白是植物體內(nèi)重要的代謝物質(zhì)(張亞玲等,2016),游離脯氨酸在保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、清除自由基等方面也發(fā)揮重要作用??扇苄缘鞍滓材芴岣吖δ艿鞍椎臄?shù)量,以維持細(xì)胞正常的生理代謝活動(dòng),從而提高植物的抗逆性。沒(méi)有添加重金屬條件下,游離脯氨酸較高,但隨著鉛、鎘濃度的增加,游離脯氨酸濃度先升高后降低。研究結(jié)果表明,植物葉片中游離脯氨酸濃度會(huì)隨著脅迫程度的增加而增加(陸海燕等,2013)。這與本研究的結(jié)果存在差異,表明在一定范圍內(nèi),珙桐能通過(guò)增加游離脯氨酸和可溶性蛋白來(lái)抵抗重金屬鉛、鎘脅迫,但鉛、鎘濃度過(guò)高可能會(huì)進(jìn)一步破壞珙桐的細(xì)胞膜系統(tǒng)以及代謝平衡,導(dǎo)致其應(yīng)激能力降低,因此游離脯氨酸濃度有降低的現(xiàn)象(覃光球等,2006),在不同濃度鉛、鎘(除10 mg·kg-1外)脅迫下,MDA在各處理組均顯著高于對(duì)照組,且先增加后降低可以進(jìn)一步印證,與此同時(shí)也說(shuō)明游離脯氨酸對(duì)鉛、鎘的脅迫更為敏感。鎘濃度為10 mg·kg-1時(shí),膜質(zhì)化程度最低,但珙桐幼苗株高增量也最低,且其他組沒(méi)有顯著差異,這可能與其抗氧化酶活性在高濃度鎘脅迫下降低,其活性受到抑制,植物抵抗重金屬傷害能力下降有關(guān)。鉛脅迫下,可溶性蛋白濃度先增加后降低,但均顯著高于對(duì)照組,這與游離脯氨酸的變化規(guī)律相似,表明較低濃度的鉛能誘導(dǎo)珙桐產(chǎn)生可溶性蛋白以減輕鉛脅迫對(duì)珙桐的傷害,而較高的鉛濃度會(huì)產(chǎn)生抑制作用,這與珙桐膜脂過(guò)氧化加劇降低蛋白質(zhì)功能,導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成體失活有關(guān),也進(jìn)一步印證了隨著重金屬濃度的增加,珙桐幼苗生長(zhǎng)受到抑制作用增強(qiáng)。除對(duì)照組可溶性蛋白濃度最低外,不同濃度的鎘對(duì)可溶性蛋白的影響無(wú)顯著性差異,這與珙桐對(duì)不同種類(lèi)重金屬脅迫的應(yīng)激機(jī)制存在差異有關(guān),因此可溶性蛋白的響應(yīng)程度也存在差異,這與唐探等(2015)的研究相似。

    3.2 鉛、鎘對(duì)珙桐幼苗抗氧化酶活性的影響

    重金屬刺激植物產(chǎn)生較多的活性氧自由基,這些氧自由基與脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)發(fā)生反應(yīng),引起脂質(zhì)過(guò)氧化、膜損傷和酶失活,從而影響細(xì)胞的性能和生存能力,一旦超過(guò)植物自我清除的能力,還會(huì)導(dǎo)致植物死亡。SOD是一種金屬酶,能夠催化體內(nèi)氧化活性很強(qiáng)的超氧自由基(O2-)的歧化反應(yīng)(陸海燕等,2013),生成氧化活性較弱的H2O2,進(jìn)而由POD、CAT參與催化細(xì)胞內(nèi)H2O2的分解以防止過(guò)氧化反應(yīng)。本研究發(fā)現(xiàn),鉛脅迫環(huán)境下,SOD活性存在“高促低抑”的現(xiàn)象,POD和CAT(除800 mg·kg-1外)活性均顯著高于對(duì)照組,但在較高濃度鉛處理下其活性均出現(xiàn)降低的趨勢(shì),這表明了低濃度鉛激發(fā)了珙桐抗氧化反應(yīng),刺激抗氧化酶的產(chǎn)生以去除重金屬鉛脅迫產(chǎn)生的氧基自由基,但高濃度的鉛(800~1 000 mg·kg-1)會(huì)嚴(yán)重破壞植物細(xì)胞功能,降低了抗氧化系統(tǒng)的應(yīng)激反應(yīng)能力,其中SOD活性對(duì)鉛脅迫最敏感。李錚錚等(2007)的研究也發(fā)現(xiàn)魚(yú)腥草在不同濃度鉛脅迫下SOD、POD、CAT活性先增加后降低,此外POD和CAT活性的降低也與SOD活性的降低有關(guān)。鎘濃度為1、5和20 mg·kg-1,POD活性隨鎘濃度的增加也有先增加后降低的變化規(guī)律,較高濃度的鎘(10~30 mg·kg-1)脅迫也抑制了CAT的活性,Liu et al.(2010)對(duì)鎘影響高粱的抗氧化調(diào)節(jié)作用的研究也有相似的發(fā)現(xiàn)。本研究還發(fā)現(xiàn),珙桐幼苗的抗氧化系統(tǒng)能夠應(yīng)對(duì)較低濃度的鎘(Cd≤5 mg·kg-1)脅迫,清除O2-、H2O2等有害物質(zhì)以維持植物體內(nèi)自由基的正常代謝,同時(shí)鎘的毒性增強(qiáng)會(huì)抑制抗氧化系統(tǒng)的反應(yīng)能力(Yang et al.,2018)。珙桐幼苗株高變化量對(duì)鉛脅迫更為敏感,不同濃度鎘對(duì)珙桐幼苗的生長(zhǎng)影響不顯著。

