延衰組合物對酵母細胞壽命及氧化應激的研究

王敏，廖林鋒，孫曉宇，任嬌艷，2*

（1.華南理工大學食品科學與工程學院，廣東 廣州 510641；2.中新國際聯(lián)合研究院，廣東 廣州 510000）

衰老是生物隨著時間的推移， 自發(fā)的必然過程，也是應激、勞損、營養(yǎng)失調和功能障礙等導致的結果[1]。 目前，關于抗衰老及相應抗衰老劑方面的研究對人類生命、社會、經(jīng)濟具有重要價值，仍需積極探索。衰老機制的研究是生命科學領域的前沿課題，由于機體衰老過程受到外界各種因素的干擾，所以衰老研究非常復雜。 酵母細胞與人類的體細胞非常相似，酵母細胞作為衰老的研究模型具有諸多優(yōu)點：生活周期較短、遺傳背景簡單、基因組已完全破譯，可進行遺傳操作，重要的是酵母細胞內與衰老相關的新陳代謝及信號轉導通路具有高度的保守性[2-4]。 幾十年來，酵母細胞應用于衰老方面研究取得了較大進展。 在能量限制條件下，酵母細胞會退出有絲分裂細胞周期，并獲得一系列特定的靜息細胞特性以延長壽命，且抗逆性增加[5]。 酵母細胞內激酶（Rim15、Mck1、Yak1）、復合物SNF1/AMPK、細胞壁完整性通路以及許多細胞周期調節(jié)因子被證明是酵母建立適當?shù)撵o息狀態(tài)和延長其時序壽命所必需的。 此外，研究發(fā)現(xiàn)減少酵母細胞內的毒性氧化物[如活性氧（reactive oxygen species，ROS）]可顯著延長酵母細胞壽命[6]。 因此，利用酵母細胞進行延衰活性物質篩選及其延衰機理研究，具有可行性和優(yōu)越性。

中國的傳統(tǒng)植物資源豐富，從中尋找高效、低副作用的活性物質具有重要的研究價值。 西洋參又稱美國人參、花旗參，為五加科人參屬植物，其性涼，味甘、微苦，具有補氣養(yǎng)陰、清熱（虛火）生津的功效[7]；五味子味酸斂，可益氣斂陰補腎，收耗散之氣[8]；葛根、麥冬和茯苓，具有健脾生津利水的功效[9-11]。 現(xiàn)代藥理學研究表明，西洋參、五味子、葛根、麥冬和茯苓中均含有諸多抗氧化活性成分（如皂苷、多糖、多酚、氨基酸等），可有效清除衰老過程中的自由基， 減少機體的氧化損傷，因而具有潛在的延衰功效[12-14]。 但衰老是多組織和器官的問題，涉及的治療靶點往往不止一個，因而單一活性成分研究已不能滿足其要求。 近年來，基于中醫(yī)藥理論利用各原料進行科學合理的配伍而獲得的組合物及其機理研究逐漸受到廣泛的關注，并取得了顯著的成效。 組方的配伍，一方面可以發(fā)揮協(xié)同作用，提高療效以適應復雜多靶點的治療；另外一方面可發(fā)揮拮抗作用，減少不良反應以利于治療[15]。基于上述背景，本文將西洋參、五味子、葛根、麥冬和茯苓進行組合配比，利用酵母細胞模型，探討單一原料及其組合物在延緩衰老方面的效果，這將為天然植物活性物質在研發(fā)延緩衰老的功能性食品和藥品方面提供有益的參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

