薤中新的甾體皂苷類化學(xué)成分

楊依然，姚 華，閆江紅，孫志恒，張 余，房雪晴，李緒文，金永日

（1.吉林大學(xué)化學(xué)學(xué)院,長春 130012；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院，長春 130033；3.吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院第一臨床醫(yī)院,長春 130021;4.新南威爾士大學(xué)材料科學(xué)學(xué)院，悉尼2033，澳大利亞）

薤（Allium chinenseG.Don），別名藠頭，是百合科蔥屬植物，廣泛種植于我國安徽、廣東、福建等地.薤因其獨(dú)特的風(fēng)味，常被腌漬制成副食食用，具有健脾胃和助消化等保健功效［1，2］.薤的干燥鱗莖是中藥薤白的來源之一，具有通陽散結(jié)及行氣導(dǎo)滯等功效，常用于治療胸痹心痛、皖腹痞滿脹痛、瀉痢后重等疾病［3］.薤中主要含有甾體皂苷類化合物［4～13］、含氮化合物［14］、含硫化合物［15～17］、脂肪酸類化合物［18］和多糖類化合物［19］，其中甾體皂苷類化合物是薤的主要化學(xué)成分.甾體皂苷類化合物由甾體皂苷元和糖基組成，皂苷元主要分為螺甾烷醇類、異螺甾烷醇類、呋甾烷醇類和變形呋甾烷醇類4種類型，糖基中主要含有葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖等［20，21］.目前，國內(nèi)外學(xué)者對薤白（中藥材）和小根蒜（中藥材薤白的另一來源）化學(xué)成分的研究較多，共分離并鑒定了約70余種甾體皂苷，其中甾體皂苷元主要包括tigogenin，laxogenin，smilagenin，sarsapogenin和gitogenin 5種類型［22］.但對薤化學(xué)成分的報道較少，僅分離出chinenoside Ⅰ和chinenoside Ⅲ～Ⅶ等十幾種甾體皂苷.

文獻(xiàn)報道關(guān)于薤白中甾體皂苷類化合物的生物活性研究主要集中在抗氧化和細(xì)胞毒性2 個方面［23～28］，如薤白葉片總皂苷的抗亞油酸脂質(zhì)體氧化能力要強(qiáng)于鱗莖；薤白原汁對由白酒造成的氧應(yīng)激態(tài)大鼠的T淋巴細(xì)胞具有明顯保護(hù)作用，且具有顯著抑制血清過氧化脂質(zhì)形成作用；薤白中分離得到的甾體皂苷類化合物可有效抑制SF-268和NCI-H460腫瘤細(xì)胞的生長；薤白總皂苷對人宮頸癌HeLa細(xì)胞具有顯著的抑制增殖作用，并能誘導(dǎo)其凋亡.上述研究結(jié)果表明，薤白中某些甾體皂苷類化合物具有抗氧化功效，能夠清除體內(nèi)自由基，提高機(jī)體免疫能力，并且能夠干預(yù)腫瘤的生長.

本文對薤的化學(xué)成分進(jìn)行了深入研究，從中分離鑒定了6種新的呋甾型化合物（化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1），其中化合物1和2的皂苷元結(jié)構(gòu)為首次從天然產(chǎn)物中分離得到的新骨架.此外，選用H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞神經(jīng)氧化損傷模型，初步考察了6種新的呋甾型化合物的抗氧化活性，為薤的開發(fā)利用提供了新的科學(xué)依據(jù).

Fig.1 Chemical structures of compounds 1—6

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料、試劑和儀器

新鮮薤購于江西，經(jīng)吉林大學(xué)藥學(xué)院張靜敏教授鑒定為薤（Allium chinenseG.Don）的根莖.

乙腈（色譜純，Sigma-Aldrich公司）；柱層析硅膠（青島海洋化工廠，200～300 目）；ODS色譜柱（北京未來科技發(fā)展有限公司，75～100 μm）；Silica 60 F254 高效薄層層析板和ODS RP-18 F254高效薄層層析板（美國Merk公司）；D-101大孔吸附樹脂（南開大學(xué)化工廠）；其它試劑均為北京化工廠產(chǎn)品.

E試劑的配制：取2 g對二甲氨基苯甲醛溶解在200 mL乙醇中，加入50 mL鹽酸混合均勻即得.過氧化氫（H2O2，開原化學(xué)試劑一廠）；CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑盒（美國Bimake生物科技有限公司）；二甲基亞砜（北京索萊寶科技有限公司）；α-MEM 培養(yǎng)基（Hyclone）、青霉素-鏈霉素雙抗溶液（100×，SV30010，Hyclone）和DMEM 培養(yǎng)基（Gibco）（美國賽默飛科技有限公司）；胎牛血清（FBS，天津康源生物技術(shù)有限公司）；胰酶細(xì)胞消化液（0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA，Biosharp生物科技有限公司）；實(shí)驗(yàn)用水由Unique-R20型超純水制備系統(tǒng)（廈門銳思捷科學(xué)儀器有限公司）制備（電阻率18.20 MΩ·cm）.

Aglient 1200型高效液相色譜儀（HPLC），配備Alltech-6000型蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）；RID-20A半制備型液相色譜儀（日本Shimadzu 公司），XAmide 分析型色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），XAmide制備型高效色譜柱（10 mm×250 mm，10 μm）；Bruker AV600 型核磁共振波譜儀和Agilent 1290-micrOTOF Q Ⅱ高分辨液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；New Brunswick Galaxy 170R細(xì)胞培養(yǎng)箱（德國Eppendorf股份公司）；Olympus CKX31-C11BF倒置相差顯微鏡（日本奧林巴斯有限公司）；Tecan Infinite 200 Pro酶標(biāo)儀（瑞士帝肯有限公司）；Corning 25/75 cm2一次性培養(yǎng)瓶和Corning 3599 型96 孔培養(yǎng)板（美國康寧公司）.