    3.3 鉛、鎘脅迫下珙桐幼苗的主要指示指標(biāo)

    鉛脅迫下,SOD活性與游離脯氨酸、可溶性蛋白均顯著正相關(guān),CAT也與可溶性蛋白有顯著正相關(guān)性,主成分分析中SOD、可溶性蛋白與第一主成分有強(qiáng)烈的相關(guān)性,POD活性和游離脯氨酸與第二主成分相關(guān)性較強(qiáng),這意味著抗氧化酶SOD、POD與游離脯氨酸可以作為珙桐幼苗對(duì)鉛的響應(yīng)規(guī)律的主要參考指標(biāo)。與鉛脅迫不同,鎘脅迫下,SOD活性可能會(huì)影響CAT活性,SOD、POD活性與膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物MDA的正相關(guān)性表明了珙桐抗氧化性的提高,其膜脂過(guò)氧化程度有增加的趨勢(shì)。SOD、POD、MDA與第一主成分有較強(qiáng)的正相關(guān)性,CAT和游離脯氨酸與第二主成分也有強(qiáng)烈的正相關(guān)性,也進(jìn)一步說(shuō)明了鎘脅迫環(huán)境下其抗氧化酶、MDA和游離脯氨酸對(duì)鎘脅迫有重要的指示作用。

    4 結(jié)論

    (1)在低濃度鉛、鎘(Pb≤600 mg·kg-1,Cd≤5 mg·kg-1)脅迫環(huán)境下,珙桐的抗氧化反應(yīng)的程度較強(qiáng),且株高增加量較高,意味著珙桐能較好地通過(guò)自我防御減輕重金屬毒性。

    (2)鉛、鎘脅迫導(dǎo)致MDA有較高的累積,表明2種重金屬很容易引起珙桐幼苗細(xì)胞膜脂過(guò)氧化并損害細(xì)胞正常代謝功能。游離脯氨酸濃度隨著鉛、鎘濃度的增加先升高后降低,且可溶性蛋白在鉛的脅迫下表現(xiàn)出與游離脯氨酸相同的變化規(guī)律。然而,在高濃度鉛、鎘脅迫下,珙桐幼苗對(duì)鉛、鎘的應(yīng)激反應(yīng)能力降低。

    (3)珙桐幼苗抗氧化酶在低濃度的鉛、鎘脅迫下表現(xiàn)出較強(qiáng)的活性,增強(qiáng)了珙桐幼苗對(duì)氧自由基等有害物質(zhì)的清除能力。此外,抗氧化酶活性、游離脯氨酸可以較好地指示珙桐幼苗對(duì)重金屬鉛、鎘脅迫的響應(yīng)規(guī)律。我們的發(fā)現(xiàn)豐富了珙桐相關(guān)領(lǐng)域的研究資料,也為探究珙桐對(duì)重金屬脅迫環(huán)境適應(yīng)能力的研究提供了參考依據(jù)。

    參考文獻(xiàn):

    ABDELGAWAD H,ZINTA G,BADRELDIN AH,et al.,2019. Maize roots and shoots show distinct profiles of oxidative stress and antioxidant defense under heavy metal toxicity[J]. Environ Pollut,113705.

    CHEN K,JIANG XZ,MA SY,et al.,2019. Physiological response and cold resistance evaluation of the leaves of Parashorea chinensis seedlings to low temperature stress[J]. J NW For Univ,34(3):67-73.[陳凱,江秀章,馬松亞,等,2019. 望天樹(shù)苗期葉片對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)及抗寒性評(píng)價(jià)[ J]. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào),34(3):67-73.]

    CHENG YF,WEI HM,SUN R,et al.,2016. Rapid method for protein quantitation by Bradford assay after elimination of the interference of polysorbate 80[J]. Anal Biochem,494:37-39.

    DING HD,QI NM,ZHU WM,et al.,2006. Effects of Cd,Zn stress on the growth,contents of proline and GSH of tomato seedlings[J]. Chin J Eco-Agric,14(2):53-55.[丁海東,齊乃敏,朱為民,等,2006. 鎘、鋅脅迫對(duì)番茄幼苗生長(zhǎng)及其脯氨酸與谷胱甘肽含量的影響[J]. 中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),14(2):53-55.]

    DONAHUE JL,OKPODU CM,CRAMER CL,et al.,1997. Responses of antioxidants to paraquat in pea leaves (relationships to resistance)[J]. Plant Physiol,113(1):249-257.

    EWA SP,DRKIEWICZ M,KRUPA Z,2009. Lipid peroxidation andantioxidative response in Arabidopsis thaliana exposed to cadmium and copper[J]. Acta Physiol Plant,32:169-175.

