蛋白芯片法對(duì)肺結(jié)核的診斷價(jià)值分析

丁海霞，王曉艷

（周口市傳染病醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 周口466000）

目前臨床治療肺結(jié)核主要采用抗結(jié)核類(lèi)藥物，可有效殺滅致病菌，改善患者臨床體征，但該疾病具有較強(qiáng)的傳染性，臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，由于部分患者疾病發(fā)現(xiàn)不及時(shí)，提升疾病的傳播率［1］。因此，及時(shí)明確疾病，對(duì)減少致病菌傳播，改善患者健康具有積極意義。既往臨床早期診斷肺結(jié)核多采用抗酸染色法，但臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，漏診、誤診率較高，應(yīng)用具有一定局限性［2，3］。蛋白芯片法為一種新型的檢測(cè)方式，主要是利用微陣列技術(shù)，將抗原快速純化，然后通過(guò)顯色度判斷疾病發(fā)生情況，具有操作方便、結(jié)果出具較快等優(yōu)點(diǎn)［4］。考慮蛋白芯片法在肺結(jié)核診斷中可獲益。鑒于此，本研究將探討蛋白芯片法與抗酸染色法對(duì)肺結(jié)核的診斷價(jià)值。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年10月～2020年10月于本院就診的180例疑似肺結(jié)核患者作為研究對(duì)象，其中男101例、女79例；年齡31～68（49.20±1.25）歲；身體質(zhì)量指數(shù)15～28（21.36±0.54）kg/m2。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)［2018年審（412）號(hào)］。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均伴有不同程度的咳嗽、咳痰等癥狀；②無(wú)乙肝、艾滋病等其他傳染類(lèi)疾?。虎酆炇鹬橥鈺?shū)。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①重要臟器功能性障礙；②凝血功能異常；③肺結(jié)核疾病史。

1.3 方法

1.3.1 綜合診斷 參照符合《肺結(jié)核診斷和治療指南》［5］中肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合臨床體征、X線、痰涂片等檢查，將出現(xiàn)以下表現(xiàn)患者確診為肺結(jié)核，（1）伴有咳嗽、濃痰、咳中帶血等表現(xiàn)，且癥狀持續(xù)時(shí)間均≥2周。（2）X線檢查，提示肺部異常陰影，病灶邊緣存在模糊不清的斑片狀陰影，可有中心溶解或空洞。（3）痰液涂片檢查提示結(jié)核桿菌為陽(yáng)性。所有患者均接受蛋白芯片法及抗酸染色法檢查。

1.3.2 蛋白芯片法 分別采集所有患者晨起空腹靜脈血2～6ml，采用MD4-5CL型離心機(jī)（長(zhǎng)沙米淇?jī)x器設(shè)備有限公司提供）進(jìn)行離心，離心速度為4000r/min，離心時(shí)間為5min，離心半徑為13.5cm，完成后，取血清，將100μl血清滴入蛋白芯片試劑盒中（武漢安特捷生物技術(shù)也有限公司），并滴入抗原A，放置于室溫下靜置30s，等待血清與抗原A完全融合后，向試劑盒中加入抗原B、抗原C，并放置于含有5%二氧化碳的孵育箱中，反應(yīng)18h，然后加入50μl顯色溶液，在室溫下反應(yīng)10min，完成后，采用蛋白芯片閱讀儀（江蘇三聯(lián)生物工程有限公司提供）對(duì)質(zhì)控位點(diǎn)的顯色情況進(jìn)行讀取，其中任意一位點(diǎn)出現(xiàn)顯色，即提示為陽(yáng)性。

1.3.1 抗酸染色法 分別采集所有患者晨起漱口后第一口痰液，并采用石蠟將痰液固定，制作成圖片標(biāo)本，向標(biāo)本中滴入石碳酸復(fù)紅滴，并在酒精燈上加熱3min，等待痰液標(biāo)本冷卻后，加入3%鹽酸酒精進(jìn)行脫色處理，后采用美蘭溶液進(jìn)行復(fù)染，完成后，在IMS-2515F型高倍顯微鏡（蘇州富萊恩電子科技有限公司提供）下觀察，其中視野內(nèi)出現(xiàn)抗酸桿菌，則提示為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料采用±s表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用例（百分率）表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 綜合診斷結(jié)果分析 180例疑似肺結(jié)核患者中，經(jīng)綜合診斷結(jié)果顯示，61例確診為肺結(jié)核，占33.89%；119例為非肺結(jié)核，占66.11%。見(jiàn)表1。

