感染性疾病甲肝乙肝免疫學(xué)檢驗(yàn)的臨床研究

孔蕾，楊紅潔

1.昆明醫(yī)科大學(xué)校醫(yī)院，云南昆明650000；2.云南省昆明市第三人民醫(yī)院，云南昆明650000

甲型肝炎與乙型肝炎在臨床中十分常見，均具有較大的感染性，將會(huì)在較大程度威脅著人們的生命健康，目前已成為世界性的傳染病，由于被感染初期并未具有顯著的臨床表現(xiàn)，因而較易被忽視，隨著病程的進(jìn)展，諸多患者將會(huì)演變至慢性、遷延性的乙型肝炎，嚴(yán)重者還將出現(xiàn)肝硬化或肝癌的不良后果，產(chǎn)生更加嚴(yán)重的不良損害，相比于甲型肝炎及其他肝炎疾病，乙型肝炎將會(huì)產(chǎn)生更加嚴(yán)重的不良危害，但不論是何種肝炎疾病類型，由于其具有傳染性，因此及時(shí)有效的檢驗(yàn)是發(fā)現(xiàn)疾病、及時(shí)處理、提升機(jī)體健康的關(guān)鍵[1]。以往由于缺少有效的檢驗(yàn)技術(shù)條件與經(jīng)驗(yàn)，僅能夠使用傳統(tǒng)方式進(jìn)行檢驗(yàn)，例如使用直接檢測HAV-IgM抗體檢測捕獲法等，然而通過臨床實(shí)踐顯示，傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方式無法獲得較好的檢測效果，因而無法有效地為臨床醫(yī)生提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)信息[2]。目前伴隨著檢驗(yàn)技術(shù)的不斷改進(jìn)，臨床中開始使用免疫學(xué)檢驗(yàn)方式，該種檢驗(yàn)方式發(fā)揮作用的主要原理是依據(jù)抗原與抗體反應(yīng)的原理，能夠獲得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，從而能夠?yàn)榕R床醫(yī)生提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，制定有效的治療方案[3]。該文方便選取130例于2016年3月—2020年8月昆明市第三人民醫(yī)院收治的感染性疾病甲肝乙肝患者，探討感染性疾病甲肝乙肝免疫學(xué)檢驗(yàn)的臨床效果?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用隨機(jī)數(shù)表法對方便選取130例昆明市第三人民醫(yī)院收治的感染性疾病甲肝乙肝患者進(jìn)行分組，其中甲型肝炎患者共50例，乙型肝炎患者共80例。對照組中男女患者數(shù)量分別為35例、30例；年齡25～49歲，平均（37.5±1.9）歲；其中甲型肝炎患者共28例，乙型肝炎患者共37例。研究組中男女患者數(shù)量分別為36例、29例；年齡25～50歲，平均（37.9±2.1）歲；其中甲型肝炎患者共22例，乙型肝炎患者共43例。該研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)同意。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①均為感染性疾病甲肝乙肝患者；②家屬均同意該研究的檢測方式，表示知情，且所有患者均能夠積極配合。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①中途退出的檢驗(yàn)患者；②患有其他感染性肝炎疾病。

1.3 方法

該研究選用安圖全自動(dòng)型酶標(biāo)分析儀及其配套設(shè)備、試劑，并嚴(yán)格按照說明與步驟進(jìn)行檢測。

對照組患者實(shí)施傳統(tǒng)方式進(jìn)行檢驗(yàn)，使用直接檢測HAV-IgM抗體檢測捕獲法，將抗人IgM抗體作為固相抗體，向固相抗體中添加血清標(biāo)本，在捕獲IgM抗體非特異性和特異性被固相抗體時(shí)加入特異抗原，完全結(jié)合固相上捕獲的IgM抗體，加入酶標(biāo)抗特異抗原抗體以及底物，以便能夠顯色，最后檢驗(yàn)HAV-IgM抗體情況。

免疫學(xué)檢驗(yàn)方式是研究組所用方式，選擇雙抗原夾心法對抗-HBs予以檢驗(yàn)，具體的方式如下：由于HBeAg是HB核心內(nèi)部的可溶型蛋白，因此當(dāng)機(jī)體感染HBV病毒后，HBeAg與HBsAg會(huì)存在于血液中，因此使用夾心法對HBeAg進(jìn)行檢驗(yàn)，并采取HBV-DNA進(jìn)行定量檢測，能夠有效地確定HBV的存在，并記錄檢驗(yàn)結(jié)果。

