基于代謝組學(xué)研究補(bǔ)腎解毒方對(duì)輻射損傷 大鼠的防護(hù)作用機(jī)制

曹惠敏 劉冬書 雷寧 李延暉 張蓉

〔摘要〕 目的 基于代謝組學(xué)初步探究補(bǔ)腎解毒方對(duì)輻射損傷大鼠的防護(hù)作用機(jī)制。方法 將60只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為假照射組、2 Gy輻射模型組、4 Gy輻射模型組、2 Gy補(bǔ)腎解毒方干預(yù)組和4 Gy補(bǔ)腎解毒方干預(yù)組，每組12只，假照射組和輻射模型組給予生理鹽水灌胃，補(bǔ)腎解毒方干預(yù)組給予補(bǔ)腎解毒方灌胃[組方生藥等效劑量9.45 g/（kg·d）]，連續(xù)灌胃10 d。第11 天，除假照射組外，其余組均進(jìn)行相應(yīng)劑量的γ射線全身輻射，輻射后24 h和72 h分別收集各組大鼠血清，高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜靶向檢測大鼠血清中氨基酸和?；鈮A的含量。結(jié)果 與假照射組相比，輻射大鼠血清代謝輪廓明顯改變，血清中賴氨酸含量明顯升高（P<0.01），瓜氨酸、谷氨酸、組氨酸、脯氨酸含量明顯降低（P<0.01），十四碳烯酰肉堿和蘇氨酸水平先降低后升高（P<0.01）。與輻射模型組相比，補(bǔ)腎解毒方可改善輻射大鼠血清代謝輪廓，明顯回調(diào)輻射大鼠血清中瓜氨酸、谷氨酸、組氨酸、賴氨酸、脯氨酸、蘇氨酸、十四碳烯酰肉堿含量（P<0.01或P<0.05），改善精氨酸生物合成、精氨酸和脯氨酸代謝、組氨酸代謝、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代謝等途徑。結(jié)論 補(bǔ)腎解毒方可能通過回調(diào)輻射大鼠血清中部分氨基酸和?；鈮A含量，改善相關(guān)代謝通路，發(fā)揮輻射防護(hù)作用。

〔關(guān)鍵詞〕 補(bǔ)腎解毒方;輻射;代謝組學(xué);氨基酸;?；鈮A

〔中圖分類號(hào)〕R285.5? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ?〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2021.06.007

Mechanism of Radiation Injury Protection of Rats of Bushen Jiedu Prescription

Based on Metabonomics

CAO Huimin1，2， LIU Dongshu2，3， LEI Ning2， LI Yanhui2， ZHANG Rong2*

（1. School of Pharmacy， Soochow University， Suzhou， Jiangsu 215021， China; 2. Rocket Army Characteristic Medical Center， Beijing 100088， China; 3. Jinzhou Medical University， Jinzhou， Liaoning 121001， China）

〔Abstract〕 Objective To explore the protective mechanism of Bushen Jiedu Prescription on radiation-damaged rats based on metabonomics. Methods 60 male Wistar rats were randomly divided into sham radiation group， 2 Gy radiation model group， 4 Gy radiation model group， 2 Gy Bushen Jiedu Prescription intervention group and 4 Gy Bushen Jiedu Prescription intervention group， with 12 rats in each group. Sham radiation group and radiation model groups were given normal saline by gavage， and the Bushen Jiedu Prescription intervention groups were given Bushen Jiedu Prescription [equivalent dose of crude drug was 9.45 g/（kg·d）] by gavage， for 10 consecutive days. On the 11th day， except for the sham irradiation group， the other groups received corresponding doses of γ-ray whole body radiation. After 24 hours and 72 hours after irradiation， the serum of rats of each group was collected. The content of amino acids and acylcarnitine in the blood of rats was detected by high performance liquid chromatography-mass spectrometry. Results Compared with the sham irradiation group， the serum metabolic profile of irradiated rats changed significantly （P<0.01）. The content of lysine in the serum was significantly increased （P<0.01）， the content of citrulline， glutamic acid， histidine， proline was significantly reduced （P<0.01）， and the levels of tetradecenoyl carnitine and threonine first decreased and then increased （P<0.01）. Compared with the radiation model group， Bushen Jiedu Prescription improved the serum metabolic profile of irradiated rats. The content of citrulline， glutamic acid， histidine， lysine， proline， threonine， and tetradecenoyl carnitine in the serum of irradiated rats was significantly returned （P<0.01 or P<0.05）， and improved arginine biosynthesis， arginine and proline

metabolism， histidine metabolism， D-glutamine and D-glutamate metabolism and other metabolic pathways. Conclusion Bushen Jiedu Prescription may improve the related metabolic pathways and exert radiation protection by adjusting the content of some amino acids and acylcarnitine in the serum of irradiated rats.

