韓志豪 , 李松林 , 黃旭雄
(1.上海海洋大學(xué) 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部魚類營養(yǎng)與環(huán)境生態(tài)研究中心 , 上海 浦東 201306;2.上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)科學(xué)國家級實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心 , 上海 浦東 201306)
動物標(biāo)本種類繁多,按照制作方法可將動物標(biāo)本分為剝制標(biāo)本、浸制標(biāo)本、骨骼標(biāo)本、干制標(biāo)本(Dry specimen)和玻片標(biāo)本等[1]。不同的標(biāo)本制作方法適用于不同的動物類群,如鳥和獸類大多采用剝制方法,而昆蟲和甲殼類則大多制成干制標(biāo)本。
蟹類干制標(biāo)本是高等農(nóng)業(yè)院校水生生物學(xué)教學(xué)中的重要教學(xué)材料,具有直觀、生動、不受季節(jié)和區(qū)域限制的優(yōu)點(diǎn),能讓學(xué)生更深刻的了解蟹類外部結(jié)構(gòu)?,F(xiàn)在蟹類標(biāo)本的制作大多都是使用浸制法,此法可方便、快速、長時間的保存蟹類標(biāo)本,但是該方法存在以下缺點(diǎn):使用的浸制液多為5%~10%的福爾馬林溶液或95%的乙醇溶液,浸制液的揮發(fā)會對人體健康產(chǎn)生危害;同時,因?yàn)闃?biāo)本在浸制液中保存,所以很難對其進(jìn)行定型,并且運(yùn)輸困難、成本高;標(biāo)本長時間保存于福爾馬林浸制液中往往會有多聚甲醛形成,使浸制液體變的渾濁,影響觀察[2]。相比之下,干制標(biāo)本就僅需拿標(biāo)本針將其固定在標(biāo)本盒中就可四處攜帶。若螃蟹標(biāo)本后期遇到損傷或蟹腿脫落等問題,干制標(biāo)本用適當(dāng)方法就可進(jìn)行修復(fù),而浸制標(biāo)本很難進(jìn)行后期修復(fù)。最重要的是,浸制標(biāo)本中無論使用哪一種浸制液都會對蟹類甲殼中的色素造成溶解,標(biāo)本會隨著浸泡時間的增長體色越來越淡,會誤導(dǎo)觀看者對蟹類體色的認(rèn)知。目前常用的標(biāo)本干制方法主要有以下2種:(1)使用防腐粉的干制法:將防腐粉放入蟹類體內(nèi),抑制蟹類的腐爛,從而達(dá)到長期保存的目的,但是該方法不能徹底去除甲殼內(nèi)肌肉,導(dǎo)致標(biāo)本做成之后粘附在甲殼內(nèi)部的肌肉氧化后變黑、變臭,大大影響觀賞效果;(2)舊殼定型法:利用螃蟹自身新陳代謝脫下來的殼,將其定型干燥即可。此法雖然方便且殼中幾乎沒有肌肉,但是標(biāo)本外殼硬度極低,甲殼中色素含量也少,只能供觀看者了解該蟹的大致形狀,且標(biāo)本不易保存,極易造成標(biāo)本的不可修復(fù)性損傷。使用范圍窄,僅當(dāng)有蟹脫殼時才能使用。
為克服上述弊端,本文介紹了一種新型蟹類干制標(biāo)本制作方法,可使蟹類標(biāo)本甲殼中的色素得以最大保留,標(biāo)本也可呈原生形態(tài)展現(xiàn)給觀眾,標(biāo)本硬度高,且不易損壞,有助于推動國內(nèi)蟹類標(biāo)本制作的發(fā)展。
1.1 試驗(yàn)材料與器材 螃蟹、切割墊板、牙簽、棉簽、標(biāo)本針(根據(jù)螃蟹大小而改變)、白乳膠(標(biāo)本粘膠)、1 mL注射器(帶針頭)、紙巾、泡沫板、速干膠(UHU德國產(chǎn))、小刷子、死皮鉗、細(xì)頭鑷、吹風(fēng)機(jī)、樟腦、活性炭、大小適宜的標(biāo)本盒、手術(shù)刀(或壁紙刀)、亮油、金剛噴劑(承中牌)、錫絲、KOH(分析純)、胰蛋白酶(10萬單位)以及75%乙醇溶液。