1.2 實(shí)驗(yàn)過程

1.2.1 提取分離 將30 kg 新鮮的薤攪碎成勻漿，用體積分?jǐn)?shù)為98%的乙醇浸提4 次，液料比分別為10∶1，8∶1，8∶1和6∶1，每次浸提時間均為4 h，合并4次提取液，過濾并減壓濃縮；然后用5倍體積的水稀釋，再利用D-101大孔樹脂柱吸附，用體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇洗脫并收集洗脫液；減壓濃縮后經(jīng)TLC檢測，得到125 g呋甾型總皂苷.將呋甾總皂苷采用硅膠柱色譜分離，用乙酸乙酯-乙醇-水（體積比5∶0.9∶0.1～6∶1.5∶0.2）梯度洗脫，分別收集洗脫液，經(jīng)過TLC 檢測合并相同組分，回收溶劑后得到2個部分（Fr.1 和Fr.2）.Fr.1 部分采用硅膠柱色譜分離，用二氯甲烷-甲醇-水（體積比8∶2∶0.2～8.5∶3∶0.3）梯度洗脫，分別收集洗脫液，經(jīng)過TLC 檢測合并相同組分；然后分別以丙酮-水（體積比1∶1.2～1∶4.5）為洗脫劑進(jìn)行十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）柱色譜分離，洗脫液經(jīng)TLC 檢測后合并相同組分；回收溶劑后利用制備型高效液相色譜以乙腈-水（體積比87∶13）為流動相進(jìn)行分離純化，分別得到化合物1（20.6 mg）、化合物2（28.7 mg）、化合物3（31.9 mg）、化合物4（19.4 mg）和化合物5（13 mg）.Fr.2（2.1 g）部分分別用ODS柱色譜分離（流動相∶丙酮-水，體積比1∶2.5）及制備高效液相色譜（流動相∶乙腈-水，體積比92∶8）分離純化，最終得到化合物6（20.6 mg）.

1.2.2 酸水解實(shí)驗(yàn) 稱取化合物1～6 粉末各5 mg，分別加入5 mL 濃度為2 mol/L 的HCl 溶液，在90 ℃下加熱回流2 h，然后用2 mol/L的NaOH 溶液中和至pH=7，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯層，經(jīng)減壓濃縮得到皂苷元部分；水層經(jīng)濃縮后，采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測器（HPLC-ELSD）進(jìn)行測定，使用XAmide色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm，100 A），以乙腈-水（體積比90∶10）等度洗脫，檢測糖的種類.

1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng) PC12細(xì)胞系為大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞瘤的細(xì)胞系，是常用的神經(jīng)細(xì)胞株，購自美國模式培養(yǎng)物集存庫（ATCC）.采用含有10%胎牛血清（FBS）、1%青霉素-鏈霉素雙抗溶液的α-MEM培養(yǎng)基，于37 ℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)PC12細(xì)胞.培養(yǎng)2～3天進(jìn)行細(xì)胞傳代，選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn).另外，采用DMEM 高糖培養(yǎng)基［含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素雙抗溶液］，于37 ℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng).實(shí)驗(yàn)時同樣使用對數(shù)生長期的細(xì)胞.

1.2.4 H2O2誘導(dǎo)氧化損傷及藥物保護(hù)作用 將對數(shù)期生長的PC12細(xì)胞用0.25%胰酶-EDTA溶液消化制成細(xì)胞懸液，終濃度為5×104Cell/mL.將100 μL細(xì)胞懸液接種在96孔板中，于37 ℃，5%CO2條件下培養(yǎng)24 h.在藥物處理前，用無血清α-MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)1 h，使細(xì)胞同步化.隨后，分別加入6種化合物的樣品溶液，使其最終濃度為80 μg/mL.每個實(shí)驗(yàn)組設(shè)置3個復(fù)孔，以PBS緩沖液作為陰性對照組，于37 ℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24 h.向?qū)嶒?yàn)組及陰性對照組加入含500 μmol/L H2O2的α-MEM培養(yǎng)基，制造氧化損傷模型，空白組不做損傷處理.在培養(yǎng)箱中孵育2 h后進(jìn)行CCK-8細(xì)胞活性檢測.檢測時棄去原培養(yǎng)基，用PBS 緩沖液清洗1 次，再向每孔中加入含有10%CCK-8 檢測試劑的100 μL培養(yǎng)基，在細(xì)胞培養(yǎng)箱中反應(yīng)約1.5 h.最后，用酶標(biāo)儀檢測各孔在450 nm 處的光密度值（OD450nm），計(jì)算細(xì)胞存活率.對具有PC12細(xì)胞保護(hù)作用的化合物進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，配制終濃度分別為40，80和120 μg/mL的樣品溶液，重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證化合物對H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用的劑量依賴性.

2 結(jié)果與討論

2.1 結(jié)構(gòu)分析

化合物1為白色粉末（乙腈-水），m.p.242～244 ℃，E試劑反應(yīng)顯粉紅色，提示該化合物可能為呋甾皂苷類化合物.高分辨液相色譜-質(zhì)譜（HR-ESI-MS）分析得到m/z995.4689［M+H］+，提示化合物1的分子量為994.4609，推測其分子式為C46H74O23.