    GUO YL,TAI PD,HAN YP,2009. Effects of cadmium on the growth and physiological characteristics of sunflower seedlings[J]. Chin J Environ Eng,3(12):2291-2296.[郭艷麗,臺(tái)培東,韓艷萍,2009. 鎘脅迫對(duì)向日葵幼苗生長(zhǎng)和生理特性的影響[J]. 環(huán)境工程學(xué)報(bào),3(12):2291-2296.]

    HAN L,XU XB,2020. Quantitative evaluation of human health risk of heavy metals in soils based on positive matrix factorization model and geostatistics[J/OL]. Environ Sci:1-15[2020-06-22].https://doi.org/10.13227/j.hjkx.202004081.[韓琳,徐夕博,2020. 基于PMF模型及地統(tǒng)計(jì)的土壤重金屬健康風(fēng)險(xiǎn)定量評(píng)價(jià)[J/OL]. 環(huán)境科學(xué):1-15[2020-06-22].https://doi.org/10.13227/j.hjkx.202004081.]

    HE JS,LIN J,CHEN WL,1995. The current status of endemic and endangered species Davidia involucrata and the preserving strategies[J]. Chin Biodivers,3(4):213-221.[賀金生,林潔,陳偉烈,1995. 我國(guó)珍稀特有植物珙桐的現(xiàn)狀及其保護(hù)[J]. 生物多樣性,3(4):213-221.]

    HU J,MENG DL,LIU XD,et al.,2018. Response of soil fungal community to long-term chromium contamination[J]. Trans Nonferrous Metal Soc Chin,28(9):1838-1846.

    JIA X,ZHOU CJ,DONG SM,2011. Progress of research on the effects of Cd2+ stress on wheat and the response of wheat to Cd2+[J]. J Triticeae Crops,31(4):786-792.[賈夏,周春娟,董歲明,2011. 鎘脅迫對(duì)小麥的影響及小麥對(duì)鎘毒害響應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 麥類(lèi)作物學(xué)報(bào),31(4):786-792.]

    JIANG MY,GUO SC,ZHANG XM,1997. Proline accumulation and antioxidant activity in rice seedlings under -OH stress[J]. Chin Sci Bull,42(6):647-649.[蔣明義,郭紹川,張學(xué)明,1997. -OH 脅迫下稻苗體內(nèi)脯氨酸積累及其抗氧化作用[J]. 科學(xué)通報(bào),42(6):647-649.]

    JIN Y,QU JJ,LI Y,2013. Isolation,identification and Pb (Ⅱ)biosorption characterization of a lead-resistant strain[J]. Acta Sci Circum,33(8):2248-2255.[金羽,曲娟娟,李影,2013. 一株耐鉛細(xì)菌的分離鑒定及其吸附特性研究[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),33(8):2248-2255.]

    JIN YQ,ZENG CM,LV QF,et al.,2019. Efficient adsorption of methylene blue and lead ions in aqueous solutions by 5-sulfosalicylic acid modified lignin[J]. Int J Biol Macromol,123:50-58.

    LI ZZ,WU J,TANG Y,et al.,2007. Effect of Pb,Zn and their interactions on the chlorophyll content and antioxidant enzyme systems of Houttuynia cordata Thunb[J]. Acta Agron Sin,(12):5441-5446.[李錚錚,伍鈞,唐亞,等,2007. 鉛、鋅及其交互作用對(duì)魚(yú)腥草 (Houttuynia cordata)葉綠素含量及抗氧化酶系統(tǒng)的影響[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),(12):5441-5446.]

    LIN L,ZHOU WH,DAI HX,et al.,2012. Selenium reduces cadmium uptake and mitigates cadmium toxicity in rice[J]. J Hazardous Mat,235-236:343-351.

    LIU B,LIANG CJ,2005. Recent advances of catalase in organism[J]. Chin Agric Sci Bull,21(5):223-232.[劉冰,梁嬋娟,2005. 生物過(guò)氧化氫酶研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),21(5):223-232.]

    LIU DL,ZHANG SP,CHEN Z,et al.,2010. Soil cadmium regulates antioxidases in sorghum[J]. Agric Sci Chin,9(10): 1475-1480.

    LIU QS,VETUKURI RR,XU X,et al.,2019. Transcriptomic responses of dove tree (Davidia involucrata Baill.)to heat stress at the seedling stage[J]. Forest,10(8): 656.

    LIU XF,HOU F,LI GK,et al.,2015 Effects of nitrogen dioxide and its acid mist on reactive oxygen species production and antioxidant enzyme activity in Arabidopsis plants[J]. J Environ Sci,34(8):93-99.

    LIU ZL,HE XY,CHEN W,2009. Effects of cadmium stress on the growth and physiological characteristics of Lonicera japonica[J]. J Appl Ecol,20(1):40-44.[劉周莉,何興元,陳瑋,2009. 鎘脅迫對(duì)金銀花生理生態(tài)特征的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),20 (1):40-44.]

    LU HY,LIU ZH,L GH,2013. Reaction of MDA,proline,and SOD under Cd stress in mixture of Phragmites australiss stems and leaves[J]. J Arid Land Res Environ,27(8):171-175.[陸海燕,劉志輝,呂光輝,2013. 鎘污染下蘆葦葉片丙二醛、脯氨酸及SOD保護(hù)酶反應(yīng)研究[J]. 干旱區(qū)資源與環(huán)境,27(8):171-175.]

