大豬屎豆揮發(fā)油的GC-MS研究

陸海琳，唐云麗，銀勝高，譚建寧，曾憲志，李 斌

（廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530200）

大豬屎豆Crotalaria assamicaBenth.為豆科植物，全株均可入藥。莖葉具有清熱解毒、涼血止血、利水消腫之功效，用于治療小兒頭瘡、口瘡、外傷出血、跌打損傷、水腫、腎結石、膀胱炎、風濕骨痛等；根具有涼血降壓之功效，用于治療跌打損傷、高血壓等；種子含有大量的野百合堿，臨床中多用于治療白血病、鱗狀上皮癌及宮頸癌等［1-3］。筆者前期對大豬屎豆生藥鑒定和化學成分進行了研究［4-5］，何報作等［6］也對其進行了急毒性實驗研究，但目前尚未見有關揮發(fā)性成分研究的相關文獻報道。大豬屎豆在壯族民間應用廣泛［7］，具有較好的開發(fā)利用前景，本實驗通過GC-MS技術對其揮發(fā)油的主要化學成分進行分析，旨為其進一步的研究開發(fā)提供實驗依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 藥品與試劑 大豬屎豆采自廣西南寧市及其周邊郊區(qū)，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學郭敏副教授鑒定為豆科植物大豬屎豆Crotalaria assamicaBenth.的全株。無水硫酸鈉及其他試劑均為分析純。

1.2 儀器 6890/5973 型氣相-質譜聯(lián)用儀（美國Agilent 科技公司）；電熱恒溫水浴鍋（北京市意成科技開發(fā)公司）；DHG-9241 型電熱恒溫干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）。

2 方法與結果

2.1 揮發(fā)油的提取 取干燥的大豬屎豆莖葉粗粉120.0 g 和根粗粉100.0 g，分別按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部附錄2204項下?lián)]發(fā)油測定法［8］操作測定，經(jīng)無水硫酸鈉干燥后得揮發(fā)油，揮發(fā)油為具有特殊濃郁香味的黃色透明油狀液體。

2.2 氣相色譜條件 HP-5MS 毛細管色譜柱（30 m×250 μm×0.25 μm），載氣為高純氦氣（99.99%），流速為1 ml/min，進樣量為1.0 μl，分流比為10∶1，進樣口溫度80 ℃；升溫程序：以10 ℃/min升至140 ℃，再以3 ℃/min升至180 ℃，保持 3 min；以3 ℃/min 升至230 ℃，保持3 min。

2.3 質譜條件 質譜接口溫度280 ℃，電離方式EI源，電子能量70 eV，離子源溫度230 ℃，四極桿溫度150 ℃，加速電壓1 741 V，掃描范圍45～550 amu，掃描間歇2.94次/秒，溶劑延時3 min。

2.4 揮發(fā)油測定 分別對大豬屎豆莖葉與根部的揮發(fā)油進行分析，GC-MS 總離子流圖譜見圖1、圖2。再以峰面積歸一化法測得揮發(fā)油各組分的相對百分含量，對總離子流圖（圖1、圖2）中的各峰經(jīng)質譜掃描后得到質譜圖，經(jīng)過NIST（08）質庫檢索，結合人工譜圖解析，按各色譜峰的質譜裂片圖與文獻核對，對基峰、質荷比和相對豐度等方面進行直觀比較，鑒定出化學成分。結果見表1。

