小果南燭三萜類化學(xué)成分研究

張萌 李齊激 王雪 楊娟 楊小生

摘 要： 羊毛甾烷三萜是南燭屬植物主要活性成分之一。為進(jìn)一步研究南燭屬植物功效物質(zhì)基礎(chǔ)，結(jié)合民族民間對(duì)小果南燭的應(yīng)用實(shí)際，該文利用硅膠、MCI、Sephadex LH-20、半制備高效液相色譜等植物化學(xué)技術(shù)手段對(duì)該植物95%乙醇提取物進(jìn)行分離、純化，綜合理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)對(duì)其化合物進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明：從小果南燭的莖、葉提取物中分離得到14個(gè)三萜及其皂苷，分別鑒定為mollic acid 3-O-α-L-arabinopyranoside （1）、mollic acid 3-O-β-D-glucopyranoside （2）、cycloart-3，7-dihydroxy-24-en-28-oic acid （3）、白樺脂酸 （4）、1β， 3α， 11α-trihydroxy-urs-12-ene （5）、 oleanderolide （6）、（Z）-馬斯里酸-3-O-對(duì)香豆酸酯 （7）、木栓酮 （8）、坡模酸 （9）、2α， 3α-二羥基烏蘇-12-烯-28-酸 （10）、科羅索酸 （11）、齊墩果酸 （12）、熊果酸 （13）、委陵菜酸 （14）。其中，化合物1-7為首次從南燭屬植物分離得到，化合物8-11，14為首次從小果南燭植物中分離得到。

關(guān)鍵詞： 小果南燭， 化學(xué)成分， 三萜， 提取分離， 結(jié)構(gòu)鑒定

中圖分類號(hào)： Q946; R914.4 ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A ?文章編號(hào)： 1000-3142（2021）07-1082-08

Abstract： Lanostane triterpene is one of the main active components of Lyonia Nutt. In order to further study the functional material basis of Lyonia， and in combination with the application of ethnic and folk practices to Lyonia ovalifolia var. elliptica， 95% ethanol extract of the plant was treated with phytochemical techniques such as silica gel， MCI， Sephadex LH-20， HPLC， fourteen lanostane triterpenes and their glycosides were identified by the physical and chemical properties. These fourteen compounds were identified as mollic acid 3-O-α-L-arabinopyranoside （1）， mollic acid 3-O-β-D-glucopyranoside （2）， cycloart-3，7-dihydroxy-24-en-28-oic acid （3）， betulinicacid （4）， 1β， 3α， 11α-trihydroxy-urs-12-ene （5）， oleanderolide （6）， 3-O-cis-p-coumaroyl maslinic acid （7）， friedelin （8）， pomolic acid （9）， 2α， 3α-dihydroxy-urs-12-en-28-oic acid （10）， corosolic acid （11）， oleanolic acid （12）， ursolic acid （13）， tormentic acid （14）. Compounds 1-7 were isolated from this genus for the first time， and compounds 8-11， 14 are isolated from this plant for the first time.

Key words： Lyonia ovalifolia var. elliptica， chemical constituents， triterpenes， extraction and isolation， structure identification

小果南燭（Lyonia ovalifolia var. elliptica）為杜娟花科（Ericaceae）南燭屬（Lyonia Nutt）植物，又名小果珍珠花，生于陽坡灌木叢，主要分布于長江以南的湖南、廣西、四川、貴州、云南等地。該植物具有祛風(fēng)解毒、活血強(qiáng)筋等功效，民間用其治療閉合性骨折（貴州植物志編輯委員會(huì)，1990）?，F(xiàn)有的南燭屬植物化學(xué)成分主要有木藜蘆烷、異海松烷二萜、羊毛甾烷三萜及其他類三萜皂苷，此外還含有環(huán)烯醚萜、木脂素類、黃酮等成分（Sakakibara et al.，1974;Kashima et al.，2010;Zhao et al.，2018）;藥理作用主要表現(xiàn)為抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)鈉離子通道、昆蟲拒食、鎮(zhèn)痛、抗氧化（Lv et al.，2016，2017;Wu et al.，2011;Li et al.，2013a，b）等方面，其活性物質(zhì)主要為木藜蘆烷與異海松烷二萜，羊毛甾烷三萜及其皂苷。

小果南燭是南燭屬植物南燭（Lyonia ovalifolia）的變種，與其原植物種主要區(qū)別在于葉下有毛，葉較薄，紙質(zhì)，萼裂片三角狀卵形，果實(shí)較小。之前該植物的化學(xué)研究以分析毒性成分木藜蘆烷二萜（Yasue et al.，1970）為主，但其三萜類活性成分報(bào)道甚少。作為貴州苗族地區(qū)同胞偶有應(yīng)用的、具有小毒的植物藥，明確其物質(zhì)基礎(chǔ)是其用藥安全和研究開發(fā)的前提。為豐富小果南燭中三萜類成分，加深對(duì)其功效物質(zhì)的認(rèn)識(shí)和為進(jìn)一步研究開發(fā)提供參考，本文利用多種柱層析、半制備高效液相色譜等技術(shù)從小果南燭莖、葉的95%乙醇提取物中分離得到14個(gè)三萜及其皂苷（圖1），其中，化合物1-7為首次從南燭屬植物分離得到，化合物8-11，14為首次從小果南燭中分離得到。

1 材料與儀器

藥材于2017年9月采自貴州省貴陽市花溪區(qū)，經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)孫慶文教授鑒定為杜鵑花科南燭屬植物小果南燭（Lyonia ovalifolia var. elliptica）。