1.2 標(biāo)本制作之前的準(zhǔn)備
1.2.1 觀察并測量螃蟹 在制作任何蟹類干制標(biāo)本之前,首先應(yīng)該在網(wǎng)絡(luò)、書籍中盡可能多的觀察其自然形態(tài)的照片以及視頻(圖1、2、3)。例如,螯足和步足在自然狀態(tài)下的姿勢;眼睛在自然情況下與眼窩的相對位置;螃蟹正視圖中眼睛與頭胸甲之間的角度;這些參數(shù)在后期整姿中發(fā)揮著巨大的作用,甚至還要了解它們的生活習(xí)性以便設(shè)計(jì)標(biāo)本姿態(tài)[3]。若觀察活體時,盡可能多的在不同角度進(jìn)行拍照,以方便后期整姿。
圖1 中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)形態(tài)模式圖[4]1: 頭胸甲; 2: 螯足; 3: 第2步足; 4: 第3步足; 5: 第4步足; 6: 第5步足
圖2 中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)的步足[4]1: 長節(jié); 2: 腕節(jié); 3: 前節(jié); 4: 指節(jié)
圖3 中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)的螯足[4]1: 長節(jié); 2: 腕節(jié); 3: 掌節(jié); 4: 指節(jié)
1.2.2 定種及標(biāo)簽的制作 借助書籍、網(wǎng)絡(luò)和詢問蟹類專家,以獲得該蟹基本信息[5],如中文名、俗名等。在Word文檔中,插入文本框,中文用宋體5號,加粗;英文用宋體5號,加粗(拉丁學(xué)名需用斜體),設(shè)置文本框邊框線條顏色為黑色,粗細(xì)為2磅(標(biāo)簽如圖4)。將其打印出來,進(jìn)行過塑,沿標(biāo)簽邊緣5 mm剪下,與螃蟹標(biāo)本配套存放。
圖4 標(biāo)簽?zāi)0?/p>
注意:如有添加特殊內(nèi)容可自行更改標(biāo)簽格式。
1.2.3 相關(guān)溶液的配制 胰蛋白酶溶液配制方法:50 mL水中加入2 g胰蛋白酶(10萬單位),然后在100 mL容量瓶中定容后轉(zhuǎn)移至燒杯中,用KOH溶液調(diào)節(jié)至pH8(胰蛋白酶溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用)。在肌肉溶解過程中最好放入38 ℃的恒溫箱,可加速肌肉溶解。在肌肉溶解時應(yīng)多觀察,不能過度浸泡,防止組織連接部分也被溶解,對后期粘連造成麻煩。
5%KOH溶液的配制方法:50 mL水中加入5 g KOH固體(分析純),然后將其轉(zhuǎn)入 100 mL容量瓶,用水添加至刻度線,塞上塞子,搖勻,轉(zhuǎn)移至燒杯即可使用。
1.3 標(biāo)本制作前螃蟹的處理
1.3.1 蟹的麻醉 將螃蟹放入冰水混合物中浸泡10~20 min,待抓起后無劇烈反抗,即可進(jìn)行下一步操作。
1.3.2 殺蟹 用1 mL注射器吸取1 mL 95%乙醇溶液,找到螃蟹嘴部偏下的位置,用注射針頭輕輕試探(勿傷及螃蟹口前板結(jié)構(gòu))。當(dāng)發(fā)現(xiàn)有一處針頭可輕松插入時,將針頭快速插入并將1 mL乙醇溶液完全注射其內(nèi),螃蟹1 min左右死亡,這時可能會有螃蟹肢體掉落,屬正?,F(xiàn)象,對掉落肢體進(jìn)行標(biāo)記即可。若為死蟹,當(dāng)時卻無條件制作標(biāo)本,可用塑料器皿加水沒過螃蟹進(jìn)行冷凍,待有條件時,在自來水流沖刷下進(jìn)行解凍,解凍后立即進(jìn)行標(biāo)本制作[6]。
