妊娠期糖尿病患者基因DNA甲基化的研究進展

吳 丹，葛莉萍

廣西壯族自治區(qū)南寧市紅十字會醫(yī)院產(chǎn)科，南寧 530012

妊娠期糖尿?。╣estational diabetes mellitus，GDM）為患者妊娠前糖代謝正常、妊娠期出現(xiàn)的糖耐量異常；依據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)及人群不同，其發(fā)病率為10%～15%［1］。對于母體而言，GDM患者孕期易并發(fā)子癇前期，且遠期罹患2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）及代謝性疾病的風(fēng)險大大增加；對于子代而言，其出現(xiàn)巨大兒、早產(chǎn)、胎兒生長受限、圍產(chǎn)期死亡及新生兒低血糖等并發(fā)癥的概率明顯增加，且對于胎兒的代謝影響可延續(xù)至成年甚至終生［2］，這也是此前易被忽視的GDM危害性。近年來隨著對GDM研究的不斷深入，“胎兒編程”和“胎源性成人疾病”的概念愈來愈受到重視。研究［3］發(fā)現(xiàn)，胎兒早期暴露于GDM母體宮內(nèi)高血糖環(huán)境后，機體代謝模式發(fā)生重編程，其影響可延續(xù)至子代成年［3］。表觀遺傳修飾在“胎兒編程”理論中被認為具有重要的作用［4］，而DNA甲基化作為研究最多的表觀遺傳機制，近年來在GDM中的報道逐步增多。

DNA甲基化指在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下，基因組胞嘧啶和鳥嘧啶組成的串聯(lián)重復(fù)序列（CpG）中的胞嘧啶5'碳位共價鍵結(jié)合一個甲基基團；其通常發(fā)生在基因啟動子區(qū)，可在不改變DNA序列的情況下，調(diào)控基因表達水平。研究［5］發(fā)現(xiàn)，DNA甲基化參與癌癥、心血管疾病、糖尿病等多種疾病的發(fā)生，干預(yù)其對特定基因的遺傳修飾可成為疾病的治療策略，且對外周血中循環(huán)DNA的甲基化水平進行檢測可望為疾病的預(yù)測與診斷提供幫助。GDM患者胎盤、外周血、臍血及脂肪組織等標(biāo)本中均出現(xiàn)部分基因甲基化水平的改變，同時GDM患者子代機體組織標(biāo)本中亦存在某些基因甲基化水平的差異。這些差異引起的基因表達水平與遺傳信息的改變，可能對GDM的發(fā)病、并發(fā)癥的發(fā)生及遠期代謝性疾病罹患風(fēng)險的增加具有重要的影響。本文對目前GDM中相關(guān)基因的DNA甲基化研究進展進行綜述，以期為臨床上GDM新型診斷和治療手段的開發(fā)提供啟示。