Bruker 600 MHz核磁共振測試儀（TMS內(nèi)標(biāo)）（美國Bruker公司）;500 MHz 液體核磁共振譜儀（中國科學(xué)院武漢物理數(shù)學(xué)研究所）;INOVA 400 MHz核磁共振測試儀（TMS內(nèi)標(biāo)）（美國Varian公司）;Hewlett Pakard 110質(zhì)譜儀（美國惠普公司）;漢邦NS4101型高效液相色譜儀（江蘇漢邦科技有限公司）;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀N-1100型（日本Eyela公司）;Sephadex LH-20（瑞士安發(fā)瑪生物技術(shù)公司）;硅膠（青島海洋化工有限公司）;高效液相色譜儀所用溶劑為色譜純，其他溶劑經(jīng)工業(yè)純重蒸處理后使用。

2 提取與分離

小果南燭莖、葉共14 kg，陰干粉粹后，用95% 乙醇回流提取3次，每次2 h，減壓濃縮回收溶劑后得到浸膏約4.2 kg。將浸膏分散在25 L蒸餾水中，分別用2倍體積的石油醚、乙酸乙酯萃取3次，減壓濃縮并回收溶劑，分別得到石油醚層浸膏（210 g）、乙酸乙酯層浸膏（500 g）。

對(duì)石油醚層浸膏進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚∶乙酸乙酯（體積比1∶0 ～ 0∶1）為洗脫體系梯度，洗脫得到Fr.1-Fr.31。小果南燭石油醚層Fr.19、Fr.20合并經(jīng)柱層析、洗滌、重結(jié)晶得到化合物12（200 mg）;Fr.16通過MCI柱子以除去其色素并對(duì)其甲醇部分進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚∶乙酸乙酯（體積比1∶0～0∶1） 進(jìn)行梯度洗脫，得到Fr.16.1-Fr.16.10。Fr.16.1生成結(jié)晶，對(duì)結(jié)晶部分進(jìn)行柱層析純化得到化合物8（40 mg）;對(duì)Fr.16.8進(jìn)行硅膠柱層析，以氯仿為洗脫劑得到4個(gè)流分Fr.16.8.1-Fr.16.8.4，F(xiàn)r.16.8.3以V（石油醚）∶V（丙酮）=10∶1進(jìn)行硅膠柱層析得到化合物4（30 mg）;Fr.23、Fr.24合并經(jīng)過硅膠柱層析得到Fr.23.1-Fr.23.15，F(xiàn)r.23.14經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜[V（三氯甲烷）∶V（甲醇）=1∶1]、制備型HPLC[V（乙腈）∶V（水）=85∶15]分離純化后得到化合物5（180 mg）、6（8 mg）、9（25 mg）。

乙酸乙酯層浸膏用硅膠柱層析進(jìn)行分離，以乙酸乙酯-甲醇（體積比1∶0～0∶1）梯度洗脫得到4個(gè)流分Fr.1-Fr.4。 Fr.3以二氯甲烷-甲醇（體積比1∶0～0∶1）得到Fr.3.1-Fr.3.18。Fr.3.14、Fr.3.15、 Fr.3.17分別結(jié)晶得到化合物1（1.25 g）、2（36 mg）、3（10 mg）; Fr.2以二氯甲烷-甲醇 （體積比1∶0～0∶1） 得到Fr.2.1～Fr.2.15， Fr.2.4結(jié)晶得到化合物13（90 mg）;Fr.2.7經(jīng)硅膠柱層析二氯甲烷∶甲醇（體積比1∶0～0∶1）分離得到Fr.2.7.1-Fr.2.7.5，其中Fr.2.7.2、Fr.2.7.4分別經(jīng)制備型高效液相色譜[V（乙腈）∶V（水）=20∶80]純化得到7（15 mg）、10（8 mg）;Fr.2.8經(jīng)硅膠柱層析[V（石油醚）∶V（丙酮）為1∶0～0∶1]后，F(xiàn)r.2.8.8經(jīng)MCI柱色譜[V（甲醇）∶V（水）=3∶7]、Sephadex LH-20柱色譜[V（三氯甲烷）∶V（甲醇）=1∶1]、制備型高效液相色譜[V（乙腈）∶V（水）為70∶30～95∶5]純化得到化合物11（8 mg）、14（75mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色粉末，ESI-MS m/z： 627 [M + Na]+ 。1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.38 （1H， d， J = 4.3 Hz， H-19）， 0.56 （1H， d， J = 4.3 Hz， H-19）， 0.85 （3H， d， J = 6.2 Hz， H-21）， 0.88 （3H， s， H-30）， 0.90 （3H， s， H-18）， 0.98 （3H， s， H-29）， 1.55 （3H， s， H-26）， 1.63 （3H， s， H-27）， 3.27-3.63 （H-2′， 3′， 4′， 5′）， 4.19 （1H， d， J = 5.6 Hz， H-1′）， 4.39 （1H， dd， J = 11.2， 3.4 Hz， H-3）， 5.06 （1H， t， J = 7.2 Hz， H-24）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 70.8 （C-1）， 40.1 （C-2）， 78.8 （C-3）， 51.7 （C-4）， 35.3 （C-5）， 20.0 （C-6）， 27.7 （C-7）， 47.4 （C-8）， 21.9 （C-9）， 32.4 （C-10）， 24.4 （C-11）， 36.6 （C-12）， 44.8 （C-13）， 48.5 （C-14）， 35.1 （C-15）， 28.7 （C-16）， 52.9 （C-17）， 18.0 （C-18）， 28.9 （C-19）， 36.1 （C-20）， 19.1 （C-21）， 36.0 （C-22）， 25.0 （C-23）， 124.9 （C-24）， 130.3 （C-25）， 25.5 （C-26）， 17.5 （C-27）， 177.9 （C-28）， 9.3 （C-29）， 18.1 （C-30）， 103.3 （C-1′）， 72.2 （C-2′）， 70.6 （C-3′）， 66.8 （C-4′）， 63.9 （C-5′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（Rogers，1989）報(bào)道一致，故鑒定化合物1為mollic acid 3-O-α-L-arabinopyranoside 。

