16S rRNA高通量測(cè)序研究柴芪湯對(duì)代謝綜合征大鼠腸道菌群的影響

彭龍 張立平

摘要 目的：采用16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù)分析柴芪湯對(duì)代謝綜合征（MS）大鼠腸道菌群的影響。方法：通過(guò)Illumina Miseq PE300型高通量測(cè)序儀對(duì)大鼠糞便腸道菌群進(jìn)行16S rRNA基因V3-V4可變區(qū)檢測(cè)，運(yùn)用Usearch、Mothur、LEfSe分析腸道菌群的組成結(jié)構(gòu)及不同菌屬相對(duì)豐度變化。結(jié)果：柴芪湯能夠逆轉(zhuǎn)MS大鼠腸道菌群物種多樣性的下降，并糾正MS導(dǎo)致的菌群組成結(jié)構(gòu)改變。研究發(fā)現(xiàn)MS大鼠的腸道菌群在菌屬水平有57個(gè)菌屬相對(duì)豐度發(fā)生顯著變化，而柴芪湯能將其中的54個(gè)菌屬恢復(fù)至正常水平。結(jié)論：從腸道微生態(tài)角度闡釋了MS的可能病機(jī)，柴芪湯可以通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群防治MS。

關(guān)鍵詞 代謝綜合征;柴芪湯;健脾疏肝;腸道菌群;16S rRNA高通量測(cè)序;炎癥反應(yīng);短鏈脂肪酸;脂多糖

Effects of Chaiqi Decoction on Gut Microbiota in MS Rats Based on 16S rRNA

High-Throughput Gene Sequencing Study

PENG Long，ZHANG Liping

（Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China）

Abstract Objective：To explore the effects of Chaiqi Decoction on gut microbiota in metabolic syndrome rats based on high-throughput 16S rRNA gene sequencing.Methods：Illumina Miseq PE300 high-throughput sequencer was used to detect the 16S rRNA gene V3-V4 variable region of rat fecal intestinal flora.Usearch，Mothur，and LEfSe were used to analyze the composition and structure of intestinal flora and the relative abundance of different bacteria.Results：Chaiqi Decoction can reverse the decline in the species diversity of the intestinal flora of rats with metabolic syndrome and correct the changes in the composition and structure of the flora caused by the metabolic syndrome.The study found that the relative abundance of 57 genera of the intestinal flora of rats with metabolic syndrome changed significantly at the level of genus，and Chaiqi Decoction could restore 54 of them to normal levels.Conclusion：The possible pathogenesis of metabolic syndrome from the perspective of intestinal microecology is explained.Chaiqi Decoction could prevent and treat metabolic syndrome by regulating the intestinal flora.

Keywords Metabolic syndrome; Chaiqi Decoction; Invigorating spleen and soothing liver; Gut microbiota; 16S rRNA high-throughput gene sequencing; Inflammation reaction; Short-chain fatty acids; Lipopolysaccharide

中圖分類(lèi)號(hào)：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.05.014

代謝綜合征（Metabolic Syndrome，MS）是一組復(fù)雜的代謝紊亂癥候群，包括糖代謝異常、腹型肥胖、血脂代謝異常和高血壓，是心腦血管疾病、慢性腎病、非酒精性脂肪肝等疾病的重要危險(xiǎn)因素之一[1]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，腸道菌群是影響人體物質(zhì)能量代謝的重要因素，同時(shí)也是導(dǎo)致炎癥介質(zhì)過(guò)度表達(dá)、胰島素抵抗，并進(jìn)一步引起MS重要原因[2]，而中醫(yī)學(xué)認(rèn)為脾胃主運(yùn)化，與腸道菌群功能相符，因此從調(diào)理脾胃即調(diào)節(jié)腸道菌群入手改善MS患者的代謝狀態(tài)成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。張立平教授認(rèn)為，肝失疏泄、脾失健運(yùn)狀態(tài)導(dǎo)致物質(zhì)代謝能力下降是其發(fā)病的核心病機(jī)[3]，并提出應(yīng)用健脾疏肝調(diào)理脾胃法治療MS，擬方“柴芪湯”。前期研究中課題組已經(jīng)證實(shí)柴芪湯能夠糾正代謝異常狀態(tài)，改善MS大鼠的胰島素抵抗，減輕血管內(nèi)皮損傷[4-10]。本研究采用微生物16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù)，進(jìn)一步研究MS及柴芪湯干預(yù)后大鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)與組成的變化，并鑒定豐度顯著差異的菌屬，從腸道微生態(tài)角度闡釋柴芪湯防治MS的機(jī)制，并為柴芪湯在防治MS臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 SPF級(jí)雄性SD大鼠;體質(zhì)量（200±10）g;周齡：6～8周齡;來(lái)源：北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006。動(dòng)物均飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室[SYXK（京）2019-0013]中，室內(nèi)溫度：23～25 ℃，相對(duì)濕度（55±10）%，40 W日光燈照射，維持12 h光照和12 h黑暗的晝夜。自由進(jìn)食、飲水。實(shí)驗(yàn)中對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理遵循3R原則，并通過(guò)北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院倫理委員會(huì)審議（倫理審批號(hào)：201902）。