    MALEKI M,MANSOUR G,KHALIL K,2017. Physiological and antioxidative responses of medicinal plants exposed to heavy metals stress[J]. Plant Gene,11:247-254.

    MEREY HA,RAMADAN NK,DIAB SS,et al.,2018. Validated UPLC method for the determination of guaiphenesin,oxeladin citrate,diphenhydramine,and sodium benzoate in their quaternary mixture used in treatment of cough,in the presence of guaiphenesin-related substance (guaiacol)[J]. Chem Pap,72(9):2247-2254.

    QI BZ,1989. The effects of sulfur nutrition on some physiological parameters in relation to carbon and nitrogen metabolism in wheat and maize[J]. Acta Agr Sin,15(1):31-35.[祁葆滋,1989. 硫營(yíng)養(yǎng)對(duì)小麥、玉米碳、氮代謝中幾項(xiàng)生理參數(shù)的影響[J]. 作物學(xué)報(bào),15(1):31-35.]

    QIN GQ,YAN CL,WEI LL,2006. Effect of cadmium stress on the contents of tannin,soluble sugar andproline in Kandelia candel (L.)Druce seedlings[J]. Acta Ecol Sin,26(10):3366-3371.[覃光球,嚴(yán)重玲,韋莉莉,2006. 秋茄幼苗葉片單寧、可溶性糖和脯氨酸含量對(duì)Cd脅迫的響應(yīng)[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),26(10):3366-3371.]

    SHI J,SUN JJ,F(xiàn)ANG BJ,et al.,2018. Photoluminescence performance ofEr/Yb co-doped NBT ceramics prepared via hydrothermal method[J]. J Physics Chem Solids,121:228-235.

    SPONGBERG SA,1993. Exploration and introduction of ornamental and landscape plants from Eastern Asia[J]. N Crop N Y:Wiley 140-147.

    TANG CQ,DONG YF,HERRANDO-MORAIRA S,et al.,2017. Potential effects of climate change on geographic distribution of the tertiary relict tree species Davidia involucrata in China[J]. Sci Rep,7:43822.

    TANG T,JIANG YL,ZHANG Y,et al.,2015. Physiological characteristics of Cinnamomum glanduliferum seedlings under lead and cadmium stress[J]. Jiangsu Agric Sci,43(1):199-201.[唐探,姜永雷,張瑛,等,2015. 鉛、鎘脅迫下云南樟幼苗的生理特性變化[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),43(1): 199-201.]

    TIAN GZ,LI HF,QIU WF,2001. Advances on research of plant peroxidases[J]. J Wuhan Bot Res,19(4):332-344.

    WANG JX,ZU YQ,LI Y,2011. Effects of maize and vegetable intercropping system on accumulation of Pb,Cu and Cd in plants[J]. J Agro-Environ Sci,30(11):2168-2173.[王吉秀,祖艷群,李元,2011. 玉米和不同蔬菜間套模式對(duì)重金屬 Pb、Cu、Cd 累積的影響研究[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),30(11):2168-2173.]

    WANG NN,HU ZH,SHEN YB,2011. Photosynthetic characteristics of Davidia involucrata Baill. seedlings under soil drought stress[J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin,31(1):101-108.[王寧寧,胡增輝,沈應(yīng)柏,2011. 珙桐苗木葉片光合特性對(duì)土壤干旱脅迫的響應(yīng)[J]. 西北植物學(xué)報(bào),31(1):101-108.]

    WANG X,XU HJ,LIU T,2010. Comparison of the physiological response of Chinese cabbage between cerium and lead stress[J]. J Nucl Agric Sci,24(3):634-638.[王學(xué),徐恒戩,劉濤,2010. 白菜對(duì)鈰、鉛脅迫響應(yīng)的比較研究[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào),24(3):634-638.]

    WANG XJ,WANG WB,YANG L,et al.,2015. Transport pathways of cadmium (Cd)and its regulatory mechanisms in plant[J]. Acta Ecol Sin,35(23):7921-7929.[王曉娟,王文斌,楊龍,等,2015. 重金屬鎘(Cd)在植物體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)途徑及其調(diào)控機(jī)制[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),35(23):7921-7929.]

    WU G,XIAO HD,LI J,et al.,2000. Relationship between human activities and survival of rare and endangered species Davidia involucrata[J]. J Appl Ecol,11(4):493-496.

    XU JJ,LIU NN,QIN L,et al.,2016. Effects of Cd stress on antioxidant enzymes activity of Sonchus asper L. Hill. and Zea mays L. in intercropping system[J]. J Yunnan Agric Univ(Nat Sci Ed),30(2):348-355.[徐佳佳,劉寧寧,秦麗,等,2016. 鎘脅迫對(duì)續(xù)斷菊與玉米間作體系中植物葉片抗氧化酶活性的影響[J]. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),31(2):348-355.]