化合物2 白色粉末，ESI-MS m/z： 657 [M + Na]+ 。1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.38 （1H， d， J = 4.3 Hz， H-19）， 0.56 （1H， d， J = 4.3 Hz， H-19）， 0.85 （3H， d， J = 6.2 Hz， H-21）， 0.89 （3H， s， H-30）， 0.90 （3H， s， H-18）， 0.98 （3H， s， H-29）， 1.55 （3H， s， H-26）， 1.63 （3H， s， H-27）， 3.19-4.31 （H-2′， 3′， 4′， 5′， 6′）， 4.40 （1H， dd， J = 12.1， 4.3 Hz， H-3）， 4.59 （1H， d， J = 7.6 Hz， H-1′）， 5.06 （1H， t， J = 7.3 Hz， H-24）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 73.3 （C-1）， 40.1 （C-2）， 79.0 （C-3）， 51.7 （C-4）， 35.3 （C-5）， 20.0 （C-6）， 27.7 （C-7）， 47.4 （C-8）， 21.9 （C-9）， 32.5 （C-10）， 24.5 （C-11）， 36.8 （C-12）， 44.8 （C-13）， 48.5 （C-14）， 35.3 （C-15）， 28.8 （C-16）， 53.0 （C-17）， 18.0 （C-18）， 28.8 （C-19）， 36.1 （C-20）， 19.1 （C-21）， 36.0 （C-22）， 24.8 （C-23）， 124.9 （C-24）， 130.3 （C-25）， 25.5 （C-26）， 17.5 （C-27）， 178.0 （C-28）， 9.3 （C-29）， 18.1 （C-30）， 104.2 （C-1′）， 75.1 （C-2′）， 71.1 （C-3′）， 70.6 （C-4′）， 67.9 （C-5′）， 60.2 （C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（Rogers & Thevan，1986）報(bào)道一致，故鑒定化合物2為mollic acid 3-O-β-D-glucopyranoside。

化合物3 ?白色粉末，ESI-MS m/z： 495 [M + Na]+。1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.29 （1H， d， J = 4.2 Hz， H-19）， 0.47 （1H， d， J = 4.2 Hz， H-19）， 0.79 （3H， d， J = 6.2 Hz， H-21）， 0.82 （3H， s， H-30）， 0.83 （3H， s， H-18）， 0.84 （3H， s， H-29）， 1.49 （3H， s， H-26）， 1.56 （3H， s， H-27）， 1.93 （1H， d， J = 7.9 Hz， H-8）， 2.37 （1H， dd， J = 12.6， 4.5 Hz， H-5）， 4.15 （1H， dd， J = 11.3， 3.0 Hz， H-3）， 5.00 （1H， t， J = 7.2 Hz， H-24）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 32.5 （C-1）， 29.0 （C-2）， 71.0 （C-3）， 51.6 （C-4）， 40.4 （C-5）， 35.3 （C-6）， 69.1 （C-7）， 53.8 （C-8）， 19.8 （C-9）， 24.5 （C-10）， 27.8 （C-11）， 35.5 （C-12）， 44.8 （C-13）， 47.6 （C-14）， 37.5 （C-15）， 25.0 （C-16）， 48.5 （C-17）， 17.5 （C-18）， 25.5 （C-19）， 35.9 （C-20）， 18.1 （C-21）， 36.5 （C-22）， 22.3 （C-23）， 125.0 （C-24）， 130.4 （C-25）， 17.9 （C-26）， 25.0 （C-27）， 178.3 （C-28）， 8.7 （C-29）， 19.0 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（Milena et al.，2009）報(bào)道一致，故鑒定化合物3為cycloart-3， 7-dihydroxy-24-en-28-oic acid。

化合物4 白色粉末，ESI-MS m/z： 479 [M + Na]+。1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.64 （3H， s， H-27）， 0.75 （3H， s， H-24）， 0.86 （3H， s， H-25）， 0.86 （3H， s， H-26）， 0.92 （3H， s， H-23）， 1.64 （3H， s， H-30）， 2.96 （1H， dd， J = 10.7， 5.3 Hz， H-3α）， 4.55 （1H， brs， H-29b）， 4.68 （1H， brs， H-29a）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 38.3 （C-1）， 27.2 （C-2）， 76.9 （C-3）， 38.6 （C-4）， 55.0 （C-5）， 18.0 （C-6）， 34.0 （C-7）， 40.3 （C-8）， 50.0 （C-9）， 36.8 （C-10）， 20.5 （C-11）， 25.2 （C-12）， 37.7 （C-13）， 42.1 （C-14）， 30.2 （C-15）， 31.8 （C-16）， 55.5 （C-17）， 46.7 （C-18）， 48.6 （C-19）， 150.4 （C-20）， 29.3 （C-21）， 36.4 （C-22）， 28.2 （C-23）， 15.8 （C-24）， 15.9 （C-25）， 16.0 （C-26）， 14.4 （C-27）， 177.4 （C-28）， 109.7 （C-29）， 19.0 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（武蕊娟等，2015）報(bào)道一致，故鑒定化合物4為白樺脂酸。