1.1.2 藥物 柴芪湯顆粒（柴胡10 g、黃芪30 g、白術(shù)10 g、枳實(shí)10 g、三七粉3 g）由北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院制劑中心制備。

1.1.3 試劑與儀器 1）試劑：E.Z.N.A. soil DNA kit（美國(guó)Omega Bio-tek公司，貨號(hào)：D5625-01）;瓊脂糖（西班牙biowest公司，貨號(hào)：BY-R0100）;NEXTFLEX Rapid DNA-Seq Kit（美國(guó)Bioo Scientific公司，貨號(hào)：5144-08）;FastPfu Polymerase，（TransGen公司，貨號(hào)：AP221-02）;AxyPrep DNA Gel Extraction Kit（美國(guó)Axygen Biosciences公司，貨號(hào)：AP-GX-50）;MiSeq Reagent Kit v3（美國(guó)Illumina公司，貨號(hào)：MS-102-3003）。2）儀器：超微量分光光度計(jì)（Thermo Scientific公司，美國(guó)，型號(hào)：NanoDrop2000型）;PCR儀（ABI公司，美國(guó)，型號(hào)：9700型）;高通量測(cè)序儀（Illumina公司，美國(guó)，型號(hào)：Miseq PE300型）。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備

按照本課題組前期研究已建立的造模方法[4]，用高糖高脂高鹽飼料（基礎(chǔ)飼料50%、熟豬油10%、蛋黃粉10%、膽固醇2%、奶粉7.5%、果糖10%、棕櫚油5%、食用鹽3%、魚(yú)粉2%、膽鹽0.5%，購(gòu)自北京科澳協(xié)力飼料有限公司）。喂養(yǎng)SD大鼠8周，以制備代謝綜合征動(dòng)物模型，將造模成功后的大鼠應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為模型組（7只）、觀察組（7只）;普通飼料喂養(yǎng)的SD大鼠作為正常組（7只）。

1.2.2 給藥方法 造模第9周，觀察組開(kāi)始灌胃予柴芪湯藥液11.34 g/（kg·d），并恢復(fù)普通飼料，連續(xù)給藥4周;模型組繼續(xù)高脂高糖高鹽飼料喂養(yǎng)，并與正常組同時(shí)給予等量蒸餾水灌胃。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法 末次給藥24 h后收集糞便，采用微生物16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)糞便菌群進(jìn)行分析。

1.2.3.1 腸道菌群DNA提取 采用E.Z.N.A. soil DNA kit試劑盒參照說(shuō)明書(shū)對(duì)糞便樣本進(jìn)行微生物群落總DNA抽提，使用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA的提取質(zhì)量，使用NanoDrop2000測(cè)定DNA濃度和純度。

