• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    珙桐幼苗生理生化指標(biāo)對(duì)重金屬鉛、鎘脅迫的響應(yīng)

    2021-10-16 12:48:37劉朝榮張柳青楊艷黃興黎云祥權(quán)秋梅朱曉華
    廣西植物 2021年9期
    關(guān)鍵詞:珙桐抗氧化酶

    劉朝榮 張柳青 楊艷 黃興 黎云祥 權(quán)秋梅 朱曉華

    摘 要:鉛和鎘在土壤中表現(xiàn)出很強(qiáng)的毒性,嚴(yán)重危害植物的生長(zhǎng)發(fā)育。該研究著眼于中國(guó)特有瀕危珍稀植物珙桐,探究盆栽實(shí)驗(yàn)條件下其抗氧化酶活性、丙二醛(MDA)以及游離脯氨酸、可溶性蛋白對(duì)不同濃度重金屬鉛、鎘脅迫的響應(yīng)規(guī)律。結(jié)果表明:(1)不同濃度鉛處理下,珙桐幼苗MDA濃度均顯著高于對(duì)照組,而鎘脅迫條件下除10 mg·kg-1濃度外,其余處理組MDA濃度也顯著高于對(duì)照組,表明了鉛和鎘污染加劇了珙桐膜脂過(guò)氧化進(jìn)程。(2)游離脯氨酸隨著鉛、鎘濃度的增加,表現(xiàn)出先增加后降低的現(xiàn)象,分別在鉛濃度≥800 mg·kg-1和鎘濃度≥20 mg·kg-1處理下顯著低于對(duì)照組??扇苄缘鞍诐舛入S著鉛濃度的增加也表現(xiàn)出先增后減的規(guī)律,其濃度在鎘脅迫下均顯著高于對(duì)照組??扇苄缘鞍缀陀坞x脯氨酸的增加可以提高珙桐抵抗低濃度重金屬危害的能力,高濃度重金屬對(duì)珙桐則產(chǎn)生抑制作用。(3)隨著鉛和鎘濃度的增加,珙桐抗氧化酶活性也表現(xiàn)出先增加后降低的特征,表明了低濃度重金屬(鉛濃度≤600 mg·kg-1,鎘濃度≤5 mg·kg-1)容易激活珙桐抗氧化應(yīng)激反應(yīng),有效地減少重金屬的危害,高濃度的重金屬則會(huì)抑制抗氧化酶活性。(4)通過(guò)相關(guān)性和主成分分析表明,珙桐幼苗中抗氧化酶、游離脯氨酸可以較好地反映珙桐對(duì)兩種重金屬脅迫的響應(yīng)規(guī)律。

    關(guān)鍵詞:珙桐,鉛,鎘,抗氧化酶,膜脂過(guò)氧化

    中圖分類(lèi)號(hào):Q945.78

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    文章編號(hào):1000-3142(2021)09-1401-10

    Abstract:Lead (Pb)and cadmium (Cd),which are very toxic heavy metals found in soil,severely impair plant growth. This study focuses on Davidia involucrata,a rare relic plant in China,exploring the responses of the antioxidant enzymes,malondialdehyde (MDA)and free proline,soluble protein to different concentrations Pb and Cd by pot experiment. The results were as follows:(1)The concentrations of MDA in D. involucrata seedlings were higher in different concentrations of Pb than that in the control group. The MDA concentrations of the different concentrations of Cd,except for the concentration was 10 mg·kg-1,was significantly higher than that in the control group,indicating the increased degree of cell membrane lipid peroxidation of D. involucrata. (2)Free proline concentration of osmoregulation substances initially increased and then decreased with the increase concentrations of Pb and Cd,which was lower than that in the control group under treatment of Pb concentration ≥800 mg·kg-1 and Cd concentration ≥20 mg·kg-1,respectively. With the increase of Pb concentration,the soluble protein concentration also showed an initial increase and then decrease trend. The concentrations of soluble protein were higher in the treatment groups of Cd than that in the control group. The increase of soluble protein and free proline enhanced the stress resistance of D. involucrata to resist the damage. In addition,the high concentration of heavy metals inhibited the growth of D. involucrata. (3)Antioxidant enzyme activities also initially increased and then decreased with the increase of Pb and Cd concentrations,indicating that low concentrations of heavy metals(Pb concentration≤600 mg·kg-1 and Cd concentration≤5 mg·kg-1)could easily activate the antioxidant capacity of D. involucrata and it could deal with the harm,while high concentrations of heavy metals could inhibit the activities of antioxidant enzymes. (4)The correlation and principal component analysis showed that antioxidant enzymes and free proline in D. involucrata seedlings had important indicative effects on the stresses of the two heavy metals.

    Key words:Davidia involucrata,Pb,Cd,antioxidant enzymes,membrane lipid peroxidation

    隨著城鎮(zhèn)化進(jìn)程的加快,人類(lèi)活動(dòng)強(qiáng)度加劇,加速了污染物向大氣、水和土壤的釋放,進(jìn)而降低自然資源質(zhì)量,危害動(dòng)植物和人類(lèi)的健康。土壤是重要的物質(zhì)和能量交換媒介,也是陸生植物生長(zhǎng)繁殖的物質(zhì)基礎(chǔ),由于人為的干擾導(dǎo)致了土壤污染的加劇。其中,土壤重金屬污染具有難降解、易遷移、潛伏期長(zhǎng)等污染特征,我國(guó)受污染最嚴(yán)重的兩種重金屬污染物是鉛(Pb)和鎘(Cd)。對(duì)于植物而言,鉛、鎘并非植物生長(zhǎng)所需要的元素,但它們會(huì)通過(guò)植物根系吸附作用遷移到植物體內(nèi),過(guò)量的鉛、鎘會(huì)抑制植物細(xì)胞酶的活性和功能,干擾植物的呼吸和光合作用,進(jìn)而阻礙植物的生長(zhǎng)發(fā)育,造成累積毒害現(xiàn)象。植物抗氧化酶通常作為植物抵抗重金屬脅迫的重要指示指標(biāo),重金屬刺激植物產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),生成較多的超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化物酶(POD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)等自主清除體內(nèi)過(guò)多的氧自由基。因此,其活性增加表明植物抵御不利環(huán)境的能力也增強(qiáng)。另外,游離脯氨酸的積累也是植物在受到不利環(huán)境條件下的一種重要解毒機(jī)制。可溶性蛋白受到重金屬毒害作用后主要表現(xiàn)出變性、降解等現(xiàn)象,從而使酶參與的代謝活動(dòng)發(fā)生功能紊亂(楊惠等,2013;唐探等,2015)。然而,MDA的積累則指示植物受到逆境傷害的程度較高,尤其是細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)被破壞的程度。