〔Keywords〕 Bushen Jiedu Prescription; radiation; metabolomics; amino acids; acylcarnitine

近年來，輻射在便利人們生活的同時(shí)，也帶來了意想不到的傷害，切爾諾貝利、福島、達(dá)喀爾等核事故加重了人類對(duì)輻射的擔(dān)憂[1-2]。輻射引起基因、mRNA、蛋白質(zhì)等代謝過程紊亂，損傷機(jī)體多個(gè)層面，造成體內(nèi)代謝物的異常消耗或蓄積[3]。代謝組學(xué)是檢測環(huán)境改變后，生物體內(nèi)源性小分子物質(zhì)變化及變化規(guī)律的一門學(xué)科，通過高通量檢測手段對(duì)生物體小分子物質(zhì)進(jìn)行定性和定量檢測，動(dòng)態(tài)監(jiān)測并反映生物表型變化[4-5]。

中醫(yī)藥是我國瑰寶，具有低毒高效、防治結(jié)合的特點(diǎn)，已廣泛用于輻射損傷的研究[6]。張蓉等[7-9]通過對(duì)輻射病癥進(jìn)行分析，從五臟角度提出了從腎論治核輻射的思想，并在前期實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎解毒方能夠通過干預(yù)TLR4/NF-KB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，影響IL-6、IL-10和TGF-β等下游炎性因子的表達(dá)，減輕胸腺、睪丸和子宮等主要臟器損傷，具有較好的輻射保護(hù)效果[10-12]。

氨基酸不僅是合成蛋白質(zhì)的基本單位，還能夠轉(zhuǎn)化為脂質(zhì)、糖等物質(zhì)，廣泛參與機(jī)體生理生化活動(dòng)[13];?；鈮A是機(jī)體脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)必不可少的載體，同時(shí)也在支鏈氨基酸代謝中扮演重要的角色[14]。體內(nèi)氨基酸和?；鈮A的水平與腎臟疾病和代謝疾病關(guān)系密切，對(duì)生物體內(nèi)氨基酸和酰基肉堿含量進(jìn)行分析，有助于疾病診斷新標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和機(jī)制研究[15-16]。所以本實(shí)驗(yàn)擬從輻射損傷大鼠血清中氨基酸和?；鈮A對(duì)補(bǔ)腎解毒方的輻射損傷防護(hù)作用機(jī)制進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供SPF級(jí)雄性Wistar大鼠60只，體質(zhì)量180～220 g，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SCXK（鄂）2020-0018。自由進(jìn)水?dāng)z食，普通顆粒飼料喂養(yǎng)。

1.2? 主要試劑

補(bǔ)腎解毒方方劑組成：熟地黃10 g，山茱萸12 g，山藥10 g，澤瀉10 g，茯苓10 g，牡丹皮10 g，冬蟲夏草3 g，白花蛇舌草10 g，購于北京康仁堂藥業(yè)有限公司并配置成中藥顆粒;0.9%氯化鈉注射液采購于火箭軍特色醫(yī)學(xué)中心;甲醇、乙腈、甲酸、純水均采購于美國Fisher Scientific公司，有機(jī)溶劑均為分析純;氨基酸靶向試劑盒（批號(hào)20200301#）和?；鈮A靶向試劑盒（批號(hào)20200105#）購于北京質(zhì)譜醫(yī)學(xué)有限公司。

1.3? 主要儀器

5810R型離心機(jī)（德國Eppendorf公司）;Ultimate 3000 LC液相（美國戴安公司）;API 3200 Q-TRAP MS質(zhì)譜（美國AB SCIEX公司）;Elekta Synergy直線加速器（瑞典Elekta公司）。