酵母細胞（野生型菌株BY4742、 共轉染質粒pRS426-pSSA3-RFP 株和共轉染質粒pRS425-pHsp26-VFP 株） 均由劍橋大學生物化學系Nianshu Zhang 教授提供；細菌培養(yǎng)用酵母抽提物（微生物用）、D-（+）-葡萄糖（生化試劑）、瓊脂（生化試劑）、不含氨基酸的酵母氮堿（微生物用）、甘油（生化試劑）、聚乙二醇4000（生化試劑）、硫酸腺嘌呤、L-鹽酸組氨酸、L-色氨酸、L-亮氨酸、L-鹽酸賴氨酸：BBI Life Science 公司；西洋參片（批號19041705）、葛根（批號Y181008-01）： 安國市一方藥業(yè)有限公司； 五味子（批號181201）： 廣東杏林藥業(yè)有限公司； 茯苓（批號Y180208-01、QKFL181104）： 安徽金寨喬康藥業(yè)有限公司；麥冬（批號180701）：四川新荷花中藥飲片股份有限公司。 蛋白胨（微生物用）、乙酸鋰二水（分析純）、三羥甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸緩沖液（tris-ethylene diamine tetraacetic acid，TE，分析純）：生工生物工程（上海）股份有限公司；丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、肌醇、賴氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸、對氨基苯甲酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、酪氨酸、蘇氨酸、纈氨酸：上海源葉生物科技有限公司； 二氫羅丹明123（Dihydrorhodamine 123，DHR123，D1504）、海藻糖酶（2.6U/mg 蛋白）、淀粉葡萄糖苷酶（30 U/mg 蛋白～60 U/mg 蛋白）、葡萄糖檢測試劑盒（GAGO-20）：Sigma-Aldrich 公司；碘代3，3'-二己氧基羰花青試劑盒（3，3'-dihexyloxacarbocyanine Iodide，DiOC6（3））：Abbkine 科技有限公司；乙醇、濃硫酸等試劑均為分析純：廣州從源試劑有限公司。

1.2 儀器與設備

全溫振蕩培養(yǎng)箱（HZQ-F160）：太倉市強樂實驗設備有限公司；渦旋混合儀（XW-80A）：麒麟貝爾實驗室儀器有限公司；水浴恒溫振蕩器（THZ-82A）：常州澳華儀器有限公司；分析天平（FA2104N）：上海民橋精密科學儀器有限公司；高壓滅菌鍋（LDZC-40BI）：上海申安醫(yī)療器械廠；超凈工作臺（SW-CJ）：蘇州安泰空氣技術有限公司；高速冷凍離心機（H2050R）：長沙湘儀離心機儀器有限公司； 全功能微孔板檢測酶標儀（Synergy H1）：美國伯騰儀器有限公司；流式細胞儀（CytoFlex）：美國貝克曼庫爾特公司；超聲波清洗器（KQ5200DE）：昆山市超聲儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 原料及組合提取物粉末的制備和配制

西洋參、葛根、五味子、麥冬和茯苓提取物制備：稱取原料各100 g，粉碎過60 目篩，以1∶10（g/mL）的料液比加入65%乙醇進行微沸回流提取2 h， 過濾后取上清液；過濾后的濾渣繼續(xù)以1∶8（g/mL）的料液比加入65%乙醇進行二次微沸回流提取，提取時間為2 h，過濾棄渣，5 000 r/min 離心15 min，合并濾液，（60±3）℃真空濃縮，冷凍干燥，干燥器避光保存?zhèn)溆谩?/p>

組合提取物制備：將西洋參、麥冬、茯苓、葛根、五味子按4∶2∶3∶4∶3 的質量比例分別稱取25、12.5、18.75、25、18.75 g 原料粉末（過60 目篩），混勻，以1∶10（g/mL）的料液比加入65%乙醇進行微沸回流提取2 h， 過濾后取上清液；混合物濾渣繼續(xù)以1∶8（g/mL）的料液比加入65%乙醇進行二次微沸回流提取，提取時間為2 h，過濾棄渣，5 000 r/min 離心15 min， 合并濾液，（60 ±3）℃真空濃縮，冷凍干燥，干燥器避光保存?zhèn)溆谩?/p>

提取物液配制：各提取物粉末用液體的酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基（yeast extract peptone dextrose medium，YPD）溶解成終濃度為2 mg/mL 的母液，此母液經(jīng)0.22 μm 的無菌濾頭過濾，放置4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 酵母細胞培養(yǎng)

