血清CCL18與TM4SF1水平檢測在卵巢良惡性腫瘤鑒別診斷中的價值研究

丁 潔，李阿利，李 靜

（中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九八七醫(yī)院婦產(chǎn)科, 陜西寶雞 721000）

卵巢癌(ovarian cancer)是婦科常見惡性腫瘤，其發(fā)病早期隱匿性強，與良性腫瘤臨床表現(xiàn)相近，這給卵巢癌早期診斷帶來困難，也使部分卵巢癌患者失去最佳治療時機，影響患者預后[1-2]。血清標記物檢測一直是卵巢癌早期篩查和診斷的重要依據(jù)，糖類抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）和人附睪蛋白（human epididymal secretory protein 4，HE4）是目前診斷卵巢癌最為廣泛的腫瘤標記物[3-4]，但近年來報道顯示CA125 特異度低，HE4 存在假陽性率，且CA125，HE4 表達受年齡、月經(jīng)狀態(tài)等因素影響[5-6]，使診斷效能降低。趨化因子配體18（chemokine ligand 18，CCL18）是具有調節(jié)腫瘤浸潤、轉移等作用的小分子分泌蛋白[7]，四次跨膜蛋白1（transmembrane-4-L-six-family-member-1，TM4SF1） 則為TM4SF 家族成員，報道顯示TM4SF1 參與乳腺癌、肺癌等多種惡性腫瘤癌變過程[8]。本研究收集84 例良惡性卵巢腫瘤患者臨床資料，探討血清CCL18 與TM4SF1 在卵巢癌鑒別診斷中的價值。報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2018年7月～2020年7月84例卵巢腫瘤患者作為研究對象，年齡18～65 歲，平均年齡46.27±16.51 歲；體重指數(shù)20.14±1.95kg/cm2。

納入標準：①卵巢腫瘤均參照中國抗癌協(xié)會婦科腫瘤專業(yè)委員會推薦指南標準，經(jīng)病理檢查確診[9]；②臨床病例資料完整；③患者均對本研究內容知情同意，并簽署知情同意書。

排除標準：①并發(fā)有子宮頸癌、乳腺癌等其他惡性腫瘤者；②既往已接受手術治療、生物治療者；③并發(fā)有泌尿系炎性疾病者。

1.2 儀器與試劑 CCL18 和TM4SF1 試劑盒均由上海百蕊生物科技有限公司提供，西門子ADVIA 2400 型全自動血液生化分析儀。

1.3 方法 在確診后3 天內采集患者清晨空腹靜脈血5ml，3 000r/min 離心10min，取上清液作為檢測標本。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清CCL18 與血清TM4SF1 水平。操作方法按試劑盒說明進行。

1.3 統(tǒng)計學分析 選用SPSS 20.0 軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，符合正態(tài)分布時，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較行t檢驗，計數(shù)資料以頻數(shù)（頻率）表示，組間比較行卡方檢驗，鑒別診斷價值采用受試者工作曲線（receiver operating characteristic，ROC）分析，結果以曲線下面積（area under curve，AUC）表示，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清CCL18 和TM4SF1 比較 見表1。84 例卵巢腫瘤患者中48 例為良性，36 例為惡性。良性腫瘤與惡性腫瘤患者血清CCL18，TM4SF1 水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。

表1 兩組血清CCL18 和TM4SF1 比較（±s，ng/ml）

表1 兩組血清CCL18 和TM4SF1 比較（±s，ng/ml）

指標良性腫瘤組（n=48）惡性腫瘤組（n=36）t 值P 值血清CCL1898.16±29.45162.07±35.239.050.00血清TM4SF1102.28±40.46 172.39±59.576.420.00

2.2 血清CCL18 和TM4SF1 鑒別診斷價值分析 見表2，圖1。ROC 分析顯示血清CCL18 和TM4SF1 聯(lián)合預測概率判斷卵巢惡性腫瘤的AUC 為0.85，顯著高于血清CCL18 和TM4SF1 單項檢測，差異有統(tǒng)計學意義（Z=-1.98，-2.19，P=0.03，0.01）。