化合物1的13C NMR（C5D5N，150 MHz）譜共給出46個碳信號，其中包括22個皂苷元碳信號和24個糖基碳信號.結(jié)合無畸變極化轉(zhuǎn)移增強(qiáng)（DEPT）譜可知，低場區(qū)δC181.26 為羰基碳信號，δC105.21，105.04，104.68和102.50推測為糖的端基碳信號，δC70.95～88.65共給出18個連氧叔碳信號，推測為糖基C-2～C-5或甾體皂苷苷元上的連氧碳信號，δC18.01，13.91和12.34為3個甲基碳信號.化合物1的1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中，高場區(qū)出現(xiàn)了3 組甲基質(zhì)子信號，分別為δH0.57（3H，s），δH0.48（3H，s），δH1.12（3H，d，J=7.2 Hz），根據(jù)異核單量子相關(guān)譜（HSQC）以及異核多鍵相關(guān)譜（HMBC），可將這3 組甲基碳信號分別歸屬為C-18（δC13.91），C-19（δC12.34）和C-21（δC18.01）.由于C18質(zhì)子信號（δH0.57，3H）處于低場而C19質(zhì)子信號（δH0.48，3H）處于高場，可確認(rèn)甾體皂苷元5位氫為α構(gòu)型［20］.

由HMBC 譜可知，δH1.12（3H，d，J=7.8 Hz，H-21）分別與δC59.11，δC36.40，δC181.26 存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3 組碳信號分別歸屬為C-17，C-20 和C-22.δH0.57（3H，s，H-18）分別與δC38.29，δC41.87，δC54.53，δC59.11 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4 組碳信號分別歸屬于C-12，C-13，C-14 和C-17.δH0.48（3H，s，H-19）分別與δC37.27，δC44.69，δC54.50和δC35.87存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將該4組信號分別歸屬為C-1，C-5，C-9和C-10.在同核化學(xué)位移相關(guān)譜（1H-1H COSY）中，δH4.77（H-16）與δH1.28，1.98（H-15）存在1H-1H 相關(guān)，再結(jié)合HSQC 譜，可歸屬δC82.82 為C-16 信號，歸屬δC33.3 為C-15 信號.δH0.64，1.32（H-1）與δH1.48，1.91（H-2）存在1H-1H 相關(guān)，故將δC29.96 歸屬為C-2，同時δH1.48，1.91（H-2）又與δH3.77（H-3）存在1H-1H相關(guān)，故將δc 77.34（連氧叔碳）歸屬為C-3信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.將化合物1的13C NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［29］中3-羥基-5α-cholano-22，16-內(nèi)酯對照，發(fā)現(xiàn)皂苷元的數(shù)據(jù)基本一致，只是A環(huán)C-2，C-3和C-4化學(xué)位移發(fā)生了變化，由于C-3連糖，導(dǎo)致C-3向低場移動δ6.24，進(jìn)而導(dǎo)致其周圍的C-2和C-4分別向高場移動了δ1.44和δ3.25.

在1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中低場區(qū)出現(xiàn)4 個糖的端基質(zhì)子信號，分別為δH4.76（1H，d，J=7.8 Hz），δH5.03（1H，d，J=7.8 Hz），δH5.19（1H，d，J=7.8 Hz），δH5.47（1H，d，J=7.8 Hz），提示化合物中存在4分子糖，由J=7.8 Hz可知4分子糖的端基質(zhì)子均為β構(gòu)型.酸水解結(jié)果表明，分子中存在半乳糖和葡萄糖.由HMBC 譜可知，半乳糖的端基質(zhì)子信號（δH4.76，1H，d，J=7.8 Hz）與母核C-3（δC77.34）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，因此推測該糖連接在皂苷元母核C-3 位，內(nèi)側(cè)葡萄糖的端基質(zhì)子信號（δH5.03，1H，d，J=7.8 Hz）與半乳糖的C-4′（δc 80.36）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，推測其連接方式為1→4.外側(cè)葡萄糖端基質(zhì)子信號（δH5.19，1H，d，J=7.8 Hz 和δH5.47，1H，d，J=7.8 Hz）分別與內(nèi)側(cè)葡萄糖的C-3″（δC88.65）和C-2″（δC81.59）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，推測兩分子葡萄糖與內(nèi)側(cè)葡萄糖的連接方式分別為1→3和1→2.此外，化合物1的糖基碳的化學(xué)位移值與文獻(xiàn)［30］報道基本一致.

綜上所述，鑒定化合物1（分子式C46H74O23）結(jié)構(gòu)為5α-cholano-22，16-內(nèi)酯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）-［β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）］-β-D-吡喃葡萄糖基（1→4）-β-D-吡喃半乳糖苷.經(jīng)文獻(xiàn)檢索，確認(rèn)其為新化合物.化合物1的HMBC與COSY相關(guān)圖譜見本文支持信息中圖S1，13C NMR數(shù)據(jù)見表1.

化合物2為白色粉末（乙腈-水），m.p.208～210 ℃，E試劑反應(yīng)顯粉紅色，提示該化合物可能為呋甾皂苷類化合物.HR-ESI-MS 分析得到m/z787.3693［M+H］+，提示化合物2 的分子量為786.3385，推測其分子式為C38H58O17.

化合物2的13C NMR（C5D5N，150 MHz）譜共給出38個碳信號，其中包括22個皂苷元碳信號和16個糖基碳信號.結(jié)合DEPT 譜可知，低場區(qū)δC181.26 和δC209.29 為羰基碳信號，δC105.84，105.24 和102.11推測為糖的端基碳信號，δC69.96～82.5共給出12個連氧叔碳信號，推測為糖基C-2～C-5或甾體皂苷苷元上的連氧碳信號，δC13.81，13.12 和17.97 為3 個甲基碳信號.化合物2 的1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中，高場區(qū)出現(xiàn)了3 組甲基質(zhì)子信號，分別為δH0.56（3H，s），δH0.49（3H，s）和δH1.13（3H，d，J=7.8 Hz），根據(jù)HSQC 以及HMBC 譜，可將這3 組甲基碳信號分別歸屬為C-18（δC13.81），C-19（δC13.12）和C-21（δC17.97）.由于C18質(zhì)子信號（δH0.56，3H）處于低場而C19質(zhì)子信號（δH0.49，3H）處于高場，可確認(rèn)甾體皂苷元5位氫為α構(gòu)型.