1.2.3.2 16S rRNA基因PCR擴(kuò)增及測(cè)序 1）預(yù)變性（95 ℃，3 min）。2）27個(gè)循環(huán)（95 ℃變性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s）。3）穩(wěn)定延伸（72 ℃，10 min）。4）保存（4 ℃，ABI GeneAmp 9700型PCR儀）。PCR體系為：5×TransStart FastPfu緩沖液4 μL，2.5 mM dNTPs 2 μL，上游引物338F（5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3′）0.8 μL，下游引物和806R（5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′）0.8 μL，TransStart FastPfu DNA聚合酶0.4 μL，模板DNA 10 ng，補(bǔ)足至20 μL，每個(gè)樣本重復(fù)3次。

1.2.3.3 測(cè)序數(shù)據(jù)收集 1）回收（混合后，2%瓊脂糖凝膠回收）。2）純化（Purification）。3）檢測(cè)（2%瓊脂糖凝膠，Quantus Fluorometer定量檢測(cè)）。4）建庫(kù)（NEXTFLEX Rapid DNA-Seq Ki）：a.接頭鏈接;b.磁珠篩選去除接頭自連片段;c.應(yīng)用PCR擴(kuò)增進(jìn)行文庫(kù)模板的富集;d.磁珠回收PCR產(chǎn)物得到最終的文庫(kù)。5）測(cè)序（Illumina Miseq PE300平臺(tái)，由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司完成測(cè)序操作，原始數(shù)據(jù)上傳至NCBI SRA數(shù)據(jù)庫(kù)）。

1.2.3.4 測(cè)序數(shù)據(jù)分析 1）過(guò)濾：（窗口：50 bp;過(guò)濾：reads質(zhì)量<20，長(zhǎng)度<50 bp，包含N堿基）。2）拼接：（軟件：FLASH;邏輯：PE reads之間的overlap關(guān)系;最小overlap長(zhǎng)度為10 bp）。3）拼接篩選：（最大錯(cuò)配比率：20%）。4）修正（barcode允許的錯(cuò)配數(shù)為0，最大引物錯(cuò)配數(shù)為2）。5）分析（軟件：UPARSE 7.1;相似度：97%;分析：OTU聚類(lèi)分析;物種分類(lèi)注釋?zhuān)篟DP classifier;比對(duì)：Silva數(shù)據(jù)庫(kù)（SSU128），比對(duì)閾值70%）。所有測(cè)序數(shù)據(jù)分析Trimmomatic質(zhì)控下進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示;多組間比較，方差齊性者采用單因素方差分析，方差不齊者的采用非參數(shù)檢驗(yàn)，設(shè)置95%為置信區(qū)間。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

模型驗(yàn)證及柴芪湯對(duì)MS大鼠代謝相關(guān)指標(biāo)影響：本研究采用了與本課題組前期研究的造模方法，第16周檢測(cè)并記錄各組體質(zhì)量、血糖、血清總膽固醇（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、收縮壓/舒張壓，模型組上述指標(biāo)均顯著高于正常組（P<0.05），同時(shí)符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南2017版》及國(guó)際糖尿病聯(lián)盟[2]的MS診斷標(biāo)準(zhǔn)，造模成功。同時(shí)柴芪湯能夠顯著降低模型大鼠的上述體征及指標(biāo)，與前期研究一致[4，10]。

2.1 測(cè)序結(jié)果質(zhì)量分析

1）14個(gè)樣本通過(guò)測(cè)序經(jīng)質(zhì)控過(guò)濾后共獲得816 954條有效序列數(shù)目，平均單個(gè)樣本產(chǎn)生58 354條有效序列，平均序列長(zhǎng)度418.549;341 771 653 bp有效堿基，平均單個(gè)樣本24 412 261 bp有效堿基。在97%的相似度水平下對(duì)序列進(jìn)行聚類(lèi)，共發(fā)現(xiàn)735種OTUs。稀釋曲線結(jié)果顯示，曲線隨測(cè)序量增加而趨向平緩，各樣本物種豐度指數(shù)Sobs指數(shù)或多樣性指數(shù)Shannon指數(shù)并不會(huì)隨測(cè)序數(shù)據(jù)量的增加而繼續(xù)增加。見(jiàn)圖1。表明本研究所有樣本序列充分，目前的測(cè)序量能夠覆蓋樣本中的絕大部分物種，獲得數(shù)據(jù)可以用于分析。2）腸道菌群Alpha多樣性分析：Alpha多樣性分析后可得到豐度指數(shù)Sobs、Ace、Chao，多樣性指數(shù)Shannon、Simpson，覆蓋度指數(shù)Coverage。見(jiàn)表1。結(jié)果顯示，各組覆蓋度良好，組間比較顯示，模型組Sobs指數(shù)較正常組顯著降低（P<0.05），模型組Ace指數(shù)、Chao指數(shù)較正常組顯著降低（P<0.01）;而觀察組Ace指數(shù)、Chao指數(shù)較模型組顯著升高（P<0.05）。提示MS可以導(dǎo)致腸道菌群豐度下降，而給予柴芪湯干預(yù)后能夠提高腸道菌群物種豐度。