表1 綜合診斷結(jié)果［n（%）］

2.2 蛋白芯片法與抗酸染色法對(duì)肺結(jié)核的診斷價(jià)值對(duì)比 蛋白芯片法診斷肺結(jié)核的準(zhǔn)確度、靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值高于抗酸染色法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；蛋白芯片法診斷肺結(jié)核的特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)價(jià)值略高于抗酸染色法檢查，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；抗酸染色法診斷肺結(jié)核結(jié)果與綜合診斷結(jié)果具有理想的一致性（Kappa=0.608）；蛋白芯片法診斷肺結(jié)核結(jié)果與綜合診斷結(jié)果具有極好的一致性（Kappa=0.854）。見(jiàn)表2～4。

表2 蛋白芯片法檢查結(jié)果（n）

表3 抗酸染色法檢查結(jié)果（n）

表4 蛋白芯片法與抗酸染色法對(duì)肺結(jié)核的診斷價(jià)值對(duì)比［n(%)］

3 討論

肺結(jié)核為臨床常見(jiàn)的感染性疾病，主要由于感染結(jié)核分支桿菌，引發(fā)的一系列慢性呼吸系統(tǒng)疾病，如未及時(shí)治療，可造成肺功能?chē)?yán)重?fù)p傷。肺結(jié)核主要通過(guò)飛沫進(jìn)行傳播，具有較強(qiáng)的傳染性，故及時(shí)發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核，對(duì)控制疾病傳播尤為重要［6］。目前臨床早期檢測(cè)肺結(jié)核的方式較多，效果參差不齊，因此，本研究旨在探尋一種快速、高效的檢測(cè)方式，以期進(jìn)一步提升肺結(jié)核的檢出率。

本研究結(jié)果顯示，抗酸染色法檢查與綜合診斷結(jié)果具有理想的一致性，表明，抗酸染色法對(duì)肺結(jié)核具有一定的檢測(cè)價(jià)值，但該檢查方式，主要以患者痰液為檢測(cè)樣本，檢測(cè)結(jié)果易受到痰液質(zhì)量及濃度的影響，且還易受到染色劑質(zhì)量的影響，因此，臨床存在部分漏診、誤診情況，應(yīng)用具有一定局限性［7］。本研究結(jié)果顯示，蛋白芯片法診斷肺結(jié)核的準(zhǔn)確度、靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值高于抗酸染色法（P＜0.05）；且蛋白芯片法診斷肺結(jié)核的特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)價(jià)值略高于抗酸染色法檢查，但無(wú)差異（P＞0.05）；蛋白芯片法診斷肺結(jié)核結(jié)果與綜合診斷結(jié)果具有極好的一致性（Kappa=0.854）。分析原因在于，蛋白芯片法為一種新型的檢測(cè)方式，近年來(lái)被逐漸應(yīng)用于肺結(jié)核疾病早期診斷中，其主要以微孔濾膜為載體，應(yīng)用微陣列技術(shù)將3種抗原快速固定于同一膜片上，并快速將抗原，通過(guò)純化、凝集、免疫應(yīng)答反應(yīng)等作用，使抗原在膜上顯色，臨床可根據(jù)抗原顯色情況診斷疾病，具有操作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉、結(jié)果出具迅速等優(yōu)點(diǎn)［8，9］。此外，蛋白芯片法中可同步對(duì)3種抗原的抗體進(jìn)行檢測(cè)，其中當(dāng)任意一種抗原顯色時(shí)，即可明確疾病發(fā)生情況，其不受顯色劑的影響，進(jìn)一步提升檢測(cè)的準(zhǔn)確性［10］。但蛋白芯片法在高齡患者中容易出現(xiàn)假陰性，主要與該檢測(cè)方式中抗原的免疫應(yīng)答反應(yīng)有關(guān)，高齡患者血清免疫應(yīng)答反應(yīng)相對(duì)較低，臨床可結(jié)合胸部影像學(xué)檢查綜合分析。

綜上所述，蛋白芯片法對(duì)肺結(jié)核診斷的準(zhǔn)確度、靈敏度均高于抗酸染色法，具有較高的診斷價(jià)值，可為臨床及時(shí)診斷肺結(jié)核提供可靠依據(jù)，值得臨床推廣與應(yīng)用。