1.3.3 固定 將已經(jīng)死亡的螃蟹放入75%乙醇溶液中浸泡至少24 h,進(jìn)行固定,防止后期長時間制作時腐爛。
1.4 螃蟹的肢解
1.4.1 螯足、步足(泳足)與胸部腹甲之間的分離 參照圖5,有一條環(huán)繞于附肢的淺溝(也就是蟹類每受到危險(xiǎn)時,螃蟹會有斷腿現(xiàn)象的分離點(diǎn)),用手術(shù)刀的尖端刻該淺溝,然后嘗試輕掰是否能斷。如果不能則重復(fù)上述步驟,此方法可以輕易地將附肢分離,而且分離處邊緣十分整齊,有利于后期無縫粘合。
圖5 蟹類步足基部折斷處[4]1: 分解前; 2: 分解后
注意:因?yàn)轶π凡阶愕拇笮?、形態(tài)極其相似,所以一定要記住每個螃蟹步足的位置,切忌混淆,以防給后來的粘合環(huán)節(jié)造成極大的困擾。務(wù)必在肢解下每一個步足時做好標(biāo)記(例如左1、左2、右1、右2等)。因?yàn)橹夂笠^續(xù)泡在酒精中,所以可通過腿上綁繩的顏色和圈數(shù)來辨識是螃蟹哪個部位的步足。例如:紅色繩子代表右邊,白色繩子代表左邊;綁1圈代表是從上往下第1個步足,綁2圈代表是從上往下第2個步足,以此類推。
1.4.2 頭胸甲與胸部腹甲的分離及胸部腹甲和腹臍的分離 固定螃蟹頭胸甲,將螃蟹胸部腹甲輕輕掰開,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有裂縫出現(xiàn)時,用手術(shù)刀尖端輕輕插入將里面鏈接頭胸甲和胸甲的薄膜組織全部劃斷。此時用手可以更輕松的將其掰開,再用手術(shù)刀將腹臍左右兩端的連接處割斷,再將腹臍從胸部腹甲上慢慢地剝離。
注意:分離時,切勿損壞螃蟹各個部位,螃蟹的每個部位都可能會是粘合的重要部位,若其破碎將會給標(biāo)本的整體效果帶來嚴(yán)重的不良影響。
1.5 螃蟹甲殼中肌肉的去除
1.5.1 螯足、步足及泳足中肌肉的去除 分別在步足上的長節(jié)、腕節(jié)、前節(jié)以及指節(jié)連接處可找到類似薄膜的半透明組織(都是成對存在的,每個連接處上下都有,一般上面的較小,下面的較大),用手術(shù)刀將其劃開,沿著垂直關(guān)節(jié)運(yùn)動方向慢慢進(jìn)行手掰(力量漸增,不可用力一下掰開,這樣會對關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)有較大的破壞,不利于之后的粘合)。然后使用尖頭鑷、大頭針、棉簽以及紙巾將里面肌肉盡可能地剔除干凈,在胰蛋白酶溶液中浸泡約6 h,觀察其中是否還有肌肉殘留,若有,適當(dāng)增加浸泡時間,最后用清水沖洗干凈,螯足的肌肉去除環(huán)節(jié)就完成了。螯足的肌肉去除與步足處理方法相同。若是泳足則需相同的方法處理長節(jié)、腕節(jié)和前節(jié),指節(jié)則直接浸泡胰蛋白酶溶液處理即可。
1.5.2 頭胸甲中肌肉的去除 先拿捏子將其肝胰腺與胃剔出來,再拿牙刷將附著在頭胸甲內(nèi)部的黑色物質(zhì)盡可能地刷干凈,然后將其放入胰蛋白酶溶液中約6 h,再拿牙刷清洗,待無明顯雜質(zhì)后,拿清水沖洗干凈即可。
注意:頭胸甲處理后盡快進(jìn)行硬化及亮化,這樣頭胸甲中的色素才能最大程度保持不變。
1.5.3 胸部腹甲中肌肉的去除 拿死皮鉗沿鰓生長的地方連同下面的幾丁質(zhì)一同剪去,注意不要破壞邊緣以及嘴外部的兩片甲,盡量將容易去除的肉去除,然后放入5%KOH溶液24 h,視情況增加時間,待胸甲內(nèi)部無明顯肌肉時,將其拿出,用尖口鑷將其中已化為黏液狀的肌肉剔除,用清水沖洗干凈即可。
1.6 螃蟹的拼接