2.2 物種組成分析

1）主坐標(biāo)分析（Principal Co-ordinates Analysis，PCoA）得分圖中樣本組成差異的解釋度值主坐標(biāo)值1（Principal Coordinates 1，PC1）、主坐標(biāo)值2（Principal Coordinates 2，PC2）、主坐標(biāo)值3（Principal Coordinates 3，PC3）分別為46.76%、20.58%、11.72%，其中模型組樣本與正常組樣本完全分開(kāi)，觀察組樣本更接近于正常組，證明MS大鼠的腸道菌群結(jié)構(gòu)較健康正常大鼠發(fā)生了較大變化，而柴芪湯能夠促進(jìn)腸道菌群組成結(jié)構(gòu)的恢復(fù)。見(jiàn)圖2。2）門(mén)水平下各樣本腸道菌群組成結(jié)構(gòu)情況見(jiàn)圖3，所有樣本共檢測(cè)到細(xì)菌菌門(mén)6個(gè)，擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes）、厚壁菌門(mén)（Firmicutes）參與構(gòu)成菌群的主要部分，模型組較正常組厚壁菌門(mén)/擬桿菌門(mén)比例升高，同時(shí)放線菌門(mén)（Actinobacteria）相對(duì)豐度增加，觀察組腸道菌群結(jié)構(gòu)與正常組類(lèi)似。3）LEfSe分析得出的多級(jí)物種層級(jí)樹(shù)圖見(jiàn)圖4，模型組較正常組有57個(gè)菌屬發(fā)生改變，包括Anaeroplasma、Bacteroides_pectinophilus_group、Muribaculum、norank_f_Christensenellaceae、Pygmaiobacter、Ruminiclostridium、Papillibacter、Ruminiclostridium_6、Ruminococcus_1、Odoribacter、Ruminiclostridium_1、Helicobacter、Ruminiclostridium_9、norank_o_Mollicutes_RF39、norank_f_Flavobacteriaceae、Prevotellaceae_NK3B31_group、Clostridium_sensu_stricto_1、norank_f_Erysipelotrichaceae、Elusimicrobium、Rikenellaceae_RC9_gut_group、Alistipes、Tyzzerella、Harryflintia、norank_f_Clostridiales_vadinBB60_group、norank_f_Muribaculaceae、Barnesiella、unclassified_f_Clostridiaceae_1、Intestinimonas、Oscillibacter、Ruminococcaceae_UCG_013、Ruminococcace-ae_UCG_010、Prevotella_1、unclassified_p_Firmicutes、Ruminococcaceae_NK4A214_group、Candidatus_Saccharimonas、Blautia、Holdemania、Erysipelotrichaceae_UCG_003、Negativibacillus、Phascolarctobacterium、Ruminococcaceae_UCG_008、Anaerostipes、Sutterella、Ruminococcus_torques_group、unclassified_f_Lachnospiraceae、Enterococcus、Ruminococcus_gauvreauii_group、Candidatus_Stoquefichus、Fusicatenibacter、Globicatella、Clostridium_innocuum_group、Coprococcus_3、Lachnospiraceae_UCG_001、Streptococcus、Lachnospiraceae_UCG_010、Faecalitalea、Lachnoclostridium、Anaerofustis。而柴芪湯能夠?qū)⑵渲?4個(gè)菌屬調(diào)回至正常水平，并能將Parabacteroides、Erysipelatoclostridium、Roseburia、Catabacter、Family_XIII_UCG_001、cBacteroides 6個(gè)菌屬的相對(duì)豐度提高至正常水平以上。

