基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對(duì)枸杞子-五味子治療注意缺陷多動(dòng)障礙的機(jī)制探究

吳靜靜 鄧家琳 于慶洋 閆雨柔 王俊宏

摘要 目的：基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討枸杞子-五味子藥對(duì)治療注意缺陷多動(dòng)障礙的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制。方法：檢索ETCM數(shù)據(jù)庫(kù)，篩選枸杞子-五味子活性成分及靶基因;檢索Drugbank、Genecards、DisGeNET和TTD數(shù)據(jù)庫(kù)，篩選ADHD相關(guān)靶基因;利用Cytoscape構(gòu)建藥對(duì)活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)并進(jìn)行拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)分析;對(duì)疾病靶點(diǎn)與藥對(duì)靶點(diǎn)繪制維恩圖篩選關(guān)鍵靶點(diǎn)，利用David進(jìn)行GO分析和KEGG分析。結(jié)果：篩選出枸杞子-五味子有36個(gè)活性成分，207個(gè)靶基因，活性成分-靶點(diǎn)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)分析得到Inosine和其他基因互相關(guān)聯(lián)程度最高;篩選出ADHD相關(guān)靶基因1 861個(gè)，維恩圖提取關(guān)鍵靶點(diǎn)73個(gè)，GO分析得到11條生物過程，12條細(xì)胞組分表達(dá)過程，14個(gè)分子功能相關(guān)過程;KEGG分析顯示21條信號(hào)通路，包括類固醇激素的合成、細(xì)胞色素P450代謝、GABA能突觸及膽堿能突觸調(diào)節(jié)、色氨酸代謝等。結(jié)論：枸杞子-五味子藥對(duì)活性成分通過多成分、多靶點(diǎn)、多通路調(diào)控機(jī)體類固醇激素代謝、神經(jīng)遞質(zhì)代謝、中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)、免疫調(diào)節(jié)對(duì)ADHD發(fā)揮治療作用。

關(guān)鍵詞 注意缺陷多動(dòng)障礙;枸杞子;五味子;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);分子機(jī)制

Mechanism Study on the Investigation of the Mechanism of Fructus Lycii-Fructus Schisandrae Chinensis in the Treatment of Attention-deficit/Hyperactivity Disorder Based on Network Pharmacology

WU Jingjing，DENG Jialin，YU Qingyang，YAN Yurou，WANG Junhong

（Dongzhimen Hospital，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100700，China）

Abstract Objective：To explore the molecular mechanism of Fructus Lycii-Fructus Schisandrae Chinensis in the treatment of attention-deficit/hyperactivity disorder based on network pharmacology.Methods：ETCM was used to screen the active components and target gene of Fructus Lycii-Fructus Schisandrae Chinensis.Drugbank，Genecards，DisGeNET and TTD databases was searched to screen ADHD-related target genes; Cytoscape was used to construct a drug-to-active ingredient-target network and conduct topological structure analysis; Venn diagrams for disease targets and drug-to-targets were drawn to screen key targets.David was used for GO analysis and KEGG analysis.Results：A total of 36 active ingredients and 207 potential target genes related to Fructus Lycii-Fructus Schisandrae Chinensis were retrieved from ETCM.1 861 ADHD-related target genes were screened，73 key targets were extracted from Venn diagrams.A total of 11 biological processes，12 cell component expression processes，and 14 molecular functions related processes were obtained by GO analysis; KEGG analysis showed 21 signal pathways，including the synthesis of steroid hormones，cytochrome P450 metabolism，GABAergic synapse and cholinergic synaptic regulation，tryptophan metabolism，etc.Conclusion：The active ingredients of Fructus Lycii-Fructus Schisandrae Chinensis active ingredients can regulate the body′s steroid hormone metabolism，neurotransmitter metabolism，central nervous system regulation，and immune regulation through multiple components，multiple targets，and multiple pathways to play a therapeutic effect on ADHD.