化合物5 ?白色粉末，ESI-MS m/z： 481 [M + Na]+。 1H NMR （500 MHz， CDCl3） δ： 0.81 （3H， s， H-28）， 0.82 （3H， s， H-26）， 0.89 （3H， d， J = 6.6 Hz， H-29）， 0.92 （3H， d， J = 6.5 Hz， H-30）， 1.00 （3H， s， H-25）， 1.08 （3H， s， H-27）， 1.12 （3H， s， H-24）， 1.20 （3H， s， H-23）， 2.07 （1H， d， J = 11.4 Hz， H-18）， 2.20 （1H， dt， J = 13.5， 3.6 Hz， H-1）， 4.18 （1H， dd， J = 8.2， 5.5 Hz， H-11）， 4.50 （1H， s， OH-11）; 13C NMR （125 MHz， CDCl3） δ： 70.9 （C-1）， 28.9 （C-2）， 78.8 （C-3）， 38.3 （C-4）， 55.4 （C-5）， 18.5 （C-6）， 33.4 （C-7）， 39.8 （C-8）， 54.7 （C-9）， 39.3 （C-10）， 70.4 （C-11）， 116.2 （C-12）， 145.2 （C-13）， 43.1 （C-14）， 27.7 （C-15）， 27.3 （C-16）， 34.0 （C-17）， 51.1 （C-18）， 41.2 （C-19）， 41.1 （C-20）， 31.4 （C-21）， 41.8 （C-22）， 27.8 （C-23）， 16.7 （C-24）， 15.8 （C-25）， 16.9 （C-26）， 24.4 （C-27）， 28.5 （C-28）， 18.1 （C-29）， 21.4 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（Topcu & Nulubele，1999）報(bào)道一致，故鑒定化合物5為1β， 3α， 11α-trihydroxy-urs-12-ene。

化合物6 ?白色粉末，ESI-MS m/z： 495 [M + Na]+。1H NMR （600 MHz， CDCl3） δ： 0.78 （3H， s， H-24）， 0.88 （3H， s， H-25）， 0.90 （3H， s， H-30）， 0.98 （3H， s， H-29）， 0.99 （3H， s， H-23）， 1.14 （3H， s， H-26）， 1.30 （3H， s， H-27）， 1.72 （ddd， J = 13.0 ， 3.4， 3.4 Hz， H-1）， 2.04 （ 1H， m， H-18）， 2.13 （ddd， J = 13.4， 13.4， 5.9 Hz， H-16）， 3.22 （1H， dd， J = 10.9， 5.1 Hz， H-3）， 3.89 （1H， brs， H-12）; 13C NMR （150 MHz， CDCl3） δ： 39.0 （C-1）， 27.6 （C-2）， 78.9 （C-3）， 39.0 （C-4）， 55.3 （C-5）， 17.9 （C-6）， 34.1 （C-7）， 42.3 （C-8）， 44.8 （C-9）， 36.7 （C-10）， 29.0 （C-11）， 76.7 （C-12）， 90.8 （C-13）， 42.4 （C-14）， 28.2 （C-15）， 21.3 （C-16）， 44.8 （C-17）， 51.3 （C-18）， 39.7 （C-19）， 31.8 （C-20）， 34.4 （C-21）， 27.3 （C-22）， 28.2 （C-23）， 15.5 （C-24）， 16.5 （C-25）， 18.8 （C-26）， 18.7 （C-27）， 180.0 （C-28）， 33.4 （C-29）， 24.0 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（Fu et al.，2005）報(bào)道一致，故鑒定化合物6為oleanderolide。

化合物7 ?白色粉末，ESI-MS m/z： 641 [M + Na]+ 。1H NMR （600 MHz， CD3OD） δ： 0.78 （3H， s， H-26）， 0.85 （3H， s， H-23）， 0.88 （3H， s， H-29）， 0.95 （6H， s， H-24， 30）， 0.99 （3H， s， H-25）， 1.16 （3H， s， H-27）， 2.82 （1H， m， H-18）， 3.80 （1H， m， H-2）， 4.54 （1H， d， J = 3.5 Hz， H-3）， 5.22 （1H， t， J = 4.6 Hz， H-12）， 5.81 （1H， d， J = 12.7 Hz， H-2′）， 6.71 （2H， d， J = 8.6 Hz， H-3′′， 5′′）， 6.84 （1H， d， J = 12.8 Hz， H-3′）， 7.60 （2H， d， J = 8.6 Hz， H-2′′， 6′′）; 13C NMR （150 MHz， CD3OD） δ： 47.7 （C-1）， 67.5 （C-2）， 85.2 （C-3）， 40.6 （C-4）， 56.4 （C-5）， 19.4 （C-6）， 33.6 （C-7）， 40.4 （C-8）， 48.5 （C-9）， 39.5 （C-10）， 24.0 （C-11）， 124.3 （C-12）， 144.8 （C-13）， 43.1 （C-14）， 28.8 （C-15）， 24.6 （C-16）， 48.2 （C-17）， 42.8 （C-18）， 47.3 （C-19）， 31.5 （C-20）， 35.0 （C-21）， 33.9 （C-22）， 29.6 （C-23）， 17.7 （C-24）， 17.0 （C-25）， 18.2 （C-26）， 26.4 （C-27）， 181.0 （C-28）， 33.8 （C-29）， 24.0 （C-30）， 168.6 （C-1′）， 117.4 （C-2′）， 140.1 （C-3′）， 129.4 （C-1′′）， 133.6 （C-2′′）， 115.8 （C-3′′）， 159.8 （C-4′′）， 115.8 （C-5′′）， 133.6 （C-6′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（許瓊明等，2010）報(bào)道一致，故鑒定化合物7為（Z）-馬斯里酸-3-O-對(duì)香豆酸酯。

