血清HE4、B7H4水平變化與卵巢癌分期、淋巴結轉移的關系及其診斷價值

孫培松 白雪 庫亞西克孜·努爾買買

摘要：目的? 探討血清附睪蛋白4（HE4）、B7同源體4（B7H4）與卵巢癌臨床分期、淋巴結轉移的關系及對卵巢癌的診斷價值。方法? 選取我院2019年9月～2020年2月我院確診的卵巢癌患者94例設為卵巢癌組，另選取同期我院體檢健康婦女94例設為對照組，比較兩組血清HE4、B7H4水平及卵巢癌組中不同臨床分期、淋巴結轉移患者血清HE4、B7H4水平，采用受試者工作曲線（ROC）分析HE4、B7H4水平聯(lián)合檢測卵巢癌的診斷價值。結果? 卵巢癌組血清HE4、B7H4水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;卵巢癌組中Ⅲ期和Ⅳ期、發(fā)生淋巴結轉移的卵巢癌患者血清HE4、B7H4水平高于Ⅰ期和Ⅱ期、未發(fā)生淋巴結轉移的卵巢癌患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;血清HE4、B7H4聯(lián)合檢測鑒別診斷卵巢癌的靈敏度為89.63%、特異度為97.28%、漏診率為10.37%、誤診率為2.72%、AUC值為0.941。結論? 卵巢癌患者血清HE4、B7H4水平升高，并且與臨床分期增高、淋巴結轉移有關，二者聯(lián)合檢測有利于提高對卵巢癌的鑒別診斷能力。

關鍵詞：血清附睪蛋白4;B7同源體4;卵巢癌;臨床分期;淋巴結轉移

Abstract：Objective? To explore the relationship between serum epididymal protein 4 （HE4）， B7 homolog 4 （B7H4） and clinical staging of ovarian cancer， lymph node metastasis， and their diagnostic value for ovarian cancer.Methods? 94 patients with ovarian cancer diagnosed in our hospital from September 2019 to February 2020 were selected as the ovarian cancer group， and 94 healthy women in our hospital during the same period were selected as the control group. The two groups of serum HE4 and B7H4 were compared. In the ovarian cancer group， the serum HE4 and B7H4 levels of patients with different clinical stages and lymph node metastasis were used. Receiver operating curve （ROC） was used to analyze the diagnostic value of combined detection of HE4 and B7H4 levels for ovarian cancer.Results? Serum HE4 and B7H4 levels in the ovarian cancer group were higher than those in the control group，the difference was statistically significant （P<0.05）; In the ovarian cancer group， the serum HE4 and B7H4 levels of ovarian cancer patients with stage III and IV and lymph node metastasis were higher than those of ovarian cancer patients with stage I and II without lymph node metastasis， the difference was statistically significant （P<0.05）; The sensitivity of combined detection of serum HE4 and B7H4 in differential diagnosis of ovarian cancer was 89.63%， specificity was 97.28%， missed diagnosis rate was 10.37%， misdiagnosis rate was 2.72%， and AUC value was 0.941.Conclusion? Serum HE4 and B7H4 levels in patients with ovarian cancer are elevated， and are related to increased clinical staging and lymph node metastasis. The combined detection of the two is beneficial to improve the ability of differential diagnosis of ovarian cancer.

Key words：Serum epididymis protein 4;B7 homolog 4;Ovarian cancer;Clinical staging;Lymph node metastasis

卵巢癌（ovarian cancer）是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一，5年生存率低、死亡率高[1]，據(jù)報道[2]，卵巢癌的發(fā)病率可超過495/10萬，在具有相關家族性遺傳病史的患者中，其發(fā)病率更高。由于卵巢體積比較小，卵巢癌初期表現(xiàn)較不明顯，往往確診時即是晚期，因此早期診斷對于改善卵巢癌患者預后具有重要意義。血清學指標檢測能夠為卵巢癌的早期篩查提供參考依據(jù)，其中附睪蛋白4（HE4）是上皮細胞惡性腫瘤的非特異性糖蛋白，在腫瘤細胞異常增殖的過程中，HE4的表達可顯著上升[3];B7同源體4（B7H4）是T淋巴細胞共刺激家族分子，其能夠抑制T淋巴細胞的免疫功能，降低T淋巴細胞對于腫瘤細胞的殺傷和吞噬功能，促進腫瘤細胞的免疫逃逸[4]?；诖?，本研究選取我院2019年9月～2020年2月我院確診的94例卵巢癌患者臨床資料，探討HE4、B7H4與卵巢癌臨床分期、淋巴結轉移的關系及對卵巢癌的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取我院2019年9月～2020年2月確診的卵巢癌患者94例設為卵巢癌組，納入標準：①卵巢癌診斷標準參考國際婦科腫瘤協(xié)會制定的標準[5];②年齡19～65歲;③經(jīng)手術后病理學檢查證實為卵巢癌;④手術前患者無放化療、免疫治療病史。排除標準：①伴有結核感染者;②全身感染性疾病者;③免疫功能疾病者;④近3個月具有糖皮質激素類藥物應用史者;⑤合并其他部位惡性腫瘤的患者。另選取同期體檢的健康婦女94例設為對照組。卵巢癌組年齡45～65歲，平均年齡（56.33±6.26）歲;FIGO分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期38例、Ⅲ28期、Ⅳ期8例;分化程度：高分化20例、中分化37例、低分化33例;伴有淋巴結轉移44例。對照組年齡42～65歲，平均年齡（55.51±7.32）歲。兩組年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究獲得我院醫(yī)學倫理委員會的批準，研究對象知情同意并自愿簽訂知情同意書。