接種環(huán)于酒精燈外焰灼燒滅菌后，從裝有野生型菌株（BY4742）的甘油管中蘸取一環(huán)菌液，以平板劃線方式在固體酵母平板YPD 培養(yǎng)基上逐漸稀釋菌液，劃線后的固體平板在30 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 d。 取出劃線生長2 d 后的固體YPD 平板， 挑單菌落于裝有5 mL～10 mL YPD 液體培養(yǎng)基的50 mL 試管中， 置于30 ℃、200 r/min 的搖床中過夜培養(yǎng)，用于后續(xù)試驗[5]。

1.3.3 酵母細胞增殖檢測

將過夜培養(yǎng)后的BY4742 菌液以1∶50（體積比）的接種比例接種于含藥物濃度為250、500、1 000 μg/mL的YPD 培養(yǎng)液中，并設置各自溶劑對照，以200 μL/孔的液體量培養(yǎng)于96 孔板中，每個濃度設置4 個平行復孔， 于酶標儀中， 在30 ℃下以連續(xù)振板方式培養(yǎng)，在OD595nm下每15 min 讀數(shù)一次，培養(yǎng)24 h，計算代時（即酵母繁殖一代所需時間）[5]。

1.3.4 酵母細胞時序壽命（chronological lifespan，CLS）檢測

將酵母株按1∶50（體積比）接種在含1 000 μg/mL各原料和組合提取物的酵母氨基酸缺陷型合成培養(yǎng)基（yeast synthetic drop-out medium，SD）中振蕩培養(yǎng)8 d，分別在培養(yǎng)的3 d 和8 d 后取出酵母培養(yǎng)液，采用單克隆計數(shù)法（colony forming units，CFU）測定干預后的酵母BY4742 株形成單菌落的能力。 干預后的酵母細胞按照1∶10、1∶50 和1∶250 的稀釋梯度不斷稀釋，將最終稀釋125 000 倍的酵母細胞液涂瓊脂平板，在30 ℃條件的培養(yǎng)箱中生長3 d， 拍照并使用Image J 軟件進行單菌落計數(shù)統(tǒng)計。 酵母細胞的存活率計算：將每組培養(yǎng)3 d 后的酵母形成單菌落個數(shù)標記為A，培養(yǎng)8 d 后酵母形成單菌落個數(shù)標記為a，3 d 后計數(shù)得到的單菌落數(shù)酵母細胞存活率為（A/A×100）%，標記為CLS0，此時各組的CLS0 存活率均為100%，8 d 后酵母細胞存活率為（a/A×100）%（即為相對CFU%）[16]。

1.3.5 酵母細胞內活性氧檢測

將酵母株按1∶50（體積比）接種在40 mL 濃度為1 000 μg/mL 的組合提取物培養(yǎng)液中，在30 ℃、200 r/min的搖床中培養(yǎng)。 培養(yǎng)24 h 后，取樣檢測酵母細胞活性氧水平。 將OD595nm值為0.5～0.6 的酵母培養(yǎng)液，25 ℃、11 000 r/min 離心1 min，收集沉淀酵母細胞。用200 μL磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer saline，PBS）洗滌1 次，然后重懸于200 μL PBS 中。將50 μL 細胞加入到含有10 μmol 二氫羅丹明123（DHR 123）的1 mL PBS 中。避光，并在30 ℃下孵育60 min，用200 μL PBS 洗滌細胞一次，并重懸于1 mL PBS 中。在輕度超聲處理后，使用流式細胞儀[激發(fā)波長：488 nm，發(fā)射波長：（530±30）nm]檢測細胞熒光強度[17]。

1.3.6 酵母細胞內線粒體膜電位（mitochondrial membrane potential，MMP）檢測

將酵母株按1 ∶50（體積比）接種在40 mL 濃度為1000μg/mL 的組合提取物培養(yǎng)液中，在30℃、200 r/min的搖床中培養(yǎng)。 培養(yǎng)24 h 后，取樣檢測酵母細胞活性氧水平。 將OD595nm值為0.5～0.6 的酵母培養(yǎng)液，25 ℃、11 000 r/min 離心1 min，收集沉淀酵母細胞，用200 μL PBS 洗滌1 次，然后重懸于200 μL PBS 中。將100 μL細胞加入到0.9 mL 用PBS 稀釋后終濃度為200 nmol/L DiOC6（3）熒光探針中。 細胞懸液在30 ℃下避光孵育30 min，用PBS 洗滌一次并重懸于PBS 中，用流式細胞儀（激發(fā)波長：482 nm，發(fā)射波長：504 nm）中異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）通道檢測細胞熒光強度。