    珙桐(Davidia involucrata),俗稱(chēng)鴿子樹(shù),屬于珙桐科(Davidiaceae)落葉喬木,是第三紀(jì)古熱帶植物區(qū)的遺跡種,我國(guó)特有屬種,已被列為重點(diǎn)保護(hù)野生植物。目前,我國(guó)現(xiàn)有的野生種僅分布在四川省西南部、湖北省中部及周邊地區(qū)。由于珙桐具有較高的觀賞價(jià)值、經(jīng)濟(jì)價(jià)值和藥用價(jià)值,已被廣泛地引種在自然保護(hù)區(qū)、風(fēng)景名勝區(qū)等地區(qū)(王寧寧等,2011)。許多學(xué)者對(duì)珙桐展開(kāi)了研究,主要集中在人工繁殖和引種、種群生態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)等領(lǐng)域(朱利君等,2007)。賀金生等(1995)研究了珙桐及珙桐林的天然分布特征和分布區(qū)的自然環(huán)境狀況;Tang et al.(2017)運(yùn)用物種分布模型預(yù)測(cè)了珙桐氣候適宜區(qū)域的未來(lái)分布狀況;劉周莉等(2009)在42 ℃熱處理下對(duì)珙桐幼苗進(jìn)行了基于RNA-Seq的基因表達(dá)分析,對(duì)珙桐的研究有利于提高其存活率以及較好地規(guī)劃保護(hù)措施,具有重要的意義。由于重金屬污染物質(zhì)會(huì)通過(guò)大氣干濕沉降、污水灌溉等進(jìn)入到土壤中,一部分有害重金屬被截留在土壤中,通過(guò)植物富集和遷移轉(zhuǎn)化進(jìn)入植物體內(nèi)阻礙其正常生長(zhǎng)發(fā)育、降低生物量等(韓琳等,2020)。珙桐對(duì)其生長(zhǎng)環(huán)境有較高的要求,土壤質(zhì)量的優(yōu)劣對(duì)珙桐的生長(zhǎng)具有重要的影響作用。然而,關(guān)于土壤重金屬污染對(duì)珙桐幼苗的生理生化指標(biāo)影響的研究較少,相關(guān)資料比較缺乏。因此,本研究分析了珙桐幼苗的抗氧化酶、MDA、可溶性蛋白以及游離脯氨酸在不同濃度土壤重金屬鉛、鎘污染條件下的活性或濃度變化規(guī)律,以期探討珙桐對(duì)重金屬污染的響應(yīng)機(jī)制和潛在影響因素,為進(jìn)一步研究珙桐在逆境下的生存能力提供了研究資料,也為保護(hù)珙桐、提高成活率及制定合理的保護(hù)規(guī)劃提供了參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    珙桐幼苗(三年生)均來(lái)自四川省什邡市,實(shí)驗(yàn)所使用的土壤pH為7.67±0.07,全氮、全磷含量分別為513.47、472.5 mg·kg-1,其中Pb、Cd的背景值含量分別為5.71、0.09 mg·kg-1。

    1.2 栽培和處理

    根據(jù)土壤環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(GB15618-1995),使用Pb(NO3)2和CdCl2·2.5H2O制備重金屬溶液,分別模擬低濃度、中濃度和高濃度鉛和鎘脅迫環(huán)境(表1)。配制的溶液添加到土壤中并混合均勻,用盆栽土培的實(shí)驗(yàn)方法于西華師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)基地培養(yǎng)90 d(2018年6月至2018年8月),每組處理均重復(fù)3次。

    1.3 生理生化指標(biāo)測(cè)定

    1.3.1 株高 重金屬處理前,用卷尺測(cè)量每株珙桐幼苗的株高,3次重復(fù)。經(jīng)90 d重金屬處理后,再次測(cè)量每株幼苗的株高,均3次重復(fù)。計(jì)算株高增量,即處理后株高減去處理前株高。

    1.3.2 MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白 摘取同一功能區(qū)的葉片3~5片,置于冰盒中,立即送回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)。MDA采用硫代巴比妥方法測(cè)定(AbdElgawad et al.,2019),游離脯氨酸使用磺基水楊酸法測(cè)定(Jin et al.,2019),可溶性蛋白采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定(Cheng et al.,2016)。

    1.3.3 抗氧化酶活性 SOD、POD和CAT采用分光光度計(jì)法測(cè)定。稱(chēng)取葉片0.2 g于研磨缽中,添加2 mL磷酸鹽緩沖液并置于冰浴中快速研磨,然后在4 ℃下10 000 r·min-1離心15 min,收集上清液作為待測(cè)樣品。根據(jù)Donahue et al.(1997)的方法,波長(zhǎng)560 nm處的OD值引起50%硝基藍(lán)四氮唑(NBT)還原速率抑制所需的酶量來(lái)測(cè)量SOD活性。POD活性通過(guò)愈創(chuàng)木酚氧化法測(cè)定(Merey et al.,2018),測(cè)量波長(zhǎng)470 nm處吸光度的增加值。CAT活性被定量為底物H2O2的消耗而導(dǎo)致波長(zhǎng)240 nm處的吸光度的減少值(Jing et al.,2018)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)分析

    采用SPSS 23.0(IBM Inc.,美國(guó))對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,包括均值和標(biāo)準(zhǔn)差、不同處理組間的顯著性差異分析以及皮爾遜相關(guān)性分析,采用Origin 2018進(jìn)行主成分分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 珙桐幼苗株高變化特征

    由圖1可知,經(jīng)重金屬鉛、鎘脅迫90 d后,珙桐幼苗的株高均有所增加,隨著鉛濃度的增加,株高的增量先變大后減小。其中鉛濃度在200~800 mg·kg-1范圍內(nèi)對(duì)珙桐生長(zhǎng)的抑制作用較低,而1 000 mg·kg-1具有較強(qiáng)抑制作用。且600和800 mg·kg-1處理下株高增量顯著高于對(duì)照組。隨著鎘濃度的升高,珙桐幼苗株高的增量也出現(xiàn)先增后減的規(guī)律,鎘濃度為5 mg·kg-1時(shí),株高的增量最明顯,但整體上無(wú)顯著性差異。

    2.2 MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白的特征

    由圖2:A,C,E可知,MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白濃度隨鉛濃度的增加先升高后下降。對(duì)照組MDA的濃度顯著低于其他處理組(P<0.05),鉛濃度在400~800 mg·kg-1范圍內(nèi),MDA濃度顯著高于其他處理組。鉛濃度為400 mg·kg-1時(shí),游離脯氨酸的濃度最高(P<0.05);800和1 000 mg·kg-1濃度的鉛脅迫下,游離脯氨酸濃度顯著降低(P<0.05)??扇苄缘鞍诐舛仍阢U濃度為200和400 mg·kg-1時(shí)顯著高于其他處理組(P<0.05);鉛濃度超過(guò)400 mg·kg-1時(shí),對(duì)可溶性蛋白的影響無(wú)顯著差異。

    鎘脅迫對(duì)MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白的影響與鉛脅迫存在一定的差異(圖2:B,D,F(xiàn))。鎘濃度為10 mg·kg-1濃度時(shí),MDA濃度最低,其次是對(duì)照組,均顯著低于其他處理組(P<0.05)。鎘濃度為20和30 mg·kg-1時(shí),游離脯氨酸的濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。不同濃度鎘脅迫下可溶性蛋白的濃度均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),但各處理組之間無(wú)顯著差異。

    2.3 SOD、POD和CAT活性特征

    隨鉛濃度的增加,抗氧化酶SOD、POD和CAT的活性先升高后降低。鉛濃度為400 mg·kg-1時(shí),SOD活性最高;而鉛濃度高于600 mg·kg-1時(shí),SOD活性降低顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。對(duì)照組POD活性顯著低于其他處理組(P<0.05),鉛濃度為200、400和800 mg·kg-1時(shí),POD活性較高。除鉛濃度800 mg·kg-1外,各處理組CAT活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其中鉛濃度為200 mg·kg-1時(shí)CAT活性較高。