化合物8 針狀結(jié)晶（氯仿），ESI-MS m/z： 449 [M + Na]+。1H NMR （400 MHz， CDCl3） δ： 0.72 （3H， s， H-24）， 0.87 （3H， d， J = 6.4 Hz， H-25）， 0.96 （3H， s， H-29）， 1.01 （3H， s， H-30）， 1.01 （3H， s， H-26）， 1.05 （3H， s， H-27）， 1.17 （3H， s， H-28）; 13C NMR （100 MHz， CDCl3） δ： 22.0 （C-1）， 41.5 （C-2）， 213.2 （C-3）， 58.3 （C-4）， 42.0 （C-5）， 41.2 （C-6）， 18.2 （C-7）， 53.0 （C-8）， 37.5 （C-9）， 59.5 （C-10）， 35.5 （C-11）， 30.6 （C-12）， 39.7 （C-13）， 38.1 （C-14）， 32.3 （C-15）， 36.0 （C-16）， 29.8 （C-17）， 42.6 （C-18）， 35.2 （C-19）， 28.0 （C-20）， 32.8 （C-21）， 39.1 （C-22）， 6.9 （C-23）， 14.7 （C-24）， 18.0 （C-25）， 20.1 （C-26）， 18.7 （C-27）， 32.0 （C-28）， 35.0 （C-29）， 37.4 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（徐菁等，2014）報(bào)道一致，故鑒定化合物8為木栓酮。

化合物9 白色粉末，ESI-MS m/z： 495 [M + Na]+。1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.56 （3H， s， H-25）， 0.58 （3H， s， H-23）， 0.73 （3H， d， J = 6.0 Hz， H-30）， 0.78 （3H， s， H-26）， 0.97 （3H， s， H-24）， 1.15 （3H， s， H-29）， 1.47 （3H， s， H-27）， 2.25 （1H， s， H-18）， 3.62 （1H， m， H-3α）， 5.04 （1H， s， H-12）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 38.5 （C-1）， 27.0 （C-2）， 77.1 （C-3）， 38.3 （C-4）， 55.0 （C-5）， 18.2 （C-6）， 32.8 （C-7）， 41.2 （C-8）， 47.0 （C-9）， 36.7 （C-10）， 23.2 （C-11）， 126.9 （C-12）， 138.7 （C-13）， 41.5 （C-14）， 28.3 （C-15）， 25.3 （C-16）， 46.8 （C-17）， 53.4 （C-18）， 71.8 （C-19）， 37.5 （C-20）， 25.9 （C-21）， 38.2 （C-22）， 28.2 （C-23）， 15.2 （C-24）， 16.1 （C-25）， 16.8 （C-26）， 24.1 （C-27）， 179.0 （C-28）， 26.6 （C-29）， 16.5 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（An et al.，2005）報(bào)道一致，故鑒定化合物9為pomolic acid。

化合物10 白色粉末，ESI-MS m/z： 495 [M + Na]+。1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.71 （3H， s， H-25）， 0.75 （3H， s， H-24）， 0.79 （3H， d， J = 6.5 Hz， H-30）， 0.86 （3H， d， J = 6.5 Hz， H-29）， 0.88 （3H， s， H-26）， 0.89 （3H， s， H-27）， 1.02 （3H， s， H-23）， 2.09 （1H， d， J = 11.3 Hz， H-18）， 3.74 （1H， d， J = 8.7 Hz， H-3β）， 3.99 （1H， m， H-2β）， 5.11 （1H， s， H-12）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 38.0 （C-1）， 64.7 （C-2）， 77.9 （C-3）， 38.5 （C-4）， 47.6 （C-5）， 17.6 （C-6）， 32.7 （C-7）， 38.5 （C-8）， 46.9 （C-9）， 37.8 （C-10）， 23.4 （C-11）， 123.5 （C-12）， 139.6 （C-13）， 41.8 （C-14）， 28.9 （C-15）， 21.8 （C-16）， 46.7 （C-17）， 52.3 （C-18）， 40.2 （C-19）， 37.4 （C-20）， 29.1 （C-21）， 35.3 （C-22）， 28.9 （C-23）， 23.4 （C-24）， 16.3 （C-25）， 17.6 （C-26）， 22.0 （C-27）， 179.2 （C-28）， 17.0 （C-29）， 21.2 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（王福東等，2005）報(bào)道一致，故鑒定化合物10為2α， 3α-二羥基烏蘇-12-烯-28-酸。