1.3.7 酵母細胞內應激轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1激活程度的檢測

利用含2%葡萄糖的酵母基礎培養(yǎng)基（yeast synthetic condition minimal medium，SC） 復蘇已轉化質粒（pRS426-pSSA3-RFP 與pRS425-pHsp26-VFP） 的酵母菌株液，30 ℃、200 r/min 過夜培養(yǎng)。 將過夜培養(yǎng)的含質粒酵母細胞以1∶50（體積比）接種在低糖（0.6%葡萄糖）SC 培養(yǎng)基配制的含1 000 μg/mL 組合提取物培養(yǎng)液中，干預24 h 后利用流式細胞儀測定酵母細胞中由啟動子控制的應激轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1 的激活熒光變化。 2 000 r/min 離心5 min 收集干預后的酵母細胞，用PBS 清洗1 遍后，再用PBS 重懸。流式細胞儀上機檢測，紅色熒光蛋白（red fluorescent protein，RFP）的激發(fā)波長為（580±10）nm，發(fā)射波長為（610±10）nm；綠色熒光蛋白（vivid Verde fluorescent protein，VFP）的激發(fā)波長為（500±10）nm，發(fā)射波長為（540±10）nm[5]。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

所有數(shù)據(jù)均進行平行測定3 次，數(shù)據(jù)結果以平均值±標準誤的形式表示，采用Prism 6 軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，兩組之間采用t 檢驗，多組之間通過方差分析（one way ANOVA）做顯著性分析，p ＜0.05 為有統(tǒng)計學意義，圖表采用GraphPad Prism 6 進行繪制。

2 結果與分析

2.1 不同原料提取物及組合提取物對酵母細胞生長的影響

代時表示酵母細胞分裂一次所需的時間，表征酵母細胞在藥物或者溶劑下的生長情況。 酵母細胞生長曲線圖見圖1。

如圖1 所示， 酵母細胞在0～5 h 處于生長的延滯期，即適應環(huán)境及慢速生長時期；5 h～10 h 處在生長對數(shù)期，酵母細胞汲取營養(yǎng)，營養(yǎng)消耗速率較快，酵母細胞快速生長，細胞數(shù)量以指數(shù)形式增加；在12 h 后，酵母細胞群體達到穩(wěn)定，處于細胞生長的穩(wěn)定期，細胞數(shù)量處于動態(tài)變化，整體數(shù)量基本不變。 數(shù)據(jù)處理選取了對數(shù)期（5 h～10 h）細胞生長數(shù)據(jù)，根據(jù)指數(shù)期生長曲線公式，計算細胞生長代時。

各原料提取物及組合提取物在3 個濃度（250、500、1 000 μg/mL）下對酵母細胞生長的影響見圖2。

由圖2 可知， 不同濃度下的西洋參、 五味子、麥冬、葛根及組合提取物對酵母生長沒有明顯的抑制或者促進作用（p＞0.05）。 此外，茯苓干預組在濃度為500 μg/mL～1 000 μg/mL 范圍內可顯著抑制酵母細胞生長（p＜0.05）。

圖2 各原料提取物及組合提取物對酵母細胞生長的影響Fig.2 Effects of individual extracts and combined extracts on the growth of yeast cells

2.2 不同原料提取物及組合提取物對酵母細胞時序壽命的影響

在裂殖酵母中，細胞壽命可分為兩種形式：一種是復制壽命（replicative lifespan，RLS），指母細胞在衰老前可產(chǎn)生子細胞數(shù)量；另一種是時序壽命（CLS），指不分裂的細胞在穩(wěn)定期中所能存活的時間[18]。 而酵母細胞時序壽命形式更能反映哺乳動物細胞在分裂完成后存活的時間長短，反映哺乳動物細胞壽命，因此，采用時序壽命指標評價各單一原料提取物及其組合提取物的延衰活性。