    鎘濃度分別為1、5和20 mg·kg-1時(shí),SOD活性顯著高于其他處理組(P<0.05)。POD和CAT活性在鎘濃度分別為5和1 mg·kg-1時(shí)最高。CAT活性隨鎘濃度的增加逐漸降低,且鎘濃度在10~30 mg·kg-1時(shí)顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

    2.4 抗氧化酶、MDA以及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)相關(guān)性分析

    由表2可知,在鉛脅迫下,SOD活性與游離脯氨酸、可溶性蛋白顯著正相關(guān)(P<0.01),POD活性與MDA濃度也顯著正相關(guān)(P<0.01),CAT活性與可溶性蛋白顯著相關(guān)(P<0.01)。由表3可知,SOD活性與CAT活性、MDA濃度顯著正相關(guān)(P<0.01,P<0.05),此外POD活性與MDA、可溶性蛋白也有顯著性正相關(guān)性(P<0.05)。不同種類(lèi)重金屬對(duì)珙桐各項(xiàng)生理生化指標(biāo)的影響存在差異,鉛、鎘脅迫下SOD和POD的產(chǎn)生與可溶性蛋白濃度的增加相關(guān),鉛脅迫環(huán)境下SOD活性的增強(qiáng)與游離脯氨酸濃度增加是相關(guān)的。此外,鎘脅迫下SOD活性的提升也伴隨著CAT活性的增強(qiáng)。

    2.5 抗氧化酶、MDA以及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的主成分分析

    由圖4:A可知,兩個(gè)主成分共同解釋了75.49%的信息,其中PC1解釋了45.63%,PC2解釋了29.86%??寡趸?、MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白為主成分PC1的主要指標(biāo),可溶性蛋白與PC1相關(guān)性最高??梢?jiàn)3種抗氧化酶、MDA、游離脯氨酸和可溶性蛋白都能在一定程度上反映珙桐對(duì)鉛脅迫的響應(yīng)規(guī)律。由圖4:B可知,PC1和PC2共同解釋了64.98%的信息,其中,PC1為39.98%、PC2為25%。除游離脯氨酸外,其余指標(biāo)均與PC1有較強(qiáng)的正相關(guān)性。游離脯氨酸、CAT和SOD與PC2有較強(qiáng)的相關(guān)性,MDA和可溶性蛋白與PC2有較強(qiáng)的負(fù)相關(guān)性。3種抗氧化酶、MDA濃度和可溶性蛋白能較好地指示珙桐對(duì)鎘的響應(yīng)特征。

    3 討論

    3.1 鉛、鎘對(duì)珙桐幼苗膜脂化、游離脯氨酸和可溶性蛋白的影響

    研究發(fā)現(xiàn),膜脂質(zhì)和蛋白質(zhì)也是植物在環(huán)境脅迫下活性氧的作用目標(biāo),因此認(rèn)為它們是氧化應(yīng)激可控調(diào)節(jié)的指示指標(biāo)(Liu et al.,2015)。MDA是植物中自由基和脂質(zhì)相互作用的產(chǎn)物,脅迫環(huán)境會(huì)引起MDA累積,進(jìn)而造成蛋白質(zhì)、核酸等大分子的交聯(lián)聚合,降低植物細(xì)胞中蛋白質(zhì)代謝效果,也會(huì)對(duì)細(xì)胞膜系統(tǒng)、光合作用等產(chǎn)生較大的危害(楊國(guó)遠(yuǎn)等,2014)。研究發(fā)現(xiàn),不同濃度的鉛脅迫均會(huì)引起珙桐幼苗MDA濃度的顯著增加,且鉛的濃度在低于800 mg·kg-1范圍內(nèi),其濃度越高,珙桐幼苗的膜脂過(guò)氧化程度也越強(qiáng)。這與王吉秀等(2011)的研究相同,意味著較高濃度的重金屬加劇珙桐膜脂化程度。游離脯氨酸和可溶性蛋白是植物體內(nèi)重要的代謝物質(zhì)(張亞玲等,2016),游離脯氨酸在保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、清除自由基等方面也發(fā)揮重要作用??扇苄缘鞍滓材芴岣吖δ艿鞍椎臄?shù)量,以維持細(xì)胞正常的生理代謝活動(dòng),從而提高植物的抗逆性。沒(méi)有添加重金屬條件下,游離脯氨酸較高,但隨著鉛、鎘濃度的增加,游離脯氨酸濃度先升高后降低。研究結(jié)果表明,植物葉片中游離脯氨酸濃度會(huì)隨著脅迫程度的增加而增加(陸海燕等,2013)。這與本研究的結(jié)果存在差異,表明在一定范圍內(nèi),珙桐能通過(guò)增加游離脯氨酸和可溶性蛋白來(lái)抵抗重金屬鉛、鎘脅迫,但鉛、鎘濃度過(guò)高可能會(huì)進(jìn)一步破壞珙桐的細(xì)胞膜系統(tǒng)以及代謝平衡,導(dǎo)致其應(yīng)激能力降低,因此游離脯氨酸濃度有降低的現(xiàn)象(覃光球等,2006),在不同濃度鉛、鎘(除10 mg·kg-1外)脅迫下,MDA在各處理組均顯著高于對(duì)照組,且先增加后降低可以進(jìn)一步印證,與此同時(shí)也說(shuō)明游離脯氨酸對(duì)鉛、鎘的脅迫更為敏感。鎘濃度為10 mg·kg-1時(shí),膜質(zhì)化程度最低,但珙桐幼苗株高增量也最低,且其他組沒(méi)有顯著差異,這可能與其抗氧化酶活性在高濃度鎘脅迫下降低,其活性受到抑制,植物抵抗重金屬傷害能力下降有關(guān)。鉛脅迫下,可溶性蛋白濃度先增加后降低,但均顯著高于對(duì)照組,這與游離脯氨酸的變化規(guī)律相似,表明較低濃度的鉛能誘導(dǎo)珙桐產(chǎn)生可溶性蛋白以減輕鉛脅迫對(duì)珙桐的傷害,而較高的鉛濃度會(huì)產(chǎn)生抑制作用,這與珙桐膜脂過(guò)氧化加劇降低蛋白質(zhì)功能,導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成體失活有關(guān),也進(jìn)一步印證了隨著重金屬濃度的增加,珙桐幼苗生長(zhǎng)受到抑制作用增強(qiáng)。除對(duì)照組可溶性蛋白濃度最低外,不同濃度的鎘對(duì)可溶性蛋白的影響無(wú)顯著性差異,這與珙桐對(duì)不同種類(lèi)重金屬脅迫的應(yīng)激機(jī)制存在差異有關(guān),因此可溶性蛋白的響應(yīng)程度也存在差異,這與唐探等(2015)的研究相似。