Keywords Attention deficit hyperactivity disorder; Fructus Lycii; Fructus Schisandra Chinensis; Network pharmacology; Molecular mechanism

中圖分類號(hào)：R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.03.008

注意缺陷多動(dòng)障礙（Attention Deficit Hyperactivity Disorder，ADHD）是兒童期最為常見的神經(jīng)發(fā)育障礙之一，臨床主要表現(xiàn)為與年齡不相稱的注意力不集中、多動(dòng)和沖動(dòng)行為[1]，常與對(duì)立違抗障礙、品行障礙、抽動(dòng)障礙、孤獨(dú)癥譜系障礙、學(xué)習(xí)困難等共存，對(duì)患兒身心健康、學(xué)業(yè)水平、家庭關(guān)系等造成負(fù)面影響。ADHD全球患病率3.4%[2]，近年來我國(guó)ADHD總患病率逐年上升，已達(dá)6.2%[3]，約2/3患者癥狀持續(xù)至青春期，1/3可能持續(xù)終生[4]，可見ADHD對(duì)于患兒的負(fù)面影響是長(zhǎng)遠(yuǎn)的，給個(gè)人、家庭及整個(gè)社會(huì)帶來沉重負(fù)擔(dān)。

ADHD病因復(fù)雜，西醫(yī)以對(duì)癥治療為主，通常用于治療本病的藥物包括：興奮劑如哌甲酯和苯丙胺，非興奮劑如托莫西汀，三環(huán)類抗抑郁藥和α激動(dòng)劑，需要長(zhǎng)期服藥。但長(zhǎng)期療效不確切，存在耐藥、易成癮、不良反應(yīng)較多等局限性。近40年來該病的中醫(yī)藥研究逐漸廣泛、深入，取得了很大進(jìn)展，中醫(yī)藥治療本病顯示出了不可替代的優(yōu)勢(shì)[5]，具有減少不良反應(yīng)和降低適應(yīng)性耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，故探究本病的中醫(yī)治療起效機(jī)制具有深遠(yuǎn)的意義。

本病根據(jù)其活動(dòng)過多、沖動(dòng)任性、情緒不穩(wěn)的臨床表現(xiàn)，可歸屬于中醫(yī)學(xué)“臟躁”“躁動(dòng)”范疇。先天稟賦不足，后天調(diào)護(hù)不當(dāng)，導(dǎo)致臟腑功能失常，陰陽(yáng)失衡是本病的主要原因[6]。本課題組多年來致力于注意缺陷多動(dòng)障礙的臨床及實(shí)驗(yàn)研究，認(rèn)為此病躁與動(dòng)的產(chǎn)生，究其根本為陰?kù)o不足而產(chǎn)生陽(yáng)動(dòng)亢盛的結(jié)果，故本病的根本病機(jī)為陰虛陽(yáng)亢，治宜益氣養(yǎng)陰，寧心安神。長(zhǎng)期臨證經(jīng)驗(yàn)表明，枸杞子-五味子是治療ADHD的中藥中具有養(yǎng)陰寧心作用的代表性藥對(duì)，其中枸杞子善滋腎、益精、養(yǎng)血，為平補(bǔ)腎精肝血之品;五味子歸肺、心、腎經(jīng)，味甘能補(bǔ)，主益氣、滋腎水，寧心安神。本研究旨在通過應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)，探究枸杞子-五味子藥對(duì)治療ADHD的潛在活性成分、靶點(diǎn)基因、藥理作用機(jī)制，為探究枸杞子-五味子治療ADHD的起效機(jī)制提供理論依據(jù)，為下一步的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究奠定基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 篩選枸杞子-五味子的潛在活性成分及靶點(diǎn) 對(duì)ETCM數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.nrc.ac.cn：9090/ETCM/）進(jìn)行檢索，該數(shù)據(jù)庫(kù)基于更新更權(quán)威的算法預(yù)測(cè)化合物的ADME（absorption，distribution，metabolism and excretion），給出綜合評(píng)分及證據(jù)等級(jí)，按其藥物相似性定量估計(jì)（QED）得分將預(yù)測(cè)到的化合物分為3類：好（QED>0.67）、中度（0.49≤QED≤0.67）和弱（QED<0.49）;并基于更可靠的商業(yè)軟件MedChem Studio（version 3.0）預(yù)測(cè)靶點(diǎn)信息，給出預(yù)測(cè)分（0.8以上）的靶點(diǎn)[7]。本研究根據(jù)QED≥0.49的原則，篩選出枸杞子、五味子證據(jù)等級(jí)中等質(zhì)量及高質(zhì)量的潛在活性成分;依據(jù)篩選預(yù)測(cè)分（0.8以上）的靶點(diǎn)，得到枸杞子-五味子潛在活性成分相對(duì)應(yīng)的作用靶點(diǎn)基因。