試驗中檢測了西洋參、五味子、麥冬、茯苓、葛根和組合提取物分別干預8 d 后，其酵母細胞存活情況，即形成單克隆菌群的能力，結果如圖3 所示。

圖3 各原料提取物及組合提取物對酵母細胞時序壽命的影響Fig.3 Effects of individual extracts and combined extracts on the CLS of yeast cells

由圖3 可知，與溶劑組（51.00±3.94）%相比，在組合提取物干預酵母細胞8 d 后， 該組的細胞存活率為（126.81± 5.22）%（p＜0.05）；而五味子、葛根、麥冬、茯苓單一提取物組與溶劑組無顯著性差異（p＞0.05），與組合提取物組存在顯著性差異（p＜0.05）。 這些結果表明，相比于組合物中各單一提取物，組合提取物可顯著延長酵母細胞的壽命， 其延衰效果優(yōu)于單一原料，說明組合的原料之間具有潛在的協(xié)同增效作用。 此外，研究發(fā)現(xiàn)，西洋參組的延長酵母時序壽命效果優(yōu)于其它原料單一成分效果（p＜0.05），這說明組合物中延衰成分可能主要來自于西洋參。

2.3 組合提取物對酵母細胞內活性氧水平的影響

文獻報道指出酵母的壽命與細胞內活性氧水平等密切相關[19]。 活性氧（ROS）的產(chǎn)生是造成細胞氧化損傷的一個主要原因， 伴隨著衰老的發(fā)生，ROS 的產(chǎn)生逐步增加，引起胞內脂質、蛋白及核酸等大分子的損傷積累，最終可導致細胞功能損傷，引起細胞死亡，而增加細胞的抗氧化能力可以延長多種生物的壽命[20]。試驗采用一種自由基熒光染料羅丹明123（DHR123）檢測胞內的ROS 積累情況，根據(jù)活細胞中熒光的產(chǎn)生情況，可以判斷ROS 含量的多少及變化。 組合提取物處理對酵母細胞內ROS 水平的影響見圖4。

圖4 組合提取物處理對酵母細胞內ROS 水平的影響Fig.4 Effects of the combined extracts on intracellular ROS levels of yeast cells

如圖4 所示：與溶劑組（100 ± 3.74）%相比，組合提取物可高度顯著降低酵母細胞內的ROS 水平（82.17±2.48）%（p＜0.001），起到較好的細胞內抗氧化效果。

2.4 組合提取物對酵母細胞線粒體膜電位的影響

線粒體膜電位（MMP）是評價線粒體產(chǎn)能作用的重要參數(shù)，是維持氧化磷酸化（oxidative phosphorylation，OXPHO）期間能量儲存過程中的重要因素[21]。 酵母線粒體膜電位的測定選擇一種具細胞膜滲透性、發(fā)綠色熒光的親脂性探針DiOC6（3）可在低濃度下偏向性選擇染色線粒體。 組合提取物處理對酵母細胞內線粒體膜電位的影響見圖5。

由圖5 可知， 組合提取物干預組的相對熒光強度（54.44±1.23）%高度顯著低于溶劑對照組（100±1.44）%（p＜0.001）。 線粒體膜電位越高，線粒體產(chǎn)生的能量越多，促進細胞能量轉化。 因而，組合提取物可通過降低線粒體膜電位， 使酵母產(chǎn)生和釋放的能量顯著減少。越來越多的研究指出， 熱量限制能夠有效延長壽命，這已經(jīng)在多個物種（如酵母、線蟲、果蠅和猴子等）中得以證實[5，22-24]。 此外，能量限制可通過整合多個通路信號，來調節(jié)酵母細胞的時序壽命[5]。 因此，組合提取物可通過調節(jié)線粒體膜電位以限制酵母細胞的能量，延長酵母細胞的時序壽命。

圖5 組合提取物處理對酵母細胞內膜電位水平的影響Fig.5 Effects of the combined extracts on intracellular MMP levels of yeast cells