由HMBC譜可知，δH1.13（3H，d，J=7.8 Hz，H-21）分別與δC58.89，δC36.38和δC181.07存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3 組碳信號分別歸屬為C-17，C-20 和C-22.δH0.56（3H，s，H-18）分別與δC37.83，δC42.22，δC54.61 和δC58.89 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4 組碳信號分別歸屬于C-12，C-13，C-14 和C-17.δH0.49（3H，s，H-19）分別與δC36.77，δC56.5，δC53.78和δC40.87存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4組碳信號分別歸屬為C-1，C-5，C-9和C-10.δH2.02（1H，s，H-5）分別與δC209.29和δC26.97存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將其信號分別歸屬為C-6 和C-4.在1H-1H COSY 譜中，δH4.76（H-16）與δH1.26，1.90（H-15）存在1H-1H 相關(guān)，再結(jié)合HSQC 譜，可歸屬δC82.5（連氧叔碳）為C-16信號，歸屬δC33.0為C-15

信號.δH0.96，1.40（H-1）與δH1.48，1.95（H-2）存在1H-1H 相關(guān)，故將δC29.49 歸屬為C-2，同時δH1.48，1.95（H-2）又與δH3.82（H-3）存在1H-1H相關(guān)，故將δC76.94（連氧叔碳）歸屬為C-3信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.發(fā)現(xiàn)化合物2的皂苷元部分與化合物1的皂苷元數(shù)據(jù)基本一致，只是在C-4，C-5，C-6，C-7 和C-8 化學(xué)位移發(fā)生了變化.由于C-6（δC209.29）為羰基，形成了共軛體系，導(dǎo)致C-5，C-7和C-8分別向高場移動了δ11.81，14.27和2.07，C-4向低場移動了δ7.88.

Table 1 Chemical shifts of 13C NMR(600 MHz)for compounds 1—6(δ,C5D5N)

在1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中低場區(qū)出現(xiàn)3 個糖的端基質(zhì)子信號，分別為δH4.81（1H，d，J=7.8 Hz），δH4.94（1H，d，J=7.2 Hz）和δH5.37（1H，d，J=7.8 Hz），提示化合物中存在3分子糖，由J均在7.2 Hz以上，可知4分子糖的端基質(zhì)子均為β構(gòu)型.酸水解結(jié)果表明分子中存在葡萄糖、木糖和阿拉伯糖.由HMBC譜可知，葡萄糖的端基質(zhì)子信號（δH4.81，1H，d，J=7.8 Hz）與母核C-3（δC76.94）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，因此推測該糖連接在皂苷元母核C-3 位，木糖的端基質(zhì)子信號（δH5.37，1H，d，J=7.8 Hz）和阿拉伯糖的端基質(zhì)子信號（δH5.37，1H，d，J=7.8 Hz）分別與葡萄糖的C-4′（δC79.9）和C-6′（δC68.23）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，推測木糖和阿拉伯糖與葡萄糖的連接方式分別為1→4和1→6.此外，化合物2的糖基碳化學(xué)位移值與文獻(xiàn)［11］報道基本一致.

綜上所述，鑒定化合物2（分子式C38H58O17）結(jié)構(gòu)為6-酮-5α-cholano-22，16-內(nèi)酯-3-O-β-D-吡喃木糖基-（1→4）-［α-L-吡喃阿拉伯糖基-（1→6）］-β-D-吡喃葡萄糖苷.經(jīng)文獻(xiàn)檢索確認(rèn)其為新化合物.化合物2的HMBC與COSY相關(guān)圖譜見本文支持信息中圖S2，13CNMR數(shù)據(jù)見表1.

化合物3為白色粉末（乙腈-水），m.p.265～267 ℃，E試劑反應(yīng)顯粉紅色，提示該化合物可能為呋甾皂苷類化合物.HR-ESI-MS 分析得到m/z1247.6076［M+NH4］+，提示化合物3 的分子量為1229.3547，推測其分子式為C57H96O28.

化合物3的13C NMR（C5D5N，150 MHz）譜共給出57個碳信號，其中包括27個皂苷元碳信號和30個糖基碳信號.結(jié)合DEPT譜可知，低場區(qū)δC102.52，104.68，105.03，105.14和105.21推測為糖的端基碳信號，δC70.94～88.65 共給出23 個連氧叔碳信號，推測為糖基C-2～C-5 或甾體皂苷苷元上的連氧碳信號，δC13.78，12.42，13.66和17.45為4個甲基碳信號.化合物3的1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中，高場區(qū)出現(xiàn)了4 組甲基質(zhì)子信號，分別為δH0.99（3H，s），δH0.54（3H，s），δH1.12（3H，d，J=7.2 Hz）和δH0.93（3H，d，J=6.6 Hz），根據(jù)HSQC 以及HMBC 譜，可將這4 組甲基碳信號分別歸屬為C-18（δC13.78），C-19（δC12.42），C-21（δC13.66）和C-27（δC17.45）.由于C18質(zhì)子信號（δH0.99，3H）處于低場，而C19質(zhì)子信號（δH0.54，3H）處于高場，可確認(rèn)甾體皂苷元5位氫為α構(gòu)型.