1.4? 造模

SPF級(jí)雄性Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為假照射組、2 Gy輻射模型組（簡稱2 Gy輻射組）、4 Gy輻射模型組（簡稱4 Gy輻射組）、2 Gy補(bǔ)腎解毒方干預(yù)組（簡稱2 Gy中藥組）和4 Gy補(bǔ)腎解毒方干預(yù)組（簡稱4 Gy中藥組），每組12只。適應(yīng)性喂養(yǎng)2 d后，每天上午8：00對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃，假照射組和輻射模型組給予9.45 g/（kg·d）的0.9%氯化鈉溶液灌胃;補(bǔ)腎解毒方干預(yù)組給予9.45 g/（kg·d）補(bǔ)腎解毒方中藥灌胃，連續(xù)灌胃10 d，第11天除假照射組外，其余各組分別接受2 Gy和4 Gy單次60Co γ射線全身照射（0.5 Gy/min），腹部向上，距離輻射源30 cm，假照射組放入相同環(huán)境但不給予輻射，輻射結(jié)束后繼續(xù)放入代謝籠中喂養(yǎng)。大鼠補(bǔ)腎解毒方給藥劑量參考《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》[17]，按照人體給藥劑量換算大鼠給藥劑量，組方生藥等效劑量9.45 g/（kg·d）。

1.5? 實(shí)驗(yàn)取材及樣本制備

分別于輻射暴露后的24 h和72 h，將各組大鼠用乙醚麻醉，稱重，眼眶采血，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)每組取樣6只。于4 ℃條件下將血漿靜置30 min，析出血清后，將其置于低溫高速離心機(jī)，4 ℃、3 000 g離心15 min，收集上清，儲(chǔ)存于-80 ℃冰箱，HPLC-MS/MS檢測備用。

1.6? 樣品處理及指標(biāo)檢測

吸取所有大鼠血清樣本各10 uL，混合均勻后得到質(zhì)控樣本。

樣本中氨基酸前處理和檢測方法：（1）取標(biāo)準(zhǔn)品混標(biāo)、待測樣本50 uL，加50 uL蛋白沉淀劑（含NVL），混勻后16 900 g冷凍離心4 min。取上清10 uL，加50 uL標(biāo)記緩沖液混勻，瞬離。再加20 uL衍生液混勻、瞬離，55 ℃恒溫衍生15 min。衍生后樣本置冰箱冷卻后混勻瞬離，取50 uL上機(jī)檢測。（2）液相條件：C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 um）;柱溫50 ℃;流速為1 mL/min;以水（含0.1%甲酸）為流動(dòng)相A，乙腈（含0.1%甲酸）為流動(dòng)相B，梯度洗脫程序?yàn)?～1 min 95% B，1～1.1 min 50% B，1.1～12 min 70% B，12～15 min 100% B，15～20 min 50% B;進(jìn)樣量為5 uL。（3）質(zhì)譜條件：離子源正離子模式，多反應(yīng)監(jiān)測掃描。噴霧電壓為+5 500 V，霧化氣為55 psi，輔助氣為60 psi，碰撞氣為Medium，霧化溫度為500 ℃，氣簾氣為20 psi，碰撞室射出電壓為2 V，射入電壓為10 V。

樣本中?；鈮A前處理和檢測方法：（1）配置內(nèi)標(biāo)液：取1支NSK-A瓶和1支NSK-B瓶，分別依次加入0.5 mL乙腈和0.5 mL去離子水，搖勻溶解，靜置5 min;將配好的NSK-A和NSK-B加入200 mL容量瓶中;甲醇反復(fù)5次清洗內(nèi)標(biāo)瓶，清洗液加入200 mL容量瓶中，甲醇定容到200 mL。（2）樣品提?。好總€(gè)樣品取5 uL，添加100 uL內(nèi)標(biāo)液，用保護(hù)薄膜密封。將密封好的96孔微濾板的上層樣品盤至于振蕩器上10 min。置于60 ℃恒溫下，氮?dú)獯蹈?。每孔分別添加60 uL衍生試劑，用保護(hù)薄膜密封。將密封好的下層樣品盤至于恒溫振蕩器上，控制65 ℃、600 g衍生反應(yīng)15 min。取下層樣品盤，移除保護(hù)薄膜。置于60 ℃恒溫下，氮?dú)獯蹈伞Ｏ蛞蜒苌玫臉悠分懈魈砑?00 uL復(fù)溶液。覆膜密封。室溫下200 g，振蕩15 min后，移除覆膜，改換鋁箔紙密封，待測。（3）液相條件：流動(dòng)相為20%水（含0.02%甲酸）-80%乙腈（含0.02%甲酸），流速程序?yàn)椋?.01～0.17） min×350 μL/min;（0.18～0.99） min×20 μL/min;（1.00～1.20） min×350 μL/min;提取液為甲醇;復(fù)溶液為80%乙腈-20%水（含0.02%甲酸）;衍生試劑為正丁醇∶乙酰氯=9∶1;進(jìn)樣量為20 μL。（4）質(zhì)譜條件：離子源正離子模式，多反應(yīng)監(jiān)測掃描。噴霧電壓為5 000 V，霧化氣為30 psi，輔助氣為30 psi，碰撞氣為Medium，氣簾氣為20 psi，質(zhì)核比掃描范圍為210～510，?；鈮A丁酯化子離子為85.10 Da。