化合物11 白色粉末，ESI-MS m/z： 495 [M + Na] +。1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.39 （3H， s， H-24）， 0.45 （3H， s， H-25）， 0.50 （3H， d， J = 6.5 Hz， H-30）， 0.56 （3H， d， J = 6.5 Hz， H-29）， 0.60 （3H， s， H-26）， 0.61 （3H， s， H-27）， 0.72 （3H， s， H-23）， 4.12 （1H， d， J = 8.9 Hz， H-3α）， 4.81 （1H， m， H-2α）， 5.38 （1H， s， H-12）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 47.2 （C-1）， 67.5 （C-2）， 82.6 （C-3）， 38.8 （C-4）， 55.0 （C-5）， 18.3 （C-6）， 32.9 （C-7）， 40.0 （C-8）， 47.3 （C-9）， 37.8 （C-10）， 23.2 （C-11）， 124.6 （C-12）， 138.7 （C-13）， 42.0 （C-14）， 27.7 （C-15）， 23.5 （C-16）， 48.8 （C-17）， 52.7 （C-18）， 38.7 （C-19）， 38.5 （C-20）， 30.6 （C-21）， 36.6 （C-22）， 29.0 （C-23）， 17.4 （C-24）， 17.4 （C-25）， 17.5 （C-26）， 24.3 （C-27）， 178.6 （C-28）， 21.3 （C-29）， 16.8 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（陳龍勝等，2008）報(bào)道一致，故鑒定化合物11為科羅索酸。

化合物12 白色粉末，ESI-MS m/z： 479 [M + Na]+。1H NMR （600 MHz， CDCl3） δ： 0.74 （3H， s， H-24）， 0.77 （3H， s， H-25）， 0.90 （3H， s， H-29）， 0.91 （3H， s， H-30）， 0.92 （3H， s， H-23）， 0.98 （3H， s， H-23）， 1.13 （3H， s， H-26）， 2.82 （1H， m， H-18）， 3.22 （1H， m， H-3）， 5.27 （1H， brs， H-12）; 13C NMR （150 MHz， CDCl3） δ： 38.7 （C-1）， 27.5 （C-2）， 79.4 （C-3）， 39.1 （C-4）， 55.6 （C-5）， 18.6 （C-6）， 32.9 （C-7）， 39.6 （C-8）， 48.0 （C-9）， 37.4 （C-10）， 23.2 （C-11）， 123.0 （C-12）， 144.0 （C-13）， 41.2 （C-14）， 27.9 （C-15）， 23.6 （C-16）， 47.0 （C-17）， 42.0 （C-18）， 46.2 （C-19）， 31.0 （C-20）， 34.1 （C-21）， 32.8 （C-22）， 28.4 （C-23）， 15.7 （C-24）， 15.9 （C-25）， 17.5 （C-26）， 26.3 （C-27）， 184.0 （C-28）， 33.4 （C-29）， 23.9 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（劉普等，2006）報(bào)道一致，故鑒定化合物12為齊墩果酸。

化合物13 白色粉末，ESI-MS m/z： 479 [M + Na]+。 1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.66 （3H， s， H-24）， 0.74 （3H， s， H-25）， 0.80 （3H， d， J = 6.4 Hz， H-29）， 0.86 （3H， d， J = 4.0 Hz， H-30）， 0.88 （3H， s， H-23）， 0.90 （3H， s， H-26）， 1.03 （3H， s， H-27）， 2.09 （1H， d， J = 11.3 Hz， H-18）， 3.02 （1H， dd， J = 11.1， 5.0 Hz， H-3）， 5.11 （1H， t， J = 3.7 Hz， H-12）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 36.5 （C-1）， 27.0 （C-2）， 79.2 （C-3）， 38.2 （C-4）， 54.8 （C-5）， 18.0 （C-6）， 32.7 （C-7）， 40.1 （C-8）， 47.0 （C-9）， 38.5 （C-10）， 23.3 （C-11）， 124.6 （C-12）， 138.2 （C-13）， 41.7 （C-14）， 28.3 （C-15）， 23.8 （C-16） ， 46.8 （C-17） ， 52.4 （C-18）， 38.4 （C-19）， 38.4 （C-20）， 30.2 （C-21）， 36.3 （C-22）， 27.6 （C-23）， 15.2 （C-24）， 16.1 （C-25）， 17.0 （C-26）， 22.9 （C-27）， 178.3 （C-28）， 16.9 （C-29）， 21.1 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（李火云等，2014）報(bào)道一致，故鑒定化合物13為熊果酸。

化合物14 白色粉末，ESI-MS m/z： 511 [M + Na]+ 。1H NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 0.62 （3H， s， H-24）， 0.64 （3H， s， H-25）， 0.77 （3H， d， J = 6.4 Hz， H-29）， 0.83 （3H， d， J = 4.0 Hz， H-30）， 0.85 （3H， s， H-23）， 1.01 （3H， s， H-26）， 1.21 （3H， s， H-27）， 2.30 （1H， s， H-18）， 2.67 （1H， dd， J = 9.4， 3.8 Hz， H-3）， 3.70 （1H， m， H-2）， 5.10 （1H， s， H-12）; 13C NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 46.8 （C-1）， 67.2 （C-2）， 82.4 （C-3）， 39.0 （C-4）， 54.9 （C-5）， 18.2 （C-6）， 32.7 （C-7）， 40.4 （C-8）， 47.0 （C-9）， 37.7 （C-10）， 23.3 （C-11）， 126.8 （C-12）， 138.7 （C-13）， 41.5 （C-14）， 28.1 （C-15）， 25.2 （C-16）， 47.0 （C-17）， 53.2 （C-18）， 71.7 （C-19）， 41.2 （C-20）， 26.0 （C-21）， 37.3 （C-22）， 28.9 （C-23）， 16.4 （C-24）， 16.4 （C-25）， 17.2 （C-26）， 24.0 （C-27）， 177.7 （C-28）， 26.4 （C-29）， 16.7 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)（鄭光海和樸惠順，2012）報(bào)道一致，故鑒定化合物14為委陵菜酸。