結(jié)合HMBC 譜可知，δH0.93（3H，d，J=6.6 Hz，H-27）分別與δC31.14，δC34.20 和δC75.83 存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3組碳信號分別歸屬為C-24，C-25和C-26.δH1.12（3H，d，J=7.2 Hz，H-21）分別與δC59.89，δC37.53和δC73.32存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3組碳信號分別歸屬為C-17，C-20和C-22.δH0.99（3H，s，H-18）分別與δC40.76，δcC43.36，δC54.59和δC59.89存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4組碳信號分別歸屬為C-12，C-13，C-14和C-17.δH0.54（3H，s，H-19）分別與δC37.32，δC44.82，δC54.72和δC35.86存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4組碳信號分別歸屬為C-1，C-5，C-9和C-10.在1H-1H COSY譜中，δH4.45（H-16）與δH1.36，2.16（H-15）存在1H-1H相關(guān)，再結(jié)合HSQC譜，可歸屬δC71.43（連氧叔碳）為C-16信號，歸屬δC37.83為C-15信號.δH0.69，1.43（H-1）與δH1.50，1.92（H-2）存在1H-1H相關(guān)，故將δC30.03 歸屬為C-2，同時δH1.50，1.92（H-2）又與δH3.79（H-3）存在1H-1H 相關(guān)，故將δC77.46（連氧叔碳）歸屬為C-3 信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.δH1.95（H-25）與δH3.51，3.99（H-26）存在1H-1H相關(guān)，再結(jié)合HSQC譜，可歸屬δC75.83（連氧仲碳）為C-26信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.由C-26位質(zhì)子信號（δHa3.99，δHb3.51）的差值Δab=δHa-δHb≤0.48，提示25位的構(gòu)型為R型［31］.將化合物3的13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［24］中（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-甲氧基-5β-呋甾-3β，26-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）-D-吡喃半乳糖苷數(shù)據(jù)對比，發(fā)現(xiàn)兩者皂苷元的數(shù)據(jù)基本一致.只是化合物3中皂苷元E環(huán)的C-22失去羥基，導(dǎo)致C-22向高場移動δ37.28，從而使C-16，C-23，C-20和C-17的化學(xué)位移值向高場移動.

在1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中低場區(qū)出現(xiàn)5 個糖的端基質(zhì)子信號，分別為δH4.77（1H，d，J=7.8 Hz），δH5.03（1H，d，J=7.8 Hz），δH5.18（1H，d，J=7.8 Hz），δH5.46（1H，d，J=7.8 Hz），δH4.72（1H，d，J=7.8 Hz），提示化合物中存在5分子糖，由J=7.8 Hz可知5分子糖的端基質(zhì)子均為β構(gòu)型.酸水解實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明分子中存在半乳糖和葡萄糖.由HMBC 譜可知，半乳糖的端基質(zhì)子信號（δH4.77，1H，d，J=7.8 Hz）與母核C-3（δC77.46）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，因此推測該糖連接在皂苷元母核C-3位，內(nèi)側(cè)葡萄糖的端基質(zhì)子信號（δH5.03，1H，d，J=7.8 Hz）與半乳糖的C-4′（δc 80.37）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，推測其連接方式為1→4.外側(cè)葡萄糖端基質(zhì)子信號（δH5.18，1H，d，J=7.8 Hz和δH5.46，1H，d，J=7.8 Hz）分別與內(nèi)側(cè)葡萄糖的C-3″（δC88.65）和C-2″（δC81.59）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，推測兩分子葡萄糖與內(nèi)側(cè)葡萄糖的連接方式分別為1→3和1→2.葡萄糖的端基質(zhì)子信號（δH4.72，1H，d，J=7.8 Hz）與母核C-26（δC75.83）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，因此推測該糖連接在皂苷元母核C-26 位.此外化合物3 的糖基碳化學(xué)位移值與文獻(xiàn)［30］報道基本一致.

綜上所述，鑒定化合物3（分子式C57H96O28）結(jié)構(gòu)為（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5α-呋喃甾烷-3β，26-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）-［β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）］-β-D-吡喃葡萄糖基（1→4）-β-D-吡喃半乳糖苷.經(jīng)文獻(xiàn)檢索，確認(rèn)其為新化合物.化合物3的HMBC與COSY相關(guān)譜圖見本文支持信息中圖S3，13C NMR數(shù)據(jù)見表1.

化合物4為白色粉末（乙腈-水），m.p.216～218 ℃，E試劑反應(yīng)顯粉紅色，提示該化合物可能為呋甾皂苷類化合物.HR-ESI-MS 分析得到m/z887.9102［M+H-H2O］+，提示化合物4 的分子量為905.0311，推測其分子式為C44H72O19.

化合物4的13C NMR（C5D5N，150 MHz）譜共給出44個碳信號，其中包括27個皂苷元碳信號和17個糖基碳信號.結(jié)合DEPT譜可知，低場區(qū)δc 209.58為羰基碳信號，δC102.13，105.7和105.08推測為糖的端基碳信號，δC70.95～81.08 共給出13 個連氧叔碳信號，推測為糖基C-2～C-5 或甾體皂苷苷元上的連氧碳信號，δC16.68，13.16，16.53 和17.55 為4 個甲基碳信號.化合物4 的1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中，高場區(qū)出現(xiàn)了4組甲基質(zhì)子信號，分別為δH0.71（3H，s），δH0.51（3H，s），δH1.21（3H，d，J=6.6 Hz）和δH0.86（3H，d，J=6.6 Hz），根據(jù)HSQC以及HMBC譜，可將這4組甲基碳信號分別歸屬為C-18（δC16.68），C-19（δC13.16），C-21（δC16.53）和C-27（δC17.55）.由于C18質(zhì)子信號（δH0.71，3H）處于低場而C19質(zhì)子信號（δH0.51，3H）處于高場，可確認(rèn)甾體皂苷元5位氫為α構(gòu)型.

