人乳頭瘤病毒分型檢測聯(lián)合液基薄層細(xì)胞檢測檢查在宮頸癌篩查中的臨床價(jià)值

胡雙燁 楊光建 裴謙鳳 何 婷

[1.成都市龍泉驛區(qū)婦幼保健院婦科，四川成都 610100；2.成都市龍泉驛區(qū)第一人民醫(yī)院（四川大學(xué)華西醫(yī)院龍泉醫(yī)院）婦科，四川成都 610199]

人乳頭瘤病毒（HPV）是一種雙鏈環(huán)狀DNA病毒，屬于乳頭瘤病毒家族，是男性和女性最常見的性傳播病原體之一[1]。流行病學(xué)研究證實(shí)HPV和生殖器疣及宮頸癌、外陰癌、陰道癌、肛門癌和陰莖癌密切相關(guān)。大量證據(jù)表明持續(xù)性HPV感染，特別是高危型HPV感染，是導(dǎo)致癌前病變和宮頸癌的主要原因[2]?；诖?，本研究以2018年1月至2020年8月于成都市龍泉驛區(qū)婦幼保健院就診的4 722例女性為研究對象，分析探討人乳頭瘤病毒分型檢測聯(lián)合液基薄層細(xì)胞檢測（TCT）檢查在宮頸癌篩查中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018年1月至2020年8月間4 722名到成都市龍泉驛區(qū)婦幼保健院就診并接受HPV及TCT檢查的女性的資料。研究經(jīng)成都市龍泉驛區(qū)婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。受檢者年齡22～78歲，平均年齡（48.36±1.58）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡在18歲以上，有活躍性生活；②12個(gè)月內(nèi)未參加過宮頸癌篩查。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有重大疾病者；②存在相關(guān)檢查禁忌證者；③臨床資料不全者；④妊娠或因良性疾病切除子宮者。

1.2 方法 標(biāo)本采集：由經(jīng)驗(yàn)豐富的婦科醫(yī)師用棉拭子將宮頸口黏液擦去，然后用一次性宮頸刷刷取宮頸脫落細(xì)胞，放于裝有保存液的密閉保存管中送檢。①細(xì)胞學(xué)檢查。采用沉降式全自動液基薄層細(xì)胞制片染色系統(tǒng)（福建泰普生生物科學(xué)有限公司，型號：JY-8000C）制片，操作按說明書進(jìn)行。液基細(xì)胞學(xué)術(shù)語根據(jù)Bethesda系統(tǒng)定義[3]，包括未見上皮內(nèi)病變或惡性腫瘤（NILM）、不能明確意義的非典型鱗狀細(xì)胞（ASCUS）、不除外高級別上皮內(nèi)病變的非典型鱗狀細(xì)胞（ASC-H）、低級別鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高級別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）。②HPV-DNA分型檢測。采用醫(yī)用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因分型試劑盒（潮州凱普生物科技有限公司，型號：賽默飛MagMAX）對宮頸細(xì)胞樣本中的HPV-DNA進(jìn)行檢測?？蓹z出高危型13種、低危型5種以及中國人常見感染亞型。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對4 722名婦女的相關(guān)資料進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用[例（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TCT檢查結(jié)果及分布情況 TCT檢查共篩查出HPV陽 性患 者1 213例（25.69%），NILM 占 比 為73.70%，ASC-US及以上級別占比26.30%，見表1。

表1 TCT檢查結(jié)果及分布情況

2.2 HPV感染分型分布情況及感染率 1 213例HPV陽性患者中檢出高危型13種共994例，低危型5種共70例、中國人常見感染亞型共149例。檢出構(gòu)成比居于前3位的高危型分別為52型、16型、58型，見表2。

表2 HPV感染分型分布情況及感染率

2.3 高危型感染與TCT異常的關(guān)系 ASC-US及以上級別的患者中，高危型HPV混合感染檢出率94.04%；NILM的患者中，高危型HPV混合感染檢出率為77.63%；前者的高危型HPV混合感染檢出率高于后者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 高危型感染與TCT異常的關(guān)系[例（%）]

2.4 HPV分型檢測聯(lián)合TCT檢查結(jié)果 在4 722例標(biāo)本中，HPV陽性感染率為19.72%，其中NILM單發(fā)感染率76.78%，多發(fā)感染率68.98%；ASC-US單發(fā)感染率14.40%，多發(fā)感染率18.52%；LSIL單發(fā)感染率3.78%，多發(fā)感染率8.33%；ASC-H單發(fā)感染率2.38%，多發(fā)感染率2.31%；HSIL單發(fā)感染率2.66%，多發(fā)感染率1.85%，見表4。