1.4 觀察指標(biāo)

患者甲肝、乙肝的陽性檢出率情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

研究組的甲型肝炎、乙型肝炎的陽性檢出率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1兩組患者甲肝、乙肝的陽性檢出率比較（%）

3 討論

甲肝在臨床中的全稱即為甲型病毒性肝炎，主要是因甲型肝炎病毒(HAV)感染所致，其主要的臨床特征是以肝臟炎癥病變?yōu)橹?，通過臨床研究表明，甲型肝可發(fā)病于任何年齡階段，但特別是多見于青少年群體以及兒童群體[4]。通過臨床觀察與實(shí)驗(yàn)室研究表明，甲肝患者與無癥狀感染患者是甲型肝炎的主要傳染源，并且主要經(jīng)糞便將病原體排出體外，在此期間患者的血液也存在較大的傳染特性；糞口途徑是甲型肝炎的主要傳播途徑，一般經(jīng)口進(jìn)入體內(nèi)后，再經(jīng)腸道進(jìn)入血液循環(huán)之中，從而導(dǎo)致病毒性血癥等不良情況的發(fā)生，并且會(huì)對肝臟、咽部、扁桃體等器官形成不良累及；除此之外，通過相關(guān)的臨床統(tǒng)計(jì)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，冬春季節(jié)是甲型肝炎的高發(fā)季節(jié)，急性肝炎是患者的主要表現(xiàn)[5]。目前為對甲型肝炎進(jìn)行有效的治療，臨床中廣泛應(yīng)用滅活疫苗，并且通過臨床觀察可知，甲型肝炎已獲得了良好的控制，然而對于未注射甲肝疫苗的患者而言，其普遍存在HAV感染的情況，但若患者已患過甲肝或感染過HAV，則對于甲型肝炎病毒將會(huì)產(chǎn)生較大的免疫力[6]。對于感染甲型肝炎病毒的患者而言，疲乏、食欲減退、肝功能異常是其主要的臨床癥狀表現(xiàn)，并且對于中青年群體而言多表現(xiàn)為顯性感染特征，而對于老年人群體與兒童群體而言，其感染多表現(xiàn)為隱性感染特征。然而在過去因缺少對甲型肝炎的認(rèn)知，諸多醫(yī)生認(rèn)為甲型肝炎主要是經(jīng)消化道傳染，具有較短的潛伏期，并且并未能夠?qū)ζ溥M(jìn)行有效的檢測[7]。隨著認(rèn)知程度的不斷提升及檢測能力的不斷提升，目前主要對患者的血清ALT、AST、總膽紅素水平等肝功能指標(biāo)進(jìn)行檢測，具有重要作用。