4 討論與結(jié)論

本研究從小果南燭莖、葉乙醇提取物中獲得14個(gè)三萜及其皂苷類物質(zhì)，其中，化合物1-7為首次從南燭屬植物分離得到，化合物8-11，14首次從小果南燭分離得到。

從該屬植物化學(xué)研究報(bào)道來看，羊毛甾烷三萜是該屬植物中主要的三萜類型，且具有較好的抗惡性細(xì)胞增殖活性（Teng et al.，2018），但該類成分未從小果南燭中分離得到。本研究發(fā)現(xiàn)的環(huán)阿屯烷三萜（1-3）為首次從南燭屬植物分離得到，該類成分對(duì)人乳腺癌、肝癌、前列腺癌細(xì)胞系具有較好的抑制作用及抗骨質(zhì)疏松和抗補(bǔ)體活性（Yang et al.，2016;李延勛等， 2017）?；衔?在小果南燭中含量較大（克級(jí)），且能有效抑制Ca-Ski宮頸癌細(xì)胞的生長（Wong et al.，2012）。這不僅可作為該藥材質(zhì)量標(biāo)志物候選物質(zhì)用于質(zhì)量控制，還可作為該植物化學(xué)分類的重要參考。此外，化合物2對(duì)經(jīng)熱誘導(dǎo)和化學(xué)誘導(dǎo)的小鼠傷害性疼痛以及大鼠足跖腫脹具有抑制作用（Ojewole，2008）;化合物3對(duì)革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌及病原真菌具有抑制作用（Milena et al.，2009）;化合物11、12、13具有抗炎（鞠建華等，2003）、抗腫瘤（Chiang et al.，2005）等活性。本研究結(jié)果豐富了南燭屬植物三萜成分類型，為小果南燭的后續(xù)研究與應(yīng)用提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

AN RB， KIM HC， JEONG GS， et al.， 2005. Constituents of the aerial parts of Agrimonia pilosa [J]. Nat Prod Sci， 11 （4）： 196-198.

CHEN LS， L Y， XU SW， et al.， 2008. Study on the triterpene acids in fruit of Crataegus pinnatifida [J]. Lishizhen Med Mat Med Res， 19（12）： 2909-2910. [陳龍勝， 呂楊， 許舒雯， 等， 2008. 山楂中三萜酸成分的研究 [J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥， 19（12）： 2909-2910.]

Editorial Committee of Flora of Guizhou， 1990. Flora of Guizhou [M]. Guiyang： Guizhou Peoples Publishing House， 3： 260-262. [貴州植物志編輯委員會(huì)， 1990. 貴州植物志 [M]. 貴陽： 貴州人民出版社， 3： 260-262.]

CHIANG YM， CHANG JY， KUO CC， et al.， 2005. Cytotoxic triterpenes from the aerial roots of Ficus microcarpa [J]. Phytochemistry， 66： 495-501.

FU LW， ZHANG SJ， LI N， et al.， 2005. Three new triterpenes from Nerium oleander and biological activity of the isolated compounds [J]. J Nat Prod， 68（2）： 198-206.

JU JH， ZHOU L， LIN G， et al.， 2003. Studies on constituents of triterpene acids from Eriobotrya japonica and their anti-inflammatory and antitussive effects [J]. Chin Pharm J， 38（10）： 752-757. [鞠建華， 周亮， 林耕， 等， 2003. 枇杷葉中三萜酸類成分及其抗炎、鎮(zhèn)咳活性研究 [J]. 中國藥學(xué)雜志， 38（10）： 752-757.]

KASHIMA K， SANO K， YUN YS， et al.， 2010. Ovafolinins A-E， five new lignans from Lyonia ovalifolia [J]. Chem Pharm Bull， 58（2）： 191-194.

LI HY， JIAO K， ZHANG P， et al.， 2014. Chemical constituents from Isodon excisoides [J]. Chin Trad Herb Drug， 45（2）： 154-160. [李火云， 焦珂， 張鵬， 等， 2014. 擬缺香茶菜化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥， 45（2）： 154-160.]

LI Y， LIU YB， ZHANG JJ， et al.， 2013a. Grayanoids from the Ericaceae family： structures， biological activities and mechanism of action [J]. Phytochem Rev， 12（2）： 305-325.

LI Y， LIU YB， ZHANG JJ， et al.， 2013b. Mollolide A， a diterpenoid with a new 1， 10： 2， 3-disecograyanane skeleton from the roots of Rhododendron molle [J]. Org Lett， 15（12）： 3074-3077.

LI YX， LI ZP， SU YF， 2017. Research progress on secocycloartane triterpenoids [J]. Chin Trad Herb Drug， 48（15）： 3198-3209. [李延勛， 栗章彭， 蘇艷芳， 2017. 裂環(huán)環(huán)阿屯烷型三萜的研究進(jìn)展 [J]. 中草藥， 48（15）： 3198-3209.]

LIU P， DUAN HQ， PAN Q， et al.， 2006. Triterpenes from herb of Potentilla chinesis [J]. Chin J Chin Mat Med， 31（22）： 187. [劉普， 段宏泉， 潘勤， 等， 2006. 委陵菜三萜成分研究 [J]. 中國中藥雜志， 31（22）： 187.]

LV XJ， LI Y， MA SG， et al.， 2016. Antiviral triterpenes from the twigs and leaves of Lyonia ovalifolia [J]. J Nat Prod， 79（11）： 2824-2837.