圖1 大豬屎豆莖葉揮發(fā)油總離子流圖

圖2 大豬屎豆根揮發(fā)油總離子流圖

表1 大豬屎豆揮發(fā)油的化學成分分析結果

序號 化合物名稱 分子式 相對分子質量相對含量（%）莖葉 根6 7 8 9*C10H16O 152 2，6，6-trimethyl-1-Cyclohexene-1-carboxaldehyde（2，6，6-三甲基-1-環(huán)己烯-1-甲醛）1，7，7-trimethyl-Bicyclo［2.2.1］hept-2-ene{1，7，7-三甲基-雙環(huán)［2.2.1］庚-2-烯}（Z）-3，7-dimethyl-2，6-Octadien-1-ol［（Z）-3，7-二甲基-2，6-辛二烯-1-醇］Cyclooctane（環(huán)辛烷）2-Nonen-4-one（2-壬烯-4-酮）1，1，6-trimethyl-1，2-dihydro-1-Naphthalene（1，1，6-三甲基-1，2-二氫-1-萘）1，2，3，4-tetrahydro-1，1，6-trimethyl Naphthalene（1，1，6-三甲基-1，2，3，4-四氫萘）1-（2，6，6-trimethyl-1，3-cyclohexadien-1-yl）-2-Buten-1-one［1-（2，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己二烯-1-基）-2-丁烯-1-酮］（E）-1-（2，6，6-trimethyl-1，3-cyclohexadien-1-yl）-2-Buten-1-one（大馬士酮）1，4，6-trimethyl-1，2-dihydro-1-Naphthalene（1，4，6-三甲基-1，2-二氫-1-萘）1，5，8-trimethyl-1，2-dihydro-1-Naphthalene（1，5，8-三甲基-1，2-二氫-1-萘）（Z）-6，10-dimethyl-5，9-Undecadien-2-one［（Z）-6，10-二甲基-5，9-十一烷二烯-2-酮］（E）-4-（2，6，6-trimethyl-1-cyclohexen-1-yl）-3-Buten-2-one（β-紫羅蘭酮）alpha-Farnesene（α-法呢烯）（E）-3，7，11-trimethyl-1，6，10-Dodecatrien-3-ol［（E）-橙花叔醇］2-methyl-4-（2，6，6-trimethyl-1-cyclohexenyl）-But-3-enal［2-甲基-4-（2，6，6-三甲基-1-環(huán)己烯-1-基）-2-丁烯醛］Cyclododecane（環(huán)十二烷）Tetradecanal（十四烷醛）n-Heptadecanol-1（1-正十七烷醇）Phenanthrene（菲）Hexadecanal（十六碳醛）6，10，14-trimethyl-2-Pentadecanone（6，10，14-三甲基-2-十五烷酮）1，2-Benzenedicarboxylic acid bis（2-methylpropyl）ester（鄰苯二甲酸二異丁酯）（Z，Z，Z）-9，12，15-Octadecatrienoic acid［（Z，Z，Z）-9，12，15-十八碳三烯酸］6，10，14-trimethyl-5，9，13-Pentadecatrien-2-one（6，10，14-三甲基-5，9，13-十五烷三烯-2-酮）Hexadecanoic acid methyl ester（十六酸甲酯）3，5，11，15-tetramethyl-1-Hexadecen-3-ol（3，5，11，15-四甲基-1-十六碳烯-3-醇）n-Hexadecanoic acid（正十六烷酸）9，12，15-Octadecatrienal（9，12，15-十八碳三烯醛）0.09 C10H161360.13— —0.72 10 11 C10H18O C8H16 C9H16O C13H16 154 112 140 172 0.21 0.45 0.19 0.24 12C13H181740.11 13C13H18O 1900.48 14C13H18O 19014.26 15C13H161720.10 16C13H161720.14 17C13H22O 1940.85 18 19 20 21 22 23*24*25 26 27 C13H20O C15H24 C15H26O C14H22O C12H24 C14H28O C17H36O C14H10 C16H32 C18H36O 192 204 222 206 168 212 256 178 206 268 1.40 0.50 0.22 0.48 0.42 2.80 0.15 0.21 9.18 1.81—— —— — — —— — —2.05 0.98 28C15H22O42780.36 29C18H50O22783.09 30 31 32 33*34 C18H30O C17H34O2 C20H40O C16H32O2 C18H30O 262 270 296 256 262 1.55 0.87 0.26 6.06 5.40—— — — — —46.33—