    3.2 鉛、鎘對(duì)珙桐幼苗抗氧化酶活性的影響

    重金屬刺激植物產(chǎn)生較多的活性氧自由基,這些氧自由基與脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)發(fā)生反應(yīng),引起脂質(zhì)過(guò)氧化、膜損傷和酶失活,從而影響細(xì)胞的性能和生存能力,一旦超過(guò)植物自我清除的能力,還會(huì)導(dǎo)致植物死亡。SOD是一種金屬酶,能夠催化體內(nèi)氧化活性很強(qiáng)的超氧自由基(O2-)的歧化反應(yīng)(陸海燕等,2013),生成氧化活性較弱的H2O2,進(jìn)而由POD、CAT參與催化細(xì)胞內(nèi)H2O2的分解以防止過(guò)氧化反應(yīng)。本研究發(fā)現(xiàn),鉛脅迫環(huán)境下,SOD活性存在“高促低抑”的現(xiàn)象,POD和CAT(除800 mg·kg-1外)活性均顯著高于對(duì)照組,但在較高濃度鉛處理下其活性均出現(xiàn)降低的趨勢(shì),這表明了低濃度鉛激發(fā)了珙桐抗氧化反應(yīng),刺激抗氧化酶的產(chǎn)生以去除重金屬鉛脅迫產(chǎn)生的氧基自由基,但高濃度的鉛(800~1 000 mg·kg-1)會(huì)嚴(yán)重破壞植物細(xì)胞功能,降低了抗氧化系統(tǒng)的應(yīng)激反應(yīng)能力,其中SOD活性對(duì)鉛脅迫最敏感。李錚錚等(2007)的研究也發(fā)現(xiàn)魚(yú)腥草在不同濃度鉛脅迫下SOD、POD、CAT活性先增加后降低,此外POD和CAT活性的降低也與SOD活性的降低有關(guān)。鎘濃度為1、5和20 mg·kg-1,POD活性隨鎘濃度的增加也有先增加后降低的變化規(guī)律,較高濃度的鎘(10~30 mg·kg-1)脅迫也抑制了CAT的活性,Liu et al.(2010)對(duì)鎘影響高粱的抗氧化調(diào)節(jié)作用的研究也有相似的發(fā)現(xiàn)。本研究還發(fā)現(xiàn),珙桐幼苗的抗氧化系統(tǒng)能夠應(yīng)對(duì)較低濃度的鎘(Cd≤5 mg·kg-1)脅迫,清除O2-、H2O2等有害物質(zhì)以維持植物體內(nèi)自由基的正常代謝,同時(shí)鎘的毒性增強(qiáng)會(huì)抑制抗氧化系統(tǒng)的反應(yīng)能力(Yang et al.,2018)。珙桐幼苗株高變化量對(duì)鉛脅迫更為敏感,不同濃度鎘對(duì)珙桐幼苗的生長(zhǎng)影響不顯著。

    3.3 鉛、鎘脅迫下珙桐幼苗的主要指示指標(biāo)

    鉛脅迫下,SOD活性與游離脯氨酸、可溶性蛋白均顯著正相關(guān),CAT也與可溶性蛋白有顯著正相關(guān)性,主成分分析中SOD、可溶性蛋白與第一主成分有強(qiáng)烈的相關(guān)性,POD活性和游離脯氨酸與第二主成分相關(guān)性較強(qiáng),這意味著抗氧化酶SOD、POD與游離脯氨酸可以作為珙桐幼苗對(duì)鉛的響應(yīng)規(guī)律的主要參考指標(biāo)。與鉛脅迫不同,鎘脅迫下,SOD活性可能會(huì)影響CAT活性,SOD、POD活性與膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物MDA的正相關(guān)性表明了珙桐抗氧化性的提高,其膜脂過(guò)氧化程度有增加的趨勢(shì)。SOD、POD、MDA與第一主成分有較強(qiáng)的正相關(guān)性,CAT和游離脯氨酸與第二主成分也有強(qiáng)烈的正相關(guān)性,也進(jìn)一步說(shuō)明了鎘脅迫環(huán)境下其抗氧化酶、MDA和游離脯氨酸對(duì)鎘脅迫有重要的指示作用。

    4 結(jié)論

    (1)在低濃度鉛、鎘(Pb≤600 mg·kg-1,Cd≤5 mg·kg-1)脅迫環(huán)境下,珙桐的抗氧化反應(yīng)的程度較強(qiáng),且株高增加量較高,意味著珙桐能較好地通過(guò)自我防御減輕重金屬毒性。

    (2)鉛、鎘脅迫導(dǎo)致MDA有較高的累積,表明2種重金屬很容易引起珙桐幼苗細(xì)胞膜脂過(guò)氧化并損害細(xì)胞正常代謝功能。游離脯氨酸濃度隨著鉛、鎘濃度的增加先升高后降低,且可溶性蛋白在鉛的脅迫下表現(xiàn)出與游離脯氨酸相同的變化規(guī)律。然而,在高濃度鉛、鎘脅迫下,珙桐幼苗對(duì)鉛、鎘的應(yīng)激反應(yīng)能力降低。

    (3)珙桐幼苗抗氧化酶在低濃度的鉛、鎘脅迫下表現(xiàn)出較強(qiáng)的活性,增強(qiáng)了珙桐幼苗對(duì)氧自由基等有害物質(zhì)的清除能力。此外,抗氧化酶活性、游離脯氨酸可以較好地指示珙桐幼苗對(duì)重金屬鉛、鎘脅迫的響應(yīng)規(guī)律。我們的發(fā)現(xiàn)豐富了珙桐相關(guān)領(lǐng)域的研究資料,也為探究珙桐對(duì)重金屬脅迫環(huán)境適應(yīng)能力的研究提供了參考依據(jù)。

    參考文獻(xiàn):

    ABDELGAWAD H,ZINTA G,BADRELDIN AH,et al.,2019. Maize roots and shoots show distinct profiles of oxidative stress and antioxidant defense under heavy metal toxicity[J]. Environ Pollut,113705.

    CHEN K,JIANG XZ,MA SY,et al.,2019. Physiological response and cold resistance evaluation of the leaves of Parashorea chinensis seedlings to low temperature stress[J]. J NW For Univ,34(3):67-73.[陳凱,江秀章,馬松亞,等,2019. 望天樹(shù)苗期葉片對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)及抗寒性評(píng)價(jià)[ J]. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào),34(3):67-73.]

    CHENG YF,WEI HM,SUN R,et al.,2016. Rapid method for protein quantitation by Bradford assay after elimination of the interference of polysorbate 80[J]. Anal Biochem,494:37-39.

    DING HD,QI NM,ZHU WM,et al.,2006. Effects of Cd,Zn stress on the growth,contents of proline and GSH of tomato seedlings[J]. Chin J Eco-Agric,14(2):53-55.[丁海東,齊乃敏,朱為民,等,2006. 鎘、鋅脅迫對(duì)番茄幼苗生長(zhǎng)及其脯氨酸與谷胱甘肽含量的影響[J]. 中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),14(2):53-55.]

    DONAHUE JL,OKPODU CM,CRAMER CL,et al.,1997. Responses of antioxidants to paraquat in pea leaves (relationships to resistance)[J]. Plant Physiol,113(1):249-257.

    EWA SP,DRKIEWICZ M,KRUPA Z,2009. Lipid peroxidation andantioxidative response in Arabidopsis thaliana exposed to cadmium and copper[J]. Acta Physiol Plant,32:169-175.

    GUO YL,TAI PD,HAN YP,2009. Effects of cadmium on the growth and physiological characteristics of sunflower seedlings[J]. Chin J Environ Eng,3(12):2291-2296.[郭艷麗,臺(tái)培東,韓艷萍,2009. 鎘脅迫對(duì)向日葵幼苗生長(zhǎng)和生理特性的影響[J]. 環(huán)境工程學(xué)報(bào),3(12):2291-2296.]