1 GDM患者基因的DNA甲基化

1.1 胎盤組織

胎盤是孕期母體供應(yīng)胎兒營養(yǎng)物質(zhì)、母胎交流的重要樞紐，可分泌多種激素，對維持胎兒的正常生長非常重要。GDM患者宮內(nèi)高血糖環(huán)境可促使胎盤組織形態(tài)、結(jié)構(gòu)及功能發(fā)生異常改變，對胎兒的生長與代謝模式造成直接影響，而DNA甲基化的遺傳修飾方式在其中的作用不容忽視。研究表明，GDM患者胎盤組織DNA甲基化水平發(fā)生改變的基因功能多與葡萄糖代謝、生長調(diào)控、脂質(zhì)代謝等相關(guān)。如GDM胎盤中非典型notch配體1（δ likenon-canonical notch ligand 1，DLK1）甲基化水平異常與母體葡萄糖耐量試驗2 h血糖水平和新生兒出生體質(zhì)量具有相關(guān)性［6］；過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助激活因子1A（peroxisome proliferator activated receptorγ coactivator 1α，PPARGC1A）與胰十二指腸同源異型基因1（pancreatic and duodenal homeobox 1，PDX1）甲基化水平與胎兒葡萄糖代謝均具有一定關(guān)聯(lián)［7］；胰島素樣生長因子2（insulin-like growth factor 2，IGF2）的甲基化水平改變可影響胎兒發(fā)育和出生體質(zhì)量［8］；PPARGC1A啟動子甲基化水平改變與母體餐后2 h血糖水平及新生兒瘦素水平相關(guān)［9-10］；胎盤脂蛋白酯酶（lipoprotein lipase，LPL）基因甲基化水平可影響母體和胎兒的脂質(zhì)譜［11］及子代5歲時的身體成分［12］。此外，另有研究［13］發(fā)現(xiàn)，中胚層特異性轉(zhuǎn)錄子（mesoderm specific transcript，MEST）的異常表觀遺傳修飾可能會導(dǎo)致GDM患者的子代終生肥胖。6-磷酸葡萄糖脫氫酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD）基因的異常甲基化與高血糖癥、氧化應(yīng)激相關(guān)，而胰島素樣生長因子軸相關(guān)分子的甲基化改變則直接增加巨大兒的發(fā)生風(fēng)險［14］。此外，GDM環(huán)境還可以通過DNA甲基化和基因表達水平變化使胎兒胎盤內(nèi)皮細胞形態(tài)與屏障功能發(fā)生損傷［15］。研究者［16］基于生物信息學(xué)工具，發(fā)現(xiàn)GDM患者胎盤組織中低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1b（LDL receptor related protein 1b，LRP1B）等基因可能為胎兒發(fā)生代謝模式重編程的候選基因?？梢?，GDM患者胎盤組織中DNA甲基化水平的變化參與多種病理過程。

1.2 臍血

除胎盤外，臍帶對胎兒的正常生長亦發(fā)揮著不可替代的作用。臍血標(biāo)本信息可直接反映胎兒部分相關(guān)指標(biāo)的變化。GDM患者臍血中部分基因啟動子區(qū)域甲基化水平改變引起的基因表達異常，與機體組織多種生物學(xué)功能的損害相關(guān)。臍血是臨床上預(yù)測胎兒并發(fā)癥的發(fā)生、胎兒遠期機體代謝模式的重要媒介。如臍血瘦素甲基化水平與巨大兒的發(fā)生相關(guān)［17］；IGF2的甲基化水平改變與胎兒出生體質(zhì)量具有相關(guān)性［8］；巨大兒臍血中Rho蛋白鳥苷酸交換因子11（Rho guanine nucleotide exchange factor 11，ARHGEF11）基因的甲基化水平明顯降低，與新生兒血糖水平和出生體質(zhì)量呈負相關(guān)［18］。研究［19］還發(fā)現(xiàn)，GDM可引起1型糖尿病、主要組織相容性復(fù)合體和神經(jīng)元發(fā)育相關(guān)途徑基因發(fā)生表觀遺傳修飾，這些基因通過DNA甲基化方式參與胎兒代謝編程，對胎兒的生長和發(fā)育產(chǎn)生影響。研究［20］發(fā)現(xiàn)，人缺氧誘導(dǎo)因子α（hypoxia inducible factor 3 subunitα，HIF3A）等基因可能在GDM效應(yīng)傳遞給子代的過程中發(fā)揮重要作用。此外，臍血中基因DNA甲基水平的改變還可以作為GDM患者診斷的間接指標(biāo)。如孕產(chǎn)婦GDM的發(fā)生與臍血自閉癥相關(guān)嗅覺受體家族2亞家族L成員13（olfactory receptor family 2 subfamily L member 13，OR2L13）基因和細胞色素P450同工酶2E1（cytochrome P450 family 2 subfamily E member 1，CYP2E1）基因的甲基化水平降低有關(guān)［21］。研究［22］還發(fā)現(xiàn)，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8（COP9 signalosome subunit 8，COPS8）等基因在母體發(fā)生GDM前已出現(xiàn)甲基化水平的變化，顯示DNA甲基化作為臨床生物標(biāo)志物的巨大潛力。與此同時，DNA甲基化方式參與調(diào)節(jié)臍血淋巴細胞內(nèi)丙二酰-輔酶A-?；d體蛋白轉(zhuǎn)氨酶網(wǎng)絡(luò)，影響細胞脂肪酸合成及胰島素抵抗［23］；在胎兒臍血中分離出的淋巴細胞中，G蛋白α亞基（GNAS complex locus，GNAS）基因甲基化水平較高，其可能與GDM母體與子代代謝疾病風(fēng)險增加相關(guān)［24］。