乙肝在臨床中又被稱為慢性乙型病毒性肝炎，主要是指慢性乙肝病毒檢測結(jié)果呈現(xiàn)為陽性，并且病程超過半年，乏力、畏食、惡心、腹脹、肝區(qū)疼痛等炎癥表現(xiàn)是乙型肝炎患者的主要臨床癥狀表現(xiàn)，若患者的病情嚴(yán)重，還將表現(xiàn)出肝病面容、蜘蛛痣、肝掌等特征。乙型病毒性肝炎主要是由乙型肝炎病毒感染所致，乙型肝炎患者以及HBV攜帶者是該疾病的主要傳染源，血液、母嬰、皮膚黏膜破潰以及性傳播等方式是該疾病的主要傳播途徑，當(dāng)患者感染乙肝病毒后，還會(huì)受到病毒因素、宿主因素、環(huán)境因素等的影響，從而表現(xiàn)出不同的分型特征[8]；通過實(shí)驗(yàn)室研究與臨床觀察可知，乙型肝炎病毒的潛伏期一般為6周~6個(gè)月，并且因病原體種類的不同以及人體免疫狀態(tài)等不同，將會(huì)產(chǎn)生不同的臨床癥狀表現(xiàn)。經(jīng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，乙型肝炎病毒與甲型肝炎病毒完全不同，并且乙型肝炎病毒具有自身獨(dú)特的性質(zhì)[4]；同時(shí)猩猩也可感染乙型肝炎病毒，并且表現(xiàn)出與人體相似的疾病類型。目前乙型肝炎主要包括兩種不同的抗原與抗休系統(tǒng)，即乙型肝炎病毒表面抗原及其與之對應(yīng)的抗休與病毒核心抗原及其與之對應(yīng)的抗體。通過臨床研究表明，乙型肝炎病毒的核心部分于肝細(xì)胞的細(xì)胞核中進(jìn)行合成，而病毒的表面層則于肝細(xì)胞的細(xì)胞漿中進(jìn)行合成。當(dāng)病毒核心小體于細(xì)胞漿中進(jìn)行合成后，將會(huì)進(jìn)入至細(xì)胞漿中，并在細(xì)胞漿中“裝配”上病毒的外衣，才能夠形成完整的、有生命的乙型肝炎病毒，一般經(jīng)口進(jìn)入體內(nèi)后，再經(jīng)腸道進(jìn)入血液循環(huán)之中，通過糞便、尿液等排泄物排出體外。對于于肝細(xì)胞中合成的“外衣”而言，在產(chǎn)量方面經(jīng)常會(huì)超過滿足“裝配”病毒核心小體的實(shí)際需求，因而過剩的病毒外衣物質(zhì)進(jìn)入至血液循環(huán)中，進(jìn)而能夠被檢出。目前乙型肝炎病毒在感染者血清中的存在主要包括如下形式：①大球型顆粒，是一種完整的HBV顆粒；②小球形顆粒；③管形顆粒，是一種空心包膜，由HBsAg與脂類組成，不包括病毒核心，并且并未具有感染性質(zhì)。

為有效地對甲型肝炎、乙型肝炎患者進(jìn)行檢出，則需要使用一種有效的方式。然而由于缺少有效的技術(shù)條件，以往臨床中僅能夠使用傳統(tǒng)的方式進(jìn)行檢測，多使用直接檢測HAV-IgM抗體檢測捕獲法等，但通過對臨床檢測結(jié)果進(jìn)行觀察可知，此種方式無法獲得準(zhǔn)確的結(jié)果[9]，因而無法為臨床醫(yī)生提供準(zhǔn)確的檢測信息，進(jìn)而無法實(shí)施有效的治療，為此需要使用一種更加有效的方式進(jìn)行檢測。

伴隨著檢測技術(shù)的不斷發(fā)展改進(jìn)，目前臨床中多使用免疫學(xué)檢驗(yàn)方式對甲型肝炎、乙型肝炎患者進(jìn)行檢查。免疫學(xué)最早于1789年開始逐漸發(fā)展為一門獨(dú)立學(xué)科，并且逐漸廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、蛋白質(zhì)分析結(jié)構(gòu)、基因調(diào)控水平等領(lǐng)域中，免疫學(xué)理論與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)也獲得了較快的發(fā)展。免疫學(xué)檢驗(yàn)方式是機(jī)體對于自身抗體則表現(xiàn)出天然的耐受性，而對于非自身抗體則將會(huì)表現(xiàn)出顯著的排斥特點(diǎn)，且該生理功能能夠產(chǎn)生抗感染性質(zhì)，從而能夠有效地確保機(jī)體的生理平衡，并加強(qiáng)對機(jī)體的免疫保護(hù)[10]；然而通過臨床研究與觀察可知，在一定條件的影響下，將會(huì)出現(xiàn)免疫功能失調(diào)的不良情況，進(jìn)而會(huì)導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生較大的超敏反應(yīng)、自身免疫性疾病等不良反應(yīng)。

