飼料中維生素E不同添加水平對香魚仔稚魚生長性能及抗氧化酶活力的影響

■王旭李娟

（遼東學(xué)院農(nóng)學(xué)院，遼寧丹東 118003）

香魚（Pelteobagrus fulvidraco）屬鮭形目、香魚科、香魚屬，是我國廣泛分布的小型一年生淡水名貴魚類[1]。由于野生資源的不斷減少和人工苗種繁育技術(shù)的突破，香魚的人工養(yǎng)殖逐步興起[2]。在香魚人工養(yǎng)殖過程中，常存在因飼料成分不能滿足其營養(yǎng)需求所導(dǎo)致的仔稚魚抗病性差、成活率不穩(wěn)定等問題[3]。因此，研究香魚仔稚魚對不同營養(yǎng)成分的需求，通過營養(yǎng)調(diào)控提高香魚仔稚魚的抗病性和成活率具有重要意義。

維生素E是一種常用的魚類飼料添加成分，其作為一種脂溶性的生物組織抗氧化劑和自由基清除劑，能夠保護(hù)細(xì)胞膜免受自由基攻擊，避免細(xì)胞氧化損傷，從而提高魚類機體抗氧化、抗應(yīng)激能力，提高機體免疫力及繁殖能力[4]。一些學(xué)者的研究表明，維生素E缺乏會引起水產(chǎn)動物食欲不振、餌料利用率降低，抗氧化能力下降和幼魚死亡率增高等問題[5-10]。本試驗在香魚仔稚魚基礎(chǔ)飼料中添加不同水平的維生素E，探究其對香魚仔稚魚成活率、特定生長率、飼料系數(shù)及相關(guān)抗氧化酶活力的影響，以確定香魚仔稚魚飼料中維生素E的適宜添加量，為香魚仔稚魚養(yǎng)殖階段的營養(yǎng)需求提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗用魚

試驗用魚取自丹東市水產(chǎn)研究所繁育中心，暫養(yǎng)7 d后，挑選體質(zhì)健壯、規(guī)格整齊的仔稚魚800尾，放入20個90 L飼養(yǎng)箱中（每箱40尾）飼養(yǎng)，并隨機分成5個處理，每個處理4個重復(fù)，分別對其進(jìn)行不同水平維生素E飼料的飼養(yǎng)試驗，試驗周期為60 d。試驗用魚初始平均體長為（5.22±0.32）cm，平均體重（1.38±0.27）g。

1.2 試驗飼料

維生素E醋酸酯干粉（含量50%）購自浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠；魚粉（蛋白含量＞65%）購自青島翔潤水產(chǎn)品開發(fā)有限公司；去皮豆粕、魚油等原料購自丹東東方希望強大動物營養(yǎng)有限公司。

試驗以魚粉、去皮豆粕、小麥粉和豆油等為原料，配制等氮等能的半精制基礎(chǔ)飼料，在每千克基礎(chǔ)飼料中分別添加0、75、150、225 IU和300 IU維生素E醋酸酯。飼料制作過程中，各原料粉碎過40目篩，混合均勻，由小型制粒機在室溫下壓制成直徑2 mm的顆粒飼料，陰干后放入冰箱冷藏備用。實際測得各試驗飼料中維生素E的含量分別為8.67、79.34、157.86、229.93 IU/kg和309.27 IU/kg?；A(chǔ)飼料配方及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼料配方及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)，%）

1.3 養(yǎng)殖管理

試驗期間水溫保持在（20±2）℃，飼養(yǎng)箱中設(shè)一投餌臺，每日投喂2次（07:30，16:30）。每10 d對各飼養(yǎng)箱中魚總質(zhì)量進(jìn)行一次稱量，以確定各飼養(yǎng)箱投飼量。試驗1～30 d，日投飼量為魚體重的6%。試驗31～60 d，日投飼量為魚體重的5%。每次投喂前用虹吸法清除飼養(yǎng)箱中糞便并記錄有無死魚及死亡魚的質(zhì)量，投喂1 h后收集殘餌并烘干稱重。每日換水1/2左右，保持水質(zhì)清新。全天充氣，溶解氧保持在7.0 mg/L以上。為防止試驗魚受驚擾，飼養(yǎng)箱用深色布遮蓋。