    HAN L,XU XB,2020. Quantitative evaluation of human health risk of heavy metals in soils based on positive matrix factorization model and geostatistics[J/OL]. Environ Sci:1-15[2020-06-22].https://doi.org/10.13227/j.hjkx.202004081.[韓琳,徐夕博,2020. 基于PMF模型及地統(tǒng)計(jì)的土壤重金屬健康風(fēng)險(xiǎn)定量評(píng)價(jià)[J/OL]. 環(huán)境科學(xué):1-15[2020-06-22].https://doi.org/10.13227/j.hjkx.202004081.]

    HE JS,LIN J,CHEN WL,1995. The current status of endemic and endangered species Davidia involucrata and the preserving strategies[J]. Chin Biodivers,3(4):213-221.[賀金生,林潔,陳偉烈,1995. 我國(guó)珍稀特有植物珙桐的現(xiàn)狀及其保護(hù)[J]. 生物多樣性,3(4):213-221.]

    HU J,MENG DL,LIU XD,et al.,2018. Response of soil fungal community to long-term chromium contamination[J]. Trans Nonferrous Metal Soc Chin,28(9):1838-1846.

    JIA X,ZHOU CJ,DONG SM,2011. Progress of research on the effects of Cd2+ stress on wheat and the response of wheat to Cd2+[J]. J Triticeae Crops,31(4):786-792.[賈夏,周春娟,董歲明,2011. 鎘脅迫對(duì)小麥的影響及小麥對(duì)鎘毒害響應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 麥類(lèi)作物學(xué)報(bào),31(4):786-792.]

    JIANG MY,GUO SC,ZHANG XM,1997. Proline accumulation and antioxidant activity in rice seedlings under -OH stress[J]. Chin Sci Bull,42(6):647-649.[蔣明義,郭紹川,張學(xué)明,1997. -OH 脅迫下稻苗體內(nèi)脯氨酸積累及其抗氧化作用[J]. 科學(xué)通報(bào),42(6):647-649.]

    JIN Y,QU JJ,LI Y,2013. Isolation,identification and Pb (Ⅱ)biosorption characterization of a lead-resistant strain[J]. Acta Sci Circum,33(8):2248-2255.[金羽,曲娟娟,李影,2013. 一株耐鉛細(xì)菌的分離鑒定及其吸附特性研究[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),33(8):2248-2255.]

    JIN YQ,ZENG CM,LV QF,et al.,2019. Efficient adsorption of methylene blue and lead ions in aqueous solutions by 5-sulfosalicylic acid modified lignin[J]. Int J Biol Macromol,123:50-58.

    LI ZZ,WU J,TANG Y,et al.,2007. Effect of Pb,Zn and their interactions on the chlorophyll content and antioxidant enzyme systems of Houttuynia cordata Thunb[J]. Acta Agron Sin,(12):5441-5446.[李錚錚,伍鈞,唐亞,等,2007. 鉛、鋅及其交互作用對(duì)魚(yú)腥草 (Houttuynia cordata)葉綠素含量及抗氧化酶系統(tǒng)的影響[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),(12):5441-5446.]

    LIN L,ZHOU WH,DAI HX,et al.,2012. Selenium reduces cadmium uptake and mitigates cadmium toxicity in rice[J]. J Hazardous Mat,235-236:343-351.

    LIU B,LIANG CJ,2005. Recent advances of catalase in organism[J]. Chin Agric Sci Bull,21(5):223-232.[劉冰,梁嬋娟,2005. 生物過(guò)氧化氫酶研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),21(5):223-232.]

    LIU DL,ZHANG SP,CHEN Z,et al.,2010. Soil cadmium regulates antioxidases in sorghum[J]. Agric Sci Chin,9(10): 1475-1480.

    LIU QS,VETUKURI RR,XU X,et al.,2019. Transcriptomic responses of dove tree (Davidia involucrata Baill.)to heat stress at the seedling stage[J]. Forest,10(8): 656.

    LIU XF,HOU F,LI GK,et al.,2015 Effects of nitrogen dioxide and its acid mist on reactive oxygen species production and antioxidant enzyme activity in Arabidopsis plants[J]. J Environ Sci,34(8):93-99.

    LIU ZL,HE XY,CHEN W,2009. Effects of cadmium stress on the growth and physiological characteristics of Lonicera japonica[J]. J Appl Ecol,20(1):40-44.[劉周莉,何興元,陳瑋,2009. 鎘脅迫對(duì)金銀花生理生態(tài)特征的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),20 (1):40-44.]

    LU HY,LIU ZH,L GH,2013. Reaction of MDA,proline,and SOD under Cd stress in mixture of Phragmites australiss stems and leaves[J]. J Arid Land Res Environ,27(8):171-175.[陸海燕,劉志輝,呂光輝,2013. 鎘污染下蘆葦葉片丙二醛、脯氨酸及SOD保護(hù)酶反應(yīng)研究[J]. 干旱區(qū)資源與環(huán)境,27(8):171-175.]

    MALEKI M,MANSOUR G,KHALIL K,2017. Physiological and antioxidative responses of medicinal plants exposed to heavy metals stress[J]. Plant Gene,11:247-254.

    MEREY HA,RAMADAN NK,DIAB SS,et al.,2018. Validated UPLC method for the determination of guaiphenesin,oxeladin citrate,diphenhydramine,and sodium benzoate in their quaternary mixture used in treatment of cough,in the presence of guaiphenesin-related substance (guaiacol)[J]. Chem Pap,72(9):2247-2254.

    QI BZ,1989. The effects of sulfur nutrition on some physiological parameters in relation to carbon and nitrogen metabolism in wheat and maize[J]. Acta Agr Sin,15(1):31-35.[祁葆滋,1989. 硫營(yíng)養(yǎng)對(duì)小麥、玉米碳、氮代謝中幾項(xiàng)生理參數(shù)的影響[J]. 作物學(xué)報(bào),15(1):31-35.]

    QIN GQ,YAN CL,WEI LL,2006. Effect of cadmium stress on the contents of tannin,soluble sugar andproline in Kandelia candel (L.)Druce seedlings[J]. Acta Ecol Sin,26(10):3366-3371.[覃光球,嚴(yán)重玲,韋莉莉,2006. 秋茄幼苗葉片單寧、可溶性糖和脯氨酸含量對(duì)Cd脅迫的響應(yīng)[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),26(10):3366-3371.]

    SHI J,SUN JJ,F(xiàn)ANG BJ,et al.,2018. Photoluminescence performance ofEr/Yb co-doped NBT ceramics prepared via hydrothermal method[J]. J Physics Chem Solids,121:228-235.

    SPONGBERG SA,1993. Exploration and introduction of ornamental and landscape plants from Eastern Asia[J]. N Crop N Y:Wiley 140-147.

    TANG CQ,DONG YF,HERRANDO-MORAIRA S,et al.,2017. Potential effects of climate change on geographic distribution of the tertiary relict tree species Davidia involucrata in China[J]. Sci Rep,7:43822.

    TANG T,JIANG YL,ZHANG Y,et al.,2015. Physiological characteristics of Cinnamomum glanduliferum seedlings under lead and cadmium stress[J]. Jiangsu Agric Sci,43(1):199-201.[唐探,姜永雷,張瑛,等,2015. 鉛、鎘脅迫下云南樟幼苗的生理特性變化[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),43(1): 199-201.]

