柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接研究

盧玲，呂婷婷，黃其柳，黃小妹，宋曦，秦紅玲，刁麗梅*

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，廣西 南寧 530001；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023)

顳葉癲癇是局灶性癲癇的一種常見(jiàn)類型，具有反復(fù)發(fā)作的特點(diǎn)，極易發(fā)展成藥物難治性癲癇[1]。顳葉癲癇患者可伴有認(rèn)知功能障礙、焦慮、抑郁等并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患者的工作、學(xué)習(xí)和生活質(zhì)量[2]。長(zhǎng)期使用傳統(tǒng)的抗癲癇藥物可導(dǎo)致衰老及認(rèn)知功能障礙等。中醫(yī)藥治療癲癇歷史悠久，對(duì)于顳葉癲癇的輔助治療更具有較好的療效優(yōu)勢(shì)[3]。本課題組長(zhǎng)期的臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，柴胡-鉤藤配伍對(duì)顳葉癲癇的輔助治療具有良好的效果。近幾年的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究也表明，柴胡中含有的有效成分柴胡皂苷可以減低癲癇大鼠顳葉皮層、海馬區(qū)P-糖蛋白的表達(dá)，從而發(fā)揮抗癲癇作用[4]。鉤藤通過(guò)調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞，可降低腦損傷早期的癲癇易感性，且具有神經(jīng)保護(hù)作用[5]。但是，柴胡-鉤藤配伍的活性成分如何作用于顳葉癲癇的作用機(jī)制尚未有相關(guān)的研究和報(bào)道。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)融合了系統(tǒng)生物學(xué)、分子生物學(xué)、藥理學(xué)等多門學(xué)科，并以計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)為平臺(tái)來(lái)預(yù)測(cè)藥物的作用靶點(diǎn)、從而提高藥物發(fā)現(xiàn)效率[6]。分子對(duì)接技術(shù)是指通過(guò)計(jì)算機(jī)軟件預(yù)測(cè)藥物小分子與靶點(diǎn)蛋白之間的結(jié)合模式和親和力[7]。因此，本研究借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)，探討柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的作用機(jī)制，為柴胡-鉤藤配伍在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的應(yīng)用奠定了良好的基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 顳葉癲癇相關(guān)靶點(diǎn)的收集

以“Temporal Lobe Epilepsy”為關(guān)鍵詞分別在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)(https：//www.genecards.org/)以及OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)(https：//omim.org/search/advanced/)中檢索顳葉癲癇相關(guān)的靶點(diǎn)，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理去重。

1.2 中藥有效成分的查找

在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)(http：//tcmspw.com/tcmsp.php)中分別檢索柴胡、鉤藤的成分，并以藥物篩選建議：口服生物利用度(OB)[8]≥30%，類藥性(DL)[9]≥0.18為過(guò)濾條件，分別篩選得到柴胡和鉤藤的有效成分。

1.3 中藥作用靶點(diǎn)的收集

將篩選出的柴胡和鉤藤的有效成分分別輸入TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中，檢索獲得有效成分對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)。把成分及靶點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行編排去重，導(dǎo)入到UniProt 數(shù)據(jù)庫(kù)中(https：//www.uniprot.org/)，對(duì)靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行基因注釋，獲得靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)的Gene symbol。

1.4 柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的靶點(diǎn)

將顳葉癲癇相關(guān)的靶點(diǎn)以及柴胡-鉤藤配伍的作用靶點(diǎn)共同導(dǎo)入到venny2.1.0在線軟件中(https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/)進(jìn)行映射，得到柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的治療靶點(diǎn)。

1.5 蛋白-蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

把篩選出的治療靶點(diǎn)輸入到STRING數(shù)據(jù)庫(kù)(https：//string-db.org/)中，構(gòu)建蛋白-蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)(PPI網(wǎng)路)，以了解各個(gè)靶點(diǎn)蛋白之間是否存在著相互作用關(guān)系。