1.4 成活率、特定生長率及飼料系數(shù)的測定

試驗起始和結(jié)束時，分別對各試驗組香魚進(jìn)行記數(shù)、稱重。參照楊雨生等[11]的方法計算成活率、特定生長率及飼料系數(shù)。

成活率(SR,%)=(Nt/N0)×100

特定生長率(SGR,%/d)=(lnWt-lnW0)/t×100

飼料系數(shù)(FC)=F/(Wt-W0)

式中：N0、Nt——試驗初、末魚尾數(shù)(尾)；

Wt——終末體重（g）；

W0——初始體重（g）；

t——試驗天數(shù)（d）；

F——飼料攝入干重量（g）。

1.5 肝胰臟中抗氧化酶活力及維生素E含量的測定

試驗結(jié)束后，每個重復(fù)隨機選取5尾試驗魚取肝胰臟，置于-80℃超低溫冰箱保存。參照魏玉婷等[12]的方法制備肝胰臟組織上清液用于抗氧化酶活力及維生素E含量測定。肝胰臟中維生素E含量和超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力測定采用南京建成生物工程研究所試劑盒并參照趙紅霞等[13]和吳代武等[14]方法進(jìn)行。

1.6 數(shù)據(jù)處理分析

應(yīng)用軟件SPSS18.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，同時進(jìn)行LSD多重比較，分析試驗數(shù)據(jù)差異顯著性，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）”表示，以P＜0.05為差異顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 維生素E對香魚仔稚魚成活率、特定生長率及飼料系數(shù)的影響（見表2）

表2 維生素E對香魚仔稚魚成活率、特定生長率及飼料系數(shù)的影響（n=4）

如表2所示，飼料中不同水平的維生素E對香魚仔稚魚的成活率有影響，添加維生素E的各組成活率均顯著高于未添加組（P＜0.05），其中150 IU/kg添加組成活率最高，達(dá)到91.25%。飼料中不同水平的維生素E對香魚仔稚魚的特定生長率和飼料系數(shù)均未表現(xiàn)出顯著影響（P＞0.05）。

2.2 維生素E對香魚仔稚魚肝胰臟抗氧化酶活力的影響（見表3）

表3 維生素E對香魚仔稚魚肝胰臟SOD、CAT和GSH-Px活力的影響（n=4，U/mg prot.）

從表3可知，與對照組相比，飼料中維生素E的添加對肝胰臟中SOD活力有顯著影響，隨著維生素E添加量升高SOD活力呈現(xiàn)上升趨勢，但添加量大于225 IU/kg后，SOD活力不再升高，150、225 IU/kg和300 IU/kg添加組之間SOD活力差異不顯著（P＞0.05）。肝胰臟組織中CAT活力隨飼料中維生素E添加水平升高總體呈現(xiàn)逐漸上升趨勢，但75 IU/kg添加組與對照組之間差異不顯著（P＞0.05），150、225 IU/kg添加組和300 IU/kg添加組的CAT活力顯著高于對照組（P＜0.05），300 IU/kg試驗組的CAT活力最高。與對照組相比，飼料中維生素E添加可以顯著提高香魚仔稚魚肝胰臟組織中GSHPx活力（P＜0.05），但75、150、225 IU/kg和300 IU/kg添加組之間GSH-Px活力無顯著差異（P＞0.05）。