    TIAN GZ,LI HF,QIU WF,2001. Advances on research of plant peroxidases[J]. J Wuhan Bot Res,19(4):332-344.

    WANG JX,ZU YQ,LI Y,2011. Effects of maize and vegetable intercropping system on accumulation of Pb,Cu and Cd in plants[J]. J Agro-Environ Sci,30(11):2168-2173.[王吉秀,祖艷群,李元,2011. 玉米和不同蔬菜間套模式對(duì)重金屬 Pb、Cu、Cd 累積的影響研究[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),30(11):2168-2173.]

    WANG NN,HU ZH,SHEN YB,2011. Photosynthetic characteristics of Davidia involucrata Baill. seedlings under soil drought stress[J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin,31(1):101-108.[王寧寧,胡增輝,沈應(yīng)柏,2011. 珙桐苗木葉片光合特性對(duì)土壤干旱脅迫的響應(yīng)[J]. 西北植物學(xué)報(bào),31(1):101-108.]

    WANG X,XU HJ,LIU T,2010. Comparison of the physiological response of Chinese cabbage between cerium and lead stress[J]. J Nucl Agric Sci,24(3):634-638.[王學(xué),徐恒戩,劉濤,2010. 白菜對(duì)鈰、鉛脅迫響應(yīng)的比較研究[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào),24(3):634-638.]

    WANG XJ,WANG WB,YANG L,et al.,2015. Transport pathways of cadmium (Cd)and its regulatory mechanisms in plant[J]. Acta Ecol Sin,35(23):7921-7929.[王曉娟,王文斌,楊龍,等,2015. 重金屬鎘(Cd)在植物體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)途徑及其調(diào)控機(jī)制[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),35(23):7921-7929.]

    WU G,XIAO HD,LI J,et al.,2000. Relationship between human activities and survival of rare and endangered species Davidia involucrata[J]. J Appl Ecol,11(4):493-496.

    XU JJ,LIU NN,QIN L,et al.,2016. Effects of Cd stress on antioxidant enzymes activity of Sonchus asper L. Hill. and Zea mays L. in intercropping system[J]. J Yunnan Agric Univ(Nat Sci Ed),30(2):348-355.[徐佳佳,劉寧寧,秦麗,等,2016. 鎘脅迫對(duì)續(xù)斷菊與玉米間作體系中植物葉片抗氧化酶活性的影響[J]. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),31(2):348-355.]

    YANG GY,WAN LL,LEI XQ,et al.,2014. Effects of lead and chromium on the growth,photosynthetic performance,and antioxidant activity of Scenedesmus obliquus[J]. Acta Sci Circum,34(6):1606-1614.[楊國(guó)遠(yuǎn),萬(wàn)凌琳,雷學(xué)青,等,2014. 重金屬鉛、鉻脅迫對(duì)斜生柵藻的生長(zhǎng)、光合性能及抗氧化系統(tǒng)的影響[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),34(6):1606-1614.]

    YANG H,ZHAI MZ,LI L,et al.,2013. Cold-tolerance andosmoregulation mechanism of walnut cultivars[J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin,33(10):2003-2009.[楊惠,翟梅枝,李麗,等,2013. 不同核桃品種的耐寒性及其滲透調(diào)節(jié)機(jī)制[J]. 西北植物學(xué)報(bào),33(10):2003-2009.]

    YANG LP,ZHU J,WANG P,et al.,2018. Effect of Cd on growth,physiological response,Cd subcellular distribution and chemical forms of Koelreuteria paniculata[J]. Ecotox Environ Safe,160:10-18.

    YANG Y,LI YX,XU X,et al.,2016. The effect of short time treatment of two kinds of heavy metal ions on photosynthesis in Davidia involucrata seedlings[J]. J Chin West Norm Univ(Nat Sci Ed),37(2):163-168.[楊艷,黎云祥,胥曉,等,2016. 兩種重金屬離子短時(shí)處理對(duì)珙桐幼苗光合作用的效應(yīng)[J]. 西華師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),37(2):163-168.]

    ZENG QY,LING QP,YANG ZD,et al.,2019. Effects of copper stress on growth and antioxidant enzymes in sugarcane[J]. Guihaia,39(7):951-958.[曾巧英,凌秋平,楊湛端,等,2019. 銅脅迫對(duì)甘蔗生長(zhǎng)及抗氧化酶活性的影響[J]. 廣西植物,39(7):951-958.]

    ZHANG JX,LI JQ,ZHOU BS,et al.,1995. Natural distribution of Davidia involucrata and introduction analysis[J]. J Beijing For Univ,17(1):25-30.[張家勛,李俊清,周寶順,等,1995. 珙桐的天然分布和人工引種分析[J]. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),17(1):25-30.]

    ZHANG SY,ZHANG Q,LI L,2019. On tolerance of Ficus virens Aiton in soil contaminated by Pb and Cd[J]. J SW Chin Norm Univ(Nat Sci Ed),44(1):79-83.[張思悅,張晴,李凌,2019. 黃葛樹(shù)對(duì)土壤鉛、鎘污染耐受性的研究[J]. 西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),44(1):79-83.]

    ZHANG YL,XING HW,GUO N,et al.,2016. The physiological characteristics of ornamental kale for cold resistance[J]. Acta Agric Boreal-Sin,31(4):168-176.[張亞玲,幸宏偉,郭寧,等,2016. 羽衣甘藍(lán)抗寒生理特性研究[J]. 華北農(nóng)學(xué)報(bào),31(4):168-176.]

    ZHAO ZQ,XI MZ,2007. Advances in research on mechanisms of Cd induced oxidative stress in plants[J]. J Agro-Environ Sci,26:47-51.[趙中秋,席梅竹,2007. Cd 對(duì)植物的氧化脅迫機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),26:47-51.]

    ZHOU JJ,ZHOU J,F(xiàn)ENG RG,2014. Status of Chinas heavy metal contamination in soil and its remediation strategy[J]. Bull Chin Acad Sci,29(3):315-320.[周建軍,周桔,馮仁國(guó),2014. 我國(guó)土壤重金屬污染現(xiàn)狀及治理戰(zhàn)略[J]. 中國(guó)科學(xué)院院刊,29(3):315-320.]

    ZHU LJ,SU ZX,HU JY,et al.,2007. SOD activity of rare plant Davidia involucrata[J]. Chin J Ecol,26(11):1766-1770.[朱利君,蘇智先,胡進(jìn)耀,等,2007. 珍稀瀕危植物珙桐超氧化物歧化酶活性[J]. 生態(tài)學(xué)雜志,26(11):1766-1770.]

    ZHUANG GT,2015. Current situation of national soil pollution and strategies on prevention and control[J]. Bull Chin Acad Sci,30(4):477-483.[莊國(guó)泰,2015. 我國(guó)土壤污染現(xiàn)狀與防控策略[J]. 中國(guó)科學(xué)院院刊,30(4):477-483.]

