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    PTEN、P53蛋白表達(dá)與甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系

    2021-07-07 07:45:38許麗穎魏蘭濤
    實(shí)用癌癥雜志 2021年6期
    關(guān)鍵詞:癌基因陽性細(xì)胞甲狀腺癌

    李 明 許麗穎 魏蘭濤

    在臨床上,甲狀腺癌是常見的頭頸部惡性腫瘤之一,在我國的部分地區(qū)甲狀腺癌的發(fā)病率正以每年4%的速度增長。侵襲與轉(zhuǎn)移是甲狀腺重要的特征,也是導(dǎo)致甲狀腺癌患者死亡的重要因素,相關(guān)資料表明腫瘤的轉(zhuǎn)移和浸潤是1種復(fù)雜的動態(tài)過程,同腫瘤基因失控以及多種細(xì)胞因子和受體之間作用關(guān)系密切[1]。PTEN基因?qū)儆诰哂辛姿崦富鹦堑囊职┗?,能夠?qū)?xì)胞增殖產(chǎn)生抑制作用,促進(jìn)細(xì)胞凋亡并參與細(xì)胞周期調(diào)控過程,近年來發(fā)現(xiàn)在惡性腫瘤轉(zhuǎn)移過程中也起到重要作用;P53基因目前已經(jīng)證實(shí)為抑制癌基因常見的的一類,而在腫瘤組織中一半以上出現(xiàn)P53基因突變,發(fā)生空間構(gòu)象改變造成對細(xì)胞生長凋亡過程失去控制繼而轉(zhuǎn)變?yōu)榘┗?,但是臨床對于甲狀腺癌患者體內(nèi)兩種基因變化情況臨床報道少見[2]。本研究分析了甲狀腺癌組織中人第10號染色體缺失的磷酸酶(PTEN)、P53蛋白的表達(dá)及其意義,現(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    本次研究收集了我院在2017年1月至2019年10月期間收治的80例甲狀腺癌組織及80例甲狀腺良性腫瘤組織。入選標(biāo)準(zhǔn):①甲狀腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考2015年NCCN制定的甲狀腺癌診斷指南中的標(biāo)準(zhǔn);②年齡≤79歲;③經(jīng)病理學(xué)檢查予以證實(shí);④患者無放化療史及內(nèi)分泌治療史。排除標(biāo)準(zhǔn):①有甲狀腺其他手術(shù)史者;②合并有其他惡性腫瘤者;③免疫功能疾病患者;④病理學(xué)資料缺失。甲狀腺癌組,年齡33~78歲,平均(52.2±12.6)歲,其中男性29例、女性51例;病理類型:乳頭狀癌64例、濾泡癌11例、髓樣癌5例;腫瘤分化程度:低分化32例、中分化29例、高分化19例;頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性40例;TNM分期:Ⅰ期20例、Ⅱ期28例、Ⅲ期25例、Ⅳ期7例。良性組,年齡29~79歲,平均年齡(50.8±14.3)歲,其中男性25例、女性55例,經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí):結(jié)節(jié)性甲狀腺腫38例、甲狀腺纖維瘤32例、其他10例。2組患者就一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

    1.2 指標(biāo)檢測方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)

    對獲取的組織進(jìn)行切片在載玻片烘烤,在二甲苯浸泡1.5 h進(jìn)行脫蠟和水洗,沖洗后加入緩沖液加入山羊血清進(jìn)行封閉,加入一抗后在4 ℃過夜,加入二抗放置15 min置入緩沖液,加入辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素置入緩沖液,進(jìn)行DAB顯色后用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核,然后再次水洗、乙醇脫水再用二甲苯透明、中性樹脂封片。在顯微鏡下進(jìn)行觀察。

    免疫組化結(jié)果判定:PTEN蛋白、P53蛋白陽性表達(dá)分為黃色、棕黃色和褐色。①根據(jù)著色強(qiáng)度分為:0分為無色、1分為淡黃色、2分為棕黃色、3分為褐色、黑色;②根據(jù)陽性細(xì)胞比例分為:1分為陽性細(xì)胞所占比例≤10%、2分為陽性細(xì)胞占比例11%~50%、3分為陽性細(xì)胞占比例51%~75%、4分為陽性細(xì)胞占比例>75%,陰性為兩種積分相乘總分<3分、陽性為≥3分;“-”表達(dá);為3~5分,“+”表達(dá);為6~9分,“++”表達(dá);>9分,“+++”表達(dá)。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

    2 結(jié)果

    2.1 甲狀腺癌與甲狀腺良性腫瘤組織中的PTEN蛋白、P53蛋白陽性表達(dá)率差異

    甲狀腺癌組織中PTEN蛋白陽性表達(dá)率(68.75%)和P53蛋白陽性表達(dá)率(63.75%),均高于良性組的15.00%、17.50%,具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。見表1、表2。

    表1 甲狀腺癌與甲狀腺良性腫瘤組織中的PTEN蛋白陽性表達(dá)率差異/例

    表2 甲狀腺癌與甲狀腺良性腫瘤組織中的P53蛋白陽性表達(dá)率差異/例

    2.2 甲狀腺癌組織中的PTEN蛋白、P53蛋白陽性表達(dá)率與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

    在不同TNM分期、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌組織中的PTEN蛋白陽性表達(dá)率具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌組織中的P53蛋白陽性表達(dá)率具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。見表3、表4。

    表3 甲狀腺癌PTEN蛋白表達(dá)與腫瘤臨床病理學(xué)特征的關(guān)系(例,%)

    表4 甲狀腺癌P53蛋白表達(dá)與腫瘤臨床病理學(xué)特征的關(guān)系(例,%)