1.3 外周血

目前，關(guān)于GDM患者外周血中全基因組DNA甲基化水平是否存在差異尚有爭議。研究［25］表明，患或不患GDM的女性外周血全基因組DNA甲基化水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義，且基因DNA甲基化水平與空腹血糖水平及胰島素濃度均無關(guān)。而另有研究［26］顯示，GDM組和非GDM組患者之間共有1 046個CpG位點（與939個基因相關(guān)）甲基化水平具有差異性，這些基因富集于與GDM相關(guān)的途徑，例如胰島素抵抗、葡萄糖代謝和炎癥；其中前5個CpG位點的DNA甲基化在GDM組和非GDM組間顯示出不同的甲基化模式，并且與母體外周血的血糖水平相關(guān)；其中一個CpG位點定位于鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1（calmodulin binding transcription activator 1，CAMTA1）基因；該基因已被證明可調(diào)節(jié)胰島素的產(chǎn)生和分泌。此外，不同GDM嚴(yán)重程度的患者孕早期外周血中DNA甲基化水平亦存在差異［27］，且在GDM患者母體外周血中發(fā)現(xiàn)白介素10（interleukin 10，IL10）的甲基化水平降低，濃度升高［28］。

1.4 脂肪與肌肉組織

與T2DM相似，GDM可影響患者脂肪與肌肉組織對胰島素的敏感性。研究［29］表明，與正常糖耐量患者相比，GDM患者內(nèi)臟脂肪組織中腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）和細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3（suppressor of cytokine signaling 3，SOCS3）的mRNA表達水平顯著增加，伴隨著各自啟動子甲基化模式的特異性改變。同時，大網(wǎng)膜脂肪組織中HIF3A啟動子CpG島的甲基化可促進GDM的胰島素抵抗［30］，且GDM患者和子代的脂肪組織中胰島素受體表達的減少亦與其DNA甲基化改變有關(guān)［31］。脂肪組織和血細胞中脂聯(lián)素（adiponectin， C1Q and collagen domain containing，ADIPOQ）基因表達和甲基化的改變可影響GDM的病程與新生兒結(jié)局［32］?；诨虮磉_譜和甲基化譜的綜合分析發(fā)現(xiàn)，間皮素（mesothelin，MSLN）基因的表達與其甲基化水平之間呈現(xiàn)典型的負相關(guān)，該基因可參與內(nèi)臟脂肪組織的抗原加工、提呈及GDM相關(guān)通路的調(diào)控［33］。這些研究顯示，GDM患者外周組織胰島素抵抗的出現(xiàn)很可能源于DNA甲基化的表觀遺傳修飾。