表2 血清CCL18 和TM4SF1 鑒別診斷價值分析

圖1 血清CCL18 和TM4SF1 鑒別診斷卵巢腫瘤的ROC 分析

3 討論

目前，臨床對卵巢良惡性腫瘤的鑒別診斷主要依靠細胞學病理活檢，但該法為有創(chuàng)操作，重復性差，且活檢具有一定假陰性結果，影響診斷效能。而血清腫瘤標記物檢測重復性好，方法簡便，在臨床具有廣闊應用前景[10]。對于卵巢癌患者，CA125 是最為常用的腫瘤標記物，但其特異度和敏感度均有限，HE4 是近年來新發(fā)現(xiàn)的卵巢腫瘤標記物，動物實驗證實敲除HE4 基因后卵巢標準細胞株SKOV3 細胞的表皮生長因子受體磷酸化過程被阻斷[11]，邢瑞青等[12]還發(fā)現(xiàn)HE4 較CA125 診斷卵巢癌的準確性顯著提高。但也有報道顯示CA125與HE4 診斷效能并無顯著差異[13]。因而，單項檢測在診斷價值方面難以獲得顯著優(yōu)勢。

TM4SF1 是四次跨膜蛋白家族的重要成員，報道顯示TM4SF1 可通過抑制caspase-3 表達，促進肝癌發(fā)生發(fā)展[14]。PARK 等[15]的研究則發(fā)現(xiàn)TM4SF1 水平與血管內皮細胞生長因子和E-鈣黏蛋白水平呈相關性，TM4SF1 可通過調控上述因子促進結腸癌腫瘤細胞增殖侵襲，加快腫瘤生長。YE等[16]還證實TM4SF1 可通過Akt/mTOR，DDRI 信號通路直接調控乳腺癌腫瘤侵襲。上述結果說明TM4SF1 可能是腫瘤進展重要的血清標記物。本研究也發(fā)現(xiàn)良惡性卵巢腫瘤患者血清TM4SF1 水平差異顯著，提示TM4SF1 可能也參與卵巢腫瘤癌變。但目前有關其具體作用機制尚不明確，本研究進一步用ROC 分析發(fā)現(xiàn)TM4SF1 鑒別良惡性卵巢腫瘤的敏感度為0.72，提示TM4SF1 有助于卵巢惡性腫瘤的篩查。

CCL18 屬炎性趨化性小分子分泌蛋白，CCL18可促進腫瘤細胞染色體改變，增強細胞增殖能力，加快腫瘤癌變。朱軍義等[17]研究也說明CCL18 高表達可增強卵巢癌SKOV3 細胞侵襲能力。趙冰冰等[18]病理檢測也發(fā)現(xiàn)卵巢癌組織CCL18 表達水平顯著高于癌旁正常組織，這與本研究結果一致。高娜娜[19]報道證實CCL18 是卵巢癌三年生存率的獨立高危因素。本研究顯示卵巢良惡性腫瘤血清CCL18 水平存在顯著差異，進一步分析發(fā)現(xiàn)血清CCL18 在卵巢良惡性腫瘤鑒別診斷中的敏感度達0.83，而特異度僅0.54，提示血清CCL18 單項檢測有助于卵巢癌的早期診斷，但特異度有限。為此，本研究根據(jù)串聯(lián)診斷原則，即同時滿足陽性結果才判斷為陽性，利用ROC 計算血清TM4SF1 與CCL18 聯(lián)合預測概率判斷卵巢惡性腫瘤的價值，結果顯示血清TM4SF1 與血清CCL18 聯(lián)合檢測的預測概率判斷卵巢癌的AUC 達0.85，特異度達0.81，提示血清TM4SF1 可彌補CCL18 不足，這可能是因血清TM4SF1 與CCL18 可從不同途徑解釋卵巢惡性腫瘤的形成機制，因而聯(lián)合檢測可達到互補效果，上述結果說明聯(lián)合檢測對鑒別良惡性腫瘤具有重要價值。

綜上，血清TM4SF1 與CCL18 聯(lián)合檢測有助于卵巢良惡性腫瘤的臨床鑒別，具有較高應用價值。