    YANG GY,WAN LL,LEI XQ,et al.,2014. Effects of lead and chromium on the growth,photosynthetic performance,and antioxidant activity of Scenedesmus obliquus[J]. Acta Sci Circum,34(6):1606-1614.[楊國(guó)遠(yuǎn),萬(wàn)凌琳,雷學(xué)青,等,2014. 重金屬鉛、鉻脅迫對(duì)斜生柵藻的生長(zhǎng)、光合性能及抗氧化系統(tǒng)的影響[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),34(6):1606-1614.]

    YANG H,ZHAI MZ,LI L,et al.,2013. Cold-tolerance andosmoregulation mechanism of walnut cultivars[J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin,33(10):2003-2009.[楊惠,翟梅枝,李麗,等,2013. 不同核桃品種的耐寒性及其滲透調(diào)節(jié)機(jī)制[J]. 西北植物學(xué)報(bào),33(10):2003-2009.]

    YANG LP,ZHU J,WANG P,et al.,2018. Effect of Cd on growth,physiological response,Cd subcellular distribution and chemical forms of Koelreuteria paniculata[J]. Ecotox Environ Safe,160:10-18.

    YANG Y,LI YX,XU X,et al.,2016. The effect of short time treatment of two kinds of heavy metal ions on photosynthesis in Davidia involucrata seedlings[J]. J Chin West Norm Univ(Nat Sci Ed),37(2):163-168.[楊艷,黎云祥,胥曉,等,2016. 兩種重金屬離子短時(shí)處理對(duì)珙桐幼苗光合作用的效應(yīng)[J]. 西華師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),37(2):163-168.]

    ZENG QY,LING QP,YANG ZD,et al.,2019. Effects of copper stress on growth and antioxidant enzymes in sugarcane[J]. Guihaia,39(7):951-958.[曾巧英,凌秋平,楊湛端,等,2019. 銅脅迫對(duì)甘蔗生長(zhǎng)及抗氧化酶活性的影響[J]. 廣西植物,39(7):951-958.]

    ZHANG JX,LI JQ,ZHOU BS,et al.,1995. Natural distribution of Davidia involucrata and introduction analysis[J]. J Beijing For Univ,17(1):25-30.[張家勛,李俊清,周寶順,等,1995. 珙桐的天然分布和人工引種分析[J]. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),17(1):25-30.]

    ZHANG SY,ZHANG Q,LI L,2019. On tolerance of Ficus virens Aiton in soil contaminated by Pb and Cd[J]. J SW Chin Norm Univ(Nat Sci Ed),44(1):79-83.[張思悅,張晴,李凌,2019. 黃葛樹(shù)對(duì)土壤鉛、鎘污染耐受性的研究[J]. 西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),44(1):79-83.]

    ZHANG YL,XING HW,GUO N,et al.,2016. The physiological characteristics of ornamental kale for cold resistance[J]. Acta Agric Boreal-Sin,31(4):168-176.[張亞玲,幸宏偉,郭寧,等,2016. 羽衣甘藍(lán)抗寒生理特性研究[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào),31(4):168-176.]

    ZHAO ZQ,XI MZ,2007. Advances in research on mechanisms of Cd induced oxidative stress in plants[J]. J Agro-Environ Sci,26:47-51.[趙中秋,席梅竹,2007. Cd 對(duì)植物的氧化脅迫機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),26:47-51.]

    ZHOU JJ,ZHOU J,F(xiàn)ENG RG,2014. Status of Chinas heavy metal contamination in soil and its remediation strategy[J]. Bull Chin Acad Sci,29(3):315-320.[周建軍,周桔,馮仁國(guó),2014. 我國(guó)土壤重金屬污染現(xiàn)狀及治理戰(zhàn)略[J]. 中國(guó)科學(xué)院院刊,29(3):315-320.]

    ZHU LJ,SU ZX,HU JY,et al.,2007. SOD activity of rare plant Davidia involucrata[J]. Chin J Ecol,26(11):1766-1770.[朱利君,蘇智先,胡進(jìn)耀,等,2007. 珍稀瀕危植物珙桐超氧化物歧化酶活性[J]. 生態(tài)學(xué)雜志,26(11):1766-1770.]

    ZHUANG GT,2015. Current situation of national soil pollution and strategies on prevention and control[J]. Bull Chin Acad Sci,30(4):477-483.[莊國(guó)泰,2015. 我國(guó)土壤污染現(xiàn)狀與防控策略[J]. 中國(guó)科學(xué)院院刊,30(4):477-483.]

    (責(zé)任編輯 周翠鳴)