    (責(zé)任編輯 周翠鳴)

    猜你喜歡
    珙桐抗氧化酶
    珙桐——植物界“大熊貓”
    珍稀瀕危樹(shù)種珙桐的生存特性及保護(hù)
    花卉(2020年16期)2020-08-22 02:34:50
    光葉珙桐內(nèi)生真菌的分離及其多樣性研究
    外源氯化鈣對(duì)大蒜幼苗鹽脅迫傷害的緩解作用
    [CX2]NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥生理生化特性的影響
    [CX2]NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥生理生化特性的影響
    低溫脅迫對(duì)不同豇豆品種抗寒性生理特性的影響
    遮陽(yáng)網(wǎng)覆蓋對(duì)枇杷幼果抗寒性影響機(jī)理初探
    珙桐繁殖方法的分析與研究
    不同養(yǎng)殖環(huán)境中的中華絨螯蟹組織抗氧化劑水平和抗氧化酶活力
    日本免费a在线| 听说在线观看完整版免费高清| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 熟女人妻精品中文字幕| 国产成人av激情在线播放| 日本成人三级电影网站| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 香蕉丝袜av| 日韩有码中文字幕| 少妇的逼水好多| 国产极品精品免费视频能看的| 一a级毛片在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 欧美最黄视频在线播放免费| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产精品,欧美在线| 天天躁日日操中文字幕| 日韩欧美国产在线观看| 网址你懂的国产日韩在线| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 久久中文字幕人妻熟女| 久久草成人影院| 国产熟女xx| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 免费看美女性在线毛片视频| 久久草成人影院| 欧美乱色亚洲激情| avwww免费| 51午夜福利影视在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| 国产激情欧美一区二区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品一及| 真人一进一出gif抽搐免费| 日韩欧美国产在线观看| 三级国产精品欧美在线观看 | 久久九九热精品免费| 国产久久久一区二区三区| 色老头精品视频在线观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 成在线人永久免费视频| 亚洲人成伊人成综合网2020| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产野战对白在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 国产v大片淫在线免费观看| 国产精品野战在线观看| 国产精品影院久久| 黄色视频,在线免费观看| 在线免费观看不下载黄p国产 | 国产伦人伦偷精品视频| 日本三级黄在线观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产亚洲av高清不卡| 无限看片的www在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 欧美一区二区国产精品久久精品| 欧美性猛交黑人性爽| 国产av不卡久久| 久久久国产精品麻豆| 亚洲国产精品成人综合色| 99精品久久久久人妻精品| 女人被狂操c到高潮| 高清在线国产一区| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久精品91蜜桃| 国产精品影院久久| 丰满的人妻完整版| 免费看美女性在线毛片视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 脱女人内裤的视频| 无遮挡黄片免费观看| 极品教师在线免费播放| www.精华液| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久这里只有精品中国| 欧美乱妇无乱码| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲美女视频黄频| 精品久久久久久久末码| 欧美日韩福利视频一区二区| 99久久精品国产亚洲精品| 久99久视频精品免费| 日本三级黄在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲专区中文字幕在线| 在线观看一区二区三区| 日韩三级视频一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 真人一进一出gif抽搐免费| 老司机福利观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 欧美三级亚洲精品| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产成人精品久久二区二区91| 久久久久性生活片| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 香蕉丝袜av| 人妻久久中文字幕网| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 丁香六月欧美| 国产三级在线视频| 午夜福利在线观看吧| 国产久久久一区二区三区| 一区二区三区激情视频| 极品教师在线免费播放| 中文字幕最新亚洲高清| 久久欧美精品欧美久久欧美| 一个人免费在线观看电影 | 国产黄片美女视频| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产精品98久久久久久宅男小说| 九色成人免费人妻av| 在线看三级毛片| 日本熟妇午夜| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国模一区二区三区四区视频 | 久久香蕉国产精品| 欧美一级毛片孕妇| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 99热只有精品国产| 三级毛片av免费| 欧美高清成人免费视频www| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 精品国内亚洲2022精品成人| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产成人aa在线观看| 成人永久免费在线观看视频| 国产欧美日韩一区二区三| tocl精华| 日本熟妇午夜| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国产视频内射| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲国产欧美人成| 国产久久久一区二区三区| 不卡一级毛片| 成人午夜高清在线视频| 欧美一级毛片孕妇| 99热这里只有是精品50| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲欧美日韩卡通动漫| 精品一区二区三区视频在线 | 国产精品野战在线观看| 一个人看的www免费观看视频| 美女大奶头视频| 久久中文字幕一级| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 9191精品国产免费久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产三级黄色录像| 亚洲av美国av| 黄色视频,在线免费观看| 无人区码免费观看不卡| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲片人在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 91在线观看av| 国产三级中文精品| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 最近在线观看免费完整版| 精品国内亚洲2022精品成人| 俺也久久电影网| 啪啪无遮挡十八禁网站| 午夜激情欧美在线| 亚洲成人久久爱视频| 欧美高清成人免费视频www| 久久午夜综合久久蜜桃| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 九色国产91popny在线| 成年版毛片免费区| 999久久久精品免费观看国产| 国产男靠女视频免费网站| 长腿黑丝高跟| 国内精品久久久久久久电影| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国内精品美女久久久久久| 91麻豆精品激情在线观看国产| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产视频内射| 天堂影院成人在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 嫩草影视91久久| 狠狠狠狠99中文字幕| 日本在线视频免费播放| 欧美不卡视频在线免费观看| 久9热在线精品视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 欧美激情久久久久久爽电影| ponron亚洲| 身体一侧抽搐| 亚洲激情在线av| 精品熟女少妇八av免费久了| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产精品1区2区在线观看.| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美激情在线99| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 日本熟妇午夜| 男女做爰动态图高潮gif福利片| or卡值多少钱| 国产精品亚洲av一区麻豆| 免费无遮挡裸体视频| 少妇丰满av| 欧美激情在线99| 国产av一区在线观看免费| www日本在线高清视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 一二三四社区在线视频社区8| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 校园春色视频在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| av国产免费在线观看| 久久性视频一级片| 乱系列少妇在线播放| 视频中文字幕在线观看| 午夜激情福利司机影院| 国产成人午夜福利电影在线观看| 成人毛片60女人毛片免费| 国产视频首页在线观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 麻豆一二三区av精品| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲av成人av| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲国产精品国产精品| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 深夜a级毛片| 欧美激情在线99| 日本一本二区三区精品| 国产一区二区三区av在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 直男gayav资源| 欧美三级亚洲精品| 亚洲国产欧美在线一区| 桃色一区二区三区在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频 | 亚州av有码| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久草成人影院| 色综合色国产| 亚洲综合色惰| 国内精品宾馆在线| 日韩一区二区视频免费看| 波多野结衣高清无吗| 国产视频首页在线观看| 欧美3d第一页| 网址你懂的国产日韩在线| 我的女老师完整版在线观看| 成人性生交大片免费视频hd| 欧美高清成人免费视频www| 国产精品无大码| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产在线一区二区三区精 | 免费观看a级毛片全部| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 联通29元200g的流量卡| 亚洲伊人久久精品综合 | 1000部很黄的大片| 性色avwww在线观看| 亚洲欧美日韩东京热| 97在线视频观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 国产免费男女视频| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久精品91蜜桃| 草草在线视频免费看| 精品久久久久久久末码| 国产一区有黄有色的免费视频 | 欧美成人午夜免费资源| 