1.6.1 胸部腹甲與腹臍的拼接 用速干膠填滿腹臍內(nèi)部的腹甲溝,然后將腹臍鑲嵌于胸部腹甲,用吹風(fēng)機(jī)將膠吹干,再用白乳膠把胸部腹甲與腹臍之間的縫隙涂1遍,再用吹風(fēng)機(jī)將其烘干。
注意:如果腹部甲片僵硬變白,可以將其放在75%乙醇溶液泡5 min拿出,可以達(dá)到軟化的效果,使其更好的嵌合胸部腹甲(本文中提到的所有的“用吹風(fēng)機(jī)吹干”的步驟完全可以由“自然風(fēng)干”代替)。
1.6.2 頭胸甲與胸部腹甲的拼接 用速干膠將頭胸甲與胸甲接觸的邊緣涂滿,將其粘合,嘴部用白乳膠覆蓋一層使其粘緊密,用吹風(fēng)機(jī)吹干,然后用白乳膠填涂連接邊緣的縫隙,用吹風(fēng)機(jī)吹干即可。
1.6.3 螯足、步足及泳足散肢拼接 將速干膠打入各個部位(指節(jié)除外),打1/3即可,然后將錫絲插入,再將另一部分插入錫絲的另一端。以此類推,將步足、泳足和螯足拼裝好,最后再到各個連接處涂一層白乳膠加固,用吹風(fēng)機(jī)吹干即可。
1.6.4 附肢與胸甲的拼接 往胸部腹甲與附肢分離處的洞,打入速干膠然后插入適當(dāng)長度的錫絲(可視情況多放幾根錫絲,多放的錫絲要比最長的那根短),將錫絲另一端再插入附肢中(插錫絲時,插入胸甲一端再無延伸空間時,再將另一端插入附肢中),用白乳膠將拼接處涂抹平整,用吹風(fēng)機(jī)吹干,此步驟重復(fù)至少2次。為之后的整姿提供足夠的韌性,防止整姿時附肢掉落。
1.7 標(biāo)本的整姿
1.7.1 眼睛的整姿 眼睛較短的蟹類保持眼睛在眼窩之外即可,用標(biāo)本針固定眼部之后在眼窩處加滿白乳膠,保持姿勢自然風(fēng)干即可。眼睛較長的蟹類制作同上,唯一注意的是眼睛與頭胸甲之間的角度,最好遵照本品種螃蟹活體狀態(tài)下的樣子進(jìn)行制作(例如,日本大眼蟹為72°左右)。
1.7.2 螯足的整姿 正常狀態(tài)下的螯足的指節(jié)與掌節(jié)要處于閉合狀態(tài),螯足的長節(jié)、腕節(jié)和掌節(jié)也盡量的與頭胸甲粘連在一起;攻擊狀態(tài)下的螯足的指節(jié)與掌節(jié)處于張開狀態(tài)(張開角度一般都為20°~30° 為宜,特殊品種可視情況改變角度),螯足的長節(jié)可與頭胸甲相連(也可與頭胸甲不相連,視個人喜好改變)腕節(jié),掌節(jié)不與頭胸甲粘連。
1.7.3 步足的整姿 長節(jié)與腕節(jié)要保持一定的角度,范圍為120°~170°(一般為135°左右)。腕節(jié)與前節(jié)一般保持180°,指節(jié)與前節(jié)之間角度范圍為90°~150°(一般為135°左右)。最后保證在正面觀看下螃蟹是水平的,俯視觀看下盡可能對稱,造型可從網(wǎng)絡(luò)尋找同品種螃蟹圖片,自行微調(diào)。
1.8 硬化與亮化
1.8.1 硬化 使用金剛噴劑,噴口距標(biāo)本約20 cm,在通風(fēng)處噴一層薄漆(作業(yè)過程中需戴手套、口罩),放置6 h,再重復(fù)以上操作1次,即可達(dá)到硬化效果。
1.8.2 亮化 在標(biāo)本外表均勻涂一層亮油,待其自然風(fēng)干即可。
注意:長絨毛處不要涂亮油,此舉會大大影響整體效果,例如:中華絨螯蟹、中華虎頭蟹等;還有絨毛或剛毛較多的品種直接無需涂亮油,例如:紅毛蟹、棉蟹等。
經(jīng)過本法制作的細(xì)紋愛潔蟹干制標(biāo)本,由于不同部位使用不同化學(xué)特性的溶液進(jìn)行處理,含有色素較多的部位得以保護(hù),減少了色素的溶解,故使細(xì)紋愛潔蟹的甲殼得以最大程度的保持原色(中插彩版圖6~8);適當(dāng)?shù)挠不傲粱胧┦辜?xì)紋愛潔蟹標(biāo)本增加了表光面的亮度和飽滿度,標(biāo)本眼部水靈、飽滿、炯炯有神(中插彩版圖6、7);白乳膠配合錫絲粘連標(biāo)本的各個部分,不僅將斷裂處幾乎恢復(fù)至原樣(中插彩版圖8),而且關(guān)節(jié)處有錫絲的支持,可以將其整形至自然形態(tài)(中插彩版圖6),猶如剛從水中拿出來一般栩栩如生。