1.7? 數(shù)據(jù)分析

使用氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，外標(biāo)法定量樣本中氨基酸;采用ChemoView提取?；鈮A數(shù)據(jù)，內(nèi)標(biāo)法定量樣本中酰基肉堿。利用Simca-P進(jìn)行主成分分析法（PCA-X）、偏最小二乘法（PLS-DA）和正交偏最小二乘法（OPLS-DA）模型擬合，確認(rèn)變量權(quán)重（VIP）>1和差異倍數(shù)（FC>1.2或FC<0.83）的代謝物;利用SPSS 20.0對(duì)各組代謝物進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;利用MetaboAnalyst對(duì)代謝物進(jìn)行代謝通路分析。

2 結(jié)果

2.1? 方法學(xué)結(jié)果

PCA-X模型顯示質(zhì)控樣本在得分圖中相對(duì)穩(wěn)定聚集，表明系統(tǒng)穩(wěn)定性良好，數(shù)據(jù)可靠。結(jié)果見圖1。

2.2? 多元統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

實(shí)驗(yàn)靶向測定大鼠血清中氨基酸和酰基肉堿，共99種代謝物。24 h PCA-X模型顯示輻射組、中藥組與假照射組基本分離，但4 Gy中藥組與輻射組有部分重疊;72 h PCA-X模型顯示輻射組、中藥組與假照射組明顯分離，無重疊。24 h PCA-X模型的解釋率（R2X）為0.652，模型的預(yù)測率（Q2）為0.372;72 h PCA-X模型的解釋率（R2X）為0.660，模型的預(yù)測率（Q2）為0.423。PCA-X模型見圖2。

24 h-2 Gy-PLS-DA模型顯示在95%置信區(qū)間內(nèi)，假照射組、輻射組和中藥組能夠明顯分離，各組樣本較為集中，模型參數(shù)R2X=0.315，R2Y=0.906，Q2=0.525。200次置換檢驗(yàn)結(jié)果顯示PLS-DA模型未出現(xiàn)過擬合，模型穩(wěn)定可靠，模型參數(shù)Intercept R2=0.554，Intercept Q2=-0.197。同理對(duì)其余時(shí)間點(diǎn)劑量點(diǎn)的輻射大鼠樣本進(jìn)行PLS-DA模型擬合，24 h-4 Gy-PLS-DA的各項(xiàng)模型參數(shù)R2X=0.377，R2Y=0.809，Q2=0.560，Intercept R2=0.462，Intercept Q2=-0.269;72 h-2 Gy-PLS-DA的各項(xiàng)模型參數(shù)R2X=0.373，R2Y=0.889，Q2=0.546，Intercept R2=0.496，Intercept Q2=-0.179;72 h-4 Gy-PLS-DA的各項(xiàng)模型參數(shù)R2X=0.429，R2Y=0.964，Q2=0.648，Intercept R2=0.813，Intercept Q2=-0.066。所有模型中假照射組、輻射組和中藥組均明顯分離，所有模型的200次置換檢驗(yàn)均顯示PLS-DA模型未過擬合，可用于后續(xù)分析。PLS-DA模型和200次置換檢驗(yàn)見圖3。