免费av不卡在线播放| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲成色77777| 精品午夜福利在线看| 国产精品一区www在线观看| 搞女人的毛片| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲国产最新在线播放| 啦啦啦韩国在线观看视频| av在线观看视频网站免费| 色播亚洲综合网| 男女那种视频在线观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产69精品久久久久777片| 国产精品一区二区性色av| 久久午夜福利片| 九草在线视频观看| 色哟哟·www| 亚洲在线自拍视频| av免费在线看不卡| 午夜久久久久精精品| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产精品国产三级国产专区5o | 国产单亲对白刺激| 男的添女的下面高潮视频| 国内精品宾馆在线| 身体一侧抽搐| 在线免费十八禁| 成年女人看的毛片在线观看| 99久久精品国产国产毛片| av天堂中文字幕网| 一区二区三区免费毛片| 精品不卡国产一区二区三区| 国模一区二区三区四区视频| 人体艺术视频欧美日本| 一本久久精品| 国产一级毛片七仙女欲春2| 欧美精品国产亚洲| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久99蜜桃精品久久| 久久精品国产亚洲网站| 在线观看av片永久免费下载| 水蜜桃什么品种好| 久久精品人妻少妇| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲精品日韩在线中文字幕| a级毛色黄片| 日韩精品青青久久久久久| 乱系列少妇在线播放| 国产高潮美女av| 国产亚洲精品久久久com| 在线观看66精品国产| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 99久久精品一区二区三区| 亚洲自偷自拍三级| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 哪个播放器可以免费观看大片| 久久99热6这里只有精品| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 最近中文字幕2019免费版| 深爱激情五月婷婷| 国产精品乱码一区二三区的特点| av在线播放精品| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产高清国产精品国产三级 | 欧美zozozo另类| 国产伦在线观看视频一区| 乱人视频在线观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 99久久无色码亚洲精品果冻| 夫妻性生交免费视频一级片| 插阴视频在线观看视频| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 久久久国产成人精品二区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 99热这里只有是精品在线观看| 国产av在哪里看| 人妻系列 视频| 只有这里有精品99| 欧美成人精品欧美一级黄| 婷婷色综合大香蕉| 日本三级黄在线观看| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 久久久成人免费电影| 精品人妻熟女av久视频| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲成人中文字幕在线播放| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 国产片特级美女逼逼视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 人妻系列 视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 99热6这里只有精品| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲av成人精品一二三区| 国产久久久一区二区三区| 亚洲国产精品专区欧美| 天堂网av新在线| 国产黄a三级三级三级人| 国产免费又黄又爽又色| 久久久久久大精品| 欧美+日韩+精品| 精品免费久久久久久久清纯| 看十八女毛片水多多多| 性色avwww在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 嘟嘟电影网在线观看| 最新中文字幕久久久久| 午夜久久久久精精品| 亚洲18禁久久av| av专区在线播放| 国产高清国产精品国产三级 | 精品一区二区三区人妻视频| 在线免费十八禁| 日韩av在线免费看完整版不卡| 久99久视频精品免费| 3wmmmm亚洲av在线观看| 久久久国产成人精品二区| 3wmmmm亚洲av在线观看| videos熟女内射| 日韩欧美三级三区| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 听说在线观看完整版免费高清| 国产免费男女视频| 卡戴珊不雅视频在线播放| 九九在线视频观看精品| 国产淫片久久久久久久久| 日韩精品青青久久久久久| 日韩一区二区三区影片| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 久久久精品94久久精品| 欧美人与善性xxx| 日韩av在线大香蕉| 国产极品精品免费视频能看的| 日本欧美国产在线视频| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 成年免费大片在线观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 观看免费一级毛片| 久久精品综合一区二区三区| 日韩欧美 国产精品| 看片在线看免费视频| 亚洲国产精品专区欧美| 国产v大片淫在线免费观看| 午夜福利在线在线| 国产美女午夜福利| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久99蜜桃精品久久| 成人性生交大片免费视频hd| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 久久久亚洲精品成人影院| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲色图av天堂| 午夜亚洲福利在线播放| 日韩在线高清观看一区二区三区| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 亚洲中文字幕日韩| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲欧美成人精品一区二区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美又色又爽又黄视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产一区亚洲一区在线观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美zozozo另类| 亚洲精品一区蜜桃| 日韩欧美三级三区| 国产精品不卡视频一区二区| 久久久精品94久久精品| 午夜免费男女啪啪视频观看| 深爱激情五月婷婷| 国产成人freesex在线| 性色avwww在线观看| 久久热精品热| 成人亚洲精品av一区二区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 1024手机看黄色片| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产免费视频播放在线视频 | 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产伦一二天堂av在线观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 日韩精品青青久久久久久| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 免费电影在线观看免费观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| 天天躁日日操中文字幕| 午夜福利高清视频| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲自偷自拍三级| 欧美+日韩+精品| 午夜老司机福利剧场| 亚洲精品亚洲一区二区| 成年av动漫网址| 国产亚洲91精品色在线| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲最大成人手机在线| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲国产精品国产精品| 国产亚洲最大av| 看十八女毛片水多多多| 国产美女午夜福利| 亚洲av成人精品一二三区| 免费人成在线观看视频色| 最近中文字幕高清免费大全6| 全区人妻精品视频| 99热这里只有是精品在线观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产在线男女| 好男人视频免费观看在线| 久久精品人妻少妇| 别揉我奶头 嗯啊视频| 97在线视频观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产人妻一区二区三区在| 色噜噜av男人的天堂激情| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲av熟女| 日韩欧美 国产精品| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 天天一区二区日本电影三级| 久久久国产成人免费| 91av网一区二区| 99热这里只有是精品50| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产成人精品久久久久久| 嘟嘟电影网在线观看| 欧美精品国产亚洲| 国产精品国产高清国产av| 国产精品一区www在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| av专区在线播放| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 午夜福利在线观看免费完整高清在| 麻豆av噜噜一区二区三区| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 欧美激情久久久久久爽电影| 国产人妻一区二区三区在| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 边亲边吃奶的免费视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 一个人看视频在线观看www免费| 毛片女人毛片| 欧美日韩精品成人综合77777| 欧美潮喷喷水| 美女内射精品一级片tv| 日本五十路高清| 丝袜喷水一区| 日本爱情动作片www.在线观看| 成人毛片60女人毛片免费| 中文字幕免费在线视频6| 精品久久国产蜜桃| av天堂中文字幕网| 久久精品久久久久久久性| 亚洲18禁久久av| 国产毛片a区久久久久| 国产麻豆成人av免费视频| 国产成人91sexporn| 亚洲性久久影院| 亚洲四区av| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产午夜精品一二区理论片| 插阴视频在线观看视频| 久久国产乱子免费精品| 国产淫语在线视频| 久久午夜福利片| 亚洲欧美精品专区久久| 欧美97在线视频| 色播亚洲综合网| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 久久99热这里只有精品18| 在线播放无遮挡| 国产精品熟女久久久久浪| 久久久久精品久久久久真实原创| 日韩欧美在线乱码| 毛片女人毛片| 男女下面进入的视频免费午夜| 午夜免费男女啪啪视频观看| 春色校园在线视频观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 久久久久久久久中文| 免费观看的影片在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 日韩欧美在线乱码| 亚洲av免费高清在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲无线观看免费| 麻豆成人午夜福利视频| 国产精品久久久久久精品电影| 国产精品99久久久久久久久| 国产人妻一区二区三区在| 国产成人免费观看mmmm| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久精品夜色国产| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久久久久久久久久免费av| 99热6这里只有精品| 精品午夜福利在线看| 国产精品一区二区在线观看99 | 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 在线免费十八禁| 日日撸夜夜添| 九草在线视频观看| a级毛色黄片|