臨床中多使用酶聯(lián)免疫法檢測方式對于甲型肝炎患者進(jìn)行檢驗(yàn)。在進(jìn)行檢驗(yàn)前需要告知患者保持空腹?fàn)顟B(tài)，之后抽取其3 mL靜脈血，經(jīng)30 min的凝集，提取血清，然后再使用酶復(fù)合物對其進(jìn)行稀釋，向其中添加血清、陰陽性對照，一般感染甲型肝炎病毒約1周左右，便可于血清中對抗-HAV IgM(甲肝抗體免疫球蛋白)進(jìn)行有效的檢出?？?HAV IgM是目前臨床中診斷甲型肝炎的一種早期指標(biāo)，具有方便簡潔的特征；同時(shí)因抗-HAV IgM是一種保護(hù)性抗體，能夠在較大程度上避免機(jī)體再次感染甲型肝炎病毒，進(jìn)而加強(qiáng)對人體健康的保護(hù)。血清檢測是目前檢測乙型肝炎的主要方式，能夠?qū)BsAg與HBsAb進(jìn)行共同檢測。就一般情況而言，在肝細(xì)胞中，在較大量的谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高前的2~6周內(nèi)，便可對谷丙轉(zhuǎn)氨酶進(jìn)行有效的檢出，然而若在血清中檢測出HBsAb，則說明乙肝病毒感染獲得了較好的恢復(fù)；除此之外，血清HBV DNA也為乙肝病毒傳染的主要標(biāo)志物，對于慢性乙肝患者而言，其機(jī)體內(nèi)將會(huì)出現(xiàn)血清HBV DNA，因而檢測結(jié)果呈陽性。通過該研究的結(jié)果顯示，當(dāng)使用免疫學(xué)檢驗(yàn)方式對感染性疾病甲肝乙肝患者進(jìn)行檢測后提示，患者的甲型肝炎、乙型肝炎獲得了良好的檢測，提升了陽性檢出率，具有較高的臨床應(yīng)用效果。通過上述結(jié)果與對照組的檢出率進(jìn)行比較可知，免疫學(xué)檢驗(yàn)具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值，從而能夠有效地對甲型肝炎、乙型肝炎進(jìn)行早期診斷，以便能為臨床醫(yī)生提供可靠的檢測信息，便于醫(yī)生制定具有針對性與個(gè)性化的治療方案，以便能夠提升患者的健康水平，改善患者的預(yù)后。不論是感染甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒，機(jī)體內(nèi)均會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，無論實(shí)施何種肝功能檢查或依據(jù)患者的臨床表現(xiàn)進(jìn)行判斷，均較難對急性甲肝病毒感染與其他類型肝炎病毒感染進(jìn)行有效的鑒別，然而當(dāng)使用免疫學(xué)檢驗(yàn)方式進(jìn)行檢測后，則能夠進(jìn)行有效的鑒別診斷，因而具有重要的價(jià)值。除此之外，由于甲型肝炎病毒的抗原主要來源于甲型肝炎患者的糞便濾液，并且甲型肝炎病毒是一種病毒樣顆粒，也是一種甲肝特異性臨床指標(biāo)，因而若檢測結(jié)果呈陽性，則便可對甲型肝炎進(jìn)行確診。免疫學(xué)的原理是免疫學(xué)檢驗(yàn)方式主要使用的原理方式，尤其是利用抗原與抗體反應(yīng)的原理，通過使用各類敏感標(biāo)記及示綜等技術(shù)，對機(jī)體的病理與生理免疫學(xué)指標(biāo)進(jìn)行特異性的、超微量的檢驗(yàn)分析，相比于其他檢測方式，免疫學(xué)檢驗(yàn)方式能夠更加有效地提升疾病的陽性檢出率，因而具有更高的臨床使用價(jià)值。除被檢出的陽性患者外，對于關(guān)于甲肝乙肝感染性疾病誤檢或漏檢的患者而言，主要是因受到樣本例數(shù)條件的制約，因此仍然需要不斷深入研究。就該研究的結(jié)果顯示，研究組的甲型肝炎、乙型肝炎的陽性檢出率分別為90.91%與90.70%，明顯高于對照組的35.71%與29.73%（P＜0.05），提示免疫學(xué)檢驗(yàn)方式具有良好的效果。依據(jù)石劍雄[11]的研究顯示，通過采用免疫學(xué)檢驗(yàn)方式后，患者的甲肝檢出率為81.8%，乙肝檢出率為72.2%，該研究與其結(jié)果相近。

綜上所述，該研究認(rèn)為感染性疾病甲肝乙肝免疫學(xué)檢驗(yàn)具有較高的臨床價(jià)值，能夠有效地提升甲型肝炎、乙型肝炎的陽性檢出率。