白酒中氰化物測定時 試劑穩(wěn)定性實驗分析

安金桃 袁旭艷 楊妍

氰化物極具毒性，具有苦杏仁味道，氰化物檢測是保證白酒等食品安全性的重要舉措。在測定白酒中氰化物時，期間所使用試劑的穩(wěn)定性對測試結果有著決定性作用。本文通過采取試驗的方式，分析影響測定白酒氰化物試劑穩(wěn)定性的因素。

一、實驗準備

全玻璃蒸餾器、可調電爐、容量瓶、光度計、塞比色管、密度為1.6g/mL的磷酸、氫氧化鈉溶液、試紙、氨基磺酸、亞硫酸鈉溶液。

二、實驗步驟

1.實驗預處理步驟。稀釋與吸收氰化氫。從被測試的樣品中適量提取樣品，一般取200mL即可，將樣品放入蒸餾瓶內，倘若被檢測樣品中含有較高的氰化物，那么可以酌情降低提取量，加入蒸餾水將其稀釋，直至200mL。

把濃度為1%的氫氧化鈉溶液加入到容器內，取10mL即可，將其作為吸收液。

把冷凝管的出口位置連接到餾出液導管的上端位置，在容器中的吸收液置入餾出液導管的下端位置，對連接的位置開展詳細檢查，保證其具有良好的嚴密性。

在蒸餾瓶中放入Na2-EDTA溶液，放入量控制在10mL即可。

將10mL的磷酸快速加入到容器中，若是樣品的堿性程度過大，可以適量增加磷酸，保持溶液的酸堿值不超過2。此時需要即刻將瓶塞塞好。打開冷凝水，調節(jié)電爐，按照由低到高的順序逐漸升高溫度，蒸餾加熱是以每分鐘2mL-4mL的餾出液速度完成。

當接收瓶內部的溶液容量大約為100mL時要終止蒸餾，利用少量的水將餾出液導管進行清洗，將接收瓶取出，加入蒸餾水進行稀釋，直至標線位置，此時得到堿性餾出液，留待測量氰化物再用。

2.試劑穩(wěn)定性測試步驟。在中性條件下，選取的樣品中氰化物將會與氯胺T出現(xiàn)反應，進而得到氯化氫，之后再與異煙酸產(chǎn)生化學反應，在經(jīng)過水解后得到戊烯二醛，最后和吡唑啉酮合成藍色燃料。

首先繪制校準曲線。（1）將0mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL氰化物溶液加入到塞比色管，再分別加入濃度為0.1%的氫氧化鈉溶液，直至10mL。（2）將5mL磷酸鹽緩沖溶液加入到各個容器中，將溶液進行均勻攪拌。在最短時間內將氯胺T溶液加入其中，立即將瓶子蓋住，混勻，靜置3-5min。（3）將5mL的異煙酸-吡唑啉酮溶液加入容器中，將其混勻。在容器中加入蒸餾水進行稀釋，直至加到標線位置，將其搖晃均勻。在溫度為25℃-35℃的水中靜置40min。（4）在638nm的波長下，利用光度計測試，使用10nm比色皿，以零濃度的空白管作為對比，對吸光度展開測量，同時完成校準曲線繪制。

其次測定樣品。（1）在具塞比色管中分別提取10.0mL空白試驗餾出液和餾出液，之后按照校準曲線的第二步到第四步展開操作，完成吸光度測量。（2）利用校準曲線完成氰化物含量查詢。

在上述公式中，ma為氰化物含量，μg;mb為空白試樣中的氰化物含量，μg;V為選取的樣品體積，mL;V1為樣品的體積;V2為比色時樣品的體積。

3.試驗注意事項。在實驗期間，實驗人員需要特別注意的問題有四個方面：

（1）若是氰化物基于HCN形式存在的時候，那么比較容易揮發(fā)。所以，將緩沖液加入到器皿后，每一步操作都需要在最短的時間內完成，并且要將器皿的蓋子蓋好。

（2）為了將實驗中的空白值降低，實驗期間可以選擇使用無色N-2甲基甲醛酰胺。

（3）當實驗室內的環(huán)境溫度不高時，磷酸鹽緩沖溶液將會被解析出結晶，從而改變溶液的酸堿值。所以，在進行水浴處理的時候，要采取合適的方法將結晶進行溶解，攪拌均勻后方能使用。

（4）當使用濃度較高的氫氧化鈉溶液作為洗手液時，緩沖液添加之前需使用酚酞作為指示劑，在溶液內滴加鹽酸，直至褪去紅色。校準曲線和水樣必須為相同濃度的氫氧化鈉。

三、實驗結果分析

1.氯胺T濃度的影響。在分析白酒中氰化物測定試劑穩(wěn)定性的時候，將控制氯胺T濃度為0.05%、0.1%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%，對氯胺T濃度影響吸光度的能力展開分析。結果如圖1所示：