結(jié)合HMBC 譜可知，δH0.86（3H，d，J=6.6 Hz，H-27）分別與δC28.5，δC34.27 和δC75.39 存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3組碳信號分別歸屬為C-24，C-25和C-26.δH1.21（3H，d，J=6.6 Hz，H-21）分別與δC63.92，δC40.71 和δC110.74 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3 組碳信號分別歸屬為C-17，C-20 和C-22.δH0.71（3H，s，H-18）分別與δC39.79，δC41.51，δC56.53和δC63.92存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4 組碳信號分別歸屬為C-12，C-13，C-14 和C-17.δH0.51（3H，s，H-19）分別與δC37.3，δC56.53，δC53.84和δC40.95存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將其信號分別歸屬為C-1，C-5，C-9和C-10.δH1.97（1H，s，H-5）分別與δC209.58 和δC27.14 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這2 組碳信號分別歸屬為C-6 和C-4.在1H-1H COSY 譜中，δH4.79（H-16）與δH1.78 和1.24（H-15）存在1H-1H 相關(guān)，再結(jié)合HSQC 譜，可歸屬δc 80.92（連氧叔碳）為C-16信號，歸屬δC32.17為C-15信號.δH0.91，1.42（H-1）與δH1.47，1.2（H-2）存在1H-1H相關(guān)，故將δC29.55歸屬為C-2，同時δH1.47，1.2（H-2）又與δH3.8（H-3）存在1H-1H相關(guān)，故將δC77.06（連氧叔碳）其歸屬為C-3信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.δH1.79（H-25）與δH3.49，3.82（H-26）存在1H-1H相關(guān)，再結(jié)合HSQC譜，可歸屬δC75.39（連氧仲碳）為C-26信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.由C-26位質(zhì)子信號（δHa3.82，δHb3.49）的差值Δab=δHa-δHb≤0.48，提示25位的構(gòu)型為R型.化合物4的皂苷元的13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［32］報道的化合物（25R）-6-酮-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5α-呋喃甾烷-3β，22α，26-三醇-β-D-吡喃葡萄糖苷對比，發(fā)現(xiàn)兩者皂苷元數(shù)據(jù)基本一致.

在1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中低場區(qū)出現(xiàn)3 個糖的端基質(zhì)子信號，分別為δH4.88（1H，d，J=7.8 Hz），δH5.02（1H，d，J=7.8 Hz）和δH4.69（1H，d，J=7.8 Hz），提示化合物中存在3 分子糖，由J=7.8 Hz 可知5 分子糖的端基質(zhì)子均為β構(gòu)型.酸水解實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，分子中存在葡萄糖和木糖.由HMBC 譜可知，葡萄糖的端基質(zhì)子信號（δH4.81，1H，d，J=7.8 Hz）與母核C-3（δC77.06）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，因此推測該糖連接在皂苷元母核C-3位，木糖的端基質(zhì)子信號（δH5.02，1H，d，J=7.8Hz）與葡萄糖的C-4′（δC81.08）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，推測木糖與葡萄糖的連接方式分別為1→4.葡萄糖的端基質(zhì)子信號（δH4.69，1H，d，J=7.8 Hz）與母核C-26（δC75.39）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，因此推測該糖連接在皂苷元母核C-26位.此外，化合物4的糖基碳化學(xué)位移值與文獻(xiàn)［32］報道基本一致.

綜上所述，鑒定化合物4（分子式C44H72O19）結(jié)構(gòu)為（25R）-6-酮-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5α-呋喃甾烷-3β，22α，26-三醇-3-O-α-L-吡喃木糖基-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖苷.經(jīng)文獻(xiàn)檢索可知其為新化合物.化合物4的HMBC與COSY相關(guān)譜圖見本文支持信息中圖S4，13C NMR數(shù)據(jù)見表1.

化合物5為白色粉末（乙腈-水），m.p.189～190 ℃，E試劑反應(yīng)顯粉紅色，提示該化合物可能為呋甾皂苷類化合物.HR-ESI-MS 分析得出m/z855.8714［M+H-2H2O］+，提示化合物5 的分子量為890.8940，推測其分子式為C43H70O19.

化合物5的13C NMR（C5D5N，150 MHz）譜共給出43個碳信號，其中包括27個皂苷元碳信號和16個糖基碳信號.結(jié)合DEPT譜可知，低場區(qū)δC209.63為羰基碳信號，δC102.17，105.78和105.25推測為糖的端基碳信號，δC69.96～81.31 共給出13 個連氧叔碳信號，推測為糖基C-2～C-5 或甾體皂苷苷元上的連氧碳信號，δC16.53，13.16，15.05 和13.74 為4 個甲基碳信號.化合物5 的1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中，高場區(qū)出現(xiàn)了4 組甲基質(zhì)子信號，分別為δH0.65（3H，s），δH0.5（3H，s），δH1.05（3H，d，J=6.6 Hz）和δH0.97（3H，d，J=6.6 Hz），根據(jù)HSQC以及HMBC譜，可將這4組甲基碳信號分別歸屬為C-18（δC16.53），C-19（δC13.16），C-21（δC15.05）和C-27（δC13.74）.由于C18質(zhì)子信號（δH0.65，3H）處于低場而C19質(zhì)子信號（δH0.50，3H）處于高場，可確認(rèn)甾體皂苷元5位氫為α構(gòu)型.