3 討論

人類(lèi)體內(nèi)的微生物群由多達(dá)10～100萬(wàn)億微生物組成，而這個(gè)數(shù)字比構(gòu)成人體的細(xì)胞至少多10倍，這意味著構(gòu)成人體的細(xì)胞中有10%是人類(lèi)的，90%是微生物的。腸道微生物群提供了我們?nèi)祟?lèi)新陳代謝無(wú)法完成的重要代謝和生物學(xué)功能，并在宿主能量穩(wěn)態(tài)和代謝功能中起重要作用。研究表明，腸道菌群通過(guò)影響能量平衡[12-14]、葡萄糖代謝和與肥胖和相關(guān)代謝紊亂及低度炎癥反應(yīng)[15-17]參與全身代謝，其可能途徑包括參與能量和物質(zhì)代謝，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)信號(hào)通路，干預(yù)免疫，影響腎素-血管緊張素系統(tǒng)等。腸道菌群在代謝性疾病的發(fā)病過(guò)程中扮演了重要角色，這使我們看到了調(diào)節(jié)腸道菌群在針對(duì)MS及其相關(guān)并發(fā)癥的治療干預(yù)中的潛在重要性。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)具有疏肝健脾作用的柴芪湯能夠改善MS大鼠的代謝異常狀態(tài)，結(jié)合中醫(yī)對(duì)脾胃功能的認(rèn)知與腸道菌群功能的重合性，我們推測(cè)腸道菌群可能是柴芪湯防治MS的關(guān)鍵，故本研究采用16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù)探究柴芪湯對(duì)MS大鼠腸道菌群組成結(jié)構(gòu)的影響。

Alpha多樣性分析一般用于微生物群落的豐富度和多樣性分析，其結(jié)果為一系列統(tǒng)計(jì)學(xué)分析指數(shù)，其中豐富度指數(shù)包括Sobs、Ace、Chao，多樣性指數(shù)包括Shannon、Simpson。經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，我們發(fā)現(xiàn)MS大鼠豐富度指數(shù)（Sobs、Ace、Chao）顯著降低，而多樣性指數(shù)與正常組和觀察組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明MS發(fā)病過(guò)程中伴隨著腸道菌群物種豐富度水平的下降，但是同時(shí)伴隨著其他菌群相對(duì)豐度異常升高，造成其均勻度相對(duì)較高，因此其多樣性指數(shù)變化不明顯。而柴芪湯可以明顯提高其物種豐富度，與前期研究中證實(shí)的其對(duì)MS代謝異常的改善作用相一致[4]。