2 子代基因的DNA甲基化

2.1 脂肪組織、胰腺和胰島

DNA甲基化異常除了在GDM母體中出現(xiàn)外，在子代中同樣存在，并影響子代各組織的功能。研究［34］發(fā)現(xiàn)，GDM患者子代內(nèi)臟脂肪組織中ADIPOQ基因甲基化水平增加，基因表達水平降低；胰腺基因組中GNAS等基因的DNA甲基化亦發(fā)生改變，可能與子代成年后的糖脂代謝異常、T2DM易感性和肥胖有關(guān)［35］，且GDM的胰島素治療不能完全保護子代免受飲食引起的代謝紊亂。雄性子代小鼠胰島的全基因組DNA甲基化圖譜鑒定出了幾個調(diào)節(jié)胰島素分泌基因的高甲基化區(qū)域；這些基因包括ATP結(jié)合盒亞家族C成員8（ATP-binding cassette subfamily C member 8，Abcc8）等，其表達降低與胰島素分泌受損相關(guān)［36］。研究還發(fā)現(xiàn)，母體宮內(nèi)高血糖環(huán)境引起子代生殖細胞的DNA甲基化重編程，從而形成代際遺傳［37-38］，亦可誘發(fā)小鼠胎盤中Dlk1基因甲基化［39］。此外，GDM患者成年子代肌肉和脂肪組織中PPARGC1A基因的表達和DNA甲基化均發(fā)生改變［40］；外周血中磷酸二酯酶6A（phosphodiesterase 6A，PDE6A）基因與GDM狀態(tài)相關(guān)［38］?？梢姡贕DM子代中識別出的甲基化改變可能反映疾病發(fā)生機制或被利用于開發(fā)疾病的生物標(biāo)志物。

2.2 生殖細胞和部分體細胞

GDM除影響子代胰島素相關(guān)組織與器官外，還可通過DNA甲基化的方式影響其他類型組織的功能。研究顯示，GDM中脫嘌呤/脫嘧啶核酸內(nèi)切酶1（apurinic/apyrimidinic endodeoxyribonuclease 1，APEX1）基因甲基化水平的改變能夠調(diào)節(jié)子代上皮干細胞的增殖和自我更新［41］，亦可引起子代神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生［42］，且子代DNA甲基化模式的改變還與隨后的T2DM風(fēng)險相關(guān)［43］。與此同時，GDM患者所育新生兒的內(nèi)皮集落形成細胞功能受損，其原因在于暴露于GDM宮內(nèi)環(huán)境后內(nèi)皮集落形成細胞中胎盤特異蛋白8（placenta associated 8，PLAC8）基因表達增加，其表達水平與PLAC8中17個CpG位點的甲基化狀態(tài)呈負相關(guān)［44］。在心血管系統(tǒng)中，GDM子代沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information regulator 1，Sirt1）的甲基化水平降低可促進心肌缺血敏感性表型的胎兒編程［45］。更多研究發(fā)現(xiàn)，GDM子代原始生殖細胞及睪丸中出現(xiàn)了胰島素抵抗和脂肪蓄積相關(guān)基因酪氨酸激酶（Fyn proto-oncogene，Src family tyrosine kinase，F(xiàn)yn）基因的低甲基化［37］，且子代生長相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生可能與脂肪細胞因子如ADIPOQ的甲基化水平改變相關(guān)［32］。GDM患者及子代不同組織中基因DNA甲基化水平異常改變對母體及子代的影響見表1。

表1 GDM相關(guān)組織樣本中DNA甲基化水平的改變Tab 1 Changes of DNA methylation levels in GDM-related specimens

3 總結(jié)與展望

DNA甲基化作為一種常見的表觀遺傳修飾方式，發(fā)生機制與局部微環(huán)境關(guān)系密切，但其確切的調(diào)控機制尚不清楚。研究［46］發(fā)現(xiàn)，人類GDM胎盤組織中miR-98的上調(diào)可靶向抑制甲基CpG結(jié)合蛋白2（methyl-CpG binding protein 2，MECP2）基因表達，而MECP2表達水平的改變影響全基因組的甲基化狀態(tài)，表明微小RNA的作用可能是DNA甲基化的一種調(diào)控模式。盡管目前DNA甲基化發(fā)生的原因尚不明確，但是其在GDM的診斷與治療中仍具有重要的應(yīng)用前景。一方面，DNA甲基化的改變廣泛存在于外周血中，并與機體多種指標(biāo)狀態(tài)相關(guān)，如外周血中循環(huán)DNA的甲基化差異可用于監(jiān)測胰島β細胞的死亡狀況［47］，顯示了其作為一種新型生物標(biāo)志物的巨大潛力；另一方面，DNA甲基化水平改變直接影響基因表達水平，進而促進基因相關(guān)功能發(fā)生改變，可見該表觀遺傳修飾方式亦可作為疾病治療的干預(yù)靶點。由于GDM宮內(nèi)高血糖環(huán)境可對胎兒代謝進行重編程，以遺傳的方式產(chǎn)生代際間傳遞，對子代的健康影響嚴(yán)重且持久，DNA甲基化的調(diào)控可能成為一種預(yù)防GDM母胎危害的策略。隨著相關(guān)研究不斷深入，DNA甲基化有望為臨床上GDM的診斷與治療帶來新的啟示。