1.6 GO和KEGG富集分析

本研究中基因富集分析是基于R語(yǔ)言軟件(版本：v.3.5.0)條件下進(jìn)行的，其軟件包c(diǎn)lusterProfiler可以對(duì)基因集合或基因簇進(jìn)行GO和KEGG富集分析和可視化[10]。將治療靶點(diǎn)導(dǎo)入R語(yǔ)言軟件中進(jìn)行富集，并以P value<0.05且P.adjust<0.05為篩選條件，選取符合條件的前20的GO生物功能和KEGG通路。

1.7 “成分-靶點(diǎn)-通路-疾病”關(guān)系網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

對(duì)柴胡-鉤藤配伍的有效成分、顳葉癲癇的治療靶點(diǎn)、以及治療靶點(diǎn)富集前20條KEGG信號(hào)通路進(jìn)行編排。并將編排的關(guān)系對(duì)文件導(dǎo)入到Cytoscape3.6.1軟件中進(jìn)行可視化，構(gòu)建“柴胡-鉤藤藥對(duì)有效成分-治療靶點(diǎn)-KEGG信號(hào)通路-顳葉癲癇”多維關(guān)系網(wǎng)絡(luò)，計(jì)算網(wǎng)絡(luò)中的節(jié)點(diǎn)連接度(degree值)。選取degree值最大的靶點(diǎn)，即柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的核心治療靶點(diǎn)。

1.8 分子對(duì)接預(yù)測(cè)

為了解柴胡-鉤藤藥對(duì)的有效成分與治療靶點(diǎn)的結(jié)合情況，本研究通過(guò)分子對(duì)接技術(shù)將柴胡-鉤藤的有效成分分別與核心治療靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接。同時(shí)以顳葉癲癇常用藥物卡馬西平、丙戊酸鈉、左乙拉西坦作為對(duì)照分析。首先在RSCB PDB數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索獲得核心靶點(diǎn)蛋白的結(jié)構(gòu)信息；在PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)中查找獲得柴胡-鉤藤有效成分的結(jié)構(gòu)信息以及卡馬西平、丙戊酸鈉、左乙拉西坦的結(jié)構(gòu)信息；最后通過(guò)Autodock Vina實(shí)現(xiàn)小分子化合物與靶點(diǎn)蛋白的分子對(duì)接。

2 結(jié)果

2.1 顳葉癲癇相關(guān)的靶點(diǎn)

在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)檢索獲得2 780個(gè)顳葉癲癇的靶點(diǎn)，在OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)中查找得到553個(gè)顳葉癲癇靶點(diǎn)。對(duì)兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)的靶點(diǎn)信息進(jìn)行合并，去除重復(fù)部分后共得到顳葉癲癇相關(guān)的靶點(diǎn)3 230個(gè)。

2.2 柴胡-鉤藤藥對(duì)有效成分及靶點(diǎn)

根據(jù)過(guò)濾條件：口服生物利用度(OB)≥30%，類藥性(DL)≥0.18篩選出柴胡的有效成分17種，鉤藤的有效成分33種，共50種。根據(jù)藥物有效成分，在TCMSP中檢索共得到柴胡-鉤藤藥對(duì)有效成分作用的靶點(diǎn)200個(gè)。

2.3 柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的靶點(diǎn)

將顳葉癲癇相關(guān)的3 230個(gè)靶點(diǎn)以及柴胡-鉤藤藥對(duì)有效成分作用的200個(gè)靶點(diǎn)導(dǎo)入到venny中進(jìn)行映射，得到柴胡-鉤藤藥對(duì)治療顳葉癲癇的靶點(diǎn)共116個(gè)。對(duì)這116個(gè)治療靶點(diǎn)信息進(jìn)行編排，結(jié)果表明：在柴胡-鉤藤藥對(duì)的50種有效成分中，能作用于這116個(gè)治療靶點(diǎn)的有效成分有41種，部分有效成分見(jiàn)表1。

表1 柴胡-鉤藤配伍作用于顳葉癲癇的部分有效成分基本信息

2.4 構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)