LEfSe多級(jí)物種差異辨別分析發(fā)現(xiàn)MS大鼠與正常健康大鼠比較，有57個(gè)菌屬發(fā)生相對(duì)豐度改變，其中35個(gè)菌屬相對(duì)豐度下降，22個(gè)菌屬相對(duì)豐度升高。針對(duì)其中數(shù)據(jù)庫(kù)可明確分類(lèi)識(shí)別的菌屬分析發(fā)現(xiàn)，相對(duì)豐度下降在門(mén)水平下擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes）為主，其相對(duì)豐度減少是宿主肥胖的重要原因[18]。而在科水平下擬桿菌門(mén)中以Muribaculaceae菌科下降最明顯，后者參與宿主復(fù)雜碳水化合物（尤其是植物多糖）的代謝，其下降可能與飲食結(jié)構(gòu)改變密切相關(guān);同時(shí)下降明顯的還有瘤胃菌科（Ruminococcaceae）下的Ruminiclostridium、Ruminiclostridium_1、Ruminiclostridium_6、Ruminiclostridium_9、Ruminococcaceae_UCG_013、Ruminococcaceae_NK4A214_group、Ruminococcus_1菌屬，該類(lèi)菌屬能夠發(fā)酵抗酶解淀粉、膳食纖維和低聚多糖，產(chǎn)生丁酸鹽，后者是短鏈脂肪酸（Short-Chain Fatty Acids，SCFA）的一種，并且有研究證實(shí)上述菌屬能夠減緩非酒精性脂肪肝?。∟onalcoholic Fatty Liver Disease，NAFLD）的進(jìn)展，其可能機(jī)制為通過(guò)其代謝產(chǎn)物丁酸鹽實(shí)現(xiàn)，后者具維持腸道屏障功能、維持腸道菌群平衡、調(diào)節(jié)免疫、抗炎等作用[19-22]。同時(shí)豐度下降菌屬中Clostridium_sensu_stricto_1、Intestinimonas、Barnesiella的代謝產(chǎn)物也以SCFA為主[23]。Prevotellaceae_NK3B31_group、Candidatus_Saccharimonas具有抗炎作用，其豐度下降可能會(huì)導(dǎo)致炎癥介質(zhì)的過(guò)度表達(dá)。Odoribacter已被證實(shí)其豐度與肥胖妊娠期女性的收縮壓、纖溶酶原激活物抑制劑-1濃度負(fù)相關(guān)[24]。其余菌屬如Prevotella_1、Alistipes、Rikenellaceae_RC9_gut_group豐度的降低也與NAFLD相關(guān)[25]。相對(duì)豐度升高的菌屬以毛螺菌科（Lachnospiraceae）為主，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)非酒精性脂肪肝患者的糞便中毛螺菌科顯著高于正常人，提示其可能與脂質(zhì)代謝密切相關(guān)[26]。同時(shí)升高的還有Erysipelotrichaceae菌科，該菌科微生物群成員與代謝紊亂的臨床指標(biāo)顯著相關(guān)，這可能與其釋放的脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS）介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)有關(guān)[27]。在屬水平下，與炎癥反應(yīng)相關(guān)的Blautia、Enterococcus、Negativibacillus相對(duì)豐度升高;代謝產(chǎn)物為三甲胺（Trimetlylamine，TMA）的Phascolarctobacterium、Anaerostipes[28]相對(duì)豐度升高，TMA可在肝臟中氧化形成具有促動(dòng)脈粥樣硬化形成作用的氧化三甲胺（TMAO）;Lachnoclostridium、Streptococcus、Holdemania、Ruminococcus_gauvreauii_group的富集則與脂質(zhì)代謝異常密切相關(guān)[29-31]。而柴芪湯能將上述菌屬中的54個(gè)菌屬調(diào)回至正常水平，證明其對(duì)腸道菌群的重要調(diào)節(jié)作用。

本研究采用16S rRNA高通量測(cè)序技術(shù)研究了MS大鼠腸道菌群組成結(jié)構(gòu)的變化及柴芪湯對(duì)其的干預(yù)作用，在屬水平下鑒定了57個(gè)豐度顯著改變的菌屬。研究發(fā)現(xiàn)在飲食誘導(dǎo)的MS發(fā)病過(guò)程中，腸道菌群的組成結(jié)構(gòu)發(fā)生了巨大的變化，主要以與SCFA、LPS、炎癥反應(yīng)、TMA、脂質(zhì)代謝相關(guān)的菌屬變化為主，驗(yàn)證了腸道菌群在MS及其并發(fā)癥發(fā)病過(guò)程中的重要作用。同時(shí)研究證明柴芪湯能夠逆轉(zhuǎn)這種菌群結(jié)構(gòu)異常，驗(yàn)證了柴芪湯對(duì)MS菌群失調(diào)的改善作用，但其調(diào)節(jié)腸道菌群的具體機(jī)制及通過(guò)菌群糾正MS代謝異常的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

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（2020-04-02收稿 責(zé)任編輯：芮莉莉）

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81273695）

作者簡(jiǎn)介：彭龍（1992.02—），男，博士，研究方向：中醫(yī)藥防治代謝綜合征，E-mail：772699670@qq.com

通信作者：張立平（1963.11—），女，博士，教授，研究方向：中醫(yī)藥防治代謝綜合征，E-mail：lpzhang2005@126.com