序號 化合物名稱 分子式 相對分子質量相對含量（%）莖葉 根35 36 C18H34O C16H32 266 206 1.95 0.60 37C17H28O22640.27 38 39 40 41*42*C19H34O2 C19H32O2 C8H14O C20H40O C20H36O2 294 292 126 297 308 0.85 1.72 3.08 23.50 0.38—— — — —4.23 1.59 43C20H34O23060.47 44C16H342260.34 45C21H40O23250.19 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 C28H58 C6H14O C7H16O C8H16O C8H18O C9H18O C10H16O C10H18O C18H36O2 C14H28O2 C16H30O C16H32O 394 102 116 128 130 142 152 154 284 228 238 240 0.20— —1.86 0.88 0.18 0.28 0.41 0.21 0.84 0.95 7.57 0.91 1.07 58C16H22O42781.23 59C14H281960.95 60C16H26O 2340.70 61 62 C18H32O C18H36O2 264 284 2.68 6.77 63（Z）-9-Octadecenal［（Z）-9-十八碳烯醛］Hexadecanal（十六碳醛）（E，E）-3，7，11-trimethyl-2，6，10-Dodecatrien-1-ol acetate［（E，E）-3，7，11-三甲基-2，6，10-十二烷三烯乙酯］9，12-Octadecadienoic acid methyl ester（9，12-十八烷二烯酸甲酯）（Z，Z，Z）-9，12，15-Octadecatrienoic acid methyl ester（亞麻酸甲酯）2-octyl-Cyclopropaneoctanal（2-辛基環(huán)丙基辛醛）Phytol（植醇）9，12-Octadecadienoic acid ethyl ester（亞油酸乙酯）（Z，Z，Z）-9，12，15-Octadecatrienoic acid［（Z，Z，Z）-9，12，15-十八烷三烯酸乙酯］Hexadecane（十六烷）4，8，12，16-Tetramethylheptadecan-4-olide（4，8，12，16-四甲基十七烷-4-內(nèi)酯）Octacosane（二十八烷）1-Hexanol（正已醇）1-Heptanol（正庚醇）1-Octen-3-ol（1-辛烯-3-醇）1-Octanol（正辛醇）（Z）-3-Nonen-1-ol［（Z）-順-3-壬烯-1-醇］（E，E）-2，4-Decadienal［（E，E）-2，4-癸二烯醛］2，4-Decadien-1-ol（2，4-癸二烯-1-醇）1-Hexadecanol（1-十六烷醇）Tetradecanoic acid（肉豆蔻酸）cis-9-Hexadecenal（順式-9-十六碳烯醛）Hexadecanal（十六醛）1，2-Benzenedicarboxylic acid buty-l，2-methylpropyl ester（1，2-鄰苯二甲酸丁基-2-異丁酯）Cyclotetradecane（環(huán)十四烷）cis，cis，cis-7，10，13-Hexadecatrienal（cis，cis，cis-7，10，13-十六碳三烯醛）（Z）-9，17-Octadecadienal［（Z）-9，17-十八碳二烯醛］ethyl ester Hexadecanoic acid（十六酸乙酯）（Z，Z，Z）-9，12，15-Octadecatrien-1-ol［（Z，Z，Z）-9，12，15-十八碳三烯酸-1-醇］C18H32O 264—— — — — —— —0.57

表1 結果顯示，大豬屎豆莖葉揮發(fā)油共鑒定出46個化學成分，占揮發(fā)油總含量的86.93%，其主要成分為：植醇（23.50%）、大馬士酮（14.26%）、十六碳醛（9.18%）、正十六烷酸（6.06%）、9，12，15-十八碳三烯醛（5.40%），植醇所占的相對含量最大；大豬屎豆根的揮發(fā)油共鑒定出24 個化學成分，占揮發(fā)油總含量的84.42%，其中主要成分為：正十六烷酸（46.33%）、肉豆蔻酸（7.57%）、十六酸乙酯（6.77%）、植醇（4.23%）、（Z）-9，17-十八碳二烯醛（2.68%），正十六烷酸所占相對含量最大。對比大豬屎豆莖葉與根部揮發(fā)油氣質聯(lián)用的實驗結果，得出7 個相同成分，分別是十四烷醛、1-正十七烷醇、亞油酸乙酯、植醇、正十六烷酸、正壬醇、環(huán)辛烷，可見大豬屎豆的莖葉與根在揮發(fā)油中的相同成分較少，且相同成分的含量也存在較大差異。

3 討 論

本研究結果表明，大豬屎豆莖葉與根的揮發(fā)油中含量較大的有正十六烷酸及植醇。正十六烷酸又名棕櫚酸，可用作潤滑油、乳化劑、抗靜電劑及表面活性劑藥物合成的重要中間體；植醇是合成維生素K1和維生素E 的中間體，還可以降低血清總膽固醇與低密度脂蛋白膽固醇水平，用于預防心血管疾病［9］。在根的揮發(fā)油中，含量最大的是正十六烷酸，肉豆蔻酸含量次之，兩者含量占根總揮發(fā)油的53.9%。正十六烷酸和肉豆蔻酸對肺癌細胞A549、胃癌細胞SGC-7901 有顯著抑制作用［10］。亞油酸乙酯具有降低血清膽固醇和低密度脂蛋白的作用，可減輕細菌脂多糖誘導的炎性因子釋放，具有抗炎作用［11］。這些揮發(fā)油成分的作用與大豬屎豆莖葉及根的某些功效主治相吻合。大豬屎豆莖葉與根的揮發(fā)油中含有7 個相同成分，同一成分的含量差異也較大，可見它們的揮發(fā)油有一定的差異性。本實驗的研究結果可為大豬屎豆化學成分的深入研究及開發(fā)利用提供實驗依據(jù)。