把柴胡-鉤藤藥對(duì)治療顳葉癲癇的116個(gè)靶點(diǎn)輸入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)中，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖。結(jié)果表明：116個(gè)柴胡-鉤藤藥對(duì)作用于顳葉癲癇的治療靶點(diǎn)相互之間均存在直接或間接的作用關(guān)系，見(jiàn)圖1。其中PTGS2、MAPK1、AKT1、GASP3、VEGFA等治療靶點(diǎn)均在PPI網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。

2.5 GO和KEGG分析

本研究基于R語(yǔ)言軟件中的clusterProfiler包對(duì)116個(gè)治療靶點(diǎn)進(jìn)行GO和KEGG富集分析，并以P value<0.05且P.adjust<0.05為篩選條件，選取符合條件的前20的GO生物功能和KEGG通路。結(jié)果表明：治療靶點(diǎn)主要影響銨離子結(jié)合、兒茶酚胺結(jié)合、多巴胺結(jié)合、神經(jīng)遞質(zhì)受體的活動(dòng)、多巴胺神經(jīng)遞質(zhì)受體活動(dòng)、泛素樣蛋白連接酶結(jié)合、組蛋白激酶活性、類固醇激素受體活性、激酶調(diào)節(jié)活動(dòng)、細(xì)胞因子受體結(jié)合、泛素蛋白連接酶結(jié)合、核受體的活動(dòng)、轉(zhuǎn)錄因子活性，直接配體調(diào)控序列特異性DNA結(jié)合、RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、激活轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合、蛋白結(jié)合、G蛋白偶聯(lián)胺受體活性、支架蛋白結(jié)合、整合素結(jié)合等生物學(xué)功能，見(jiàn)圖2；并且主要涉及糖尿病并發(fā)癥的年齡-憤怒信號(hào)通路、流體剪切應(yīng)力和動(dòng)脈粥樣硬化、乙型肝炎、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染、前列腺癌、IL-17信號(hào)通路、腫瘤壞死因子信號(hào)通路、結(jié)腸直腸癌、人類巨細(xì)胞病毒感染、內(nèi)分泌的阻力、麻疹、胰腺癌、松弛素信號(hào)通路、多巴胺能神經(jīng)突觸、膀胱癌、eb病毒感染、VEGF信號(hào)通路、EGFR酪氨酸激酶抑制劑耐藥、丙型肝炎、肺結(jié)核等信號(hào)通路，見(jiàn)圖3。

注：灰度越深，圓形越大，則表明該靶點(diǎn)在PPI網(wǎng)絡(luò)中越重要。圖1 116個(gè)治療靶點(diǎn)的PPI關(guān)系網(wǎng)絡(luò)圖

注：橫坐標(biāo)代表基因數(shù)，縱坐標(biāo)代表GO條目，由上至下P值逐漸增大。圖2 GO 分析柱狀圖

2.6 構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)-通路-疾病”多維關(guān)系網(wǎng)絡(luò)

將柴胡-鉤藤藥對(duì)的41種有效成分、116個(gè)治療靶點(diǎn)以及治療靶點(diǎn)富集的前20條KEGG信號(hào)通路編排成關(guān)系對(duì)文件，導(dǎo)入Cytoscape軟件中進(jìn)行可視化分析，得到“柴胡-鉤藤藥對(duì)有效成分-治療靶點(diǎn)-KEGG通路-顳葉癲癇”多維關(guān)系網(wǎng)絡(luò)，見(jiàn)圖4。計(jì)算網(wǎng)絡(luò)中各個(gè)治療靶點(diǎn)的Degree值(表2)。結(jié)果表明：柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇是通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多通路共同起作用的。PTGS2是多維關(guān)系網(wǎng)絡(luò)中連接度最高的靶點(diǎn)，且它也是PPI網(wǎng)絡(luò)中的重要靶點(diǎn)。因此它可能是柴胡-鉤藤藥對(duì)治療顳葉癲癇的核心靶點(diǎn)，在治療機(jī)制中發(fā)揮著重要的作用。

表2 柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的前30個(gè)靶點(diǎn)