1.2 篩選ADHD相關(guān)靶點(diǎn) 以“Attention deficit hyperactivity disorder”為關(guān)鍵詞，分別檢索Drugbank數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.drugbank.ca/）、DisGeNET數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.disgenet.org/）、Genecards數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.genecards.org/）和TTD數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//db.idrblab.net/ttd/）四大疾病相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)，篩選與ADHD相關(guān)的所有靶點(diǎn)，合并重復(fù)靶點(diǎn)后，得到與ADHD相關(guān)的靶基因。

1.3 枸杞子-五味子潛在活性成分與靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建利用Cytoscape3.7.2軟件，將枸杞子-五味子潛在活性成分及靶點(diǎn)導(dǎo)入，繪制潛在活性成分及靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵傩苑治?，根?jù)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)節(jié)點(diǎn)值（Degree），明確該藥對(duì)治療ADHD起效的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.4 疾病與藥對(duì)交集靶點(diǎn)的篩選 將ADHD疾病相關(guān)靶點(diǎn)基因與枸杞子-五味子藥對(duì)潛在靶點(diǎn)基因進(jìn)行匹配并繪制維恩圖，提取交集，其交集即為枸杞子-五味子活性成分治療ADHD的潛在作用靶點(diǎn)。

1.5 基因本體分析及通路富集分析 對(duì)提取得到枸杞子-五味子潛在活性成分治療ADHD的關(guān)鍵作用靶點(diǎn)，利用DAVID Bioinformatics Resources 6.8，進(jìn)行GO功能富集分析與KEGG通路富集分析。

2 結(jié)果

2.1 枸杞子-五味子潛在活性成分與靶點(diǎn)的篩選 枸杞子-五味子藥對(duì)共得到36個(gè)潛在活性成分（刪去重復(fù)值后），其中來自枸杞子的有11個(gè)，來自五味子的有25個(gè)。見表1。進(jìn)一步在ETCM數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選出潛在活性成分對(duì)應(yīng)的作用靶點(diǎn)基因，得到枸杞子-五味子藥對(duì)活性成分相應(yīng)靶點(diǎn)基因共207個(gè)（去重后）。

2.2 枸杞子-五味子潛在活性成分與靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 利用Cytoscape3.7.2軟件，導(dǎo)入枸杞子、五味子潛在活性成分及靶點(diǎn)，進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)繪制。見圖1。該網(wǎng)絡(luò)圖直觀地反映這些成分與靶標(biāo)的相互作用。圖中中心藍(lán)色矩形圖標(biāo)分別代表枸杞子、五味子二味中藥，中間部分紅色“V”形圖標(biāo)代表枸杞子-五味子藥對(duì)潛在活性成分，外圍綠色圓形圖標(biāo)代表作用靶點(diǎn)。節(jié)點(diǎn)之間的邊代表成分與靶點(diǎn)之間的作用關(guān)系。圖中共涉及245個(gè)節(jié)點(diǎn)，294條邊。成分靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)分析顯示：Degree排名前5位的成分為Inosine（Degree=36）、Nootka tone（Degree=34）、2-Isopropyl-5-Methylanisole（Degree=28）、Β-Ionone（Degree=27）、Withanolide A（Degree=24）。結(jié)果顯示，Degree值居首位的是Inosine，說明該靶標(biāo)和其他基因的互相關(guān)聯(lián)程度最高，在枸杞子-五味子治療ADHD起效的機(jī)制中可能發(fā)揮著最重要的作用。此外，篩選結(jié)果顯示枸杞子-五味子藥對(duì)中潛在活性成分包括多糖類、黃酮類、萜類、木脂素及揮發(fā)油等。

2.3 ADHD疾病靶點(diǎn)篩選 通過檢索Drugbank、Genecards、DisGeNET和TTD數(shù)據(jù)庫(kù)，篩選數(shù)據(jù)，分別得到ADHD相關(guān)的基因靶點(diǎn)為192個(gè)、2 433個(gè)、411個(gè)、40個(gè)，去掉重復(fù)值后，最終得到ADHD相關(guān)靶點(diǎn)基因1 861個(gè)。