表4 人乳頭瘤病毒分型檢測聯(lián)合TCT檢查結(jié)果

3 討論

宮頸癌是原發(fā)于女性生殖系統(tǒng)的惡性腫瘤，多由HPV病毒感染所導(dǎo)致。因此臨床上在不斷推廣并完善宮頸癌篩查，使宮頸癌及癌前病變能夠得到及早發(fā)現(xiàn)和治療，對于降低我國宮頸癌發(fā)病率及死亡率具有不可忽視的重要價(jià)值。傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)檢測易受陰道環(huán)境影響，如采集子宮頸細(xì)胞樣本中攜帶的血液、黏液等均會對細(xì)胞學(xué)檢測結(jié)果造成干擾，導(dǎo)致樣本模糊不清，不易于分辨，從而在一定程度上增加了漏診的概率。TCT檢查對傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)檢測流程進(jìn)行了改進(jìn)與完善，通過將采集器整體置入裝有細(xì)胞保存液的容量瓶中進(jìn)行漂洗的方式，能夠盡可能保留采集器所收集到的子宮頸細(xì)胞樣本，不僅能夠?yàn)門CT檢查提供足夠的條件支持，同時(shí)也能夠降低反復(fù)取材檢測概率，節(jié)約患者的時(shí)間及費(fèi)用。此外，TCT檢查中的細(xì)胞樣本更加清晰明顯，也有助于提升細(xì)胞學(xué)診斷的準(zhǔn)確性。HPV病毒包括數(shù)十種類型，各類型之間感染部位，臨床癥狀及嚴(yán)重程度各不相同，因此鑒別診斷HPV類型對于宮頸癌篩查及預(yù)后評估具有重要價(jià)值。相較傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)檢查，TCT檢查具有敏感性高，操作簡便等顯著特點(diǎn)，將兩者聯(lián)合應(yīng)用后，既可用于宮頸癌篩查，同時(shí)也能夠?qū)嵤〩PV分型檢測，對于指導(dǎo)后續(xù)宮頸癌篩查流程并擬定相關(guān)治療方案具有較高價(jià)值。

HPV感染是性接觸傳播導(dǎo)致的，也有少部分是因經(jīng)污染的內(nèi)褲、便盆及浴盆等傳播，人體感染病毒后，病毒潛伏在基底角朊細(xì)胞間，并且于表皮細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，基于合適的環(huán)境下生長繁殖，如果易感上皮裂隙中進(jìn)入大量病毒顆粒的角蛋白碎片或者脫落表層細(xì)胞，容易導(dǎo)致感染。臨床研究結(jié)果顯示，女性宮頸癌的發(fā)病涉及多種因素，相關(guān)研究證實(shí)HPV感染是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)病的主要高危因素[4]。根據(jù)HPV引起宮頸癌的危險(xiǎn)程度大小將其分為高危型和低危型，其中高危型主要包括13種，低危型主要包括5種[5]。另有3種HPV基因型為中國人常見感染亞型，分別是HPV53型，66型，cp8304型。歐美地區(qū)主要以HPV16、18型為主，亞洲地區(qū)主要以HPV52、58型為主[6]。本研究結(jié)果提示：檢出構(gòu)成比居于前3位的高危型分別為52型、16型、58型。這與我國其他地區(qū)的報(bào)道基本一致。值得注意的是，本研究還觀察到中國人常見感染亞型HPV53的檢出率位于第5位，由此推測HPV53可能與中國人的宮頸癌發(fā)病有密切關(guān)系，值得臨床進(jìn)一步探討。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)在TCT結(jié)果為 ASC-US及以上等級的患者中，高危型 HPV 以混合感染方式為多見；在TCT結(jié)果為NILM的患者中，高危型HPV以混合感染方式為主。這與鄧如琦等[7]在HPV分型與TCT檢測在宮頸疾病初篩中的臨床價(jià)值中報(bào)道的結(jié)果一致。

研究顯示，在4 722例標(biāo)本中，HPV陽性感染率為19.72%。針對單發(fā)感染率結(jié)果而言，NILM為76.78%，ASC-US為14.40%，LSIL為3.78%，ASC-H為2.38%，HSIL為2.66%；針對多發(fā)感染率而言，NILM為68.98%，ASC-US為18.52%，LSIL為8.33%，ASC-H為2.31%，HSIL為1.85%。提示NILM陽性單發(fā)感染患者具有較高的HPV檢出率，且檢出結(jié)果顯示高危型為主，本研究與魏玉業(yè)等[6]關(guān)于HPV分型檢測診斷早期子宮頸癌的價(jià)值研究相一致。

由此可見，HPV分型檢測與聯(lián)合TCT檢查能夠明確反映出HPV陽性感染率、HPV基因分型、單發(fā)率以及多發(fā)率等信息，在龍泉驛地區(qū)實(shí)施HPV疫苗計(jì)劃時(shí)，應(yīng)考慮HPV基因型特異性流行的結(jié)果。兩者聯(lián)合篩查對于提高宮頸癌篩查效率，指導(dǎo)后續(xù)診療方案具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值，值得推廣。