2.7 分子對(duì)接預(yù)測(cè)

通過(guò)分子對(duì)接技術(shù)預(yù)測(cè)核心治療靶點(diǎn)PTGS2與柴胡-鉤藤藥對(duì)的41種有效成分的結(jié)合情況，計(jì)算出靶點(diǎn)蛋白與有效成分之間的結(jié)合能，見(jiàn)表3。若結(jié)合能<0 kJ/mol，表明有效成分小分子與靶點(diǎn)蛋白可以自發(fā)地結(jié)合，親合能<-5.0 kJ/mol，表明其結(jié)合性良好，結(jié)合能越小則分子間對(duì)接越好[11]。分子對(duì)接的結(jié)果表明：柴胡-鉤藤配伍藥對(duì)的41種有效成分均與核心治療靶點(diǎn)PTGS2的結(jié)合性良好，且97.56%的有效成分結(jié)合性優(yōu)于左乙拉西坦和丙戊酸鈉。乙酸亞油醇酯與核心靶點(diǎn)的結(jié)合性較左乙拉西坦差，但與丙戊酸鈉相似。此外，有7.31%的有效成分與核心靶點(diǎn)的結(jié)合性優(yōu)于卡馬西平，其余有效成分結(jié)合性均與卡馬西平相近。綜上，柴胡-鉤藤配伍對(duì)顳葉癲癇的療效顯著可能是由于其有效成分與顳葉癲癇的藥物靶點(diǎn)之間的結(jié)合性良好。

3 討論

顳葉癲癇屬于中醫(yī)“癇病”“癇證”的范疇，與風(fēng)、痰、瘀、毒等病理因素密切相關(guān)[12]。早在《內(nèi)經(jīng)》有“諸風(fēng)掉眩皆屬于肝，熱盛動(dòng)風(fēng)，風(fēng)勝則動(dòng)”，《三因極一病證方論》曰：“夫癲癇病，皆由驚動(dòng)，使臟氣不平”;《醫(yī)方考》言：“癲疾者，風(fēng)痰之故也……風(fēng)熱盛于肝，則一身之筋牽掣，故令手足搐溺也”，均表明癇病的發(fā)病與肝氣疏泄失常密切相關(guān)。因此，中醫(yī)臨床上辨治癇病注重“從肝論治”[13-15]。常治以疏肝解郁、化痰熄風(fēng)，如本課題組臨床上常使用的加味柴胡疏肝湯，方中柴胡功善疏肝解郁，鉤藤平肝熄風(fēng)止痙之效佳，二者均歸肝經(jīng)，配伍應(yīng)用可增強(qiáng)治癇之力[16-19]。且既往基礎(chǔ)研究也證實(shí)了“從肝論治”復(fù)方加味柴胡疏肝湯的抗癲癇作用[20]。但是，加味柴胡疏肝湯中柴胡-鉤藤配伍抗癲癇作用機(jī)制尚未有相關(guān)的報(bào)道，因此本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對(duì)接技術(shù)初步揭示柴胡-鉤藤配伍對(duì)顳葉癲癇的治療作用機(jī)制。

本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)篩選出柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的有效成分有41種，治療靶點(diǎn)共116個(gè)；構(gòu)建了“PPI網(wǎng)絡(luò)”和“柴胡-鉤藤藥對(duì)有效成分-治療靶點(diǎn)-KEGG通路-顳葉癲癇”多維關(guān)系網(wǎng)絡(luò)，篩選出核心治療靶點(diǎn)PTGS2。結(jié)果表明：柴胡-鉤藤配伍的同一種有效成分可作用于多個(gè)治療靶點(diǎn)，同一個(gè)治療靶點(diǎn)亦可對(duì)應(yīng)多種有效成分；同一個(gè)治療靶點(diǎn)可參與多條信號(hào)通絡(luò)，同一條信號(hào)通路亦可富集多個(gè)治療靶點(diǎn)。因此，柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇是通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多通路共同起作用的。116個(gè)治療靶點(diǎn)之間均有直接或間接的相互作用關(guān)系，而核心靶點(diǎn)PTGS2在“成分-靶點(diǎn)-通路-疾病”關(guān)系網(wǎng)絡(luò)和“PPI網(wǎng)絡(luò)”中均發(fā)揮著重要的作用，它可能在柴胡-鉤藤藥對(duì)治療顳葉癲癇的機(jī)制中有著重要的意義。此外，本研究通過(guò)分子對(duì)接技術(shù)預(yù)測(cè)了核心治療靶點(diǎn)與柴胡-鉤藤配伍有效成分的結(jié)合性。結(jié)果表明：柴胡-鉤藤配伍對(duì)顳葉癲癇的療效顯著可能是由于其多種有效成分均與顳葉癲癇中的藥物靶點(diǎn)之間的結(jié)合性良好有關(guān)。