2.4 枸杞子-五味子治療ADHD的關(guān)鍵靶點(diǎn)分析 將篩選出的1 861個(gè)ADHD疾病相關(guān)靶點(diǎn)與枸杞子、五味子藥對(duì)207個(gè)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行匹配并繪制維恩圖。見圖2。結(jié)果顯示得到交集靶點(diǎn)73個(gè)，包括CYP1A1、CYP1A2、CYP3A4、CYP2D6、CYP2A6、COMT、SHBG、DAO、SLC15A1等，表明這73個(gè)靶點(diǎn)在枸杞子-五味子治療ADHD的作用機(jī)制中具有關(guān)鍵意義，因此將對(duì)這些靶點(diǎn)進(jìn)行進(jìn)一步深入分析。

2.5 GO富集分析 對(duì)ADHD相關(guān)的枸杞子-五味子藥對(duì)73個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行GO生物功能富集分析，根據(jù)P<0.05且靶點(diǎn)基因富集度>10%對(duì)得出的結(jié)果進(jìn)行篩選，得到11條生物過程（Biological Process，BP），12條細(xì)胞組分（Cellular Component，CC）表達(dá)過程，14個(gè)分子功能（Molecular Function，MF）相關(guān)過程。見圖3。在生物過程分析中，主要涉及氧化還原過程（Oxidation-reduction Process，19個(gè)靶點(diǎn)），信號(hào)傳導(dǎo)（Signal Transduction，15個(gè)靶點(diǎn)），類固醇代謝過程（Steroid Metabolic Process，13個(gè)靶點(diǎn)），異源代謝過程（Xenobiotic Metabolic Process，13個(gè)靶點(diǎn)），藥物代謝過程（Drug Metabolic Process，11

圖2 疾病靶點(diǎn)與枸杞子-五味子藥對(duì)靶點(diǎn)維恩圖

個(gè)靶點(diǎn)），環(huán)氧酶P450途徑（Epoxygenase P450 Pathway、10個(gè)靶點(diǎn)）等。在細(xì)胞組分分析中，主要涉及膜（Membrane）、質(zhì)膜（Plasma Membrane）、突觸后膜（Postsynaptic Membrane）、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜（Endoplasmic Reticulum Membrane）、細(xì)胞連接（Cell Junction）等。在分子功能分析中，主要涉及血紅素結(jié)合（Heme Binding）、鐵離子結(jié)合（Iron Ion Binding）、氧化還原酶活性（Oxidoreductase Activity）、類固醇羥化酶活性（Steroid Hydroxylase Activity）、細(xì)胞外配體門控離子通道活性（Extracellular Ligand-gated Ion Channel Activity）等。由此可見，枸杞子-五味子成分復(fù)雜多樣，該藥對(duì)治療ADHD起效的機(jī)制是由多種生物靶點(diǎn)互相協(xié)同作用、調(diào)控多條生物過程實(shí)現(xiàn)的。

2.6 KEGG通路分析 對(duì)枸杞子-五味子73個(gè)潛在關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析，結(jié)果顯示涉及21條信號(hào)通路，根據(jù)P<0.05篩選出19條。見圖4。提示枸杞子-五味子可以通過以上通路協(xié)同發(fā)揮作用。根據(jù)靶點(diǎn)富集程度分析，其中類固醇激素的合成通路、神經(jīng)活性配體-受體相互作用通路、藥物代謝-細(xì)胞色素P450通路、GABA能突觸信號(hào)通路、膽堿能突觸信號(hào)通路、色氨酸代謝通路等可能為枸杞子-五味子治療ADHD的關(guān)鍵信號(hào)通路。