參·考·文·獻

[1] Chiefari E,Arcidiacono B,Foti D,et al.Gestational diabetes mellitus:an updated overview[J].JEndocrinol Invest,2017,40(9):899-909.

[2] Catalano PM,Kirwan JP,Haugel-de Mouzon S,et al.Gestational diabetes and insulin resistance:role in short-and long-term implications for mother and fetus[J].JNutr,2003,133(5 Suppl 2):1674S-1683S.

[3] Wong CC,Caspi A,Williams B,et al.A longitudinal study of epigenetic variation in twins[J].Epigenetics,2010,5(6):516-526.

[4] Gluckman PD,Hanson MA,Buklijas T,et al.Epigenetic mechanisms that underpin metabolic and cardiovascular diseases[J].Nat Rev Endocrinol,2009,5(7):401-408.

[5] Tobi EW,Lumey LH,Talens RP,et al.DNA methylation differences after exposure to prenatal famine are common and timing-and sex-specific[J].Hum Mol Genet,2009,18(21):4046-4053.

[6] Zhao BH,Jiang Y,Zhu H,et al.Placentalδ-like 1 gene DNA methylation levels are related to mothers'blood glucose concentration[J].J Diabetes Res,2019,2019:9521510.

[7] Wang LZ,Fan HL,Zhou LD,et al.Altered expression ofPGC-1αandPDX1and their methylation status are associated with fetal glucose metabolism in gestational diabetes mellitus[J].Biochem Biophys Res Commun,2018,501(1):300-306.

[8]Su RN,Wang C,Feng H,et al.Alteration inexpression and methylation ofIGF2/H19in placenta and umbilical cord blood are associated with macrosomia exposed to intrauterinehyperglycemia[J].PLoSOne,2016,11(2):e0148399.

[9] Xie XM,Gao HJ,Zeng WJ,et al.Placental DNA methylation of peroxisome-proliferator-activated receptor-γco-activator-1α promoter is associated with maternal gestational glucose level[J].Clin Sci(Lond),2015,129(4):385-394.

[10] C?téS,Gagné-Ouellet V,Guay SP,et al.PPARGC1αgene DNA methylation variations in human placenta mediate the link between maternal hyperglycemia and leptin levels in newborns[J].Clin Epigenetics,2016,8:72.

[11] Houde AA,St-Pierre J,Hivert MF,et al.Placental lipoprotein lipase DNA methylation levels are associated with gestational diabetes mellitus and maternal and cord blood lipid profiles[J].JDev Orig Health Dis,2014,5(2):132-141.

[12] Gagné-Ouellet V,Houde AA,Guay SP,et al.Placental lipoprotein lipase DNA methylation alterations are associated with gestational diabetes and body composition at 5 years of age[J].Epigenetics,2017,12(8):616-625.

[13] El Hajj N,Pliushch G,Schneider E,et al.Metabolic programming ofMESTDNA methylation by intrauterine exposure to gestational diabetes mellitus[J].Diabetes,2013,62(4):1320-1328.

[14] Steyn A,Crowther NJ,Norris SA,et al.Epigenetic modification of the pentose phosphate pathway and the IGF-axis in women with gestational diabetesmellitus[J].Epigenomics,2019,11(12):1371-1385.