24 h-2 Gy假照射組與輻射組的OPLS-DA模型顯示，在95%置信區(qū)間內(nèi)兩組明顯分離，模型參數(shù)R2X=0.543，R2Y=0.997，Q2=0.934。同理對(duì)其余時(shí)間點(diǎn)劑量點(diǎn)的假照射組和輻射組樣本進(jìn)行OPLS-DA模型擬合。24 h-4 Gy假照射組和輻射組OPLS-DA模型各項(xiàng)參數(shù)R2X=0.421，R2Y=0.998，Q2=0.932;72 h-2 Gy假照射組和輻射組OPLS-DA模型各項(xiàng)參數(shù)R2X=0.480，R2Y=0.995，Q2=0.926;72 h-4 Gy假照射組和輻射組OPLS-DA模型各項(xiàng)參數(shù)R2X=0.464，R2Y=0.998，Q2=0.935。所有模型中假照射組和輻射組均明顯分離。OPLS-DA得分圖見圖4A、4B。

24 h-2 Gy輻射組和中藥組的OPLS-DA模型顯示，輻射組和中藥組組間差異明顯，模型各項(xiàng)參數(shù)R2X=0.398，R2Y=0.986，Q2=0.819。同理對(duì)其余時(shí)間點(diǎn)和劑量點(diǎn)的輻射組和中藥組樣本進(jìn)行OPLS-DA模型擬合。24 h-4 Gy輻射組和中藥組OPLS-DA模型各項(xiàng)參數(shù)R2X=0.517，R2Y=0.999，Q2=0.855;72 h-2 Gy輻射組和中藥組OPLS-DA模型各項(xiàng)參數(shù)R2X=0.490，R2Y=0.999，Q2=0.909;72 h-4 Gy輻射組和中藥組OPLS-DA模型各項(xiàng)參數(shù)R2X=0.434，R2Y=0.998，Q2=0.853。所有模型中輻射組和中藥組均明顯分離，模型成功建立。OPLS-DA得分圖見圖4C、4D。

2.3? 篩選差異代謝物和代謝通路

采用變量權(quán)重VIP（VIP>1）、顯著性差異P（P<0.05）以和差異倍數(shù)FC（FC>1.2或FC<0.83）篩選補(bǔ)腎解毒方顯著回調(diào)代謝物。與假照射組相比，輻射大鼠血清中賴氨酸含量明顯升高（P<0.01），瓜氨酸、谷氨酸、組氨酸、脯氨酸含量明顯降低（P<0.01），蘇氨酸和十四碳烯酰肉堿水平先降低后升高（P<0.01）;與輻射模型組相比，補(bǔ)腎解毒方干預(yù)后輻射大鼠血清中瓜氨酸、谷氨酸、組氨酸、脯氨酸顯著升高（P<0.01或P<0.05），賴氨酸水平明顯降低（P<0.01），蘇氨酸和十四碳烯酰肉堿水平明顯回調(diào)（P<0.01或P<0.05）。結(jié)果見圖5。

MetaboAnalyst代謝通路分析顯示，補(bǔ)腎解毒方的輻射損傷防護(hù)作用涉及4條顯著性代謝通路，包括精氨酸生物合成、精氨酸和脯氨酸代謝、組氨酸代謝、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代謝。結(jié)果見圖6。

3 討論

本課題組從輻射病癥和多年臨床經(jīng)驗(yàn)出發(fā)，結(jié)合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以六味地黃方為基礎(chǔ)，加冬蟲夏草和白花蛇舌草形成自擬方劑補(bǔ)腎解毒方，固腎之根本，保肺之嬌臟，具有補(bǔ)虛損、益精氣、解熱毒的效能。

本實(shí)驗(yàn)基于代謝組學(xué)對(duì)補(bǔ)腎解毒方的輻射防護(hù)機(jī)制進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎解毒方可以顯著回調(diào)輻射大鼠血清中7個(gè)代謝物，包括瓜氨酸、谷氨酸、組氨酸、賴氨酸、脯氨酸、蘇氨酸、十四碳烯酰肉堿，涉及精氨酸生物合成、精氨酸與脯氨酸代謝、組氨酸代謝和谷氨酰胺與谷氨酸代謝等通路，以上結(jié)果提示補(bǔ)腎解毒方的輻射防護(hù)效果可能是通過干預(yù)血清中多個(gè)代謝物靶點(diǎn)，引起內(nèi)源性代謝物的明顯回調(diào)，改善相關(guān)代謝通路。