2.3 維生素E的添加對香魚仔稚魚肝胰臟中維生素E含量的影響（見表4）

如表4所示，香魚仔稚魚肝胰臟中維生素E含量受飼料中維生素E水平變化的影響，75 IU/kg添加組與對照組差異不顯著（P＞0.05），當(dāng)飼料中維生素E含量達(dá)到150 IU/kg后，肝胰臟中維生素E的含量隨著添加量的增加而顯著增加（P＜0.05）。

表4 飼料中維生素E水平對香魚仔稚魚肝胰臟中維生素E含量的影響

3 討論

3.1 飼料中維生素E水平對香魚仔稚魚成活率及其生長性能的影響

從本試驗結(jié)果來看，飼料中添加不同水平維生素E可以顯著提高香魚仔稚魚的成活率。維生素E的添加對香魚和其他魚類仔稚魚成活率的提高可能與維生素E清除自由基保護(hù)含磷脂生物膜的抗氧化能力的發(fā)揮，增強幼魚對疾病的抵抗力和對不良環(huán)境的適應(yīng)性有關(guān)[15-17]。另外，本研究中維生素E的添加對香魚仔稚魚特定生長率和飼料系數(shù)的影響不顯著，表明維生素E不具有促進(jìn)香魚仔稚魚生長的作用。這與陳聘等[18]對黃顙魚幼魚的研究結(jié)果一致，但與文華等[19]對施氏鱘幼魚和何敏[20]對斑點叉尾鮰的研究結(jié)果不同。造成此結(jié)果差異的原因，一方面可能是由于不同魚類其自身特性不同，另一方面可能是由于香魚仔稚魚生長較慢，在60 d的試驗周期里增重不明顯所致。

3.2 飼料中維生素E水平對香魚仔稚魚肝胰臟中抗氧化酶活力的影響

SOD、CAT和GSH-Px是動物體內(nèi)清除自由基的關(guān)鍵酶，這三種抗氧化酶的酶活力變化能較準(zhǔn)確地反映機體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的情況，可以以此來評價機體的抗氧化能力[21-24]。由于香魚仔稚魚個體小，無法取血制備血清進(jìn)行抗氧化酶活力檢測，試驗測定了肝胰臟組織中的三種抗氧化酶活力。結(jié)果表明，飼料中維生素E的添加提高了香魚肝胰臟中SOD、CAT活力和GSH-Px活力。由此試驗結(jié)果可知，維生素E的添加可在一定程度上提高香魚仔稚魚機體的抗氧化能力，這也是維生素E添加能顯著提高香魚仔稚魚成活率的主要原因。這與蔡中華等[25]對鯉魚和何敏[20]對斑點叉尾鮰的研究結(jié)論一致，但與Lygren等[26]對大西洋鮭的研究結(jié)論不同，結(jié)果差異可能與研究動物種類、器官組織、飼喂方式及其他飼養(yǎng)條件不同有關(guān)。

3.3 飼料中維生素E水平對香魚仔稚魚肝胰臟中維生素E含量的影響

研究表明，肝臟內(nèi)維生素E的累積與調(diào)節(jié)外界環(huán)境應(yīng)激存在相關(guān)性，當(dāng)魚體受到應(yīng)激后，肝臟中儲存的維生素E可能被釋放至血液中，緩解機體因應(yīng)激所受氧化脅迫而導(dǎo)致抗氧化物質(zhì)含量的下降[17，27]。本試驗測定了香魚仔稚魚肝胰臟中維生素E的含量，結(jié)果表明，肝胰臟中維生素E含量隨飼料中維生素E添加水平的提高而增高，這與張艷亮[28]對云紋石斑魚幼魚的研究結(jié)論相吻合。

4 結(jié)論

綜上所述，飼料中維生素E的添加可提高香魚仔稚魚的成活率和肝胰臟中抗氧化酶活力及維生素E含量。根據(jù)本試驗數(shù)據(jù)及降低飼料生產(chǎn)成本等因素考慮，建議香魚仔稚魚飼料中維生素E的添加水平為150 IU/kg。