小細(xì)胞肺癌組織中DBC-1表達(dá)及臨床意義

王 麗

小細(xì)胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)是肺癌組織類型中較為罕見的低分化神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤疾病，其分化程度較低，但惡性程度極高，極易通過血液、淋巴轉(zhuǎn)移，在發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移后，會(huì)引發(fā)相應(yīng)部位的癥狀，故患者一旦確診為SCLC，需盡早進(jìn)行相應(yīng)治療，以免癌細(xì)胞擴(kuò)散，錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)[1-2]。目前，臨床治療主要以綜合性治療為主，雖然近年來該病治療水平迅速提升，但其預(yù)后效果仍較差，死亡率較高，有研究指出，部分基因改變?cè)谄漕A(yù)后中發(fā)揮重要作用，故臨床需對(duì)其進(jìn)行探索分析，尋找敏感性較高的腫瘤標(biāo)志物，以為臨床診治、預(yù)后提供有效指導(dǎo)[3-4]。乳腺癌缺失因子-1(deleted in breast cancer-1，DBC-1)因其在乳腺癌組織中缺失而得名，研究指出，其在細(xì)胞增殖、凋亡的生理病理過程中發(fā)揮重要作用[5]。鑒于此，本研究探討SCLC組織中乳腺癌缺失因子-1(DBC-1)表達(dá)及臨床意義?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

采用前瞻性隨機(jī)試驗(yàn)方法，選取許昌市中心醫(yī)院病理科2018年3月至2019年12月收治的76例SCLC患者作為研究對(duì)象，活檢或手術(shù)切除后收集SCLC組織，并收集相應(yīng)的癌旁組織，經(jīng)福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，厚度為4 μm。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合SCLC診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤疾?。虎诤喜⒏腥拘?、血液性疾病；③合并凝血功能障礙。76例患者中男性70例，女性6例；年齡48～78歲，平均年齡為(63.28±3.58)歲；吸煙59例，不吸煙17例；其中活檢組織32例，手術(shù)組織44例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者42例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者34例；廣泛期46例，局限期30例。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

采用免疫組織化學(xué)改良二步法，對(duì)DBC-1水平進(jìn)行檢測(cè)：切片常規(guī)二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水，采用3%雙氧水滅活內(nèi)源性過氧化物酶，持續(xù)12 min。PBS洗滌3 min×3次，加入一抗，在4 ℃環(huán)境下過夜；PBS洗滌5 min×3次，加入二抗，室溫孵育30 min；PBS洗滌5 min×3次，DAB顯色2 min左右；采用蘇木精復(fù)染3 min，梯度酒精，二甲苯浸泡，采用中性樹脂封片。待其干燥后，置于顯微鏡下觀察染色情況。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

由2名觀察者采用盲法進(jìn)行觀察，每張切片均選擇5個(gè)視野，顯微鏡放大200倍，每個(gè)視野計(jì)數(shù)150個(gè)細(xì)胞，對(duì)癌細(xì)胞及其癌旁組織染色情況進(jìn)行觀察。其中細(xì)胞染色呈褐色、深褐色即為DBC-1陽性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 22.0軟件處理，以表示計(jì)量資料，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，采用單因素分析、多項(xiàng)Logistic回歸分析檢驗(yàn)DBC-1陽性表達(dá)對(duì)小細(xì)胞癌細(xì)胞組織預(yù)后的影響因素，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SCLC組織、癌旁組織的DBC-1表達(dá)水平

SCLC組織中DBC-1陽性表達(dá)率高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 SCLC組織、癌旁組織中DBC-1表達(dá)水平(例，%)

2.2 DBC-1表達(dá)水平與臨床病理參數(shù)間單因素分析

經(jīng)單因素分析顯示，SCLC組織中DBC-1陽性表達(dá)與患者年齡、性別、吸煙史無關(guān)(P>0.05)，但可能與TNM分期、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 DBC-1表達(dá)水平與臨床病理參數(shù)間單因素分析(例，%)

2.3 多項(xiàng)Logistic回歸分析

經(jīng)Logistic回歸分析，提示TNM分期、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移是DBC-1陽性表達(dá)的影響因素(OR>1，P<0.05)。見表3。

表3 多項(xiàng)Logistics回歸分析

3 討論

SCLC在肺癌中較為罕見，只占所有肺癌的15%，但其在肺癌疾病中惡性程度最高，且腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)速度極快，極易出現(xiàn)侵襲性進(jìn)展，并向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，累及全身多處臟腑器官，死亡率極高[7-8]。該病發(fā)病機(jī)制尚未明確，臨床研究顯示，可能與環(huán)境污染、遺傳、吸煙、職業(yè)等因素有關(guān)，導(dǎo)致肺部組織細(xì)胞出現(xiàn)惡性病變，從而誘發(fā)SCLC[9]。目前，臨床針對(duì)該病多采用綜合性治療方案，包括放化療、手術(shù)治療等，以延長(zhǎng)患者生存期限為目標(biāo)，避免其進(jìn)一步惡化[10]。近年來，雖然SCLC的早期診治及綜合性治療水平明顯提升，但其預(yù)后效果仍不甚理想，有研究指出，其預(yù)后與機(jī)體內(nèi)某些基因表達(dá)水平有關(guān)，故臨床需對(duì)其進(jìn)行探索分析，以便促進(jìn)預(yù)后，改善患者生命質(zhì)量[11-12]。

本研究結(jié)果顯示，SCLC組織中DBC-1陽性表達(dá)占比高于癌旁組織，經(jīng)單因素分析顯示，SCLC組織中DBC-1陽性表達(dá)與年齡、性別、吸煙史無關(guān)(P>0.05)，但可能與TNM分期、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)；為證實(shí)本結(jié)論，進(jìn)一步做Logistic回歸分析，提示TNM分期、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移是DBC-1陽性表達(dá)的影響因素，可見DBC-1高表達(dá)預(yù)示SCLC患者預(yù)后不良。分析其原因在于，DBC-1是一種新鑒定出的基因，目前臨床關(guān)于其相關(guān)研究報(bào)道較少，對(duì)其病理生理功能了解并不確切；因DBC-1在乳腺癌組織中缺失，故臨床將其命名為乳腺癌缺失基因-1[13]。有研究指出，DBC-1在多種腫瘤細(xì)胞組織中均表現(xiàn)為低表達(dá)，認(rèn)為其在腫瘤組織中發(fā)揮抑制腫瘤因子的作用；也有研究認(rèn)為，其也可能是1種具有腫瘤類型依賴性的促癌劑[14]。DBC-1研究機(jī)制發(fā)現(xiàn)，DBC-1對(duì)ER、SIRT1等分子的表達(dá)、甲基化造成影響，并在調(diào)控細(xì)胞侵襲、增殖、轉(zhuǎn)移、凋亡等生理病理過程中扮演重要角色；研究顯示，CK2a經(jīng)轉(zhuǎn)錄后，其水平對(duì)DBC-1甲基化具有調(diào)節(jié)作用，且經(jīng)caspase通路調(diào)節(jié)，對(duì)TNF-α誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡起到促進(jìn)作用；另一方面，DBC-1可與SIRT1直接結(jié)合，對(duì)SIRT1的去乙酰化酶具有抑制作用，從而對(duì)SIRT1-p53通路造成影響，有效促進(jìn)細(xì)胞凋亡，由此可見，DBC-1在腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、進(jìn)展中發(fā)揮重要作用[15]。

綜上所述，SCLC組織中DBC-1陽性表達(dá)率較高，其與TNM分期、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等因素有關(guān)，可見DBC-1高表達(dá)預(yù)示SCLC患者預(yù)后不良。