[15] Cvitic S,Novakovic B,Gordon L,et al.Human fetoplacental arterial and venous endothelial cells are differentially programmed by gestational diabetes mellitus,resulting in cell-specific barrier function changes[J].Diabetologia,2018,61(11):2398-2411.

[16] Houde AA,Ruchat SM,Allard C,et al.LRP1B,BRD2andCACNA1D:new candidate genes in fetal metabolic programming of newborns exposed to maternal hyperglycemia[J].Epigenomics,2015,7(7):1111-1122.

[17] Wang YH,Xu XX,Sun H,et al.Cord blood leptin DNA methylation levels are associated with macrosomia during normal pregnancy[J].Pediatr Res,2019,86(3):305-310.

[18] Yan J,Su RN,Zhang WY,et al.Epigenetic alteration of rho guanine nucleotide exchange Factor 11(ARHGEF11)in cord blood samples in macrosomia exposed to intrauterine hyperglycemia[J].J Matern Fetal Neonatal Med,2021,34(3):422-431.

[19] Weng XL,Liu FT,Zhang H,et al.Genome-wide DNA methylation profiling in infants born to gestational diabetes mellitus[J].Diabetes Res Clin Pract,2018,142:10-18.

[20] Haertle L,El Hajj N,Dittrich M,et al.Epigenetic signatures of gestational diabetes mellituson cord blood methylation[J].Clin Epigenetics,2017,9:28.

[21] Howe CG,Cox B,Fore R,et al.Maternal gestational diabetes mellitus and newborn DNA methylation:findings from the pregnancy and childhood epigenetics consortium[J].Diabetes Care,2020,43(1):98-105.

[22] Wu P,Farrell WE,Haworth KE,et al.Maternal genome-wide DNA methylation profiling in gestational diabetes shows distinctive diseaseassociated changes relative to matched healthy pregnancies[J].Epigenetics,2018,13(2):122-128.

[23] Zhang Y,Ye JP,Fan JX.Regulation of malonyl-CoA-acyl carrier protein transacylase network in umbilical cord blood affected by intrauterine hyperglycemia[J].Oncotarget,2017,8(43):75254-75263.

[24] Chen DQ,Zhang AP,Fang M,et al.Increased methylation at differentially methylated region of GNASin infants born to gestational diabetes[J].BMC Med Genet,2014,15:108.

[25] Dias S,Adam S,Van Wyk N,et al.Global DNA methylation profiling in peripheral blood cells of South African women with gestational diabetes mellitus[J].Biomarkers,2019,24(3):225-231.

[26] Dias S,Adam S,Rheeder P,et al.Altered genome-wide DNA methylation in peripheral blood of South African women with gestational diabetes mellitus[J].Int JMol Sci,2019,20(23):5828.

[27] Enquobahrie DA,Moore A,Muhie S,et al.Early pregnancy maternal blood DNA methylation in repeat pregnancies and change in gestational diabetes mellitusstatus:apilot study[J].Reprod Sci,2015,22(7):904-910.

[28] Kang J,Lee CN,Li HY,et al.Association of interleukin-10 methylation levels with gestational diabetes in a Taiwanese population[J].Front Genet,2018,9:222.

[29] Rancourt RC,Ott R,Ziska T,et al.Visceral adipose tissue inflammatory factors(TNF-α,SOCS3)in gestational diabetes(GDM):epigenetics as a cluein GDM pathophysiology[J].Int JMol Sci,2020,21(2):479.

[30] Zhang YH,Chen YY,Qu HM,et al.Methylation ofHIF3Apromoter CpG islands contributes to insulin resistance in gestational diabetes mellitus[J].Mol Genet Genomic Med,2019,7(4):e00583.

[31] Ott R,Melchior K,Stupin JH,et al.Reduced insulin receptor expression and altered DNA methylation in fat tissues and blood of women with GDM and offspring[J].JClin Endocrinol Metab,2019,104(1):137-149.