1.2方法? 采集患者入院后24 h內或者治療后6～8 h內的肘部靜脈血4 ml，以1500 r/min離心15 min，收集上清液，在每個聚苯乙烯板中加入上述液體0.1 ml，4℃過夜孵育，加入磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌3次，3 min/次，在每個聚苯乙烯板孔中加入HE4、B7H4抗體（1∶800，購自南京伯斯金生物公司），37℃孵育30 min，加入PBS洗滌3次，3 min/次，每孔中加入TMB溶液底物0.1 ml，37℃ 20 min，加入2 mol/L硫酸0.05 ml終止反應，采用DG5033A酶標儀（南京華東電子科技公司）進行OD值檢測。

1.3統(tǒng)計學方法? 采用SPSS 16.0處理所有數(shù)據(jù)，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗;計數(shù)資料以（n）表示，采用？字2檢驗;采用ROC曲線分析血清HE4、B7H4水平聯(lián)合檢測卵巢癌的診斷效能;以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1兩組血清HE4、B7H4水平比較? 卵巢癌組血清HE4、B7H4水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

2.2卵巢癌患者血清HE4、B7H4水平與FIGO分期、淋巴結轉移的關系? 卵巢癌組中Ⅲ期和Ⅳ期、發(fā)生淋巴結轉移的卵巢癌患者血清HE4、B7H4水平高于Ⅰ期和Ⅱ期、未發(fā)生淋巴結轉移的卵巢癌患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表2。

2.3血清HE4、B7H4水平聯(lián)合檢測卵巢癌的診斷價值? 血清HE4、B7H4聯(lián)合檢測鑒別診斷卵巢癌的靈敏度、特異度高于HE4、B7H4單獨檢測，漏診率、誤診率低于HE4、B7H4單獨檢測，見表3、圖1。

3討論

卵巢癌的發(fā)生主要考慮與卵巢生發(fā)上皮細胞的異常持續(xù)性增殖有關，在具有雌激素受體敏感性上升的人群中，卵巢癌的發(fā)病率和病死率可進一步上升[6]。研究發(fā)現(xiàn)[7]，卵巢癌患者的總體生存時間不足45%，其早期診斷水平不足35%。因此，提高卵巢癌的早期診斷是改善患者生存質量的重要途徑。血清腫瘤標記物的檢測中除了糖類抗原125（CA125）廣泛用于卵巢癌的診斷、檢測和預后評估外，HE4及B7H4生物學標記物也作為卵巢癌診斷的輔助或補充手段備受關注。研究發(fā)現(xiàn)[8]，采用CA125診斷卵巢癌具有一定的假陽性率和假陰性率?；诖耍狙芯恐饕治鯤E4及B7H4對卵巢癌的診斷價值。

HE4主要表達于胚胎上皮、神經(jīng)組織及新生兒中胚層組織中，其能夠通過絲氨酸及羧基末端的巰基結構，誘導下游腫瘤糖蛋白分子的激活，增加腫瘤相關信號通路的上調程度，從而參與到惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程[9]。有研究表明[10]，HE4蛋白的表達上升能夠提高腫瘤細胞的浸潤能力，并能夠反應腫瘤細胞的生物學特征的改變過程。B7H4是T淋巴細胞共刺激分子，其能夠負向調控淋巴細胞免疫功能，抑制樹突狀細胞的抗原提呈能力，降低T淋巴細胞的免疫應答水平[11]。薩伊普加瑪麗·米吉提等[12]研究中探討了HE4表達與卵巢癌的關系，結果發(fā)現(xiàn)HE4的表達上升與卵巢癌的發(fā)生密切相關，同時認為HE4的檢測能夠協(xié)助卵巢癌的早期診斷，但缺乏對于B7H4的分析研究。本研究結果發(fā)現(xiàn)，卵巢癌組血清HE4、B7H4水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），提示HE4、B7H4的高表達參與了卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。分析HE4、B7H4的異常表達與卵巢癌的病情進展內在聯(lián)系，考慮由于HE4、B7H4的病理生理性途徑有關[13，14]：①HE4的表達上升能夠反應卵巢生發(fā)上皮細胞的核分裂速度，評估癌細胞的異常擴增的風險;②B7H4的表達上升能夠影響到腫瘤細胞的凋亡過程，導致腫瘤細胞的凋亡比例減少，影響腫瘤細胞的免疫應答速度。本研究中卵巢癌組中Ⅲ期和Ⅳ期、發(fā)生淋巴結轉移的卵巢癌患者血清HE4、B7H4水平高于Ⅰ期和Ⅱ期、未發(fā)生淋巴結轉移的卵巢癌患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。吳瀾等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在卵巢癌患者中B7H4的表達濃度可平均上升40%以上，在具有明顯的盆腔內轉移或者明顯腹水的患者中B7H4的表達濃度可進一步上升，且其研究還發(fā)現(xiàn)在Ⅲ期和Ⅳ期、發(fā)生淋巴結轉移的卵巢癌患者的血清中HE4、B7H4蛋白的表達濃度明顯上升，高于相應臨床分期較早組，提示HE4、B7H4的高表達對于卵巢癌的病情進展的影響。此外，本研究還探討了HE4、B7H4的診斷學價值，結果發(fā)現(xiàn)血清HE4、B7H4聯(lián)合檢測鑒別診斷卵巢癌的靈敏度、特異度高于HE4、B7H4單獨檢測，漏診率、誤診率低于HE4、B7H4單獨檢測，提示臨床上可以通過聯(lián)合檢測HE4、B7H4，進而評估卵巢癌的發(fā)生風險。

綜上所述，卵巢癌患者血清HE4、B7H4水平升高，并且與臨床分期增高、淋巴結轉移有關，二者聯(lián)合檢測有利于提高對卵巢癌的鑒別診斷能力。

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收稿日期：2020-07-17;修回日期：2020-08-04

編輯/杜帆