    猜你喜歡
    珙桐抗氧化酶
    珙桐——植物界“大熊貓”
    珍稀瀕危樹(shù)種珙桐的生存特性及保護(hù)
    花卉(2020年16期)2020-08-22 02:34:50
    光葉珙桐內(nèi)生真菌的分離及其多樣性研究
    外源氯化鈣對(duì)大蒜幼苗鹽脅迫傷害的緩解作用
    [CX2]NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥生理生化特性的影響
    [CX2]NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥生理生化特性的影響
    低溫脅迫對(duì)不同豇豆品種抗寒性生理特性的影響
    遮陽(yáng)網(wǎng)覆蓋對(duì)枇杷幼果抗寒性影響機(jī)理初探
    珙桐繁殖方法的分析與研究
    不同養(yǎng)殖環(huán)境中的中華絨螯蟹組織抗氧化劑水平和抗氧化酶活力
    久久久久久久久大av| 国产老妇女一区| 中出人妻视频一区二区| 久久久久国内视频| 亚洲美女视频黄频| 亚洲专区国产一区二区| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产高潮美女av| a级一级毛片免费在线观看| 在线国产一区二区在线| 欧美中文日本在线观看视频| 久久久久久国产a免费观看| 午夜福利高清视频| 婷婷亚洲欧美| av黄色大香蕉| svipshipincom国产片| 真人一进一出gif抽搐免费| 91久久精品电影网| 日本黄色视频三级网站网址| 无限看片的www在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 日本 欧美在线| 国产精华一区二区三区| 国产亚洲欧美在线一区二区| 色吧在线观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费av不卡在线播放| 国产精品99久久99久久久不卡| 又黄又粗又硬又大视频| 热99re8久久精品国产| 中亚洲国语对白在线视频| 我要搜黄色片| 美女免费视频网站| 久久精品国产自在天天线| xxx96com| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲五月天丁香| 哪里可以看免费的av片| 国产一区二区在线av高清观看| 成人永久免费在线观看视频| www国产在线视频色| 在线观看免费午夜福利视频| 国产成人福利小说| 日本 av在线| 亚洲精品在线观看二区| 成人精品一区二区免费| 亚洲在线自拍视频| 色视频www国产| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 91在线精品国自产拍蜜月 | 国产午夜福利久久久久久| 757午夜福利合集在线观看| 免费av不卡在线播放| 成人鲁丝片一二三区免费| 两个人视频免费观看高清| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美性感艳星| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 久久精品国产自在天天线| 免费高清视频大片| 精品电影一区二区在线| 一进一出抽搐gif免费好疼| 久久国产精品影院| 国产毛片a区久久久久| 国产成人欧美在线观看| 性欧美人与动物交配| 精品久久久久久久久久久久久| 久99久视频精品免费| 国产亚洲av嫩草精品影院| 岛国视频午夜一区免费看| a级毛片a级免费在线| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 变态另类丝袜制服| 高清日韩中文字幕在线| 免费看a级黄色片| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 久久久久久久亚洲中文字幕 | 午夜久久久久精精品| 国内精品久久久久精免费| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 男女那种视频在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲成a人片在线一区二区| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲,欧美精品.| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国语自产精品视频在线第100页| 黄色成人免费大全| 麻豆久久精品国产亚洲av| 在线播放无遮挡| 亚洲最大成人中文| 九九在线视频观看精品| 网址你懂的国产日韩在线| 我的老师免费观看完整版| 九九在线视频观看精品| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产激情欧美一区二区| 久久九九热精品免费| 国产v大片淫在线免费观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| e午夜精品久久久久久久| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲av免费在线观看| 亚洲18禁久久av| 丰满乱子伦码专区| 国产精华一区二区三区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 高潮久久久久久久久久久不卡| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 一级毛片高清免费大全| 一级黄色大片毛片| 亚洲最大成人中文| 成人18禁在线播放| 狂野欧美激情性xxxx| 老司机福利观看| 精品日产1卡2卡| 国产熟女xx| 成人精品一区二区免费| 黄色日韩在线| 精品一区二区三区人妻视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲美女视频黄频| av中文乱码字幕在线| 啦啦啦免费观看视频1| 国产不卡一卡二| 久久久久久九九精品二区国产| 日本熟妇午夜| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美成人性av电影在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 日韩欧美精品v在线| 大型黄色视频在线免费观看| 内射极品少妇av片p| 日本 欧美在线| 日韩av在线大香蕉| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲成人久久爱视频| 精品欧美国产一区二区三| 91久久精品国产一区二区成人 | 日日干狠狠操夜夜爽| 啪啪无遮挡十八禁网站| 成年女人永久免费观看视频| 精品免费久久久久久久清纯| 91麻豆精品激情在线观看国产| 久久久国产精品麻豆| 两个人视频免费观看高清| 中文字幕熟女人妻在线| 欧美在线一区亚洲| 久9热在线精品视频| 可以在线观看的亚洲视频| 久久午夜亚洲精品久久| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 午夜激情欧美在线| 成年免费大片在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲av免费高清在线观看| 午夜福利视频1000在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 看免费av毛片| 中出人妻视频一区二区| 日韩大尺度精品在线看网址| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 午夜久久久久精精品| 色综合婷婷激情| 757午夜福利合集在线观看| 国产精品影院久久| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 中文字幕久久专区| 精品无人区乱码1区二区| 99久久成人亚洲精品观看| 女人被狂操c到高潮| 成熟少妇高潮喷水视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 国产精品香港三级国产av潘金莲| 少妇人妻一区二区三区视频| 搡老岳熟女国产| eeuss影院久久| 午夜a级毛片| 国产黄a三级三级三级人| 欧美黄色片欧美黄色片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 