結(jié)合HMBC 譜可知，δH0.97（3H，d，J=6.6 Hz，H-27）分別與δC70.63，δC40.08 和δC65.45 存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3組碳信號分別歸屬為C-24，C-25和C-26.δH1.05（3H，d，J=6.6 Hz，H-21）分別與δC62.54，δC40.32 和δC111.95 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3 組碳信號分別歸屬為C-17，C-20 和C-22.δH0.65（3H，s，H-18）分別與δC39.58，δC41.17，δC56.57和δC62.54存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4 組碳信號分別歸屬為C-12，C-13，C-14 和C-17.δH0.5（3H，s，H-19）分別與δC36.79，δC56.53，δC53.77 和δC40.95 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4 組碳信號分別歸屬為C-1，C-5，C-9 和C-10.δH2.02（1H，s，H-5）分別與δC209.63 和δC27.04 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這2 組碳信號分別歸屬為C-6 和C-4.在1H-1H COSY譜中，δH4.42（H-16）與δH1.8，1.25（H-15）存在1H-1H相關(guān)，再結(jié)合HSQC譜，可歸屬δC81.31（連氧叔碳）為C-16 信號，歸屬δC31.9 為C-15 信號.δH0.97，1.44（H-1）與δH1.48，1.96（H-2）存在1H-1H相關(guān)，故將δC29.54歸屬為C-2，同時δH1.48，1.96（H-2）又與δH3.84（H-3）存在1H-1H相關(guān)，故將δC77.08（連氧叔碳）歸屬為C-3信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.δH1.71（H-25）分別與δH3.47，3.58（H-26）存在1H-1H相關(guān)，再結(jié)合HSQC譜，可歸屬δC65.45（連氧仲碳）為C-26信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.由C-26位質(zhì)子信號的（δHa3.47，δHb3.58）差值Δab=δHa-δHb≤0.48，提示25位的構(gòu)型為R型.將化合物5的皂苷元與化合物4的皂苷元13C NMR數(shù)據(jù)對比，化合物5的C-24位向低場移動了δ42.13，推測C-24 連有羥基.由于C-24 位連接羥基，產(chǎn)生誘導(dǎo)效應(yīng)，導(dǎo)致C-22，C-23 和C-25位化學(xué)位移向低場移動.在核Overhauser相關(guān)譜（NOESY）中，可以看到C-24的氫信號（δH3.89）與Me-21（α）氫信號（δH1.05）相關(guān)，從而確定C-24的羥基為β型.

在1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中低場區(qū)出現(xiàn)3 個糖的端基質(zhì)子信號，分別為δH4.82（1H，d，J=7.8 Hz），δH4.94（1H，d，J=7.2 Hz）和δH5.35（1H，d，J=7.8 Hz），提示化合物中存在3分子糖.酸水解結(jié)果表明，分子中存在葡萄糖、木糖和阿拉伯糖.由HMBC 譜可知，葡萄糖的端基質(zhì)子信號（δH4.82，1H，d，J=7.8 Hz）與母核C-3（δC77.08）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，因此推測該糖連接在皂苷元母核C-3位，木糖的端基質(zhì)子信號（δH5.35，1H，d，J=7.8 Hz）和阿拉伯糖的端基質(zhì)子信號（δH4.94，1H，d，J=7.2 Hz）分別與葡萄糖的C-4′（δC79.92），C-6′（δC68.22）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，推測木糖和阿拉伯糖與葡萄糖的連接方式分別為1→4和1→6.此外，化合物5的糖基碳化學(xué)位移值與文獻(xiàn)［11］報道基本一致.

綜上所述，鑒定化合物5（分子式C43H70O19）結(jié)構(gòu)為（25R）-6-酮-5α-呋喃甾烷-3β，22α，24β，26-四醇-3-O-β-D-吡喃木糖基-（1→4）-［α-L-吡喃阿拉伯糖基-（1→6）］-β-D-吡喃葡萄糖苷.經(jīng)文獻(xiàn)檢索可知其為新化合物.化合物5的HMBC與COSY相關(guān)譜圖見本文支持信息中圖S5，13CNMR數(shù)據(jù)見表1.

化合物6 為白色粉末（乙腈-水），m.p.145～147 ℃，Liebermann-Burchard 和Molish 反應(yīng)陽性，與E 試劑反應(yīng)顯粉紅色，提示該化合物可能為呋甾皂苷類化合物.HR-ESI-MS 分析得出m/z595.3843［M+H-H2O］+，提示化合物6的分子量為612.3843，推測其分子式為C33H56O10.

化合物6的13C NMR（C5D5N，150 MHz）譜共給出33個碳信號，其中包括27個皂苷元碳信號和6個糖基碳信號.結(jié)合DEPT譜可知，低場區(qū)δC105.29推測為糖的端基碳信號，δC71.82～81.25共給出7個連氧叔碳信號，推測為糖基C-2～C-5或甾體皂苷苷元上的連氧碳信號，δC16.88，13.83，16.56和17.57為4個甲基碳信號.化合物6的1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中，高場區(qū)出現(xiàn)了4組甲基質(zhì)子信號，分別為δH0.76（3H，s），δH0.74（3H，s），δH1.2（3H，d，J=7.2 Hz）和δH0.89（3H，d，J=6.6 Hz），根據(jù)HSQC以及HMBC譜，可將這4組甲基碳信號分別歸屬為C-18（δC16.88），C-19（δC13.83），C-21（δC16.56）和C-27（δC17.57）.由于C18質(zhì)子信號（δH0.76，3H）處于低場而C19質(zhì)子信號（δH0.74，3H）處于高場，可確認(rèn)甾體皂苷元5位氫為α構(gòu)型.