瓜氨酸在精氨酸生物合成途徑中發(fā)揮重要作用，有研究[18-20]已證實(shí)瓜氨酸是輻射損傷的標(biāo)志物。輻射實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物血清中瓜氨酸的含量以劑量和時(shí)間依賴性方式降低[21]。Tang等[22]發(fā)現(xiàn)輻射后72 h，大鼠血漿中瓜氨酸含量隨著輻射劑量增加而顯著性下降，具有較好的劑量依賴關(guān)系[22]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎解毒方干預(yù)組大鼠血清瓜氨酸含量明顯高于輻射模型組，推測輻射導(dǎo)致胃腸道受損，引起血清中瓜氨酸水平明顯下降，補(bǔ)腎解毒方可以保護(hù)大鼠胃腸道，維持體內(nèi)瓜氨酸水平穩(wěn)定。

脯氨酸主要由精氨酸代謝產(chǎn)生，參與精氨酸與脯氨酸代謝途徑，具有維持氮平衡、抗氧化等作用。文獻(xiàn)報(bào)道[23]脯氨酸可以清除活性氧并抑制三葉草細(xì)胞凋亡。對(duì)輻射恒河猴的血清和尿液進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)輻射7 d后血清和尿液中脯氨酸含量均明顯變化[24]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)輻射后大鼠血清中脯氨酸明顯下降，補(bǔ)腎解毒方干預(yù)組脯氨酸含量明顯高于輻射模型組，說明補(bǔ)腎解毒方可以明顯提高血清中脯氨酸含量，發(fā)揮較強(qiáng)的抗氧化作用。

組氨酸參與組氨酸代謝，在組氨酸脫羧酶的作用下形成組胺，廣泛參與機(jī)體炎癥反應(yīng)，與核苷酸代謝密切相關(guān)。Miller等[25]發(fā)現(xiàn)電離輻射能夠升高CD47細(xì)胞中組氨酸、蘇氨酸、甘氨酸等含量，可能與甲基穩(wěn)態(tài)被破壞有關(guān)[22，26]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)輻射后大鼠血清中組氨酸水平明顯降低，可能原因是輻射損傷DNA、破壞機(jī)體甲基穩(wěn)態(tài)和能量循環(huán)，造成組氨酸水平異常。補(bǔ)腎解毒方干預(yù)后大鼠血清中組氨酸含量回調(diào)，推測補(bǔ)腎解毒方可以維持血清中組氨酸含量，保證機(jī)體甲基穩(wěn)態(tài)，修復(fù)DNA損傷。

谷氨酸與氨反應(yīng)生成谷氨酰胺，并轉(zhuǎn)移至肝臟參與尿素循環(huán)。研究[27]發(fā)現(xiàn)電離輻射引起T細(xì)胞中谷氨酸和脯氨酸等氨基酸發(fā)生明顯變化，對(duì)TCR觸發(fā)的T細(xì)胞的代謝重編程有不良影響。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)輻射模型組大鼠血清中谷氨酸含量明顯下降，可能原因是輻射損傷肝臟代謝、中樞神經(jīng)等組織，影響尿素循環(huán)等過程，補(bǔ)腎解毒方干預(yù)后，回調(diào)谷氨酸含量，維持機(jī)體內(nèi)循環(huán)穩(wěn)態(tài)。

本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)輻射大鼠血清中氨基酸和酰基肉堿的檢測，發(fā)現(xiàn)輻射降低大鼠血清中氨基酸和?；鈮A的含量，改變大鼠血清代謝輪廓，補(bǔ)腎解毒方可以顯著回調(diào)輻射大鼠血清中部分氨基酸和?；鈮A的含量，干預(yù)精氨酸、谷氨酸等代謝途徑，改善輻射大鼠血清代謝輪廓，發(fā)揮輻射防護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)從代謝層面對(duì)補(bǔ)腎解毒方的輻射損傷防護(hù)機(jī)制進(jìn)行初步探索，為進(jìn)一步完善和豐富補(bǔ)腎解毒方輻射防護(hù)提供理論基礎(chǔ)。

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