2.5 組合提取物對酵母細胞內應激轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1 激活的影響

當缺乏葡萄糖或任何其它大量營養(yǎng)物質時，酵母細胞會退出有絲分裂細胞周期，并獲得一系列特定于靜息細胞的特性，以確保其壽命[5]。 由于TOR1Δ 或CH9Δ 缺失所導致酵母細胞時序壽命CLS 延長也依賴于Rim15 激酶及其下游效應物Msn2/4 和Gis1 來激活應激反應[25]。 Wei 等[25]預測除Rim15 激酶外，其它因素也參與了通過限制熱量來調節(jié)應激反應和延長壽命的過程。 Zhang 等[5，26]為了便于自動識別調節(jié)應激反應的這些因子，采用兩種“饑餓”誘導的報告基因（pHSP12-HSP12-VFP 和pSSA3-RFP）篩選酵母基因組中編碼大多數(shù)“信號”分子的272 個基因缺失突變體，發(fā)現(xiàn)酵母細胞內ROS 的清除（應激反應）和提供能量的碳水化合物積累（能量）是受到轉錄因子Msn2/4、Gis1和Hsf1 的激活調控的。 轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1的激活一方面可抑制酵母細胞內ROS 產(chǎn)生，另一方面可促進酵母細胞內碳水化合物的積累。

為了進一步探討組合物延長酵母時序壽命作用的機理，本試驗中分別采用了兩種不同質粒構建的報告基因酵母株（pRS426-pSSA3-RFP 與pRS425-pHsp26-VFP）[5]。 酵母細胞株中兩種不同啟動子連同的報告基因都被三類應激轉錄因子靶向：Msn2/4、Gis1 和Hsf1， 而這三類應激轉錄因子可協(xié)調抗氧化防御系統(tǒng)和分子伴侶的表達；并且?guī)в屑t色熒光的RFP 報告基因或者綠色熒光的VFP 報告基因的表達水平高低反映出酵母細胞中的對應激的反應程度。 組合提取物對pSSA3-RFP 或pHsp26-VFP 啟動子控制的酵母細胞株內應激轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1 激活的影響見圖6。

圖6 組合提取物對pSSA3-RFP 或pHsp26-VFP 啟動子控制的酵母細胞株內應激轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1 激活的影響Fig.6 Effects of the combined extracts on the activation of Msn2/4，Gis1 and Hsf1 stress transcription factors in two different yeast cells with pSSA3-RFP or pHsp26-VFP promoters

結果表明（圖6）：與溶劑對照組的相對熒光強度（100%）相比，組合提取物組不僅可顯著激活pSSA3-RFP 啟動子控制下酵母細胞內的紅色相對熒光強度顯著增加（151.85 ± 3.50）%（p<0.001），還可促進pHsp26-VFP 啟動子控制的酵母細胞內綠色相對熒光強度的顯著性增加（154.44±5.13）%（p<0.001）。 同時，研究結果中紅色和綠色熒光強度增加強度無顯著差異，說明組合提取物具有較好的激活酵母細胞內應激轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1 的功效。

3 結論

對數(shù)種植物原料提取物及其組合提取物進行篩選后發(fā)現(xiàn)，組合物對酵母細胞的時序壽命延長作用最為顯著，在1 000 μg/mL 濃度作用下酵母細胞存活率可達（126.81±5.22）%，顯著高于溶劑對照組和各單一原料提取物的存活率，說明組合物延衰效果優(yōu)于組合物中任一單一原料的效果。 試驗結果進一步表明，組合提取物可顯著減少酵母細胞內ROS 水平和降低線粒體膜電位，并顯著激活酵母細胞內與應激和碳水化合物積累密切相關的Msn2/4、Gis1 和Hsf1 轉錄因子。 通過試驗結果分析可進一步推斷，組合物不僅可通過激活細胞內的與抗氧化密切相關的轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1 來清除細胞內的活性氧，起到抗氧化和延長酵母壽命的作用； 而且可通過激活轉錄因子Msn2/4、Gis1 和Hsf1 增加酵母細胞內的碳水化合物積累，降低線粒體膜電位，減少能量產(chǎn)生和釋放，從而起到延長酵母時序壽命的作用。 這些結果表明該組方在應用于研發(fā)延衰、抗氧化、調節(jié)線粒體膜功能的食品、功能性食品以及藥品中極具潛力。