LV XJ， LI Y， MA SG， et al.， 2017. Isopimarane and nor-diterpene glucosides from the twigs and leaves of Lyonia ovalifolia [J]. Tetrahedron， 73（6）： 776-784.

MILENA P， POPOVA A， IOANNA B， et al.， 2009. Terpenes with antimicrobial activity from Cretan propolis [J]. Phytochemistry， 70（10）： 1262-1271.

OJEWOLE JAO， 2008. Analgesic and antiinflammatory effects of mollic acid glucoside， a 1α-hydroxycycloartenoid saponin extractive from Combretum molle R. Br. ex G. Don （Combretaceae） Leaf [J]. Phytother Res， 22： 30-35.

ROGERS CB， THEVAN I， 1986. Identification of the mollic acid α-L-arabinoside， a 1α-hydroxycycloartenoid from Combretum molle leaves [J]. Phytochemistry， 25（7）： 1759-1761.

ROGERS CB， 1989. Isolation of the 1α-hydroxycycloartenoid mollic acid α-L-arabinoside from Combretum edwardsii leaves [J]. Phytochemistry， 28（1）： 279-281.

SAKAKIBARA J， HOTTA Y， YASUE M， 1974. Studies on the constituents of Lyonia ovalifolia Drude var. elliptica Hand.-Mazz. XVII. structure of a triterpene arabinoside， ovalifolioside. 2 [J]. PSJ， 94（2）： 170-175.

SU Y， CHI WC， WU L， et al.， 2016. Photochemistry and pharmacology of 9， 19-cyclolanostane glycosides isolated from genus Cimicifuga [J]. Chin J Nat Med， 14（10）： 721-731.

TENG Y， ZHANG HQ， ZHOU JF， et al.， 2017. Triterpenoid glycosides from the leaves of Lyonia ovalifolia var. hebecarpa and their antitumor activities [J]. Chin J Org Chem， 37（9）： 2416-2422. [滕楊， 張涵琪， 周俊飛， 等， 2017. 毛果南燭中三萜皂苷化合物及其抗腫瘤活性 [J]. 有機(jī)化學(xué)， 37（9）： 2416-2422.]

TENG Y， ZHANG HQ， ZHOU JF， et al.， 2018. Hebecarposides A-K， antiproliferative lanostane-type triterpene glycosides from the leaves of Lyonia ovalifolia var. hebecarpa [J]. Phytochemistry， 151： 32-41.

TOPCU G， NULUBELE A， 1999. Terpenoids from Salvia kronenburgii [J]. J Nat Prod， 62（12）： 1605-1608.

WANG FD， DING L， WANG HQ， 2005. Studies on triterpenoid constituents from Rabdosia japonica var. galaucocalyx [J]. Chin J Chin Mat Med， 30（24）： 1929-1932. [王福東， 丁蘭， 汪漢卿， 2005. 蘭萼香茶菜三萜成分研究 [J] . 中國中藥雜志， 30（24）： 1929-1932.]

WONG YH， ABDUL KADIR H， LING SK， 2012. Induction of mitochondria-mediated apoptosis in ca-ski human cervical cancer cells triggered by mollic acid arabinoside isolated from Leea indica [J]. Evid-Based Compl Alt， （5）： 11.

WU RJ， SONG LQ， TAN L， et al.， 2015. Chemical constituents from Paliurus ramosissimus [J]. Chin Trad Herb Drug， 46（19）： 2834-2838. [武蕊娟， 宋聯(lián)強(qiáng)， 譚鐳， 等， 2015. 馬甲子的化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥， 46（19）： 2834-2838.]

WU ZY， LI HZ， WANG WG， et al.， 2011. Lyonin A， a new 9， 10-Secograyanotoxin from Lyonia ovalifolia [J]. Chem Biodivers， 8（6）： 1182-1187.

XU J， GAO HY， MA SL， et al.， 2014. Chemical constituents and bioactivity of Kalimeris indica [J]. Chin Trad Herb Drugs， 45（22）： 3246-3250. [徐菁， 高鴻悅， 馬淑麗， 等， 2014. 馬蘭化學(xué)成分及生物活性研究 [J]. 中草藥， 45（22）： 3246-3250.]

XU QM， TANG LH， LI X， et al.， 2010. Isolation and identification of 3-O-p-coumaroyloxyl pentacyclic triterpenoids from Lysimachia clethroides Duby [J]. Chin Pharm J， 45（11）： 825-828. [許瓊明， 唐麗華， 李夏， 等， 2010. 珍珠菜中五環(huán)三萜-3-O-對(duì)香豆酸酯類化學(xué)成分的分離鑒定 [J]. 中國藥學(xué)雜志， 45（11）： 825-828.]

YASUE M， SAKAKIBARA J， KAIYA T， 1970. Studies on the consituents of Lyonia ovalifolia Drude varelliptica Hand.-Mazz. X. on the consitutents of the flowers] [J]. PSJ， 90（9）： 1174-1177.

ZHAO DR， SU LH， LI RT， et al.， 2018. Chemical constituents from the twigs and leaves of Lyonia ovalifolia [J]. Biochem System Ecol， 78： 1-4.

ZHENG GH， PIAO HS， 2012. Study on chemical constituents from Potentilla supina [J]. Chin Trad Herb Drug， 43（7）： 1285-1288. [鄭光海， 樸惠順， 2012. 朝天委陵菜化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥， 43（7）： 1285-1288.]

（責(zé)任編輯 何永艷）