3 討論

注意缺陷多動(dòng)障礙（ADHD）作為兒童時(shí)期常見的神經(jīng)發(fā)育和行為障礙，其發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，可能與遺傳因素、環(huán)境因素、神經(jīng)生理因素、大腦結(jié)構(gòu)和功能異常等相關(guān)[8]，目前較為公認(rèn)的假說是與中樞兒茶酚胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素和多巴胺代謝障礙造成的輕度腦功能缺陷有關(guān)。最常用的治療藥物有哌甲酯和托莫西汀。哌甲酯通過結(jié)合多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（Dopamine Transporter，DAT）和去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)體（Norep-inephrine Transporter，NET），阻斷并抑制其再攝取而增加單胺物質(zhì)釋放至外神經(jīng)元間隙而起到治療作用[9]。托莫西汀通過選擇性抑制去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)體，阻止其再攝取，增加所有腦區(qū)的去甲腎上腺素及主要是前額葉皮質(zhì)的多巴胺而達(dá)到治療目的[10]。西藥對(duì)該病的治療療效不明確，且不良反應(yīng)較多，僅對(duì)單一靶標(biāo)進(jìn)行阻斷，起效途徑單一?，F(xiàn)代藥理研究[11]表明，枸杞子能夠調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能，對(duì)機(jī)體的學(xué)習(xí)記憶有一定保護(hù)效果;有研究[12]表明，枸杞子水提取物能保護(hù)神經(jīng)元細(xì)胞免受Aβ淀粉樣蛋白神經(jīng)毒性的影響，減弱因同型半胱氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞死亡而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)的作用。五味子具有保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，鎮(zhèn)靜催眠的作用[13]。有研究發(fā)現(xiàn)超臨界二氧化碳萃取五味子具有顯著的鎮(zhèn)靜催眠作用，其機(jī)制可能與血清素和γ-氨基丁酸能量系統(tǒng)有關(guān)[14]，可能與調(diào)節(jié)腦內(nèi)的五羥色胺水平有關(guān)[15]。因此對(duì)枸杞子-五味子干預(yù)ADHD的演變轉(zhuǎn)歸過程的作用機(jī)制的探究及中藥活性成分的預(yù)測(cè)，有利于為中藥治療該病的機(jī)制提供新的思路，給藥物化學(xué)的研究提供大量的前體藥物分子，利于中藥的深入開發(fā)。

本研究發(fā)現(xiàn)枸杞子-五味子藥對(duì)治療ADHD的關(guān)鍵化合物有肌苷（Inosine）、睡茄素A（Withanolide A）、東莨菪內(nèi)酯（Scopoletin）、香葉醇（Geraniol）、（+）-五味子乙素（Deoxygomisin A）、戈米辛D（Gomisin D）、戈米辛E（Gomisin E）、戈米辛L1（Gomisin L1）、戈米辛R（Gomisin R）、表戈米辛O（Epigomisin O）等。肌苷有免疫調(diào)節(jié)，神經(jīng)保護(hù)、鎮(zhèn)痛等特性。據(jù)報(bào)道，肌苷能增強(qiáng)肥大細(xì)胞脫顆粒，減輕巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌促炎遞質(zhì)[16]，對(duì)機(jī)體進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)。研究[17]發(fā)現(xiàn)，肌苷既對(duì)帕金森病小鼠模型的有神經(jīng)保護(hù)作用，也能通過刺激軸突的生長(zhǎng)、下調(diào)COX-2 mRNA及蛋白表達(dá)來達(dá)到神經(jīng)保護(hù)的目的。睡茄素A是睡茄屬植物的主要有效成分，能夠促進(jìn)神經(jīng)突起的分支和突觸的重建，具有抗感染、促進(jìn)神經(jīng)因子生長(zhǎng)和相關(guān)的記憶增強(qiáng)等生物活性，被廣泛應(yīng)用于治療老年癡呆、帕金森癥等各種神經(jīng)性疾病[18-20]。東莨菪內(nèi)酯屬于乙酰膽堿酯酶（AChE）抑制劑，MOGANA等[21]研究表明東莨菪內(nèi)酯有抗炎、抗氧化和抗膽堿酯酶的活性，是一個(gè)潛在的可能用于治療神經(jīng)退行性疾病的化合物。在老年性癡呆癥模型小鼠中，東莨菪內(nèi)酯可抑制大腦海馬體突觸體的ACh E作用于煙堿乙酰膽堿受體，促進(jìn)乙酰膽堿的釋放，提高老年性癡呆癥患者的學(xué)習(xí)和記憶能力[22]。香葉醇是一種無環(huán)的類異戊二烯單萜，具有神經(jīng)保護(hù)的作用[23]，萜類物質(zhì)是五味子揮發(fā)油的主要成分[24]。張勝娜等[25]報(bào)道五味子揮發(fā)油對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有調(diào)節(jié)作用，能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)非特異性刺激的防御能力。有研究[26]發(fā)現(xiàn)，五味子乙素可以顯著提高小鼠外周血中γ-氨基丁酸（GABA）水平和降低谷氨酸水平以及大鼠大腦皮質(zhì)、海馬、下丘腦的谷氨酸水平，導(dǎo)致γ氨基丁酸/谷氨酸比例增加，通過上調(diào)γ-氨基丁酸A受體的表達(dá)，調(diào)節(jié)外周血和腦組織中GABA和谷氨酸的含有量，起到鎮(zhèn)靜催眠作用。戈米辛D、戈米辛E、戈米辛L1、戈米辛R、表戈米辛O均屬于五味子木脂素[27-28]。木脂素具有改善記憶的作用。Yang BY[29]用五味子藤莖中提取的木脂素可以減少Aβ1-42注射大鼠的逃避潛伏期和行進(jìn)距離，而增加大鼠Morris水迷宮試驗(yàn)中交叉平臺(tái)時(shí)間，表明其可以提高體內(nèi)認(rèn)知能力與學(xué)習(xí)記憶能力。