    2.3 甲狀腺癌組織中的PTEN蛋白、P53蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析

    甲狀腺癌組織中PTEN蛋白與P53蛋白陽性表達(dá)呈顯著正相關(guān)關(guān)系(Spearman秩相關(guān)系數(shù)=0.836,P<0.05)。見表5。

    表5 甲狀腺癌組織中的PTEN蛋白、P53蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析/例

    3 討論

    甲狀腺癌是1種臨床上常見的頭頸部惡性腫瘤,其發(fā)病率為全身其他部位惡性腫瘤的1%[3-4],且在各個年齡段均可以發(fā)病,女性患者是男性的3倍之多,近年來呈上升趨勢。臨床上對該病治療主要采用手術(shù)切除的方法,但是術(shù)后有些患者會出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[5-6]。在早期,頸部腫物并不明顯,患者不會產(chǎn)生不適,但是到晚期后,會對壓迫與侵犯人體組織,使患者出現(xiàn)吞咽、呼吸及發(fā)音功能異常等,對患者生活帶來不便,威脅患者生命安全[7-8]。

    本研究分析了甲狀腺癌PTEN、P53蛋白表達(dá)情況,PTEN為最早發(fā)現(xiàn)的抑癌基因,具有磷酸酶活性,因此可以保證人體物質(zhì)代謝過程與內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,一旦PTEN缺失同惡性腫瘤進(jìn)展過程以及預(yù)后不良關(guān)系密切[9]。動物學(xué)試驗(yàn)證實(shí)了PTEN 缺陷的鼠胚胎細(xì)胞出現(xiàn)明顯增生與胚胎致死性表現(xiàn),雜合子基因的敲擊動物在不同組織類型中腫瘤的發(fā)生率均顯著增高[10]。研究發(fā)現(xiàn)PTEN基因一方面會造成細(xì)胞周期停滯與程序性死亡,對細(xì)胞粘連、移動與分化產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用,通過下調(diào)PIP3 水平造成細(xì)胞停止于G1期誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;另一方面PTEN 還可以調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、增殖、遷移、分化等多種效應(yīng),但是其對于患者性別、年齡以及包膜完整性方面無明顯關(guān)聯(lián),而是與腫瘤的分期、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有高度相關(guān)性,而且臨床分期越高以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移出現(xiàn)后其表達(dá)水平越低,說明同惡性腫瘤生物學(xué)行為與預(yù)后關(guān)系緊密,同本研究報道相似[11]。此外基因?qū)W發(fā)現(xiàn)PTEN基因含具備9個外顯子和8個內(nèi)顯子,含有的多個CGG重復(fù)序列可以為甲基化提供基礎(chǔ),其高甲基化會讓基因處于靜止?fàn)顟B(tài),造成PTEN基因低水平轉(zhuǎn)錄甚至缺失[12]。P53基因則是抑癌基因常見的一類,在惡性腫瘤研究中廣泛研究,人類腫瘤組織中一半以上發(fā)現(xiàn)有P53基因的突變,細(xì)胞空間和構(gòu)象發(fā)生變化,造成了該基因?qū)τ诩?xì)胞生長凋亡及DNA修復(fù)的調(diào)控作用[13]。研究顯示P53基因的突變會導(dǎo)致甲狀腺癌的形成,同時可以讓甲狀腺癌由高分化轉(zhuǎn)變?yōu)榈头只蛘呶捶只M(jìn)展,突變的P53蛋白可以抑制人體野生類型P53基因活性,表現(xiàn)會細(xì)胞突變、丟失、重排等形式而失活,造成了DNA損傷并無法修復(fù),細(xì)胞的遺傳不穩(wěn)定并向惡性增殖演變[14]。研究發(fā)現(xiàn)PTEN為具有雙特異磷酸酶活性的抑癌基因,具有促進(jìn)自噬體的形成作用,而p53蛋白則可以抑制人體野生型基因活性,造成DNA損傷不能被修復(fù),細(xì)胞遺傳不穩(wěn)定,因此兩者可能通過相互影響、相互促進(jìn)作用造成患者體內(nèi)抑癌基因轉(zhuǎn)為癌基因,促進(jìn)了腫瘤發(fā)生和發(fā)展[15]。本研究顯示,甲狀腺癌組織中的PTEN蛋白陽性表達(dá)率68.75%、P53蛋白陽性表達(dá)率63.75%均高于良性組的15.00%、17.50%,說明在甲狀腺癌中呈現(xiàn)PTEN蛋白、P53蛋白陽性表達(dá)。在不同TNM分期、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌組織中的PTEN蛋白陽性表達(dá)率具有統(tǒng)計學(xué)差異;是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌組織中的P53蛋白陽性表達(dá)率具有統(tǒng)計學(xué)差異,說明PTEN蛋白、P53蛋白陽性表達(dá)對于甲狀腺癌發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有重要判斷價值,而PTEN蛋白陽性表達(dá)對甲狀腺癌分期具有一定的價值。甲狀腺癌組織中的PTEN蛋白與P53蛋白陽性表達(dá)呈顯著的正相關(guān)關(guān)系,說明兩項(xiàng)指標(biāo)與甲狀腺癌的發(fā)生具有顯著相關(guān)性。本研究優(yōu)勢在于證實(shí)了PTEN蛋白、P53蛋白在甲狀腺癌呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài),而且對于腫瘤分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況具有輔助判斷作用。

    綜上所述,甲狀腺癌PTEN、P53蛋白呈高表達(dá)較甲狀腺良性腫瘤組織,并且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有一定的密切關(guān)系。

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