91久久精品国产一区二区成人 | 国产高清视频在线播放一区| 精品电影一区二区在线| 黄色日韩在线| 免费av不卡在线播放| 免费观看精品视频网站| 看片在线看免费视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产v大片淫在线免费观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 欧美中文日本在线观看视频| 成人一区二区视频在线观看| 看免费av毛片| 国产精品电影一区二区三区| 欧美日韩综合久久久久久 | 午夜免费成人在线视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 99久久99久久久精品蜜桃| 中文资源天堂在线| 精品福利观看| 女同久久另类99精品国产91| 日韩欧美 国产精品| 悠悠久久av| 99久久精品热视频| h日本视频在线播放| 2021天堂中文幕一二区在线观| 女同久久另类99精品国产91| 欧美在线黄色| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲 国产 在线| 日韩欧美三级三区| 在线观看一区二区三区| 长腿黑丝高跟| 色播亚洲综合网| 日韩高清综合在线| 夜夜夜夜夜久久久久| 男人的好看免费观看在线视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 在线观看日韩欧美| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 国产爱豆传媒在线观看| 日韩免费av在线播放| 成年版毛片免费区| 午夜福利18| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲电影在线观看av| 最好的美女福利视频网| 悠悠久久av| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产一区二区在线av高清观看| 国产黄a三级三级三级人| 久久香蕉国产精品| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲av免费在线观看| 黄色视频,在线免费观看| 18禁在线播放成人免费| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 久久精品国产清高在天天线| 亚洲18禁久久av| or卡值多少钱| 国产精品99久久久久久久久| 9191精品国产免费久久| 国产精品亚洲一级av第二区| 精品久久久久久久久久久久久| 成人永久免费在线观看视频| av福利片在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 综合色av麻豆| tocl精华| 在线看三级毛片| 老司机午夜十八禁免费视频| 少妇的逼水好多| 国产一级毛片七仙女欲春2| 人妻夜夜爽99麻豆av| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 午夜福利高清视频| 熟女电影av网| www.色视频.com| 欧美黑人欧美精品刺激| 日韩欧美免费精品| 啦啦啦免费观看视频1| 欧美黄色片欧美黄色片| 一边摸一边抽搐一进一小说| 午夜亚洲福利在线播放| 99精品久久久久人妻精品| 制服人妻中文乱码| 真实男女啪啪啪动态图| 国语自产精品视频在线第100页| 欧美乱色亚洲激情| 欧美又色又爽又黄视频| 他把我摸到了高潮在线观看| 制服丝袜大香蕉在线| 天堂√8在线中文| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 黄色女人牲交| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲成av人片免费观看| 国产真人三级小视频在线观看| 此物有八面人人有两片| 性色av乱码一区二区三区2| 午夜福利视频1000在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 黄色丝袜av网址大全| 9191精品国产免费久久| 精品人妻偷拍中文字幕| 欧美bdsm另类| 日本a在线网址| 日韩欧美精品免费久久 | 久久久久九九精品影院| 首页视频小说图片口味搜索| netflix在线观看网站| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 欧美3d第一页| 国产伦在线观看视频一区| 免费在线观看影片大全网站| 久久久久久久久久黄片| 国产高清视频在线观看网站| 最近在线观看免费完整版| 亚洲人成伊人成综合网2020| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲五月天丁香| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲人成伊人成综合网2020| 两人在一起打扑克的视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 岛国在线观看网站| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲电影在线观看av| 亚洲18禁久久av| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久国产精品人妻蜜桃| 搡老熟女国产l中国老女人| 在线观看av片永久免费下载| 超碰av人人做人人爽久久 | 欧美成人免费av一区二区三区| 99国产精品一区二区三区| 一级a爱片免费观看的视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲一区二区三区色噜噜| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 色视频www国产| 九九在线视频观看精品| 免费看a级黄色片| 久久久久国内视频| 亚洲成a人片在线一区二区| h日本视频在线播放| 国产精品av视频在线免费观看| 超碰av人人做人人爽久久 | 最新美女视频免费是黄的| 欧美丝袜亚洲另类 | 久久久久久九九精品二区国产| 国产高清有码在线观看视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产69精品久久久久777片| 久久久久久久久中文| 网址你懂的国产日韩在线| 神马国产精品三级电影在线观看| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 1024手机看黄色片| 18+在线观看网站| 美女免费视频网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 欧美日韩乱码在线| 桃红色精品国产亚洲av| 99热精品在线国产| 小说图片视频综合网站| 长腿黑丝高跟| 在线免费观看的www视频| 久久性视频一级片| 午夜久久久久精精品| 国产三级在线视频| 亚洲专区国产一区二区| 精品国产美女av久久久久小说| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲av免费高清在线观看| xxx96com| 国产免费一级a男人的天堂| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 少妇丰满av| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 午夜亚洲福利在线播放| 日韩欧美精品免费久久 | 国产精品亚洲一级av第二区| АⅤ资源中文在线天堂| a级一级毛片免费在线观看| 精品国产亚洲在线| 中文字幕av在线有码专区| 熟女电影av网| eeuss影院久久| 五月伊人婷婷丁香| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 我要搜黄色片| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 黑人欧美特级aaaaaa片| 午夜福利在线在线| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美在线黄色| 国产伦人伦偷精品视频| 欧美成人一区二区免费高清观看| 免费在线观看日本一区| 午夜两性在线视频| 成年女人看的毛片在线观看| 长腿黑丝高跟| 