圖6 細(xì)紋愛潔蟹(Atergatis reticulatus)干制標(biāo)本正面觀
圖7 細(xì)紋愛潔蟹(Atergatis reticulatus)干制標(biāo)本背面觀
圖8 細(xì)紋愛潔蟹(Atergatis reticulatus)干制標(biāo)本腹面觀
3.1 本法對其他甲殼生物的通用性 本法在適用于蟹類的同時,也同樣適用于制作甲殼層較厚生物的干制標(biāo)本,例如:螯蝦類、龍蝦類以及具足蟲類等;但對制作甲殼層較薄生物的干制標(biāo)本的方法還正處于一個研究階段。例如:米蝦類、長臂蝦類等。
3.2 標(biāo)本的后期維護(hù) 蟹類干制標(biāo)本的附肢連接處都十分脆弱,很容易折斷,因此運(yùn)輸時要把標(biāo)本放入標(biāo)本盒內(nèi),還有標(biāo)本不宜放在陽光直射的地方,以防標(biāo)本褪色[7],還要注意不宜放在潮濕、不通風(fēng)的地方,以免受潮發(fā)霉[8]。放標(biāo)本的地方要適量放入活性炭和樟腦丸,防止標(biāo)本生蟲、長霉。
標(biāo)本在保存過一段時間后,若發(fā)現(xiàn)附肢有破裂,拿白乳膠涂抹在破裂處風(fēng)干即可,視破裂程度可增加上述操作次數(shù)。若發(fā)現(xiàn)附肢斷裂,拿速干膠涂抹在斷面口,然后在縫隙中插入細(xì)錫絲,將錫絲固定好,插入斷裂端附肢,晾干后,再涂一層白乳膠,風(fēng)干即可。
3.3 與國內(nèi)外傳統(tǒng)方法的比較及本方法的優(yōu)點(diǎn) 首先在使用藥品方面,本方法使用的藥品成本低,方便易得,無毒無味,安全環(huán)保,而國內(nèi)傳統(tǒng)方法中的浸制法,因其主要采用福爾馬林等對人體有刺激危害的溶液,且在保存過程中易生成多聚甲醛(白色沉淀)的化學(xué)性質(zhì),需每年更換浸制液,大大增加了標(biāo)本后期維護(hù)的人力與物力。干制標(biāo)本因?yàn)椴皇褂媒埔海钥梢詫⑵浣嚯x手持觀察,根據(jù)形態(tài)差異初步辨別中華絨螯蟹和日本絨螯蟹[9-10]。標(biāo)本裝裱后也可作為家中高檔藝術(shù)裝飾品。在整姿方面,本方法結(jié)合錫絲與白乳膠進(jìn)行連接,加強(qiáng)了標(biāo)本關(guān)節(jié)處的機(jī)械強(qiáng)度,可按照自己喜好的姿勢進(jìn)行整姿。
肌肉去除是蟹類干制標(biāo)本中最為重要的環(huán)節(jié)之一,甲殼中肌肉去除的是否干凈直接影響到整個標(biāo)本的整體效果,在肌肉去除時一定要去除徹底,不然后期殘余肌肉腐爛,會導(dǎo)致甲殼變黑,產(chǎn)生刺激性氣體,滋生細(xì)菌與蛆蟲,減短其保存時間,大大降低標(biāo)本整體效果[3]。與國內(nèi)一些使用防腐粉法制作蟹類干制標(biāo)本相比,本法規(guī)避以上缺點(diǎn)并且本法采用不同部位使用不同處理方法,頭胸甲因其甲殼中蝦青素和色素含量較多,故使用化學(xué)性質(zhì)較溫和的2%胰蛋白酶溶液處理,胸部腹甲因其蝦青素和色素含量較少,故用化學(xué)性質(zhì)較強(qiáng)烈的5%KOH溶液處理。此法對甲殼損傷小,比人工剔肉節(jié)省時間,無毒無味,并且使用的試劑成本低,容易獲取,安全環(huán)保,具有廣闊的推廣應(yīng)用價值,可作為以后蟹類干制標(biāo)本方法的新標(biāo)桿。