本研究GO分析結(jié)果顯示，枸杞子-五味子治療ADHD的關(guān)鍵靶點(diǎn)主要通過參與氧化還原過程、鐵離子結(jié)合、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、類固醇代謝過程、膽堿能突觸傳遞、環(huán)氧酶P450途徑、氯離子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄起始等生物學(xué)過程發(fā)揮治療作用。KEGG分析發(fā)現(xiàn)枸杞子-五味子治療ADHD的作用主要與信號(hào)通路、突觸通路、代謝通路等通路密切相關(guān)，包括尼古丁成癮、類固醇激素的合成通路、神經(jīng)活性配體-受體相互作用通路、藥物代謝-細(xì)胞色素P450通路、GABA能突觸信號(hào)通路、膽堿能突觸信號(hào)通路、色氨酸代謝通路等。有研究發(fā)現(xiàn)，星形膠質(zhì)細(xì)胞γ-氨基丁酸減少和強(qiáng)直性抑制的機(jī)制是注意缺陷多動(dòng)障礙的潛在原因[30]。注意缺陷多動(dòng)障礙與煙草依賴風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)，煙草的主要精神活性成分尼古丁，與ADHD相關(guān)的煙草依賴有關(guān)[31]。色氨酸代謝物3-吲哚丙酸和犬尿烯酸分別與ADHD樣行為評(píng)分負(fù)相關(guān)和正相關(guān)[32]。鐵有助于血紅蛋白結(jié)構(gòu)的穩(wěn)態(tài)，特別是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的內(nèi)平衡[33]。鐵可能導(dǎo)致髓鞘形成和/或突觸發(fā)生失調(diào)[34]。此外，鐵可能與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的合成受損有關(guān)，導(dǎo)致單胺信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)失調(diào)[35]。有研究[36]證實(shí)，鐵攝入儲(chǔ)存不足，可能是注意缺陷多動(dòng)障礙發(fā)病的原因之一。此外，單胺能及膽堿能刺激調(diào)節(jié)上丘腦的機(jī)制也與ADHD癥狀相關(guān)，上丘整合感受器接受的外界信息并將其傳遞至杏仁核參與“戰(zhàn)斗/逃跑”反應(yīng)[37]。

由此可見，中藥的藥效作用是通過中藥多個(gè)有效成分與疾病相關(guān)的多個(gè)靶點(diǎn)相互作用、相互調(diào)節(jié)而達(dá)到的。近年來，隨著中醫(yī)藥的價(jià)值越來越受到重視，其復(fù)雜性也逐漸被各領(lǐng)域的學(xué)者關(guān)注，這種復(fù)雜性使得中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明確、作用機(jī)制不清楚、缺乏科學(xué)合理有效的藥效和安全性評(píng)價(jià)體系。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是在系統(tǒng)生物學(xué)和多向藥理學(xué)快速發(fā)展的基礎(chǔ)上提出的藥物設(shè)計(jì)新方法和新策略[38]，將多個(gè)靶點(diǎn)在整個(gè)生物網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行定位，探索具有復(fù)雜成分結(jié)構(gòu)的中藥治療疾病的起效機(jī)制，為中藥的有效性提供科學(xué)依據(jù)，并為實(shí)驗(yàn)研究開拓新的思路。

綜上所述，本研究通過運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)，建立疾病-基因和中藥活性成分-蛋白質(zhì)靶標(biāo)的相互作用網(wǎng)絡(luò)，對(duì)枸杞子-五味子治療ADHD的多成分、多靶點(diǎn)、多通路之間的復(fù)雜關(guān)系進(jìn)行可視化分析，初步驗(yàn)證了枸杞子-五味子治療ADHD的藥理學(xué)作用機(jī)制，研究預(yù)測(cè)的結(jié)果為枸杞子-五味子治療ADHD提供了一定的科學(xué)依據(jù)，為下一步相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究提供前期基礎(chǔ)。

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（2020-06-04收稿 責(zé)任編輯：芮莉莉）