午夜亚洲福利在线播放| 美女高潮的动态| 亚洲五月婷婷丁香| 手机成人av网站| 午夜福利18| 欧美日韩一级在线毛片| 国产熟女xx| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 一夜夜www| 国产高清三级在线| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 久久这里只有精品中国| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 看免费av毛片| 精品人妻偷拍中文字幕| eeuss影院久久| 午夜免费激情av| 成人亚洲精品av一区二区| 91久久精品电影网| 两个人视频免费观看高清| 久久久久九九精品影院| 亚洲国产欧美网| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲黑人精品在线| 久久久国产成人精品二区| 国产熟女xx| 少妇丰满av| 母亲3免费完整高清在线观看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| xxx96com| 神马国产精品三级电影在线观看| av视频在线观看入口| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 老司机福利观看| 99国产精品一区二区三区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产精品精品国产色婷婷| 嫩草影院入口| xxx96com| 国产免费av片在线观看野外av| 偷拍熟女少妇极品色| 国产高清videossex| 啦啦啦免费观看视频1| 国产私拍福利视频在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲片人在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 一个人看视频在线观看www免费 | 俄罗斯特黄特色一大片| 免费看日本二区| 国内精品美女久久久久久| 丰满乱子伦码专区| 久久伊人香网站| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 色精品久久人妻99蜜桃| 首页视频小说图片口味搜索| 三级国产精品欧美在线观看| 又黄又粗又硬又大视频| 岛国在线观看网站| 久久精品影院6| 狠狠狠狠99中文字幕| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 看片在线看免费视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 最后的刺客免费高清国语| 色视频www国产| 欧美又色又爽又黄视频| 天美传媒精品一区二区| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 国内精品久久久久精免费| 一a级毛片在线观看| 久久6这里有精品| 国产伦精品一区二区三区四那| 激情在线观看视频在线高清| 亚洲内射少妇av| 久9热在线精品视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 一区福利在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美中文综合在线视频| 好男人电影高清在线观看| 一个人免费在线观看电影| 香蕉久久夜色| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 日韩人妻高清精品专区| 丝袜美腿在线中文| 免费在线观看亚洲国产| 韩国av一区二区三区四区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 午夜老司机福利剧场| 高潮久久久久久久久久久不卡| 99国产极品粉嫩在线观看| 最近视频中文字幕2019在线8| 老司机午夜十八禁免费视频| h日本视频在线播放| 日韩精品青青久久久久久| 禁无遮挡网站| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 久久亚洲精品不卡| 免费观看人在逋| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 欧美黑人巨大hd| 国产探花在线观看一区二区| 日本黄大片高清| 一区二区三区免费毛片| 国产熟女xx| 女同久久另类99精品国产91| 叶爱在线成人免费视频播放| 日韩大尺度精品在线看网址| 国产午夜精品论理片| 久久香蕉国产精品| 国产日本99.免费观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 日韩欧美免费精品| 99热精品在线国产| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 岛国在线免费视频观看| 欧美激情在线99| a级一级毛片免费在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲最大成人手机在线| 中出人妻视频一区二区| av在线蜜桃| 一级作爱视频免费观看| 特级一级黄色大片| 欧美性感艳星| 久久人妻av系列| 国产一区二区在线观看日韩 | 国产精品久久久久久精品电影| 国产伦人伦偷精品视频| 九色国产91popny在线| 搡老岳熟女国产| 亚洲18禁久久av| 国产成人aa在线观看| 国产老妇女一区| 亚洲国产欧美人成| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲av成人精品一区久久| 午夜福利欧美成人| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 中文亚洲av片在线观看爽| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲国产高清在线一区二区三| 69av精品久久久久久| 国产成人啪精品午夜网站| 精品福利观看| 99国产综合亚洲精品| 免费一级毛片在线播放高清视频| 美女黄网站色视频| 天天躁日日操中文字幕| 无限看片的www在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 99riav亚洲国产免费| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产激情欧美一区二区| 午夜福利欧美成人| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产亚洲欧美在线一区二区| 看免费av毛片| 午夜福利高清视频| e午夜精品久久久久久久| 亚洲精品在线观看二区| 久久九九热精品免费| 麻豆成人av在线观看| 亚洲五月天丁香| 亚洲色图av天堂| 国产成人系列免费观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 在线观看免费视频日本深夜| 母亲3免费完整高清在线观看| 两人在一起打扑克的视频| 国产三级中文精品| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产精品久久电影中文字幕| av天堂在线播放| 亚洲久久久久久中文字幕| 91在线观看av| 九九热线精品视视频播放| 美女被艹到高潮喷水动态| 老汉色av国产亚洲站长工具| 丝袜美腿在线中文| 一区二区三区激情视频| 男插女下体视频免费在线播放| 国产成人a区在线观看| 97超视频在线观看视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲成人精品中文字幕电影| 午夜精品在线福利| 1000部很黄的大片| 久久久久性生活片| 亚洲国产精品sss在线观看| 欧美成人a在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲国产精品久久男人天堂| 欧美在线黄色| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲内射少妇av| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲国产欧美人成| 国产麻豆成人av免费视频| 欧美日韩黄片免| xxxwww97欧美| 亚洲 国产 在线| 狂野欧美激情性xxxx| 日韩免费av在线播放|