本研究篩選的核心治療靶點(diǎn)環(huán)氧合酶-2(PTGS2)是一種合成炎性介質(zhì)前列腺素的酶，已被廣泛報(bào)道在癲癇發(fā)作過(guò)程中被誘導(dǎo)，被認(rèn)為是癲癇治療的潛在神經(jīng)治療靶點(diǎn)[21]。研究表明，PTGS2在顳葉癲癇的急性期和慢性期表達(dá)均顯著上調(diào)，而在潛伏期表達(dá)不明顯，通過(guò)靶向PTGS2阻斷前列腺素級(jí)聯(lián)反應(yīng)已被認(rèn)為是干預(yù)顳葉癲癇急性發(fā)作或癲癇持續(xù)狀態(tài)的一種方法[22-23]。癲癇發(fā)作后，包括白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子α(TNFα)、環(huán)氧合酶-2(PTGS2)等關(guān)鍵炎癥介質(zhì)的表達(dá)明顯增加，可能導(dǎo)致腦內(nèi)繼發(fā)性損傷，增加癲癇反復(fù)發(fā)作的可能性。在癲癇大腦特定區(qū)域PTGS2水平的升高有助于識(shí)別癲癇引起的腦部炎癥區(qū)域，因此，PTGS2抑制劑對(duì)顳葉癲癇、炎癥等神經(jīng)系統(tǒng)疾病起到治療和干預(yù)作用[24]。綜上，PTGS2與顳葉癲癇的發(fā)病及治療密切相關(guān)。因此，PTGS2用于分子對(duì)接驗(yàn)證靶點(diǎn)與藥物有效成分的結(jié)合情況具有一定的可靠性。

靶點(diǎn)功能分析結(jié)果表明，治療靶點(diǎn)共影響了157個(gè)GO生物功能；涉及157個(gè)KEGG信號(hào)通路。治療靶點(diǎn)主要影響的離子結(jié)合、兒茶酚胺結(jié)合、多巴胺結(jié)合、神經(jīng)遞質(zhì)受體的活動(dòng)、多巴胺神經(jīng)遞質(zhì)受體活動(dòng)、類固醇激素受體活性、細(xì)胞因子受體結(jié)合、神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合、蛋白結(jié)合等生物學(xué)功能與文獻(xiàn)中報(bào)道相一致，均與癲癇及顳葉癲癇等的發(fā)生發(fā)展相關(guān)[25-29]。