結(jié)合HMBC 譜可知，δH0.89（3H，d，J=6.6 Hz，H-27）分別與δC28.46，δC34.55 和δC75.51 存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3組碳信號分別歸屬為C-24，C-25和C-26.δH1.2（3H，d，J=7.2 Hz，H-21）分別與δC64.05，δC40.80 和δC110.73 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這3 組碳信號分別歸屬為C-17，C-20 和C-22.δH0.76（3H，s，H-18）分別與δC40.34，δC41.26，δC56.46和δC64.05存在C-H遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4 組碳信號分別歸屬為C-12，C-13，C-14 和C-17.δH0.74（3H，s，H-19）分別與δC46.63，δC45.37，δC54.75 和δc 37.68 存在C-H 遠(yuǎn)程相關(guān)，可將這4 組碳信號分別歸屬為C-1，C-5，C-9 和C-10.在1H-1H COSY譜中，δH4.82（H-16）與δH1.9，1.3（H-15）存在1H-1H相關(guān)，再結(jié)合HSQC譜，可歸屬δc 81.25（連氧叔碳）為C-16 信號，歸屬δC32.53 為C-15 信號.δH1.8（H-25）與δH3.5 和3.82（H-26）分別存在1H-1H相關(guān)，再結(jié)合HSQC 譜，可歸屬δC75.51（連氧仲碳）為C-26 信號，并推測其與糖基相連形成糖苷鍵.δH1.16，1.24（H-1）與δH3.93（H-2）存在1H-1H 相關(guān)，故將δC73.18 歸屬為C-2，同時δH3.93（H-2）又與δH3.74（H-3）存在1H-1H相關(guān)，故將δC76.8（連氧叔碳）歸屬為C-3信號，并推測C-2，C-3連有羥基.由于C-2，C-3 連有羥基產(chǎn)生誘導(dǎo)效應(yīng)，導(dǎo)致C-1 和C-4 化學(xué)位移值向低場移動.在NOESY 譜中，可以看到C-2的氫信號（δH3.93）與Me-19（β）氫信號（δH0.74）相關(guān)，從而確定C-2的羥基為α型.C-3的氫信號（δH3.74）與C-5（α）氫信號（δH1.09）相關(guān)，從而確定C-3 的羥基為β型.C-26 位質(zhì)子信號（δHa3.47，δHb3.58）的差值Δab=δHa-δHb≤0.48，提示25位的構(gòu)型為R型.

在1H NMR（C5D5N，600 MHz）譜中低場區(qū)出現(xiàn)1個糖的端基質(zhì)子信號為δH4.69（1H，d，J=7.8 Hz），提示化合物中存在1分子糖，由J=7.8 Hz可知1分子糖的端基質(zhì)子為β構(gòu)型，酸水解結(jié)果表明分子中存在葡萄糖.由HMBC 譜可知，葡萄糖的端基質(zhì)子信號（δH4.69，1H，d，J=7.8 Hz）與母核C-26（δC75.51）存在遠(yuǎn)程相關(guān)，因此推測該糖連接在皂苷元母核C-26位.

綜上所述，鑒定化合物6（分子式C33H56O10）結(jié)構(gòu)為（25R）-5α-呋甾-2α，3β，22α，26-四醇-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷.經(jīng)文獻(xiàn)檢索可知其為新化合物.化合物6的HMBC與COSY相關(guān)譜圖見本文支持信息中圖S6，詳細(xì)13C NMR數(shù)據(jù)見表1.

2.2 薤中6種化合物對PC12細(xì)胞H2O2誘導(dǎo)氧化損傷的保護(hù)作用

各實(shí)驗(yàn)組對PC12細(xì)胞的活性測試結(jié)果如圖2所示.與未經(jīng)處理的空白對照組相比，模型組細(xì)胞活性明顯降低，說明H2O2對PC12細(xì)胞產(chǎn)生了氧化損傷.而經(jīng)過6種化合物共孵育處理后，化合物3實(shí)驗(yàn)組與模型組相比，細(xì)胞活性顯著提高（*P＜0.05），其它5組未見明顯改善，說明化合物3對H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷有顯著保護(hù)效果.

Fig.2 Effects of six compounds in Allium chinense G.Don on the viability of PC12 cells induced by H2O2

Fig.3 Effect of compound 3 on PC12 cell activity induced by H2O2 at different concentrations

將不同濃度的化合物3 與PC12 細(xì)胞共孵育24 h，再經(jīng)H2O2誘導(dǎo)PC12 細(xì)胞損傷后檢測細(xì)胞活性，結(jié)果如圖3所示.對照組是未經(jīng)H2O2處理的空白對照，其余各組均經(jīng)H2O2處理.與對照組（0 μg/mL）相比，80和120 μg/mL實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞活性明顯提高，說明化合物3對H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用呈現(xiàn)劑量依賴性.

3 結(jié) 論

從新鮮薤（Allium chinenseG.Don）中分離得到6個新的甾體皂苷類化合物并鑒定了其化學(xué)結(jié)構(gòu)，這6個化合物分別為5α-cholano-22，16-內(nèi)酯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）-［β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）］-β-D-吡喃葡萄糖基（1→4）-β-D-吡喃半乳糖苷（1）、6-酮-5α-cholano-22，16-內(nèi)酯-3-O-β-D-吡喃木糖基-（1→4）-［α-L-吡喃阿拉伯糖基-（1→6）］-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5α-呋喃甾烷-3β，26-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）-［β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）］-β-D-吡喃葡萄糖基（1→4）-β-D-吡喃半乳糖苷（3）、（25R）-6-酮-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5α-呋喃甾烷-3β，22α，26-三醇-3-O-α-L-吡喃木糖基-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、（25R）-6-酮-5α-呋喃甾烷-3β，22α，24，26-四醇-3-O-β-D-吡喃木糖基-（1→4）-［α-L-吡喃阿拉伯糖基-（1→6）］-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）和（25R）-5α-呋甾-2α，3β，22α，26-四醇-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）.其中，化合物1和2的皂苷元骨架在天然產(chǎn)物中首次分離得到.

抗氧化損傷活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，由薤中分離出的6種化合物中只有化合物3對H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷有明顯保護(hù)作用，且具有劑量依賴關(guān)系，其它5種化合物無明顯保護(hù)效果.通過分析6種化合物的結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，化合物3與其它同類型5種化合物相比，側(cè)鏈糖基為葡萄糖和半乳糖組成的數(shù)量相對較多，同時22位無羥基或羰基存在，推測這些結(jié)構(gòu)上的差異可能導(dǎo)致了其對H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞氧化損傷的不同的生物活性，這一點(diǎn)有待進(jìn)一步研究.

支持信息見http://www.cjcu.jlu.edu.cn/CN/10.7503/cjcu20200905.