通過圖1的結果可以得知，當氯胺T的濃度值在0.1%-0.2%之間時，結果處于最佳狀態(tài)。當氯胺T的濃度值過高或者過低，都會在一定程度上對結果產(chǎn)生影響。當處于中性條件下，白酒樣品中的氰化物將會與氯胺T發(fā)生反應，進而形成氯化氫。吡唑啉酮所合成藍色染料以及異煙酸開環(huán)時，CNCl是重要的物質條件，更是定量信息的第一載體。活性氧是與氰化物發(fā)生化學反應，并且產(chǎn)生CNCl的重要物質條件，其供給量不足，那么在溶液中的CN-便不能被全部氯化。若是添加的量超過標準，那么將會造成氰化物被分解，得到次氯酸鹽。所以，通過本次實驗可以得知，活性氯的多少將會影響到氯胺T的效率，對檢測結果產(chǎn)生影響。

2.緩沖溶液酸堿值的影響。在試驗分析中，按照規(guī)定需要將磷酸鹽緩沖溶液的酸堿值控制在7。但是在實際試驗過程中，由于受到試劑質量和純水質量的影響，緩沖溶液酸堿值會出現(xiàn)不同程度的上下波動，所以在標準溶液配置過程中，需要分析緩沖溶液在配置時的濃度比例，探究酸堿值的受影響因素。

在實驗分析中得知，當磷酸鹽緩沖溶液的酸堿值維系在6.5-7之間時，處于最佳狀態(tài)，若是酸堿值過高或者過低，都會對實驗結果產(chǎn)生影響。當磷酸鹽緩沖溶液的酸堿值過低時，此時CNCl將會與異煙酸發(fā)生反應，產(chǎn)生戊烯二醛。因為吡啶環(huán)上的羧基處于酸性條件時會十分穩(wěn)定，難以被打開，反應中途會被終止，當介質的酸性增強的時候，這種效果表現(xiàn)得則更加顯著。當磷酸鹽緩沖溶液的酸堿值過高，那么水解CNCl，形成氰酸根，其化學反應方程式如下所示：CNCl+OH-=CNO-+COl-+H+，此時的吸光度將會伴隨著磷酸鹽緩沖溶液的酸堿值上升而下降。

3.異煙酸-吡唑啉酮試劑的影響。在配置異煙酸-吡唑啉酮試劑時，國家標準并未作出明確的規(guī)定，在試驗分析中，會將試劑分別保存，靜置數(shù)天以后進行合并混合使用。通過實驗分析的結果得知，這種方法會影響到煙酸-吡唑啉酮試劑的穩(wěn)定性。

在配制煙酸-吡唑啉酮試劑之前，其標準曲線斜率值為0.32，并且當煙酸-吡唑啉酮試劑在24小時之內使用的時候，其標準缺陷斜率值基本上保持穩(wěn)定，但是在第二天以后，煙酸-吡唑啉酮試劑的顏色將會呈現(xiàn)出由淺及深的變化。對標準曲線靈敏度進行檢測，發(fā)現(xiàn)其呈現(xiàn)出下降趨勢。一周以后測試其靈敏度，得知其標準曲線的斜率值下降到0.26，相對誤差值為-18.8%。若是在保存煙酸-吡唑啉酮試劑的時候，對其進行分別保存，在使用的時候再取出，將其混合使用，那么在一周時間以后，其標準曲線的斜率值將會下降到0.23，相對誤差值為-28.1%，并且煙酸-吡唑啉酮試劑的顏色會加深。

白酒中的氰化物檢測關系到食品安全，在檢測期間，試劑的穩(wěn)定性對檢測結果有著不可忽視的作用。本文通過實驗分析的方法，探究白酒氰化物檢測試劑的穩(wěn)定性。通過實驗結果得知，活性氯的多少將會影響到氯胺T的穩(wěn)定性;酸堿值的高低將會影響到磷酸鹽緩沖溶液的檢測質量;保存方式和使用時間將會影響到煙酸-吡唑啉酮試劑的穩(wěn)定性。所以在進行白酒或其他食品中氰化物的檢測時，需全面認識檢測試劑的性能，合理調配檢測試劑溶液，對影響其穩(wěn)定性的因素作出合理控制，提高檢測結果的可靠性。

作者簡介：安金桃（1992-），女，陜西旬陽人，大學本科，助理工程師，研究方向為食品檢驗。