治療靶點(diǎn)富集的KEGG信號(hào)通路中，與顳葉癲癇的發(fā)病相關(guān)的主要有IL-17信號(hào)通路、腫瘤壞死因子信號(hào)通路、內(nèi)分泌的阻力(Endocrine resistance)、多巴胺能神經(jīng)突觸(Dopaminergic synapse)、VEGF信號(hào)通路等。顳葉癲癇的發(fā)病與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，而炎性細(xì)胞因子血清白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子均是介導(dǎo)炎癥發(fā)生的重要參與因素[30-31]。研究證實(shí)在顳葉癲癇患者中，血清白細(xì)胞介素的水平明顯升高[25]。促炎性IL-17信號(hào)通路在藥物難治性癲癇免疫組學(xué)結(jié)構(gòu)中起著主導(dǎo)的作用[32]。促炎因子IL-17具有增加血腦屏障的通透性和神經(jīng)元興奮性的作用，其促炎作用可能與顳葉癲癇的發(fā)作有關(guān)。腫瘤壞死因子α(TNF-α)可以通過(guò)調(diào)節(jié)谷氨酸受體的運(yùn)輸，增加興奮性突觸的傳遞，從而導(dǎo)致包括顳葉癲癇在內(nèi)的癲癇發(fā)生率升高[33]。部分癲癇患者可伴有包括甲狀腺功能減退、生長(zhǎng)減慢、體重異常、生殖和性功能障礙等在內(nèi)的內(nèi)分泌系統(tǒng)并發(fā)癥，這可能與內(nèi)分泌阻力有關(guān)[34]。多巴胺能系統(tǒng)作為腦內(nèi)重要的神經(jīng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)，對(duì)神經(jīng)元興奮性有重要影響。研究發(fā)現(xiàn)顳葉癲癇患者存在著多巴胺介導(dǎo)的神經(jīng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)失衡，多巴胺在突觸中的持久性可能通過(guò)降低癲癇發(fā)作的閾值，從而導(dǎo)致癲癇更頻繁的發(fā)作[35]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)信號(hào)被證實(shí)是耐藥性顳葉癲癇的相關(guān)介質(zhì)。VEGF信號(hào)介導(dǎo)的腦血管重塑可能參與癲癇腦內(nèi)突觸神經(jīng)傳遞的調(diào)節(jié)。此外，VEGF的產(chǎn)生及其受體在內(nèi)皮細(xì)胞中的激活改變了血腦屏障的通透性，并可能加強(qiáng)神經(jīng)元損傷和癲癇的發(fā)作[36-37]。綜上，本研究篩選的116個(gè)治療靶點(diǎn)中，其富集的主要生物學(xué)功能及信號(hào)通路與顳葉癲癇密切相關(guān)，且與文獻(xiàn)報(bào)道大致相同。

近年的臨床研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)于使用卡馬西平治療無(wú)效的顳葉癲癇患者，添加左乙拉西坦可提高其療效，且優(yōu)于添加丙戊酸鈉[38]。而卡馬西平聯(lián)合丙戊酸鈉治療顳葉癲癇可減輕藥物的不良反應(yīng)[39]。因此，本研究選擇卡馬西平、左乙拉西坦、丙戊酸鈉作為對(duì)照藥物，進(jìn)行分子對(duì)接。結(jié)果表明：柴胡-鉤藤配伍的41種有效成分均可與核心治療靶點(diǎn)PTGS2結(jié)合良好，除了乙酸亞油醇酯(Linoleyl acetate)外，其余有效成分與核心靶點(diǎn)的結(jié)合性均優(yōu)于左乙拉西坦和丙戊酸鈉，且結(jié)合性優(yōu)于卡馬西平的有效成分有3種。這可能是柴胡-鉤藤配伍聯(lián)合西藥治療顳葉癲癇療效顯著的重要原因。

本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)，初步挖掘了柴胡-鉤藤配伍治療顳葉癲癇的活性成分及成分作用的治療靶點(diǎn)、靶點(diǎn)的相互作用關(guān)系、GO生物學(xué)功能及KEGG信號(hào)通路；構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)-通路-疾病”多維關(guān)系網(wǎng)絡(luò)；揭示柴胡-鉤藤配伍輔助治療顳葉癲癇的作用機(jī)制。結(jié)果表明：柴胡-鉤藤配伍的有效成分可能通過(guò)多靶點(diǎn)、多途徑、多通路對(duì)顳葉癲癇起到治療作用。

本研究探討柴胡與鉤藤的配伍具有理論上的創(chuàng)新性，也進(jìn)一步拓寬了柴胡-鉤藤配伍在臨床中的應(yīng)用，為本課題組在柴胡-鉤藤配伍應(yīng)用方面的深入研究奠定了良好的理論基礎(chǔ)。