[32] Ott R,Stupin JH,Melchior K,et al.Alterations of adiponectin gene expression and DNA methylation in adipose tissues and blood cells are associated with gestational diabetes and neonatal outcome[J]. Clin Epigenetics,2018,10(1):131.

[33] Deng XL,Yang YL,Sun H,et al.Analysis of whole genome-wide methylation and gene expression profiles in visceral omental adipose tissue of pregnancies with gestational diabetes mellitus[J].J Chin Med Assoc,2018,81(7):623-630.

[34] Houshmand-Oeregaard A,Hansen NS,Hjort L,et al.Differential adipokine DNA methylation and gene expression in subcutaneous adipose tissue from adult offspring of women with diabetes in pregnancy[J].Clin Epigenetics,2017,9:37.

[35] Zhu ZL,Chen XF,Xiao YQ,et al.Gestational diabetes mellitus alters DNA methylation profiles in pancreas of the offspring mice[J].J Diabetes Complications,2019,33(1):15-22.

[36] Zhu H,Chen B,Cheng Y,et al.Insulin therapy for gestational diabetes mellitus does not fully protect offspring from diet-induced metabolic disorders[J].Diabetes,2019,68(4):696-708.

[37] Ren J,Cheng Y,Ming ZH,et al.Intrauterine hyperglycemia exposure results in intergenerational inheritanceviaDNA methylation reprogramming on F1 PGCs[J].Epigenetics Chromatin,2018,11(1):20.

[38]Hjort L,Martino D,Grunnet LG,et al.Gestational diabetesand maternal obesity are associated with epigenome-wide methylation changes in children[J].JCI Insight,2018,3(17):e122572.

[39] Jiang Y,Yu YC,Ding GL,et al.Intrauterine hyperglycemia induces intergenerationalDlk1-Gtl2methylation changes in mouse placenta[J].Oncotarget,2018,9(32):22398-22405.

[40] Kelstrup L,Hjort L,Houshmand-Oeregaard A,et al.Gene expression and DNA methylation ofPPARGC1Ain muscle and adipose tissue from adult offspring of women with diabetes in pregnancy[J].Diabetes,2016,65(10):2900-2910.

[41] Chen GQ,Chen J,Yan ZL,et al.Maternal diabetes modulates dental epithelial stem cells proliferation and self-renewal in offspring through apurinic/apyrimidinicendonuclease 1-mediated DNA methylation[J].Sci Rep,2017,7:40762.

[42] Banik A,Kandilya D,Ramya S,et al.Maternal factors that induce epigenetic changes contribute to neurological disorders in offspring[J].Genes(Basel),2017,8(6):150.

[43] Quilter CR,Cooper WN,Cliffe KM,et al.Impact on offspring methylation patterns of maternal gestational diabetes mellitus and intrauterine growth restraint suggest common genes and pathways linked to subsequent type 2 diabetes risk[J].FASEB J,2014,28(11):4868-4879.

[44] Blue EK,Sheehan BM,Nuss ZV,et al.Epigenetic regulation of placentaspecific 8 contributes to altered function of endothelial colony-forming cells exposed to intrauterinegestational diabetesmellitus[J].Diabetes,2015,64(7):2664-2675.

[45] Chen ZW,Gong L,Zhang P,et al.Epigenetic down-regulation ofSirtl viaDNA methylation and oxidative stress signaling contributes to the gestational diabetes mellitus-induced fetal programming of heart ischemiasensitive phenotype in late life[J].Int JBiol Sci,2019,15(6):1240-1251.

[46] Cao JL,Zhang L,Li J,et al.Up-regulation of miR-98 and unraveling regulatory mechanisms in gestational diabetes mellitus[J].Sci Rep,2016,6:32268.

[47] Liu YF,Tan QY,Liu F.Differentially methylated circulating DNA:a novel biomarker to monitorβcell death[J].JDiabetes Complications,2018,32(3):349-353.